健胃消胀片通过调节PI3K-Akt-eNOS通路改善大鼠胃癌前病变

【目的】探讨健胃消胀片对大鼠胃癌前病变的治疗作用及机制。【方法】将40只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、叶酸组和健胃消胀片组,每组10只。除正常组,其他3组大鼠采用雷尼替丁水溶液灌胃联合N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)溶液饮用法制备胃癌前病变模型。成功造模后,相应给药治疗7周。记录造模及给药期间大鼠体质量变化,观察胃部大体观并进行病理评分,测定脾脏、肝脏系数,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察胃组织病理形态变化,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血清胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)、胰高血糖素(GC)含量,阿利新蓝-过碘酸雪夫氏(AB-PAS)染色法观察胃组织黏膜层厚度,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测胃组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白的表达,免疫荧光染色法检测胃组织血管内皮细胞生长因子A(VEGFA)蛋白的表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠实验期间体质量增长慢,胃部大体观病理评分显著升高(P<0.01),脾脏系数和肝脏系数显著降低(P<0.01),胃组织出现杯状细胞增生、肠化生现象,胃组织炎症评分显著升高(P<0.01),血清GAS含量显著升高(P<0.01),MTL、GC含量显著降低(P<0.05),胃组织黏膜层厚度显著减小(P<0.05),PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、eNOS蛋白表达水平降低(P<0.01),VEGFA蛋白表达水平降低(P<0.01);与模型组比较,健胃消胀片组和叶酸组上述指标均得到明显改善(P<0.05或P<0.01),其中,在胃组织杯状细胞增生、肠化生现象,血清GAS含量,胃组织黏膜层厚度方面,健胃消胀片组改善效果更优。【结论】健胃消胀片可改善大鼠胃癌前病变,其机制可能与激活PI3K-Akt-eNOS通路进而促进胃损伤组织的血管生成和修复能力有关。

金果胃康胶囊对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜ULK1/AMPK/mTOR信号通路的影响

目的:探讨金果胃康胶囊对胃癌前病变(PLGC)大鼠UNC-51样激酶1(ULK1)/5’-单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响。方法:75只SPF级Wistar大鼠,除空白组外,采用MNNG复合造模法建立PLGC大鼠模型,造模成功后运用随机数字表法分为模型组、叶酸组及金果胃康高、中、低剂量组,每组12只。灌胃给药8周后取材。HE染色观察胃黏膜病理学变化,免疫组化法检测ULK1蛋白表达水平,qPCR检测胃组织AMPK、mTOR mRNA表达水平,Western blot检测胃组织AMPK、p-AMPK、mTOR、p-mTOR蛋白表达水平。结果:金果胃康胶囊可显著改善PLGC大鼠胃黏膜萎缩、肠化生、上皮结构、形态紊乱及细胞异型性等病理表现。与模型组比较,金果胃康胶囊能显著上调AMPK、p-AMPK、ULK1的表达水平,下调mTOR、p-mTOR的表达水平(P<0.05),以高剂量组疗效最为显著。结论:金果胃康胶囊可能通过调控ULK1/AMPK/mTOR信号通路促进细胞自噬,修复胃黏膜病变,从而起到防治PLGC的作用。

基于网络药理学及实验验证的制萎扶胃丸干预胃癌前病变机制研究

目的通过网络药理学、分子对接技术及动物实验探究制萎扶胃丸干预胃癌前病变(PLGC)的潜在作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)及相关文献筛选制萎扶胃丸活性成分及对应靶点,利用GeneCards数据库筛选胃癌前病变疾病靶点,二者的交集靶点即为制萎扶胃丸治疗胃癌前病变的潜在作用靶点;使用Cytoscape软件构建“药物-活性成分-靶点”网络,STRING数据库构建蛋白质相互作用网络,然后筛选关键活性成分和关键靶点;使用DAVID数据库对交集靶点进行基因本体(GO)和基因组百科全书(KEGG)富集分析;采用AutoDockTools软件对关键活性成分和关键靶点进行分子对接验证。通过N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)为主的五因素复合法进行胃癌前病变大鼠模型复制,采用HE染色法检测胃组织病理学变化,Western Blot法检测胃组织PI3K、AKT、TNF-α、IL-6、Caspase-3蛋白表达。结果共获得制萎扶胃丸活性成分258种及对应靶点325个,疾病靶点1294个,二者交集靶点(潜在作用靶点)139个。筛选出关键活性成分槲皮素、木犀草素、山柰酚、β-谷甾醇等,关键靶点AKT1、CASP3、IL-6、TNF等。分析得到GO相关条目950条,KEGG相关通路177条,主要涉及PI3K/AKT、MAPK、IL-17、TNF及细胞凋亡等通路。分子对接显示,槲皮素、木犀草素、山柰酚、β-谷甾醇与AKT1、TP53、CASP3、IL-6、TNF等度值前10位关键靶点具有较好结合活性和稳定性。动物实验验证结果显示,与模型组比较,制萎扶胃丸组大鼠胃组织病理形态得到明显改善;同时该组大鼠胃组织中PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、TNF-α、IL-6蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),Caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论制萎扶胃丸治疗胃癌前病变具有多成分、多靶点、多途径的特征,能够通过抑制炎症反应、促进细胞凋亡发挥干预作用,可能与调控PI3K/AKT信号通路有关。

