Beagle犬骨髓基质细胞复合A-PCPC裸鼠皮下成骨的实验研究

目的:观察支架材料活性磷酸钙骨水泥(active porous calcium phosphate cement,A-PCPC)及其与Beagle犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)复合体在裸鼠体内的成骨性能。方法:抽取Beagle犬骨髓,体外分离培养、成骨诱导、扩增BMSCs并通过细胞化学方法检测其成骨表型。体外构建BMSCs/A-PCPC复合体,并行扫描电镜超微结构观察。将复合体植于裸鼠背部皮下,同期植入单纯A-PCPC作为对照组。术后2、4、8周取材,HE染色,进行组织学及组织形态计量学分析。结果:ALP染色阳性,VonKossa染色可见钙结节形成。扫描电镜可见细胞贴附于材料表面及孔隙表面生长。HE染色显示,2周时,复合体组可见少量编织骨,单纯材料组成骨较少。4周时,复合体组可见编织骨向小梁骨转化,单纯材料组可见大量骨样组织。8周时,复合体组新骨趋于成熟,单纯材料组骨成熟度较差。结论:A-PCPC支架接种BMSCs后显示良好的成骨活性,能够促进未成熟骨矿化,可以作为骨组织工程支架材料。

山羊乳牙牙髓干细胞构建组织工程骨的异位成骨研究

目的:评价山羊乳牙牙髓干细胞在体外的成骨分化能力,及复合多孔磷酸钙骨水泥在山羊肌袋模型内的异位成骨能力。方法:采用改良组织块法培养山羊乳牙牙髓干细胞,并且在成骨诱导条件下培养。经成骨条件培养的第3代细胞与多孔磷酸钙骨水泥复合后,植入山羊背部左侧肌袋;将多孔磷酸钙骨水泥空白支架植入右侧肌袋作为对照组。分别在植入后4、8周取材,进行组织学观察。结果:复合山羊乳牙牙髓干细胞的支架材料在4周后有类骨质形成;植入8周后,类骨质形成更多;未复合细胞的支架材料在组织学检查中未见有类骨质形成。结论:山羊乳牙牙髓干细胞在体外具有分化为成骨细胞的能力;多孔磷酸钙复合山羊乳牙牙髓干细胞在山羊体内具有异位成骨能力。