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哺乳动物细胞西尼罗病毒样颗粒表达、纯化及其鉴定
被引量:
1
1
作者
咸庆杰
姜宝芹
+6 位作者
郭雪
王琳
杨鹏飞
张丽萍
平芮巾
岳启安
胡孔新
《中国国境卫生检疫杂志》
CAS
2011年第2期85-88,共4页
目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒(WNV)prM和E蛋白,形成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株,构建重组质粒,转染293T细胞,表达并纯化西尼罗病毒prM-...
目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒(WNV)prM和E蛋白,形成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株,构建重组质粒,转染293T细胞,表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白,利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验(IFA)和酶链免疫吸附试验(ELISA)对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒(viruslike particles VLPs),转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性;间接ELISA证实,重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性,为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。
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关键词
西尼罗病毒
293T细胞
prm—e蛋白
病毒样颗粒
间接免疫荧光试验
原文传递
题名
哺乳动物细胞西尼罗病毒样颗粒表达、纯化及其鉴定
被引量:
1
1
作者
咸庆杰
姜宝芹
郭雪
王琳
杨鹏飞
张丽萍
平芮巾
岳启安
胡孔新
机构
潍坊医学院
中国检验检疫科学研究院
出处
《中国国境卫生检疫杂志》
CAS
2011年第2期85-88,共4页
基金
国家公益性行业科研专项(200810162)
国家质检总局科研基金项目(2008IK210)
文摘
目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒(WNV)prM和E蛋白,形成病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs),为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株,构建重组质粒,转染293T细胞,表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白,利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验(IFA)和酶链免疫吸附试验(ELISA)对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒(viruslike particles VLPs),转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒,免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明,表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合,具有良好的抗原性;间接ELISA证实,重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性,为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。
关键词
西尼罗病毒
293T细胞
prm—e蛋白
病毒样颗粒
间接免疫荧光试验
Keywords
W
e
st Nil
e
virus
293T c
e
ll
prm
-
e
VLPs
IFA
分类号
R512.99 [医药卫生—内科学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
哺乳动物细胞西尼罗病毒样颗粒表达、纯化及其鉴定
咸庆杰
姜宝芹
郭雪
王琳
杨鹏飞
张丽萍
平芮巾
岳启安
胡孔新
《中国国境卫生检疫杂志》
CAS
2011
1
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