用RT-PCR方法检测颞叶癫癎患者脑内KCNJ4基因的表达

目的 观察颞叶癫患者和脑外伤对照患者编码内向整流钾通道蛋白的KCNJ4基因表达差异 ,探讨难治性颞叶癫可能的发病机制。方法 12例难治性颞叶癫患者手术切除的颞叶组织 ,10例急性脑外伤患者相应部位颞叶组织 ,用RT PCR方法检测KCNJ4基因表达。结果 颞叶癫患者与脑外伤对照患者相比 ,颞叶组织KCNJ4mRNA表达水平降低 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 KCNJ4mRNA表达水平的下降 。

猪新基因KCNJ12编码区电子克隆、RT-PCR验证和组织表达分析

通过NCBI下载猪近缘物种的KCNJ12基因序列,在线BLAST比对获得猪EST序列、参考基因组序列和高通量基因组序列。利用Lasergene软件电子克隆猪KCNJ12基因编码区序列及部分侧翼序列。针对编码区设计特异引物并以版纳微型猪近交系BMI为研究材料进行试验验证,同时应用半定量RT-PCR技术对BMI 31种重要组织进行了表达分析。研究获得了猪KCNJ12 1 290 bp的编码区序列(GenBank登录号:KC505155,对应的氨基酸登录号:AGK36093)。生物信息学分析表明,该基因编码429个氨基酸,预测的蛋白质分子量(Mw)为48.63 kDa,等电点(pI)为5.66。蛋白质结构分析显示,KCNJ12存在2个保守域,3个跨膜结构域,无信号肽;疏水性分析表明其N端和C端均具有亲水性;亚细胞定位显示,该蛋白位于细胞质的概率是94.1%。系统进化分析表明,猪与牛、羊的亲缘关系最近。组织表达分析表明,KCNJ12基因在31个被检组织中存在明显的表达差异,在小脑中高表达;在肌肉、结肠、盲肠、食管、皮肤、大脑、下丘脑及脊髓中中度表达;在胸腺、肝、直肠及脑干中低表达;在颌下腺、睾丸、甲状腺、附睾、肺、心、脾、肾上腺、淋巴结、肾、胰脏、十二指肠、空肠、回肠、胃、垂体、松果体及舌下腺中不表达。研究结果为该基因在猪中的功能研究提供依据。

KCNJ15在肺腺癌组织中的表达及其对细胞增殖迁移的影响

目的探讨内向整流钾通道J亚家族成员15(KCNJ15)在肺腺癌组织中的表达及其对肺腺癌A549细胞增殖和迁移的影响。方法收集本院2006年7月至2015年10月经手术切除的肺腺癌组织117例和癌旁组织50例,采用实时定量PCR法检测以上组织中KCNJ15 mRNA水平,分析肺腺癌组织KCNJ15 mRNA水平与临床病理特征(性别、年龄、肿瘤大小、临床分期、肿瘤位置、淋巴结转移和病理分级)的关系,根据随访资料分析不同KCNJ15 mRNA水平的预后情况。构建过表达KCNJ15的载体并转染A549细胞,采用CCK-8法和Transwell试验分析KCNJ15基因在肺腺癌细胞增殖和迁移中的功能。结果与癌旁组织相比,肺腺癌组织中KCNJ15 mRNA水平降低(P<0.05);KCNJ15表达与肺腺癌患者的肿瘤大小和临床分期有关(P<0.05),与年龄、病理分级、性别、淋巴结转移和肿瘤位置无关(P>0.05);KCNJ15高表达的肺腺癌患者的总生存期长于低表达者;获得性功能实验结果表明,KCNJ15基因过表达能够抑制肺腺癌细胞的增殖和迁移能力。结论 KCNJ15基因在肺腺癌中的表达明显降低,其表达与肺腺癌患者的肿瘤大小和临床分期有关,在肺腺癌患者生存中是一个重要的有利预后标志物,可作为潜在的肺腺癌临床治疗新靶标。

基因KCNJ11的药物基因组研究报道

有研究表明约34％的糖尿病患者携带有KCNJ11基因突变位点，揭示了KCNJ11基因多态性与遗传性糖尿病的发生存在显著相关性。KCNJ11基因多态性能够改变KATP通道开闭状态，对胰腺β-细胞分泌胰岛素、调节血糖水平产生重要作用。目前KCNJ11基因研究已广泛应用于临床．KCNJ11基因多态性检测与糖尿病的治疗密切相关。其遗传药理学为基础医学向临床应用转化提供了方向。

