In Vitro Anti-influenza Virus Activities of Sulfated Polysaccharide Fractions from Gracilaria lemaneiformis

In this paper, in vitro anti-influenza virus activities of sulfated polysaccharide fractions from Gracilaria lemaneiforrnis were investigated. Cytotoxicities and antiviral activities of Gracilaria lemaneiformis polysaccharides （PGL）, Gracilaria lemaneiformis polysaccharide fraction-1 （GL-1）, Gracilaria lemaneiformis polysaccharide fraction-2 （GL-2） and Gracilaria lemaneiformis polysaccharide fraction-3 （GL-3） were studied by the Methyl thiazolyl tetrazolium （MTT） method, and the inhibitory effect against Human influenza virus H1-364 induced cytopathic effect （CPE） on MDCK cells were observed by the CPE method. In addition, the antiviral mechanism of PGL was explored by Plaque forming unit （PFU）, MTT and CPE methods. The results showed： i） Cytotoxicities were not significantly revealed, and H1-364 induced CPE was also reduced treated with sulfated polysaccharide fractions from Gracilaria lemaneiformis; ii） Antiviral activities were associated with the mass percentage content of sulfate groups in polysaccharide fractions, which was about 13%, in polysaccharides （PGL and GL-2） both of which exhibited higher antiviral activity; iii） A potential antiviral mechanism to explain these observations is that viral adsorption and replication on host cells were inhibited by sulfated polysaccharides from Gracilaria lemaneiformis. In conclusion, Anti-influenza virus activities of sulfated polysaccharide fractions from Gracilaria lemaneiformis were revealed, and the antiviral activities were associated with content of sulfate groups in polysaccharide fractions

香菇柄多糖的提取及其硫酸化产物的免疫调节活性比较

香菇是世界第二大栽培食用菌,其在加工过程中会产生大量香菇柄废弃物造成资源浪费和环境污染。该文以香菇柄为原料,通过水提分级醇沉纯化得到三种多糖LESP-20、LESP-50、LESP-80,利用化学法、高效凝胶渗透色谱、气相色谱、红外光谱对其组成及结构特性进行分析。结果表明,LESPs-50的糖含量最高,为84.31%,其相对分子质量为477.41 ku;此外,LESPs-20、LESPs-50和LESPs-80均含有Man、Glc和Gal,但单糖摩尔比存在差异;三种多糖均是含有β型糖苷键的中性杂多糖,且葡萄糖占主要成分。对香菇柄多糖(Lentinus edodes Stem Polysaccharides)LESPs进行硫酸化修饰,深入对比原始样品与硫酸化修饰后免疫调节活性的变化。结果表明,硫酸化修饰后多糖的免疫调节活性更加优越,能显著提高细胞RAW 264.7的细胞活力、吞噬能力、酸性磷酸酶活力、NO分泌量;并且硫酸基含量越高,其免疫调节活性越好。研究结果将对香菇柄的高值化开发利用提供理论依据。

多糖的硫酸化与磷酸化修饰及其活性研究进展

综述了近年来硫酸化及磷酸化修饰多糖的研究进展,包括各类常用的修饰方法,阐述了改性后的酸性多糖在抗氧化、抗病毒、抗肿瘤以及免疫调节等方面的生物活性,展望了硫酸化与磷酸化修饰多糖在食品工业和医药等领域的应用前景及挑战,以期为改性多糖的深入研究与应用提供理论依据。

正交实验优选黄芪多糖硫酸化修饰条件及修饰产物抗IBDV活性测定

目的:优选黄芪多糖硫酸化修饰的最佳条件,探讨硫酸化修饰提高黄芪多糖活性的可能性。方法:采用氯磺酸-吡啶法对一步醇沉的总黄芪多糖和分步醇沉并纯化的3种分级黄芪多糖进行硫酸化修饰,以氯磺酸-吡啶配比、反应温度和反应时间为因素水平,用L9(3)4正交设计对修饰条件进行优选,用硫酸钡比浊法测定修饰产物的硫酸基取代度(DS),用MTT法测定修饰产物的抗IBDV活性。结果:黄芪多糖氯磺酸-吡啶法修饰的最佳条件为氯磺酸:吡啶为1:6,反应温度95℃,反应时间1h。结论:硫酸化修饰能提高黄芪多糖的抗病毒活性,且与DS相关。

