吗啡对新生鼠尾核神经元钾离子通道电流的作用

目的 :研究吗啡对新生鼠尾核神经元钾离子通道电流的作用。方法 :应用全细胞膜片钳技术在培养的尾核神经元上 ,观察吗啡急性与慢性处理对尾核神经元电压门控钾离子通道电流的影响。结果 :吗啡急性处理尾核神经元诱发钾离子通道电流增大 ,电流从加吗啡前的 (2 .6± 0 .4 )nA增高到 (3.3± 0 .5 )nA ,加纳洛酮后电流下降为 (2 .4± 0 .4 )nA ;吗啡慢性处理尾核神经元的钾离子通道电流从对照组的 (2 .6± 0 .4 )nA增高到 (3.1± 0 .5 )nA ,加纳洛酮后电流下降为 (2 .4± 0 .4 )nA。结论 :在吗啡急性或慢性处理尾核神经元后 ,吗啡经 μ受体介导 ,诱发尾核神经元钾离子通道电流增大 ,使神经元处于超极化状态 。

大鼠脑微血管内皮细胞应力敏感性钾通道的研究

为探讨脑微血管内皮细胞的电生理学特征 ,研究了脑微血管内皮细胞钾离子通道的应力反应性。 1.建立了开放式切应力作用装置并进行了切应力值的计算 ;2 .培养大鼠脑微血管内皮细胞并种植到 1cm× 1cm玻片上 ,采用 Axonpatch2 0 0 A型膜片钳放大器以及全细胞膜片钳技术记录脑微血管内皮细胞的应力敏感性钾通道。结果表明 :1.1dynes/ cm2剪切应力能激发脑微血管内皮细胞的应力敏感性钾通道 ,该通道电流与钳制电压有良好的相关性。脑血管内皮细胞膜上的各种应力反应与细胞膜上的应力敏感性钾通道相关。

葛根素对大鼠心肌细胞离子通道的影响

目的探讨葛根素对大鼠心肌细胞离子通道的影响及其抗心律失常的电生理学机制.方法采用Langendoff胶原酶灌注加浸泡法分离大鼠心室肌细胞,据不同细胞外灌流液将实验分5组对照组;葛根素1.2,2.4,4.8和9.6mmol/L组.分别用膜片钳全细胞记录各组内向整流钾通道(Ik1)、瞬时外向钾通道(Ito)的电流.结果在500ms去极化的实验条件下,葛根素使不同去极化水平时的Ik1瞬间电流及稳态电流均明显下降.随着药物剂量的增加,这种抑制作用也增强.结论葛根素对大鼠心肌细胞离子通道的作用主要是抑制Ik1,且抑制呈浓度依赖性.

III类抗心律失常药RP58866对豚鼠及犬内向整流及瞬时外向钾电流的作用

目的：研究ＩＩＩ类抗心律失常药ＲＰ５８８６６ 对ＩＫ１ ，瞬时外向钾电流（Ｉｔｏ） 的作用。方法：用豚鼠和犬离体心肌细胞及全细胞电压钳技术。结果：在－ １００ ｍ Ｖ 时，ＲＰ５８８６６ 以浓度依赖方式明显减少了豚鼠心室肌细胞ＩＫ１ ，其ＩＣ５０ 为（３－４±０－８） μｍｏｌ·Ｌ－ １ 。在犬心室肌细胞，ＲＰ５８８６６ 可明显抑制Ｉｔｏ（ 在１００ μｍｏｌ·Ｌ－ １ 时减少８７％ ±２－１％ ），其ＩＣ５０ 为（２－３±０－５） μｍｏｌ·Ｌ－ １ 。结论：ＲＰ５８８６６ 对心肌细胞的ＩＫ１ 和Ｉｔｏ 均有抑制作用。

心肌细胞钾通道调控早期后除极的动力学机制

针对心肌细胞动作电位复极期振荡的早期后除极(EAD)现象,研究了细胞模型Hopf分岔和EADs的关系以及钾离子通道的作用。在LR91模型中剔除快钠离子电流并引入控制钙和钾离子通道时常数的控制因子形成子系统模型,分离出模型中不同时间尺度的变量,将跨膜电势、钙离子通道激活及失活门控变量视为快变量构成三变量快子系统,慢变量钾离子通道门控参数视为其分岔参数分析膜电位与快子系统稳定性的关系。计算机仿真结果表明,随着钾离子通道门控变量时常数的增大,膜电位越来越接近快子系统的吸引域和Hopf分岔点。当时常数增大到6倍时动作电位时程延长至1 060ms并开始出现膜电位的振荡,时常数增大到15倍时电位振荡个数增加至15,说明快子系统的Hopf分岔导致了钾通道门控作用下EAD的诱发。

