HPLC测定红车轴草中大豆苷元、染料木素、芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的含量

目的:建立测定红车轴草中大豆苷元、染料木素、芒柄花素和鹰嘴豆芽素A含量的高效液相色谱方法。方法:KromasilC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈0.1H3PO4(40∶60),流速:1.0mL·min-1,检测波长:254nm,柱温:25℃。结果:大豆苷元、染料木素、芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的线性范围分别为0.0662～0.6620μg,0.0978～0.9780μg,0.0866～0.8660μg和0.0992～0.9920μg。该方法回收率大豆苷元为98.9(RSD=0.46),染料木素为98.8(RSD=1.21),芒柄花素为98.8(RSD=0.71),鹰嘴豆芽素A为97.5(RSD=1.33)。结论:该法简便、快速、准确。

高效液相色谱法-蒸发光散射检测器和二级管阵列检测器测定红车轴草提取物中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素的含量

目的 建立以蒸发光散射检测器(EL SD)和二极管阵列检测器(DAD)测定红车轴草提取物中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素的高效液相色谱分析方法。方法 色谱柱:Kromasil C1 8柱(2 5 0 m m×4 .6 mm,5 μm) ;流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长:2 5 4 nm ;柱温:2 5℃;体积流量:1.0 m L /min;检测器:Agilent 110 0二极管阵列检测器,SEDEX5 5型蒸发光散射检测器。结果 鹰嘴豆芽素A和芒柄花素分别在1.2 75～3.315 μg和0 .96 5～2 .5 0 9μg与峰面积线性关系良好。鹰嘴豆芽素A和芒柄花素在以EL SD检测时的加样回收率分别为99.5 4 %、10 0 .84 % ,RSD分别为2 .0 3%、2 .15 % ,在以DAD检测时的加样回收率分别为10 1.2 6 %、10 1.5 9% ,RSD分别为1.84 %、1.91%。结论 本方法准确、快速。

微波法提取红车轴草中染料木素和刺芒柄花素工艺的研究

目的优化微波辐照法从红车轴草中提取、纯化染料木素和刺芒柄花素的工艺条件。方法以红车轴草为原料,甲醇为溶剂,利用微波辐射,回流、水解提取染料木素和刺芒柄花素。结果在微波功率25～30W的条件下,红车轴草粉末(60目),液料比V/W(5∶1),回流提取时间(30min×2),目标组分收率0.41,含量分别为14.3、53.6。结论微波辐照法提取染料木素、刺芒柄花素,方法简便、快速、高效。

红车轴草中刺芒柄花素的微波法提取工艺

With trifolium pratense Las ingredient and methanol as solvent,we extracted formononetin by microwave radiation,reflowing and hydroysis.And based on the optimized micrwave power,radiation time,proportion of liquid and ingredient,quantity of extraction liquid and grain-size of the ingredient,we set up the microwave-assisted extraction process:28-32w of microwave power,60mu of grain-size of ingredient,v/w 5∶1 of the proportion of liquid and ingredient,and the reflowing extraction time 30min x 2.The recovery rate is 0.32% with a content of 82.6%.The method is simple and highly effective.

微波法提取红车轴草中染料木素工艺的研究

目的:优化微波辐照法从红车轴草中提取、纯化制备染料木素的工艺条件。方法:以红车轴草为原料,甲醇为溶剂,利用微波辐射,回流、水解提取染料木素。结果:在微波功率26-35W的条件下,红车轴草粉末(60目),液料比V/W(5:1),回流提取时间(30min×2),收率0.30%,含量72.5%。结论:微波辐照法提取染料木素,方法简便、快速、高效。

测定红车轴草中刺芒柄花素含量的新方法

目的:建立了一种用同步荧光测定红车轴草中刺芒柄花素含量的新方法。方法:研究了检测条件对刺芒柄花素荧光强度的影响,以及实验的准确性、重现性和回收率。结果:该方法的线性回归方程为y=1440x-0.263,r=0.999,检出限为1.50×10-9mol/L。本方法测得红车轴草中刺芒柄花素的含量与HPLC法的结果相对偏差为1.65%。结论:说明本方法结果准确,可以满足科研和生产的要求。

