骨化三醇注射液中甘氨酸含量测定方法研究

目的：建立HPLC法测定骨化三醇注射液中甘氨酸的含量。方法：采用柱前衍生高效液相色谱法测定，通过实验筛选出柱前衍生化的最佳反应条件。结果：衍生反应的最佳条件为pH8．04，温度20～30℃，反应时间为1．5min，试剂用量1ml。含量测定的方法学验证结果显示该方法专属性好，线性关系、重复性、回收率较好。结论：采用邻苯二甲醛柱前衍生高效液相色谱法能准确测定骨化三醇注射液中甘氨酸含量。

骨化三醇前体对照品的制备及其在软胶囊中检查方法的研究

目的:制备骨化三醇前体对照品,进行方法研究,并建立高效液相色谱法测定骨化三醇软胶囊中骨化三醇前体的含量。方法:采用C8色谱柱,以乙腈-Tris缓冲液(配制1 g·L^(-1)的3-羟甲基氨基甲烷溶液,用磷酸调节pH为7.0~7.5)为流动相,梯度洗脱,流速1 mL^(-1)·min^(-1),检测波长265 nm,柱温40℃,进样体积20μL。结果:骨化三醇前体定量测定方法专属性良好,骨化三醇质量浓度在1.275~255.0μg·mL^(-1)范围内线性良好,骨化三醇前体质量浓度在0.142~2.126μg·mL^(-1)浓度范围内线性良好,骨化三醇和前体的检测下限分别为0.0064μg·mL^(-1)和0.035μg·mL^(-1),定量下限分别为0.032μg·mL^(-1)和0.12μg·mL^(-1),精密度良好,平均加样回收率100.0%,选择加校正因子的面积归一化法进行计算,对不同批次的骨化三醇软胶囊进行测定,前体平均含量分别为6.06%、5.08%、6.12%。结论:本方法操作简便,结果准确,可用于骨化三醇软胶囊中骨化三醇前体的测定,可为具有相似结构的骨化醇类药品控制前体限度提供参考。