川牛膝多糖硫酸酯的体外抗单纯疱疹病毒2型活性

从传统的川产道地中药材川牛膝中提取多糖RCP ,用氯磺酸 -吡啶法制备了它的硫酸酯衍生物S RCP .产物经红外鉴定 ,证实RCP硫酸酯化后羟基部分被硫酸基取代 ,在 12 5 0cm-1和 810cm-1处显示了硫酸基的特征吸收峰值 .w(S) =8.2 7% ,取代度Ds=0 .5 6 9.体外实验研究了RCP和S RCP对非洲绿猴肾细胞 (Verocellline)的细胞毒性和抗单纯疱疹病毒 2型 (HSV 2 )的活性 .细胞病变效应法 (CPE)和MTT法结果表明RCP在 6 .0mg/mL以下 ,S RCP在 4 .0mg/mL以下均无细胞毒性 ,RCP本身无抗病毒活性 ,经硫酸酯衍生后的S RCP获得抗病毒活性 ,0 .2 5～ 4 .0mg/mL的S RCP能很好地抑制HSV 2引起的细胞病变 .以 0 .5mg/mL的无环鸟苷 (ACV)作为阳性对照 ,结果显示当S RCP浓度为2 .0mg/mL和 4 .0mg/mL时有显著的抗病毒作用 ,效果与阳性ACV相当 .图 1表 8参 2

带形蜈蚣藻硫酸多糖的提取、分析及其抗病毒活性

目的提取带形蜈蚣藻硫酸多糖,研究其理化性质和抗病毒活性。方法用热水浸提、乙醇沉淀法提取带形蜈蚣藻硫酸多糖、再经DEAE C-52纤维素离子交换柱层析得到2个较纯组分。并对其进行了单糖组成和硫酸基含量等理化性质分析。采用细胞病变(cytopathic effect,CPE)抑制法和四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,研究带形蜈蚣藻多糖的抗病毒活性。结果带形蜈蚣藻多糖主要由半乳糖组成,还含有少量的葡萄糖、木糖等,其硫酸基含量达到15%以上;该多糖具有较好的抗病毒活性,其中经提纯的两个组分抗HSV-1对细胞病变的半抑制浓度(IC50)分别为7.81,3.91μg.mL-1,选择(指数)SI值分别大于128,256。结论带形蜈蚣藻硫酸多糖抗CoxB3和HSV-1病毒活性均比较好。

8种中药多糖及其硫酸化衍生物对新城疫病毒的影响

选定8种含有多糖的中药为药效跟踪研究对象,对8种中药进行多糖提取、纯化多糖,氯磺酸-吡啶法进行多糖硫酸化修饰,采用体外鸡胚成纤维细胞培养法研究多糖抗新城疫病毒的活性,MTT法结合CPE观察法检测评价多糖抗新城疫病毒作用。结果显示,8种多糖均具有一定抗病毒活性,以黄芪多糖效果最明显,治疗指数达8,当归多糖、板蓝根多糖次之,紫草及黄精多糖效果不显著,治疗指数低于2。硫酸化修饰使得当归和大黄多糖的抗病毒活性增强,治疗指数高达16,表现强抗NDV作用。

山豆根多糖及其硫酸酯体外抗DHV-1感染细胞作用的比较

为研制抗1型鸭肝炎病毒(DHV-1)新药成分,用水煎醇沉法提取山豆根多糖(BSRPS),并采用氯磺酸-吡啶法制备其硫酸化产物山豆根多糖硫酸酯(sBSRPS),然后运用体外细胞培养法比较研究BSRPS和sBSRPS抗DHV-1感染鸭胚肝细胞的作用。采用直接荧光免疫法比较分析BSRPS和sBSRPS对DHV-1吸附肝细胞作用的差异,并用实时荧光定量PCR法比较分析了最有效药物浓度的BSRPS和sBSRPS对DHV-1在鸭胚肝细胞上的复制、释放的影响。结果表明:BSRPS和sBSRPS都具有较好的体外抗DHV-1的作用,sBSRPS的效果优于BSRPS。sBSRPS能有效抑制DHV-1的体外复制和释放,BSRPS仅能抑制DHV-1的复制。两者对病毒吸附鸭胚肝细胞没有明显的作用。结论:sBSRPS可以作为抗DVH的新药主要成分之一。