高效液相色谱法测定山豆根中红车轴草苷和高丽槐素的含量

目的建立测定山豆根药材中红车轴草苷和高丽槐素含量的HPLC方法。方法色谱柱为Kromasil C18（4.6 mm×200 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%醋酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为310nm,柱温为25℃。结果红车轴草苷在0.200 6-3.009μg与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.999 6,平均回收率为99.6%,RSD=1.2%;高丽槐素在0.305~4.575μg与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.999 9,平均回收率为99.2%,RSD=1.1%。结论所用方法简便、准确、重复性好,提供了更好的控制山豆根药材质量的方法。

红车轴草提取物中总鹰嘴豆芽素类成分HPLC测定方法的研究

Two HPLC methods were established to determine the total biochanins in Red Clover extracts.One was taken Ononin,Sissotrin,Formononetin and Biochanin A as external standard.The other was taken Biochanin A as extrernal standard only.The results of two methods were primary similar.

HPLC法测定红车轴草中大豆苷元、染料木素、芒柄花黄素的含量

目的建立红车轴草中大豆苷元、染料木素、芒柄花黄素含量的测定方法。方法采用乙醚提取、纯化红车轴草酸水解产物,然后用RP-HPLC法同时测定3种异黄酮含量。结果大豆苷元、染料木素、芒柄花黄素的线性范围均为0.5～100.0μg/mL,平均回收率分别为95.70%、93.82%和83.36%。结论该方法基质简单、测定简便、快速、稳定性好。

红车轴草异黄酮对去势骨质疏松大鼠OPG、RANKL表达的影响

【目的】探讨红车轴草异黄酮对去势骨质疏松大鼠骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。【方法】从60只SD大鼠中随机抽取10只作为假手术组,其余大鼠作为造模组。造模组大鼠均进行去势骨质疏松模型构建。手术结束后,将去卵巢大鼠随机分为模型组,雌激素组,红车轴草异黄酮低、中、高剂量组,每组10只。术后第4周开始给药。红车轴草异黄酮低、中、高剂量组大鼠给予红车轴草异黄酮20、60、100 mg·kg^-1灌胃,每天1次;雌激素组给予尼尔雌醇2.5 mg·kg^-1灌胃,每周1次;假手术组、模型组大鼠给予等容量蒸馏水灌胃,每天1次。给药12周。采用Micro-CT扫描及相关软件定量分析骨体积/组织体积百分比,骨小梁数目、间距及厚度。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测骨组织碱性磷酸酶(ALP)、OPG、RANKL m RNA和蛋白的表达。【结果】与假手术组比较,模型组骨体积/组织体积百分比、骨小梁数目、骨小梁厚度减小,骨小梁间距加大(P <0.01);与模型组比较,红车轴草异黄酮低、中、高剂量组及雌激素组骨体积/组织体积百分比、骨小梁数目、骨小梁厚度均增加,骨小梁间距均减小,且呈剂量依赖性,其中雌激素组和红车轴草异黄酮高剂量组差异有统计学意义(P <0.05)。与假手术组比较,模型组骨组织ALP、OPG mRNA和蛋白表达水平降低,RANKL mRNA和蛋白表达水平升高(P <0.01);与模型组比较,红车轴草异黄酮低、中、高剂量组及雌激素组骨组织ALP、OPG mRNA和蛋白表达水平升高,RANKL m RNA和蛋白表达水平降低(P <0.05或P <0.01)。【结论】红车轴草异黄酮具有抗骨质疏松的作用,其机制可能与促进ALP,调节OPG、RANKL表达有关。

