电子直线加速器照射对神经胶质瘤SHG44细胞MMP2 ppGalNAcT2表达的影响及牛磺酸的防护作用

目的 :探讨电子直线加速器照射对SHG4 4细胞MMP2、ppGalNAcT2表达的影响 ,并探讨牛磺酸对此影响的防护作用。方法 :电子直线加速器 15Gy照射细胞SHG4 4作为阳性对照组 ,不照射的作为阴性对照组 ,另设三组加药组 15Gy照射 ,加药量分别为 5 0mg/L、10 0mg/L、2 0 0mg/L ,照后 12h收集。采用RT PCR法检测MMP2、ppGalNAcT2mRNA的表达差异变化。结果 :电子直线加速器照射SHG4 4细胞后MMP2上升 ,ppGalNAcT2下降 ,两者呈负相关性。而牛磺酸可使细胞在照射后与阳性对照组比MMP2下降 ,ppGalNAcT2上升 ,且与剂量相关。结论 :15Gy电子直线加速器照射促进SHG4 4细胞MMP2的表达 ,而对ppGalNAcT2有抑制作用 ;不同剂量的牛磺酸通过下调MMP2 ,上调ppGal NAclT2 ,从而抑制电离辐射引起的肿瘤细胞潜在的浸润和转移能力 ,达到生物防御作用。

γ射线对白血病细胞K562 ppGalNAcT2 mRNA表达的影响及中药多糖的防护作用

目的 探讨γ射线对白血病细胞株K562中多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mR-NA表达的影响,并探讨中药多糖对此种影响的防护作用。方法 以不同剂量的^(60)COγ射线照射K562细胞,并设加中药多糖实验组,观察不同剂量(5Gy、10Gy、15Gy)γ射线对K562细胞ppGalNAcT2 mRNA表达影响,及加入不同剂量中药(50mg/L,100mg/L,200mg/L)后对10Gy照射K562细胞组中T2 mRNA表达的防护作用。以RT-PCR法检测ppGalNAcT2 mRNA的表达差异变化。结果 γ射线照射K562细胞后ppGalNAcT2 mRNA表达明显减少,且与剂量呈负相关,而中药多糖则可对抗此种作用,使加中药多糖组细胞在照射后ppGalNAcT2 mRNA表达水平维持在正常细胞水平。结论 5～15Gyγ射线照射抑制白血病细胞ppGal-NAcT2 mPNA表达,可能与肿瘤细胞受照后分化抑制有关,而中药多糖明显对抗此种抑制作用。

1,25-(OH)_2 D_3对白血病细胞株K562和SHI-1 ppGalNAcTs表达的影响

目的:探讨在维生素D3的作用下,白血病细胞株K562与SHI-1ppGalNAcTs表达的变化。方法:应用RT-PCR法研究在不同浓度维生素D3的作用下,白血病细胞株K562与SHI-1ppGalNAcTs表达的变化。结果1,25-(OH)2D3(10-6-10-8mol/L)可分别上调K562细胞株ppGalNAcT2、T4、T5的表达。但在SHI-I细胞株,随着1,25-(OH)2D3浓度的增加ppGalNAcTI表达增加,T3表达没有变化、T4表达减少。结论:白血病细胞株K562与SHI-1PP-GMNAcTs的表达不同。在不同浓度维生素D3的作用下,白血病细胞株K562与SHI-IppGalNAcTs表达的变化也不同,说明不同ppGalNAcTs对1,25-(OH)2D3的反应不同。

原位逆转录PCR检测ppGalNAcT-2在胃癌细胞株SGC-7901的表达

目的 探索建立原位逆转录聚合酶链式反应方法以用于检测 ppGalNAcT 2在细胞株中的表达。 方法 采用原位逆转录聚合酶链式反应检测胃癌细胞株SGC 790 1中 ppGalNAcT 2的表达。 结果 胃癌细胞株SGC 790 1中 ppGalNAcT 2表达有差异 ,在细胞株中约有 30 %的细胞表达。 结论 原位逆转录PCR技术用于探索ppGalNAcT 2 在肿瘤细胞中的表达是可行的 ,它有助于对ppGalNAcT 2功能的进一步了解。

干扰素治疗病理性瘢痕的实验研究

目的 :研究体外干扰素 (INF)对瘢痕组织成纤维细胞 (FB)中转化生长因子 β1(TGF β1)、血小板衍生生长因子BB(PDGF BB)、基质金属蛋白酶 (MMP 1)以及糖基转移酶 (ppGalNAc T2 )的mRNA表达的影响 ,以求阐明干扰素对病理性瘢痕的作用机理。方法 :组织块法培养瘢痕组织FB ,传代后分成 3组①对照组 :生理盐水处理 ;②低浓度组 :10 0U/mlINF α2b处理 ;③高浓度组 :10 0 0 0U/mlINF α2b处理 ;RT PCR检测TGF β1、MMP 1、PDGF BB及ppGalNAc T2表达。结果 :体外培养瘢痕FB经 10 0U/ml及 10 0 0 0U/ml干扰素α 2b处理后 ,RT PCR检测TGF β1、PDGF BB及pp GalNAc T2表达降低 ,MMP 1表达升高 ,呈显著差异 ,且具有浓度依赖性。结论 :干扰素α2b对瘢痕FB具有抑制作用 ,其机理可能与多种细胞因子有关 ,如TGF β1、PDGF BB。

β照射对NIH3T3细胞中基质金属蛋白酶和糖基转移酶表达的影响及牛磺酸的干预作用

目的观察β射线对NIH3T3成纤维细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)和N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2,E.C2.4.1.41)基因mRNA表达的影响,并探讨牛磺酸对β辐射损伤的防护作用。方法以不同剂量的高能电子射线模拟β射线照射NIH3T3细胞,另外在15Gy照射组中提前12h加入不同浓度的牛磺酸(Tau),照后12h收集各组细胞,采用RT-PCR法检测MMP2、ppGalNAcT2在mRNA水平的表达差异。结果β射线照射NIH3T3细胞后MMP2的mRNA表达量增加,且与照射剂量呈正相关,ppGalNAcT2的变化情况正好相反,加入牛磺酸后可以起干预作用。结论5～15Gyβ射线照射对NIH3T3细胞中ppGalNAcT2在mRNA水平的表达有抑制作用,提示ppGalNAcT2可能与细胞的癌变等过程有关,牛磺酸能抑制MMP2的表达,同时促进ppGalNAcT2的表达,因而具有辐射防护作用。