白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖及多肽的含量测定

目的对白果仁止咳有效部位35%乙醇-水洗脱部位中多糖及多肽的含量进行测定,为白果仁的综合开发和质量控制提供科学依据。方法采用苯酚-硫酸法、双缩脲法,建立标准曲线,并进行精密度、稳定性、重复性、加样回收率的考察。结果白果仁35%乙醇-水洗脱部位中多糖和多肽均在浓度范围内有良好的线性关系,方法学验证RSD值均小于2%,加样回收率分别为97.96%、97.94%,多糖含量为13.99%,多肽含量为31.41%。结论本研究建立的白果仁35%乙醇-水洗脱部位多糖和多肽含量测定方法简单可行,稳定性和重现性好。

云龙黑木耳中多糖的提取与测定

目的：提取云龙野生和人工培养两种黑木耳多糖并测定其含量。方法：采用乙醇浸提法提取多糖,紫外分光光度苯酚-硫酸显色法测定粗多糖含量。结果：在8.0-48.0μg/mL线性范围内,回收率为99.03%,RSD为0.66%（n=6）,测到野生和人工培养黑木耳中多糖的收率分别为18.48%和18.29%;野生和人工培养黑木耳中多糖的含量分别为9.21%和8.20%。结论：野生黑木耳比人工培养黑木耳中多糖的含量高,生长环境对黑木耳多糖含量有影响。

人参等五种植物药不同浓度醇沉物中多糖含量

以比色法测定了人参等５种植物药不同浓度醇沉物中多糖含量，结果８０％，７０％和６０％醇沉物中多糖含量均较高，１ｋｇ生药醇沉物中多糖为２５．３６ｇ～１０８．９０ｇ。

洋葱水溶性粗多糖的提取工艺优化

采用水提醇沉法提取洋葱水溶性粗多糖,以粗多糖提取率和多糖含量的综合评分为指标,利用正交试验优化提取工艺。结果表明:最佳提取工艺条件为时间3 h,料液比1∶30 g·m L^(-1),温度90℃,物料粉碎度0.25~0.40 mm(筛孔径),在此条件下粗多糖提取率达到5.886%,多糖含量为54.547%。影响粗多糖提取效果的因素次序为:温度>料液比>物料粉碎度>时间,温度的变化对粗多糖提取效果具有显著影响。相同提取条件下,紫皮洋葱粗多糖提取率比黄皮洋葱高出1.681%,多糖含量比黄皮洋葱高出21.429%,紫皮洋葱更适用于粗多糖的提取且营养价值更高。总之,水提醇沉法提取洋葱水溶性粗多糖,成本低廉,操作简便,易实现工业化生产。

桑叶多糖的含量影响因素与提取检测方法

桑叶多糖是桑叶活性物质的一种,因其具有降血脂、降血糖、抗衰老、抗氧化、增强免疫力等多种药理作用,在医药、食品和保健品等行业有较高的开发利用价值,近年来备受人们关注。本文概述了桑叶多糖含量的影响因素,介绍了热水浸提法、微波提取法、超声波提取法等5种检测方法及其研究进展。

蛹虫草多糖含量测定样品前处理的研究

目的:建立蛹虫草多糖含量测定样品前处理方法。方法:以蛹虫草多糖含量为指标,筛选粉碎细度、醇沉时样品浓度、提取温度、提取时间为有关因素,不考虑交互作用,选择三水平进行了L9(34)的正交试验。结果:经极差分析,对多糖检测结果的影响大小的顺序为粉碎细度因素>醇沉时样品浓度>提取时间>提取温度。结论:最佳前处理条件为A3B3C3D2,即为粉碎细度200目、醇沉时样品浓度1g→10ml、提取温度100℃、提取时间1h。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法分析苦瓜多糖组分的含量

目的用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测器联用技术建立苦瓜多糖组分的分析方法。方法以苦瓜为原料,用水提醇沉法提取苦瓜粗多糖,并对其工艺进行探讨。苦瓜粗多糖经超声波酸水解处理后,以12 mmol/L NaOH溶液为淋洗液,流动相流速为1.0mL/min,CarboPaC PA10(250mm×4mm i.d.)为分析柱,进样量为25μL进行分析测定。结果苦瓜多糖中主要含有阿拉伯糖、果糖、葡萄糖、甘露糖和半乳糖,各种单糖组分在一定浓度范围内线性关系良好,能很好地分离及准确测定。结论该方法操作简便,灵敏度高,重现性好。