上海地区胰岛功能不足的2型糖尿病患者钾离子内向整流通道蛋白船KCNJ11基因突变筛查

目的 了解上海地区胰岛功能不足的糖尿病患者钾离子内向整流通道蛋白J亚单位11号成员（KCNJ11）基因突变的发生情况.方法 选取上海市第六人民医院内分泌代谢科住院2型糖尿病患者41例,其中男30例,女11例,平均年龄（57±12）岁,胰岛β细胞自身抗体谷氨酸脱羧酶（GAD）、酪氨酸磷酸酶（IA2）检查阴性且糖耐量试验空腹C肽均≤0.20μg/L.应用聚合酶链反应直接测序法进行基因突变筛查.用卡方检验来比较本实验得出的基因型频率与国际人类基因组单体型图计划（HapMap）中国人数据库是否存在差异.结果 在1例患者中见到1个同义突变（即S274S）.此外,还发现4个变异位点,分别为rs5215、rs5218、rs5219、rs1800854.4个位点的等位基因频率与HapMap中国人数据库比对差异无统计学意义（x2值依次为0.010、0.391、0.025、0.407,均P＞0.05）.结论 KCNJ11基因突变可能不是糖尿病患者胰岛功能低下的主要原因.

内向整流钾通道J亚家族成员5基因C171T变异与原发性醛固酮增多症患者低血钾的相关性

目的探讨内向整流钾通道J亚家族成员5（KCNJ5）基因C171T变异与低血钾原发性醛固酮增多症（原醛）的相关性。方法将原醛患者364例分为低血钾组（n=115）和正常血钾组（n=249），应用TaqManPCR技术对C171T变异在所有原醛患者中进行分型，分析C171T变异与低血钾的相关性。结果KCNJ5基因C171T变异在所有原醛患者中成功分型，其基因型、等位基因的分布符合Hardy—Weinberg平衡；在总体及女性患者中，两组患者C171T变异的基因型、等位基因及显性模型的频率分布差异有统计学意义（P〈0．05）；校正年龄、吸烟、饮酒和体质量指数后，Logistic回归分析显示KCNJ5基因C171T变异的CT＋TT型是女性原醛患者发生低血钾的危险因素（OR=2．499，95％CI 1．168～5．349，p=0．018）；在女性患者中，与CC型相比，CT＋TT型的血钾水平减低，而血清醛固酮水平增高（均P〈0．05）。结论KCNJ5基因的C171T变异与女性低血钾原醛相关。

甲状腺毒性周期性麻痹临床特征及钾离子内向整流通道蛋白18亚单位基因突变研究

目的:研究甲状腺毒性周期性麻痹(TPP)患者的临床特征及钾离子内向整流通道蛋白18亚单位(KCNJ18)基因突变情况。方法 :收集15例临床诊断为TPP的患者病史资料及相关辅助检查。选取同期25例原发性低钾性周期性麻痹(Hypo PP)患者及200名正常人作为对照。所有研究对象均为汉族人。应用聚合酶链反应和DNA测序技术对KCNJ18基因进行突变检测。结果:15例TPP患者中男14例,女1例。平均起病年龄为(27.9±8.3)岁,平均就诊年龄为(35.4±8.5)岁。患者伴有不同程度的高代谢症状,肌无力发作时伴有低钾血症。KCNJ18基因检测在TPP患者中发现G17A、G116A、G119A、C167A、G576C、G735A、A745G 7种基因变异,且这7种基因变异也发现于正常对照及HypoPP患者。在8名正常对照中发现T1206C 1个同义突变,8种基因变异在健康对照组的基因频率均大于1%。结论:G17A、G116A、G119A、C167A、G576C、G735A、A745G及T1206C 8种KCNJ18基因变异是一种多态性改变而非致病突变。

青年人中的成年发病型糖尿病13型1例报道

目的探讨青年人中的成年发病型糖尿病13型(MODY13)的临床表现、诊断方法及治疗方案。方法完善1例MODY13患者入院后的相关检查,同时行全外显子组检测。结果全外显子组检测结果显示,患者内向整流钾离子通道J家族11因子(KCNJ11)存在变异,调整治疗方案为服用格列美脲能有效改善糖尿病症状。结论MODY13患者的诊断需借助基因检测,确诊后根据患者年龄使用药物治疗并对饮食进行调控,能够有效控制血糖。