正交实验优选土茯苓多糖的硫酸化工艺研究及修饰产物抗肿瘤活性测定

【目的】优选土茯苓多糖硫酸化修饰的最佳条件,探讨硫酸化修饰提高土茯苓多糖活性的可能性。【方法】采用氯磺酸—吡啶法对纯化的土茯苓多糖进行硫酸化修饰,以产率、硫酸基取代度、糖含量作为考察指标,用L9(34)正交实验设计对反应时间、反应温度和氯磺酸—吡啶配比3个因素进行优化,用氯化钡—明胶法测定硫酸基的取代度(DS),用硫酸—苯酚法测定糖含量,红外光谱测定其结构,并用噻唑蓝(MTT)比色法检测正交试验中的各种硫酸化后多糖产物对肿瘤细胞Hep G2和MCF-7增殖活性的影响。【结果】土茯苓多糖采用氯磺酸—吡啶法进行硫酸化修饰的最佳条件为反应时间4.5 h,反应温度60℃和试剂配比为1∶6;MTT结果显示:硫酸化后的多糖产物对肿瘤细胞Hep G2和MCF-7具有一定的抑制增殖作用,并与浓度呈依赖性关系。【结论】氯磺酸—吡啶法对土茯苓多糖进行硫酸化修饰是可行的,且硫酸化修饰能提高土茯苓多糖的抗肿瘤活性。

昆布多糖硫酸酯化修饰及抗肿瘤活性的研究

对昆布多糖进行硫酸酯化修饰,考察修饰前后多糖结构及抗肿瘤活性的变化。采用氯磺酸-吡啶法进行多糖硫酸酯化修饰,考察了昆布多糖及其硫酸酯的红外光谱、核磁光谱特征,扫描电镜观察了表面形态,采用MTT比色法进行抗肿瘤活性评价。结果表明,昆布多糖及其硫酸酯都具有典型的多糖红外吸收,昆布多糖硫酸酯具有硫酸基的特征吸收峰;昆布多糖及其硫酸酯均是以β-(1→3)糖苷键为主链的多糖,昆布多糖硫酸酯的硫酸基取代位置在C2-OH与C6-OH。昆布多糖及其硫酸酯表面立体形态差异显著,昆布多糖表面呈云雾状或海绵状,昆布多糖硫酸酯表面呈片状或块状。昆布多糖及其硫酸酯对人肠癌细胞LOVO生长都具有明显的抑制作用,并且昆布多糖硫酸酯的抗肿瘤作用强于昆布多糖。

硫酸多糖抗病毒作用研究进展

硫酸多糖是指糖羟基上带有硫酸根的多糖,可经天然提取或硫酸化的结构修饰而得到。近年的研究证明硫酸多糖无论在体内还是在体外,都显示了不同程度的抗病毒活性,尤其是与目前使用的其他抗病毒药物相比,其细胞毒作用较小而得到广泛的关注,其抗病毒作用机理是通过抑制病毒的吸附而阻止了合胞体的形成发挥作用的。通过筛选适宜大小分子量和结构改造,降低其毒副作用,硫酸多糖有望成为继病毒逆转录酶活性抑制剂、蛋白酶抑制剂后的又一类潜在的新型抗病毒药物,将在抗病毒感染方面显示出重要的作用,具有广阔的应用前景。文章就近年来国内外硫酸多糖的抗病毒作用进行了综述。

硫酸化修饰对大枣多糖抗氧化活性的影响

对大枣多糖进行了硫酸化修饰,并对化学修饰前后的大枣多糖的羟基自由基、DPPH自由基和ABTS自由基的清除能力,以及还原力进行了测定。硫酸化大枣多糖取代度为0.51。修饰后大枣多糖羟基自由基、DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力均较未修饰前有大幅度提高。但硫酸化修饰对大枣多糖的还原力有减弱作用。以上结果表明,硫酸化修饰引起的大枣多糖的结构变化对其抗氧化活性有很大影响。

多糖抗病毒作用研究进展Ⅱ.硫酸多糖抗病毒作用

硫酸多糖的抗病毒活性 ,包括抗艾滋病毒HIV 1活性 ,在近年得以阐明。本文综述了硫酸多糖的抗病毒作用、抗病毒机理及其构效关系。硫酸多糖具有广阔的临床应用前景 ,其抗病毒作用值得深入研究。

青羊参多糖硫酸酯体外抗单纯疱疹病毒Ⅱ型活性研究

目的体外测定青羊参多糖硫酸酯抗单纯疱疹病毒Ⅱ型的活性。方法采用MTT法检测化合物对疱疹病毒感染Vero细胞的保护作用。结果青羊参多糖硫酸酯体外抗HSV-Ⅱ的EC50为69.9μg/m l,治疗指数为103。结论在体外,青羊参多糖硫酸酯有较显著的抗HSV-Ⅱ的作用。