胺碘酮对模拟缺氧状态下大鼠心室肌细胞瞬时外向和内向整流钾电流的影响

目的通过观察胺碘酮对模拟缺氧状态下急性分离的大鼠心室肌单细胞复极相中瞬时外向钾电流(Ito)和内向整流钾电流(IK1)通道的影响,探讨其在该条件下抗心律失常的作用机制。方法使用酶解法分离获取大鼠单个心室肌细胞,通过持续通以模拟缺氧细胞外液建立体外模拟缺氧模型,采用全细胞膜片钳实验技术研究胺碘酮对该条件下Ito和IK1的作用。结果胺碘酮呈剂量依赖性降低Ito和IK1电流幅值,对Ito抑制效应的起始浓度为1μmol/L,100μmol/L时抑制作用达最大,最大抑制幅度为56.78%±4.27%(23.98±2.18pA/pFvs10.38±4.27pA/pF;测试电压为+70mV;P<0.01;n=5),IC50(半数抑制浓度)为74.35μmol/L,但Ito的I-V曲线趋势并没有发生变化,稳态激活和失活曲线几乎不发生移动。胺碘酮对IK1内向电流部分抑制起始浓度为1μmol/L,外向电流部分抑制效应的起始浓度为2μmol/L,其最大抑制幅度分别为58.77%±10.76%(56.32±7.24pA/pFvs23.22±7.30pA/pF;测试电压为-150mV;P<0.01)和33.29%±2.15%(6.70±0.89pA/pFvs4.46±0.93pA/pF;测试电压为+40mV;P<0.01;n=5)。对内向电流成分的IC50为63.75μmol/L,IK1通道的稳态激活曲线无明显改变。结论在大鼠离体心室肌单细胞模拟缺氧条件下,胺碘酮对Ito和IK1电流幅度呈剂量依赖性抑制,有对抗缺氧本身造成的动作电位时程缩短效应;对I内向电流成分的敏感性高于外向成分。

自发高血压大鼠左心室心肌瞬时外向钾通道电流的动态变化

目的探讨自发高血压大鼠左心室心肌瞬时外向钾通道电流(transient outward potassium channel current,ITO)的动态演变规律及与左心室肥厚的关系。方法采用全细胞膜片钳技术记录10、24和34周龄自发高血压大鼠左心室心肌瞬时外向钾通道电流及膜电容,同时测定各组大鼠动脉收缩压和左心室质量指数。对照组为10周龄Wistar大鼠。结果①各组自发高血压大鼠的左心室质量指数及膜电容明显大于Wistar大鼠(P<0.01)。自发高血压大鼠膜电容和左心室质量指数组间差异有统计学意义(P<0.01);②10、24和34周龄组肥厚心肌ITO分别为(15.0±0.4)pA/pF,(13.9±0.9)pA/pF和(11.3±1.0)pA/pF,均小于对照组(16.3±0.8)pA/pF(P<0.05);③ITO与左心室质量指数呈负相关(r=-0.96,P<0.01),左心室质量指数是影响ITO密度的主要因素(β=0.91,P<0.01)。结论各周龄自发高血压大鼠左心室心肌出现肥厚;肥厚心肌ITO降低,且左心室肥厚越明显ITO越低。

钙调神经磷酸酶基因沉默对肥大乳鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流离子通道重构的作用

目的探讨钙调神经磷酸酶（CaN）基因沉默对乳鼠肥大心室肌细胞瞬时外向钾电流（Ito）离子通道重构和动作电位时程（APD）的影响。方法1d龄Sprague-Dawley乳鼠心室肌细胞，培养48h后换无血清培养基，分组干预48h：null组为空腺病毒载体干预，null＋PE组为空腺病毒载体联合苯肾上腺素（PE）干预，Ad-CnAl3shRNAl（A1）组给予重组腺病毒shRNA干扰载体介导沉默编码CaN之A亚基B亚型（CnAl3）基因干预，A1＋PE组为Ad-CnAl3shRNAI联合PE干预。适时荧光定量逆转录PCR检测Kv4．2基因表达。免疫印迹法检测CnAβ和Kv4．2蛋白表达。全细胞膜片钳技术记录Ito及动作电位。结果PE刺激使心室肌细胞肥大，CnAl3蛋白表达上调，Kv4．2基因和蛋白表达下调，Ito离子通道电流密度减小、APD延长。沉默CnAl3基因明显抑制PE刺激的上述效应。结论CnAl3基因沉默抑制PE诱导的肥大乳鼠心室肌细胞It0离子通道重构和APD改变。