HPLC法测定红车轴草提取物中有效成分的含量

建立了一种测定红车轴草提取物中大豆素、染料木素、刺芒柄花素含量的高效液相色谱分析方法。Polaris C18色谱柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈一0．1％H3PO4（40：60），流速1．0mL·min，检测波长260nm，柱温25℃，进样量20μL。结果表明，大豆素、染料木素、刺芒柄花素的线性范围分别为0．40～2．00μg、0．10～0．96μg、0．10～0．96μg，其回收率分别为98．42％（RSD=1．32％）、98．15％（RSD=1．96％）、100．17％（RSD=0．32％）。该法简便、快速、准确。

红车轴草异黄酮药理作用研究进展

红车轴草（Trifolium pretense L.）为豆科车轴草属植物,又叫草原幸运草、紫花苜蓿、三叶草等,主要作为家畜和家禽的优良牧草,广泛分布于世界各地。红车轴草含有异黄酮、黄酮、香豆素、皂苷、微量维生素及矿物质等多种成分，

基于在体单向肠灌流模型的红车轴草异黄酮类成分渗透性研究

目的研究红车轴草水提物的异黄酮类肠吸收成分及其肠渗透性,探讨其相应机制。方法采用超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS),建立红车轴草水提物肠灌流液中异黄酮类成分大豆苷元、大豆苷、染料木苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、芒柄花苷的定量分析方法。基于大鼠在体单向肠灌流模型,研究红车轴草水提物中6种异黄酮类成分在不同小肠段(十二指肠、空肠、回肠)的肠渗透性,并对不同浓度的芒柄花素、芒柄花苷单体成分肠渗透特征进行研究。结果建立了红车轴草水提物肠灌流液中6种异黄酮类成分的UPLC-MS/MS定量分析方法,符合方法学要求。红车轴草水提物灌流液各成分的有效渗透系数(Peff)均大于5×10-5 cm/s,最大者为芒柄花素(Peff=3.20,十二指肠),其次为染料木苷(Peff=2.19,空肠);对于不同肠段,各成分Peff和吸收速率常数(Ka)均存在一定差异,大豆苷元、芒柄花素的十二指肠Peff最大,其余4种成分的空肠Peff最大,表明红车轴草水提物中异黄酮的最佳吸收窗口为十二指肠和空肠;不同浓度芒柄花素、芒柄花苷单体灌流的Peff、Ka差异均无统计学意义(P>0.05),吸收曲线近似线性,其吸收机制符合被动扩散的特征。结论本研究初步明确了红车轴草水提物中异黄酮类成分的肠渗透性及吸收机制,可为质控成分筛选、制剂开发及临床合理用药提供参考。

红车轴草素对Aβ诱导大鼠认知障碍的保护作用

目的:探讨对β1-42淀粉样蛋白(Aβ1-42)诱导的大鼠认知障碍的保护作用及其机制。方法:10周龄Wistar大鼠随机分成假手术组、Aβ1-42模型组、阳性药(石杉碱甲0.05 mg/kg)对照组、红车轴草素10 mg/kg和20 mg/kg治疗组。采用侧脑室注射Aβ1-42建立大鼠认知障碍模型,治疗3周后,应用Morris水迷宫行为试验测试大鼠的学习记忆能力,利用Western blot法检测大鼠海马中Aβ1-42蛋白、突触可塑性相关蛋白(PSD-95、p-NMDAR1、p-Ca MKII、p-PKACβ、PKCγ、p-CREB)和BDNF蛋白的表达。Realtime PCR分析Aβ相关基因APP、BACE1、Cat B、NEP和IDE mRNA的表达。采用碱性羟胺比色法测定大鼠脑乙酰胆碱酯酶(ACh E)含量。结果:红车轴草素(10 mg/kg、20 mg/kg)可明显改善大鼠学习记忆能力,减轻海马神经元退化和凋亡,提示对Aβ1-42诱导的大鼠认知损伤有明显的改善作用。进一步的机制研究表明红车轴草素可增强PSD-95、p-NMDAR1、p-Ca MKII、p-PKACβ、PKCγ、pCREB和BDNF蛋白的表达;抑制APP、BACE1和Cat B mRNA的表达,但提高NEP和IDE mRNA的水平;降低β淀粉样多肽的含量和沉积;同时,能明显降低脑内胆碱酯酶的活性,增加乙酰胆碱的含量。结论:红车轴草素能改善Aβ1-42诱导的大鼠认知障碍,其作用机制可能与降低脑内Aβ蛋白、增强突触可塑性相关蛋白表达和降低胆碱酯酶的活性有关。