疏肝健脾颗粒对大鼠乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL表达的影响

目的:观察疏肝健脾颗粒对模型大鼠乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL表达的影响,探讨其阻断乳腺癌癌前病变发展的机制。方法:90只SD大鼠,随机分为6组,正常对照组、模型组、三苯氧胺组及疏肝健脾颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组。以雌孕激素与DMBA联合诱导乳腺癌癌前病变模型,各组分别给予生理盐水、三苯氧胺、疏肝健脾颗粒不同剂量干预60 d后,进行组织病理学及Fas、FasL表达的免疫组化检测。结果:模型组大鼠乳腺癌前病变率为69.2%,疏肝健脾颗粒各剂量组及三苯氧胺组的癌前病变发生率均低于模型组(P<0.01),模型组和疏肝健脾颗粒中、低剂量组部分大鼠乳腺组织发生浸润癌。正常对照组大鼠乳腺组织Fas蛋白表达较高,FasL蛋白表达在模型组大鼠乳腺组织表达较高,疏肝健脾颗粒各剂量组和三苯氧胺组Fas蛋白表达增强,FasL蛋白表达减弱,与模型组比较差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论:疏肝健脾颗粒可以显著降低DMBA诱导的大鼠乳腺癌癌前病变的发生率,调控乳腺癌癌前病变组织Fas、FasL的表达是其部分作用机制。

南蛇藤提取物通过抑制有氧糖酵解对大鼠胃癌前病变的影响

目的观察南蛇藤提取物通过抑制有氧糖酵解过程对大鼠胃癌前病变(Precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)的影响,并探讨其可能机制。方法采用复合模型复制法构建大鼠胃癌前病变模型,模型复制成功后,随机分为模型组及南蛇藤提取物低、中、高剂量组(12.5、25、50 mg·kg^(-1)),每组10只,灌胃治疗持续4周后处死大鼠。采用苏木素-伊红(HE)染色观察胃黏膜组织病理学改变,化学比色法检测胃黏膜乳酸含量;免疫组化(IHC)及实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测有氧糖酵解标志物己糖激酶2(HK2)、M2型丙酮酸激酶(PKM2)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶A(LDHA)、缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及潜在靶点叉头框蛋白O4(FOXO4)的蛋白和mRNA表达。结果与模型组比较,不同剂量的南蛇藤提取物能够部分缓解胃癌前病变大鼠胃黏膜的病变;降低大鼠胃黏膜的乳酸含量(P<0.01);降低HK2、PKM2、GLUT1、LDHA、HIF-1α的蛋白及mRNA表达,提高FOXO4的蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论南蛇藤提取物能够有效改善胃癌前病变大鼠胃黏膜组织病理性改变,纠正大鼠胃黏膜的酸性微环境,其机制可能与抑制有氧糖酵解、上调FOXO4的表达有关。