离子色谱法测定ACYW135群脑膜炎球菌结合物中Y群及W135群多糖含量

目的：利用离子色谱法即高效阴离子交换柱层析—脉冲安培检测法（ HPAEC-PAD）,测定ACYW135脑膜炎球菌多糖蛋白结合物中Y群和W135群多糖含量的方法,并加以验证。方法将ACYW135脑膜炎球菌多糖蛋白结合物中Y群和W135群多糖用三氟乙酸（ TFA）水解为特异性单糖（葡萄糖、半乳糖）,并去除水解液中残留的TFA,用HPAEC-PAD分析检测,用PA10糖分析柱分离单糖,电化学检测器测定葡萄糖及半乳糖含量,用Chrome-leon色谱工作站记录并分析数据。对上述方法进行专属性、准确性、重复性验证,确定该方法的检出限和定量限。结果 Y群和W135群多糖在TFA2.5 mol/L（终浓度）、90℃、4 h可完全水解为葡萄糖、半乳糖。对照品葡萄糖及半乳糖在0.10-60.00μg/mL 范围内,质量浓度和色谱峰面积呈较好的线性关系, r 均大于0.99,回收率为87.94%-109.80%,相对标准偏差（RSD）为1.00%-2.00%,检出限为0.05μg/mL（信噪比3∶1）,定量限为0.10μg /mL（信噪比10∶1）。结论离子色谱法可同时检测脑膜炎球菌多糖蛋白结合物中Y群和W135群糖含量,该方法操作简便、灵敏、快速,干扰小,重现性好,适用于对相关疫苗生产过程中的质量控制。

乙醇在微藻产业中的应用

概述了乙醇在微藻培养、微藻胞内物提取、硅藻检测(尸检)方面的应用,并提出了不足和建议。

红参多糖分级醇沉组分对肺腺癌A549细胞增殖抑制作用

探究红参中分级醇沉多糖的体外抗肿瘤活性。采用水提醇沉法得红参粗多糖,用不同体积分数乙醇溶液(55%,60%,65%),分级沉淀得不同级分的红参多糖(RGP-55,RGP-60和RGP-65)。苯酚-硫酸法测定多糖含量,通过紫外、红外扫描进行纯度和结构分析。CCK-8法研究红参多糖对肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用。结果:红参多糖RGP-55,RGP-60和RGP-65的多糖含量分别为70.29%,63.15%和56.23%。紫外扫描结果显示3种红参多糖均不含核酸和蛋白质。红外光谱分析结果表明,3种红参多糖结构中均含有多糖类物质的特征吸收峰。3种红参多糖均可抑制肺腺癌A549细胞的增殖,且呈时间和浓度依赖性。结论:红参中分离出的3种分级醇沉多糖对肺腺癌A549细胞具有增殖抑制作用。

虎杖多糖乙醇分级纯化及其抗氧化性

本文采用热水浸提及不同浓度乙醇(30%、50%、70%、90%)分级沉淀制得4组虎杖多糖(PCP-30、PCP-50、PCP-70、PCP-90),分别测定其得率、总糖含量及糖醛酸含量,采用红外和紫外光谱比较其光谱学性质差异,利用DPPH自由基清除实验及还原力实验考察其抗氧化性差异,并考察总糖含量、糖醛酸含量与抗氧化活性的相关性。结果显示,不同组分间多糖得率及含量有较大差异,PCP-70总糖含量(557.03 mg/g)及糖醛酸含量(284.85 mg/g)最高,且在DPPH自由基清除实验及还原力实验中表现出最高的抗氧化性,4组虎杖多糖红外检测都具有多糖的典型基团,紫外图谱波形近似,相关性研究表明总糖含量、糖醛酸含量与上述抗氧化模型均有一定的线性关系,表现出较强的相关性。因此,70%乙醇更适宜沉淀制备虎杖多糖,且所得虎杖多糖抗氧化性强。

野西瓜多糖分离纯化及其质量浓度研究

研究了野西瓜多糖分离纯化、质量浓度及分子质量.通过木瓜蛋白酶-Sevag法脱除蛋白,采用双氧水及透析法除去色素及小分子,利用分步醇沉法得到质量最大的CSPSⅠ,并对其进行DEAE-52柱层析,进而得到糖质量浓度最高的组分CSPSⅠC.纯度鉴定确认CSPSⅠC为高纯度多糖.对CSPSⅠC糖质量浓度、糖醛酸、硫酸基质量浓度进行测定并考察了其方法学,证实得到的结果准确可靠.采用高效液相色谱得到了CSPSⅠC的相对分子质量.通过对野西瓜多糖分离纯化及质量浓度测定为继续深入研究野西瓜多糖奠定了基础.

