白花前胡丁素对慢性阻塞性肺疾病慢性缺氧模型大鼠心肌损伤的防护作用

目的探讨白花前胡丁素(PD)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)慢性缺氧(CH)模型大鼠心肌损伤的防护作用。方法采用烟熏联合鼻饲脂多糖复制COPD大鼠模型,正常气压下持续缺氧(氧浓度9.5%~10.5%)处理COPD模型大鼠4周,以复制COPD+CH大鼠模型。实验分为COPD组(等体积生理盐水),COPD+CH组(等体积生理盐水),PD低、高剂量组(0.1、0.5 mg/mL),核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素加氧酶-1(HO-1)信号通路抑制剂全反式维甲酸(ATRA)组(0.5 mg/kg),PD高剂量+ATRA组(PD 0.5 mg/mL+ATRA 0.5 mg/kg),腹腔注射药物或生理盐水,PD及生理盐水给予频率为每日1次、连续4周,ATRA为每日1次、连续2周(建模第15天起给药)。采用苏木素-伊红(HE)染色、TUNEL法分析心肌组织损伤程度及细胞凋亡情况并计算凋亡率,酶联免疫吸附法测定肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、丙二醛(MDA)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)水平,流式细胞仪测定活性氧(ROS)水平,Western blot法测定Nrf2、HO-1蛋白表达水平。结果与COPD组比较,COPD+CH组大鼠心肌组织病理损伤及炎性反应加重,细胞凋亡率显著升高;大鼠血清CK-MB、LDH、cTnI、ROS、IL-6、IL-1β、MDA水平显著升高;Nrf2蛋白表达水平显著降低,HO-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与COPD+CH组比较,PD低、高剂量组大鼠心肌组织病理损伤及炎性反应减轻,细胞凋亡率显著降低,大鼠血清CK-MB、LDH、cTnI、ROS、IL-6、IL-1β、MDA水平显著降低,大鼠心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著升高;ATRA组大鼠心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与ATRA组比较,PD高剂量+ATRA组大鼠心肌组织Nrf2和HO-1蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论PD可保护COPD+CH模型大鼠心肌,其机制可能与提升Nrf2/HO-1信号通路活性有关。

HPLC测定除痰止嗽丸中的桔梗皂苷D、桔梗皂苷E、白花前胡甲素和白花前胡乙素

目的： 采用高效液相色谱法测定除痰止嗽丸（CTZSW）中桔梗皂苷D、桔梗皂苷E、白花前胡甲素和白花前胡乙素的含量。 方法： Hypersil C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），流速1.0 mL·min-1，流动相乙腈-水（35：65）（桔梗皂苷D和桔梗皂苷E），ELSD漂移管温度105 ℃，载气（N2）流速2.6 SLPM·min-1；流动相乙腈-甲醇-水（40：30：30）（白花前胡甲素和白花前胡乙素），检测波长321 nm。 结果： 桔梗皂苷D和桔梗皂苷E分别在0.041 3-0.826 0 μg（r=0.999 7），0.079 7-1.594 0 μg（r=0.999 8）进样量与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为98.32%，98.94%，RSD（n=6）分别为0.80%，0.93%；白花前胡甲素和白花前胡乙素分别在0.154 9-3.098 0 μg（r=0.999 4），0.051 7-1.034 0 μg（r=0.999 8）进样量与峰面积呈良好的线性关系，平均加样回收率分别为98.72%，99.15%，RSD（n=6）分别为0.86%，0.95%。 结论： 该方法测定结果准确、灵敏、重复性好；可用于除痰止嗽丸的质量评价。

白花前胡丁素在大鼠体内的药动学研究

目的：建立白花前胡丁素（PD）的血浆浓度测定方法,研究PD在大鼠体内的药动学特征。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Odyssil C18,流动相为甲醇-水（75∶25,V/V）,流速为0.8 ml/min,检测波长为323 nm,柱温为25℃,进样量为20μl。24只雄性SD大鼠随机均分为PD高、低剂量（20、10 mg/kg）组。大鼠尾iv给药0.016 7、0.083 3、0.166 7、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、3、4 h后眼眶采血测定血药浓度,采用3p87软件计算药动学参数。结果：PD检测质量浓度线性范围为0.05~51.2μg/ml（r2=1.000）,精密度试验的RSD均小于7.85%,方法回收率为83.12%~86.63%,提取回收率为80.19%~84.21%,稳定性试验的RSD均小于15%。PD高、低剂量组t1/2α分别为（0.128 6±0.052 1）、（0.118 5±0.054 6）h,t1/2β分别为（2.64±0.874）、（2.41±0.823 1）h,cmax分别为（14.981 2±5.831）、（9.012 8±1.576）μg/ml,tmax分别为（0.109 1±0.058 5）、（0.108 2±0.069 1）h,AUC0-4 h分别为（20.79±9.981）、（18.14±9.856）μg·h/ml,CL分别为（1.335 7±1.146）、（1.521 5±1.268）L·kg/h。结论：该方法灵敏度高、专属性强、操作简便、准确可靠,可应用于PD在大鼠体内的药动学特征研究。PD在大鼠体内的消除过程属于一级消除,符合二室模型。