脂肪间充质干细胞对乳腺癌癌前病变大鼠乳房微循环及血液流变学的影响

目的:观察脂肪间充质干细胞对乳腺癌前病变大鼠乳房微循环及血流动力学的影响,探讨脂肪间充质干细胞移植隆乳的安全性。方法:选择108只大鼠随机均分为健康组(n=36)、实验组(n=36)、对照组(n=36),其中实验组与对照组建成乳腺癌前病变模型,成模第10周对实验组大鼠第5对乳腺组织内注射脂肪间充质干细胞1×106个,对照组相同位置注射0.9%氯化钠溶液0.1 mL。第14周对三组大鼠进行血液流变学及血流动力学分析。结果:实验组大鼠中切全血黏度、低切全血黏度、血浆黏度、低切还原黏度低于对照组(P<0.05),与健康组比较无显著差异(P>0.05);微循环灌注量高于对照组(P<0.05),与健康组比较无显著差异(P>0.05)。结论:脂肪间充质干细胞移植对腺癌癌前病变模型大鼠的乳房微循环灌注量、血液流变学均有明显的改善作用。

胃康舒宁对大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变癌相关细胞因子的影响

目的:探讨胃康舒宁对胃癌前病变(PLGC)大鼠血清多种癌相关细胞因子的影响.方法:将60只Wistar大鼠随机分为4组:正常组、模型组、维酶素组和胃康舒宁组.采用饮用N-甲基-N-亚硝基-N-硝基胍(MNNG)建立大鼠胃癌前病变模型,用维酶素和胃康舒宁治疗12wk后,用放射免疫法检测各组大鼠血清中表皮生长因子(EGF)、转化生长因子-α(TGF-α)、生长激素(GH)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、胰岛素样生长因子-Ⅱ(IGF-Ⅱ)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的水平.结果:与模型组大鼠相比,胃康舒宁组大鼠血清GH,TNF-α,IGF-Ⅱ水平显著增高(0.24±0.10μg/L vs 0.11±0.04μg/L,91.46±7.63μg/L vs 83.64±3.75μg/L,0.38±0.12μg/L vs 0.27±0.17μg/L,P<0.05或0.01),EGF,TGF-α,bFGF水平明显降低(0.40±0.11μg/L vs 0.56±0.15μg/L,0.021±0.006μg/L vs 0.029±0.012μg/L,1.44±0.37μg/L vs 3.26±0.45μg/L,P<0.05或0.01).结论:胃康舒宁对大鼠胃癌前病变具有良好的治疗和逆转作用,其疗效优于维酶素,而调节EGF,TGF-α,GH,TNF-α,IGF-Ⅱ,bFGF的分泌水平是其防治慢性萎缩性胃炎的作用机制之一.

黄芪多糖对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜P53、P65、VEGF蛋白表达及AI的影响

目的:探讨黄芪多糖对胃癌前病变(PLGC)模型大鼠胃黏膜P53、P65、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白及细胞凋亡指数(AI)的影响。方法:将60只大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、维酶素片组(阳性药物,0.01 g/kg)和黄芪多糖低、高剂量组(0.5、1.0 g/kg),除正常对照组外,其余各组复制PLGC模型。建模成功后,各给药组大鼠ig相应药物,正常对照组和模型对照组大鼠ig生理盐水,每天1次,连续8周。检测各组大鼠胃黏膜P53、P65、VEGF蛋白的表达及AI,并观察胃黏膜病理变化。结果:与正常对照组比较,模型对照组及各给药组大鼠胃黏膜P53、P65、VEGF蛋白表达增强(P<0.05),AI降低;胃黏膜有变薄、欠光滑、黏液减少等PLGC现象。与模型对照组比较,各给药组大鼠胃黏膜P53、P65、VEGF蛋白表达减弱、AI升高,且黄芪多糖低、高剂量组上述指标变化较维酶素片组更为明显(P<0.05);胃黏膜病理情况得到改善。与黄芪多糖低剂量组比较,黄芪多糖高剂量组大鼠胃黏膜P53、P65、VEGF蛋白表达减弱、AI升高更为明显(P<0.05)。结论:黄芪多糖可下调PLGC模型大鼠P53、P65、VEGF蛋白表达,降低AI,从而控制PLGC进展。