7种植物叶不同溶剂提取法的多糖含量测定

目的:研究番石榴叶等7种植物叶经不同溶剂提取所得多糖含量的高低。方法:通过水提法、醇提法分别制备番石榴叶、柚子叶、柿子叶、杨桃叶、龙眼叶、黄皮叶和桃叶的多糖,采用苯酚-硫酸法测定各植物叶经提取的多糖含量。结果:水提法制备的番石榴叶、柚子叶、柿子叶、杨桃叶、龙眼叶、黄皮叶和桃叶的多糖含量分别为60.07 mg·g^(-1)、50.42 mg·g^(-1)、18.50 mg·g^(-1)、43.43 mg·g^(-1)、54.60 mg·g^(-1)、52.85 mg·g^(-1)和38.11 mg·g^(-1);醇提法制备的番石榴叶、柚子叶、柿子叶、杨桃叶、龙眼叶、黄皮叶和桃叶的多糖含量分别为42.64 mg·g^(-1)、37.42 mg·g^(-1)、11.19 mg·g^(-1)、29.21 mg·g^(-1)、29.97 mg·g^(-1)、38.66 mg·g^(-1)和27.09 mg·g^(-1)。结论:不同品种植物叶的多糖含量具有差异性,其中多糖含量高低顺序依次为番石榴叶>龙眼叶>黄皮叶>柚子叶>杨桃叶>桃叶>柿子叶。同时,水提法所制得的多糖含量明显高于醇提法。

血液中乙醇含量检测结果的影响因素与质量控制分析

研究了可能影响血液中乙醇含量检测结果的因素,探讨了检测过程中标本的质量控制问题,以提高检测结果的准确性。使用顶空气相色谱法,对不同储存条件、使用不同消毒方式采集的血液样品分别进行检测。研究发现,要规范血液中乙醇含量检测流程的各个环节,特别是加强对血液样品储存条件的质量控制。血样采集后,应低温保存,在48小时内送检并进行检测,以确保鉴定结果的准确,保证执法的公正性。

不同生育期香菇多糖、蛋白质积累规律及多糖抗氧化活性研究

为了探索不同生育期香菇多糖、蛋白质积累规律及多糖抗氧化活性的差异,首先对三潮香菇不同生育期总糖、多糖和蛋白质含量进行测定,然后对第一潮香菇不同生育期多糖提取液使用20%、50%、70%乙醇终浓度进行分级醇沉,得到12个组分粗多糖样品(依次命名L1P20,L1P50,L1P70,……,L4P50,L4P70),比较12个粗多糖组分得率、多糖和β-葡聚糖含量及抗氧化活性。结果表明,第一潮香菇各时期总糖和多糖含量均高于第二潮和第三潮,蛋白质和总糖含量在第一潮L3达到最大,分别为13.13%和45.33%,而多糖含量在第一潮L4达到最大8.24%;12个粗多糖组分得率、多糖和β-葡聚糖的含量有一定差异,P20组分得率最高,但是多糖和β-葡聚糖含量明显低于其他2个组分。抗氧化活性方面,12个粗多糖组分均表现出抗氧化活性,在未成熟时期整体抗氧化活性最强,其中P20组分具有最强的抗氧化活性。实验结果为香菇适宜采摘时期以及香菇多糖活性最优组分的制备提供一定的理论依据。

芸香浸膏的定性定量方法研究

目的:建立芸香浸膏的定性定量方法。方法:采用薄层色谱法,以正己烷-石油醚(60~90℃)-乙酸乙酯-冰醋酸(6∶2∶3∶0.1)为展开剂,展开,置紫外光灯(254 nm)下检视,对枫香脂药材进行鉴别及对掺伪物松香进行检查;采用高效液相色谱法测定肉桂酸含量,使用Syncronis C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇^(-1)%醋酸溶液(50∶50)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),检测波长为285 nm,柱温为30℃。结果:薄层色谱斑点清晰,分离度好;高效液相色谱法测定含量,肉桂酸质量浓度在1.66~41.52μg·mL^(-1)(r=0.999 9)范围内呈良好线性关系,低、中、高浓度加样回收率分别为97.1%(RSD=1.7%)、101.0%(RSD=0.9%)和96.9%(RSD=1.1%)。在对12个样品的检验中,含量在0.38%~14.09%之间。结论:本文所建立的方法可以作为芸香浸膏的质量控制方法。