HPLC法测定多叶越南槐中红车轴草苷及高丽槐素的含量

目的：建立测定多叶越南槐药材中红车轴草苷及高丽槐素2个黄酮类成分含量的高效液相色谱法。方法：采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,柱温25℃,以乙腈-0.1%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^-1,检测波长310 nm,进样量10μL,外标法定量。结果：红车轴草苷进样量在0.025 1-2.51μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 0）,平均回收率为97.0%（RSD=1.5%）;高丽槐素进样量在0.025 2-2.52μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0.999 0）,平均回收率为101.3%（RSD=2.2%）。结论：建立的含量测定方法符合方法验证要求。

红车轴草提取物定量测定方法的优化

目的优化红车轴草提取物的定量测定方法,以客观有效地评价提取物的质量。方法以鹰嘴豆芽素A、染料木素、刺芒柄花素和大豆苷元4种异黄酮苷元作为定量测定的指标成分,采用HPLC法分别测定提取物酸水解前后异黄酮的量。结果通过系统的研究与优化,确定的色谱条件为:Capcell pak C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,检测波长254 nm,体积流量1.0 mL/min,以乙腈(含0.05%TFA)-水(含0.05%TFA)梯度洗脱;酸水解条件为:提取物以1 mol/L盐酸甲醇溶液(每毫克提取物样品加2.0 mL)于85℃水浴回流1.5 h,冷却至室温后定容待测。结论本方法为红车轴草提取物提供了一种简便快速、有效可靠的定量测定方法。

红车轴草总异黄酮粉剂的质量标准

采用薄层色谱法建立其有效成分芒柄花素和鹰嘴豆芽素A定性方法,采用高效液相色谱法建立其有效成分芒柄花素和鹰嘴豆芽素A含量测定方法,以期建立红车轴草总异黄酮粉剂的质量标准。结果显示薄层斑点清晰、重现性好;测定芒柄花素和鹰嘴豆芽素A重现性好,平均加样回收率分别为101.10%及98.44%,RSD分别为2.19%和2.15%。本法简便、准确,可用于本品的质量控制。

红车轴草异黄酮的研究进展

对近15年来有关红车轴草异黄酮的文献资料加以归纳,综述了红车轴草异黄酮在减轻更年期症状、防治骨质疏松、抗癌和改善更年期心血管功能等方面的药理作用和临床研究进展,并且指出了未来的临床研究方向。

山豆根化学成分研究

利用多种柱层析方法,从山豆根中分得5个化合物。经过理化及波谱分析,分别鉴定为L 高丽槐素( 1)、红车轴草苷( 2 )、槲皮素( 3)、芦丁( 4 )和异鼠李素 3 芸香糖甙( 5 )。其中化合物3。

一测多评法测定山豆根中3个非生物碱成分含量

目的:建立山豆根中高丽槐素、红车轴草苷和越南槐醇3个成分含量的一测多评方法,为山豆根的质量评价提供参考。方法:以高丽槐素为内参物,计算红车轴草苷、越南槐醇相对校正因子,利用相对校正因子计算2个成分的含量,同时与外标法测定结果对比,验证一测多评法的可行性和适用性。结果:建立了以高丽槐素为内参物,红车轴草苷和越南槐醇的相对校正因子分别为1.609和0.774的山豆根药材多成分一测多评定量方法,相对校正因子重复性良好,与外标法测得值之间差异无统计学意义。结论:建立的一测多评方法精密度、稳定性及重复性较好,可用于山豆根中高丽槐素、红车轴草苷、越南槐醇3种非生物碱成分的定量分析。