淋病奈瑟菌对头孢曲松的敏感性和porB基因特征分析

目的:了解某院分离出的淋病奈悬菌对头孢曲松的敏感性和PorB基因突变特征。方法:收集2019~2021年检出的共43株淋病奈瑟菌,并测定头孢曲松的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concent ration,MIC),利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR),扩增细菌的porB基固,对PCR产物进行Sanger测序,分析淋病奈瑟菌的PorB基因的突变情况。结果:43株菌株主要来自妇科、男科和泌尿外科门诊就诊患者的分泌物或脓液经培养鉴定所得,其中患者男36例(占83.7%)、女7例(占16.3%)。43株菌株均未发现对头孢曲松不敏感的情况。其中MIC≥0.031μg/mL的菌株有10株,占比23.3%。将MIC≥0.031μg/mL菌株进行porB基图的PCR扩增和测序分析显示,其中1栋菌株为PorB1a型;其余9株菌株为DorB1b型,与野生型菌株相比,这9株菌林在G120和/或A121的位置上共发现4种突变方式,分别为G120K/A121D(n=3)、G120K/A121N(n=3)、G120K/A121G(n=2)和G120R/A121D(n=1)。结论:POIB序列分析可以作为区分淋病奈瑟菌及其流行病学初步分析的有用工具之一。头孢曲松仍是治疗淋病奈瑟菌的有效抗生素。

淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型及其突变与耐药相关性研究

了解淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型及其产物120和121位氨基酸突变与耐药的相关性。采用多重PCR(mPCR)检测淋病奈瑟菌临床菌株porB基因型,扩增产物测序后分析其编码蛋白的120和121位氨基酸突变情况,二倍平皿稀释法检测临床菌株对青霉素和四环素的耐药性。184株淋病奈瑟菌临床菌株中,99.5%(183/184)检出porB基因,其中61株(33.3%)为porB1A基因型,122株(66.7%)为porB1B基因型。122株porB1B基因型菌株中,117株(95.9%)porB基因120和/或121位氨基酸发生突变,5株(4.1%)porB1B及所有porB1A基因型菌株porB基因120和/或121位氨基酸未突变。117株porB基因120和/或121位氨基酸突变的porB1B基因型菌株中,97.4%(114/117)和95.7%(112/117)分别对青霉素和四环素耐药,2.6%菌株(3/117)对青霉素和四环素敏感。61株porB1A基因型菌株中,仅有2株(3.3%)对青霉素和四环素耐药。研究中采用的mPCR能快速、准确地对淋病奈瑟菌临床菌株porB基因进行分型,这些菌株主要携带porB1B基因且该基因型菌株对青霉素和四环素耐药率显著高于porB1A基因型(P<0.01),该耐药性与porB1B基因120和/或121位氨基酸突变密切相关。

淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型及其突变与耐药相关性研究

目的:分析本地区淋病奈瑟菌临床菌株porB基因分型特点及其Gly120和Ala121突变与耐药性关系。方法:多重PCR扩增非产酶淋病奈瑟菌临床菌株porB基因、测序分析Gly120和Ala121突变,并与药敏试验比较。结果:154株非产酶淋病奈瑟菌临床菌株中,porB1A型和porB1B型临床菌株分别占29.9%和70.1%。porB1A型菌株均出现Gly120Asp/Ala121Gly双突变,对青霉素和四环素的耐药率分别为15.2%和10.9%;95.4%porB1B菌株存在出现Gly120和/或Ala121突变,耐药率分别为99.1%和97.2%,其中4株porB1B菌株121和122位氨基酸存在删除突变的菌株对青霉素和四环素的MICs分别高达为8 mg/L～16mg/L和8 mg/L。结论:建立的多重PCR可用于淋病奈瑟菌porB基因分型。本地区流行的非产酶淋病奈瑟菌主要携带porB1B基因,不同基因型临床菌株对抗生素的耐药率有显著性差异(P<0.05)。Gly120和/或Ala121突变增强耐药性仅限于porB1B菌株。

广东首株W135群流行性脑脊髓膜炎奈瑟菌的分子特征分析

目的分析广东首次从患者脑脊液分离到的W135群流行性脑脊髓膜炎奈瑟菌（Neisseriameningitidis，N.meningitidis）的分子特征。方法复苏培养并用奈瑟菌生化鉴定系统（APINH）生化鉴定从患者脑脊液分离到的1株W135群N.meningitidis，以本地近年分离的1株C群和3株A群N.meningitidis为对照；通过DNA序列测定分析外膜蛋白编码基因（porA、porB）可变区型别；通过多位点序列分型（muhilocussequencetyping，MLST），采用SplitsTree在线软件分析进化关系，研究其分子特征。结果该W135群Mmeningitidis的porA可变区（VR）型别为P1．5，2，属主要致病型别之一；porB的可变区Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ分别为1、1、1、17型，无可变区Ⅵ、Ⅷ；MLST等位基因谱为：2、123、4、3、8、4、6，序列型（sT）为2960，属sT—11／ET-37克隆系。4株对照菌株porA的VR型别均为P1．20，porB可变区Ⅳ为7型，无可变区Ⅶ；C群对照株属ST-4821克隆系，3株A群属ST-5克隆系。结论该W135群Mmeningitidis的分子特征与国外分离株相同，而与本地流行的A群及C群菌株不同。