硫酸酯化修饰的油菜花粉多糖的抗氧化活性

目的:对油菜花粉多糖进行硫酸酯化,研究体外抗氧化活性。方法:采用浓硫酸法分别在0℃和10℃条件下对油菜花粉多糖(rape pollen polysaccharides,RPP)进行硫酸酯化修饰,并对其清除羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的能力进行了研究。结果:酯化得到取代度分别为0.89和1.36的2个改性产物(S-RPP1和S-RPP2),RPP、S-RPP1和S-RPP2表现出不同程度的抗氧化活性。总的自由基清除能力大小为S-RPP1>S-RPP2>RPP。结论:硫酸化修饰能提高油菜花粉多糖的体外抗氧化活性。

硫酸酯化牡蛎多糖对3种肿瘤细胞抑制及凋亡的影响

采用氯磺酸-吡啶法制备得到硫酸酯化牡蛎多糖(SCGP),通过CCK-8法检测其对人胃癌细胞AGS、人卵巢癌SK-OV-3细胞和人肝癌Hep G2细胞活力的影响,并用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果表明,SCGP对3种肿瘤细胞细胞活力有不同程度的抑制效应,其中对AGS细胞抑制效应最明显。流式细胞术检测结果表明,SCGP对AGS细胞有很明显的促进凋亡作用。本研究结果表明SCGP对AGS肿瘤细胞生长有一定的抑制效应。

鸡血藤多糖的硫酸化修饰、表征及活性研究

为探究鸡血藤多糖的理化性质及活性,将经过DEAE-52纤维素离子交换柱分离纯化得到的鸡血藤多糖(MDP1)采用氯磺酸—吡啶法进行硫酸化修饰,得到硫酸化修饰的多糖(S-MDP1),测得其取代度为1. 94。采用TGA和DSC对两种多糖的热性质进行分析,结果表明,两种多糖均具有良好的热稳定性能。通过羟基自由基清除实验对两种多糖的体外抗氧化活性进行了评价,结果表明,在测试的浓度范围内(0. 2～2. 0 mg/m L)这两种多糖对羟基自由基均有一定的清除能力,并表现出剂量依赖性。采用MTT比色法测定了两种多糖在体外对小鼠巨噬细胞增殖的影响,测试结果表明,MDP1和S-MDP1在50～200μg/m L的浓度范围内均能促进小鼠巨噬细胞的增殖,可见MDP1和S-MDP1可以作为潜在的抗氧化剂及免疫调节剂。

牛膝多糖硫酸酯体外抗新城疫病毒活性研究

采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测牛膝多糖硫酸酯(Achyranthes bidentata polysaccharide sulfate,ABPS)对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)感染鸡胚成纤维细胞(Chick embryo fibroblast,CEF)的保护作用。结果表明,牛膝多糖硫酸酯体外抗NDV的IC50为0.23 mg/mL,治疗指数TI为5.3。所以在体外,牛膝多糖硫酸酯有较显著的抗NDV作用。

硫酸多糖抗病毒活性构效关系

近年来随着糖生物学的发展,硫酸多糖独特的抗病毒活性越来越被人们所关注。多糖的功能与结构密切相关,多糖构效关系的研究已经成为人们关注的一个热点。论文对已研究发现的硫酸多糖,从结构出发就构效关系如硫酸基取代度、硫酸基取代位置、分子质量等对抗病毒活性的影响进行详细阐述,以期对新型硫酸多糖的研究与开发提供一定的参考。

硫酸化修饰对红枣多糖结构及抗氧化活性的影响

目的:探究纯化红枣多糖ZJP-1和硫酸化红枣多糖S-ZJP-1的结构和抗氧化活性之间的关系。方法:以残次红枣为原料,经热水浸提、DEAE-52离子交换色谱及Sephadex-200葡聚糖凝胶柱层析纯化得到纯化红枣多糖(ZJP-1),通过氯磺酸—吡啶法硫酸化修饰获得红枣多糖硫酸化衍生物(S-ZJP-1)。结果:ZJP-1和S-ZJP-1均由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖3种单糖组成,但是比例有所不同。两种多糖具有多糖特征吸收峰,S-ZJP-1具有硫酸基的特征吸收峰,表示硫酸化修饰成功。ZJP-1和S-ZJP-1不具有三股螺旋结构,表观呈片状结构。活性试验结果证实多糖ZJP-1和S-ZJP-1对DPPH自由基具有显著的清除活性,并具有一定的还原力,当多糖质量浓度达到0.5 mg/mL时,DPPH自由基清除活性分别为40.4%和47.6%,还原力分别为0.419和0.531。结论:硫酸化修饰的红枣多糖抗氧化活性更高,是一种良好的天然抗氧化剂。