利用便携式血糖仪测定乙醇

研究了便携式血糖仪(PGM)在非糖物质检测方面的应用。基于便携式血糖仪对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)具有剂量依赖性反应构建酶促反应,提出采用PGM实现对乙醇含量的便携式定量检测。在最佳的检测条件下,当乙醇的体积分数在3%~100%范围内变化时,PGM读数与乙醇含量之间呈现良好的线性关系,线性方程为y=0.70125+0.02148V,相关系数(R2)为0.97351,检出限为3%。

高效阴离子交换色谱-脉冲安培法测定W135群和Y群脑膜炎球菌多糖中半乳糖和葡萄糖含量

目的采用高效阴离子交换色谱-脉冲安培法(High-performance anion-exchange chromatography with pulsedamperometric detection,HPAEC-PAD)测定W135群和Y群脑膜炎球菌荚膜多糖中半乳糖和葡萄糖的含量,并对该方法进行验证及初步应用。方法多糖蛋白结合物原液的混合液经HCl水解处理后,进样CarboPac PA10柱,以氢氧化钠-醋酸钠梯度流洗,脉冲积分安培检测器检测。筛选样品的水解条件;对HPAEC-PAD法进行专属性、精密性及准确性验证,并进行初步应用。结果确定的样品水解条件为以2 mol/L HCl于85℃处理1 h。载体蛋白破伤风类毒素对检测结果无干扰;重复性、日内精密性和不同操作者之间精密性试验结果的RSD均小于5%;准确性试验中葡萄糖和半乳糖的回收率在90%～110%之间。HPAEC-PAD法测定多糖蛋白结合物原液的多糖含量与传统间苯二酚比色法测定结果相当;成品疫苗中的W135群和Y群多糖含量测定结果符合《A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》的规定(均≥4μg/剂)。结论 HPAEC-PAD法专属性、精密性和准确性良好,可用于A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗中W135群和Y群多糖含量的测定。

脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中A群游离多糖含量测定方法的建立

目的建立脑膜炎球菌结合疫苗中A群游离多糖含量的定量检测方法,并进行验证。方法采用高效阴离子色谱-电导法（high-performance anion-exchange chromatography with conductivity detection,HPAEC-CD）,分析柱：IonPacTMAS11 Analytical（4 mm×250 mm）,22 mmol/L Na OH流洗,流速为1 ml/min,25μl自动进样,电导检测。筛选样品的氧化反应最佳温度、双氧水浓度及干烤时间,确定HPAEC-CD的检测限和定量限,并进行专属性、准确性及精密度验证。应用建立的方法检测3批多糖蛋白结合物原液A-破伤风类毒素（A-tetanus toxoid,A-TT）多糖及游离多糖含量,并与《中国药典》三部（2010版）附录ⅦA磷测定法中的传统比色法进行比较;同时检测3批A、C群及A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗的多糖及游离多糖含量。结果确定样品的氧化条件为：100μl/ml H2O2,220℃干烤90 min。磷标准品在0.1-1μg/ml范围内,峰面积和浓度线性关系良好（r=0.999 877）;TT、C-TT、W-TT及Y-TT对测定无干扰;该方法的检测限为0.007μg/ml,定量限为0.024μg/ml;A群脑膜炎球菌多糖原液的加样回收率在97.56%-102.95%之间;重复性及不同操作者间的精密度试验结果 RSD均小于5%。A-TT的多糖含量及游离多糖含量与传统比色法测定结果差异较小;3批A、C群及A、C、W135、Y群脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗的多糖含量均符合《A、C群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》及《A、C、W135、Y群脑膜炎球菌结合疫苗制造及检定规程草案》要求,游离多糖含量分别为24.31%、23.04%、24.44%和19.07%、17.80%、19.46%。结论采用H2O2氧化处理,HPAEC-CD检测,除了能对脑膜炎球菌多糖蛋白结合疫苗中微量A群多糖含量进行定量检测外,还能够进行游离多糖含量的检测。该方法灵敏度和精密度良好,操作简单、安全,对操作者及环境提供了保护。