解毒化浊和胃方阻断大鼠慢性萎缩性胃炎癌前病变的分子生物学机制

目的:观察解毒化浊和胃方对大鼠慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变(PLGC)的增殖作用的影响,探讨解毒化浊和胃方阻断大鼠CAG PLGC发展的分子生物学机制。方法:将75只大鼠分为空白对照组、模型对照组、治疗前模型对照组、中药组、西药组,每组15只,除空白对照组外,各组以甲基亚硝基胍造模,造模后模型组给予双蒸水灌胃,中药组给予解毒化浊和胃方灌胃,西药组给予叶酸灌胃。采用免疫组化及原位分子杂交标记的方法测定EGFR蛋白翻译和mRNA转录水平以及病变粘膜组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、p21H-ras基因蛋白。结果:对照组PLGC组织EGFR蛋白翻译和mRNA转录水平均有过表达,表达随病变的进展而递增;解毒化浊和胃组EGFR蛋白及mRNA的表达下调,PCNA指数、p21H-ras基因蛋白阳性指数明显低于对照组(P<0．05)。结论:解毒化浊和胃方对大鼠CAG胃癌前病变细胞的增殖有良好的阻断作用,该作用可能与下调PLGC组织EGFR蛋白及mRNA的表达有关。

胃癌前病变大鼠胃组织GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1的表达及意义

目的：探讨胃癌前病变大鼠胃组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1的表达及其意义。方法：将50只SD大鼠随机分为正常组10只和模型组40只,正常组予自由饮用清洁水,进食普通颗粒饲料;模型组予150μg/m L的N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）自由饮用,同时自由进食含0.03%盐酸雷尼替丁的颗粒饲料,每4周各处死5只模型组大鼠观察造模情况,28周建立PLGC模型后处死全部大鼠。观察大鼠一般情况（体重、进食量及饮水量）及胃组织大体形态,H＆E染色观察胃黏膜病理形态,免疫组织化学方法观察胃组织GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1蛋白表达情况。结果：（1）大鼠体重及进食量、饮水量比较：与正常组比较,模型组大鼠体重、日进食量及日饮水量均有减少,具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。（2）病理形态学变化：正常组大鼠胃黏膜腺体形状规则、排列紧密,层次完整;模型组大鼠胃黏膜变薄,腺体减少,胃小凹粗大,或可见潘氏细胞,黏膜肌层增厚。（3）GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1等蛋白表达情况：模型组GSK-3β于细胞质表达呈浅棕色或不着色,与正常组比较,阳性细胞平均光密度降低（P〈0.05）;模型组β-catenin于细胞质及细胞核呈棕色或深棕褐色、Cyclin D1于细胞核表达呈深棕褐色颗粒状,与正常组比较,阳性细胞平均光密度较正常组明显升高（P〈0.01）。结论：PLGC发病与Wnt/β-catenin信号通路相关的异常激活,GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1蛋白的异常表达有关。

健脾消积汤抑制二乙基亚硝胺致大鼠肝癌前病变的作用

目的观察健脾消积汤抑制二乙基亚硝胺(DEN)致大鼠肝癌前病变的作用及其机制。方法实验用雄性SD大鼠80只,按抽签法随机分为4组(大、小剂量中药组及模型组、空白组),每组20只。除空白组正常饲养外,其余3组均用DEN作为肝癌的启动剂(200μg/kg),然后喂食含0.015%的2-乙酰氨基芴(2-AAF)饲料2周,行大部分肝切除术。大、小剂量中药组大鼠从实验开始即加用健脾消积方药汤剂灌胃,模型组则单纯喂食基础饲料。于停饲2-AAF饲料3 d后抽取大鼠血液并将其处死,检测大鼠血清白介素2(IL-2)含量,肝脏按规定部位取材,ABC法行转化生长因子β1(TGF-β1)免疫组织化学染色,另外肝脏采用γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)染色,算出平均每平方厘米肝面积中γ-GT阳性灶的数量、面积。结果大、小剂量中药组γ-GT阳性灶的数量、面积均明显少于模型组(P<0.05),大、小剂量中药组间无明显差异(P>0.05)。免疫组化检测显示小剂量中药组TGF-β1阳性率较模型组低(P<0.05),大剂量中药组TGF-β1阳性率低于模型组,但差异无统计学意义(P>0.05)。大剂量中药组、小剂量中药组、模型组大鼠血清IL-2含量均较空白组降低(P<0.05),大剂量中药组、小剂量中药组降低程度较模型组低(P<0.05),大剂量中药组、小剂量中药组IL-2含量无显著差异(P>0.05)。结论健脾消积方药有一定的抑制大鼠肝癌前病变作用,其机理可能是能过抑制TGF-β1生成,降低对免疫因子IL-2的抑制作用,增强大鼠免疫功能而起作用。

黄连和吴茱萸水提物对大鼠结肠癌癌前病变及结肠上皮增殖和凋亡的影响

目的研究黄连、吴茱萸水提物对二甲肼(DMH)诱导的大鼠结肠癌癌前病变的作用及其对结肠上皮增殖和凋亡的影响。方法采用DMH制备大鼠结肠癌模型;应用形态学的方法测定经过细微分离获得的完整肠腺内细胞的增殖和凋亡变化;应用甲基绿染色和光学显微镜计数中、降结肠异变肠腺病灶(ACF)数目。结果黄连、吴茱萸能够明显抑制模型组动物ACF的形成。模型组动物中、降结肠肠腺内细胞增殖显著增加,而黄连、吴茱萸能够明显抑制中、降结肠肠腺内细胞的增殖;模型组动物降结肠肠腺内细胞凋亡明显增加,而中结肠肠腺内细胞凋亡较正常相比无明显差异,而吴茱萸能够显著促进中、降结肠肠腺内细胞的凋亡,黄连无促进肠腺细胞凋亡的作用。结论黄连、吴茱萸能够显著抑制结肠癌癌前病变ACF的形成,提示其对结肠癌可能具有抑制和临床治疗作用,其中吴茱萸的作用部分通过抑制细胞增殖和促进细胞凋亡实现,而黄连对肠腺细胞的增殖具有抑制作用,但对肠腺细胞的凋亡无促进作用。

基于Raf-1基因探讨加味七方胃痛颗粒干预慢性萎缩性胃炎大鼠模型的作用机制研究

目的观察加味七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎(Chronic atrophic gastritis,CAG)大鼠模型Raf-1基因和蛋白的影响。方法将120只大鼠随机分为正常组,模型组,胃复春组和加味七方胃痛颗粒高、中、低剂量组,每组各20只。正常组自由饮用自来水,其余5组饮用180μg·mL^(-1)的N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)水溶液,建立CAG模型。造模成功后,正常组和模型组用生理氯化纳溶液灌胃,胃复春组、加味七方胃痛颗粒组分别给予胃复春片和相应浓度的加味七方胃痛颗粒灌胃。连续干预30 d后取大鼠胃黏膜,分别用Real-time PCR、Western Blot以及免疫组化法检测Raf-1基因及蛋白的表达情况。结果与正常组比较,模型组Raf-1基因表达明显增加(P<0.01),与模型组比较,胃复春组、加味七方胃痛颗粒组Raf-1基因表达均明显下调(P<0.01),其中以大剂量组下调幅度最明显;Western Blot法检测Raf-1蛋白表达显示,与正常组比较,模型组Raf-1蛋白表达明显增加(P<0.01),与模型组比较,胃复春组、加味七方胃痛颗粒组Raf-1表达均明显下调(P<0.01),其中以中剂量组下调幅度最明显;免疫组化法检测Raf-1的蛋白表达显示,与正常组比较,模型组Raf-1蛋白表达明显增加(P<0.01),与模型组比较,胃复春组、加味七方胃痛颗粒组Raf-1表达均明显下调(P<0.01),其中以中剂量组下调幅度最明显。结论加味七方胃痛颗粒对CAG有明显的疗效,能保护胃黏膜,其作用机制与其下调CAG大鼠的Raf-1基因及蛋白的表达有关。

乳腺癌癌前病变毒瘀互结模型研究

目的:通过乳腺癌癌前病变毒瘀互结证模型的研究,从大鼠一般行为学改变、舒肝颗粒药物干预两方面验证模型;并从组织病理学及免疫组化特点探讨模型预后。方法:SD大鼠分为空白组、对照组、模型组、舒肝颗粒组。用二甲基苯蒽(DMBA)联合长期慢性轻度不可预计应激制备乳腺癌癌前病变毒瘀互结模型,舒肝颗粒干预30 d。观察各组大鼠一般情况、肉眼肿瘤发生率、病理变化,免疫组化法染色观察各组大鼠血管内皮生长因子(VEGF)、趋化因子受体4(CXCR4)表达情况。结果:①与对照组相比,模型组大鼠出现一系列肝郁血瘀证的生物表征变化,且肉眼可见肿瘤发生率升高;②组织病理变化提示:模型组非典型增生较对照组数量增多,且程度加重。舒肝颗粒组大鼠病理以单纯增生伴局灶性轻度非典增为主,较模型组明显减轻。③免疫组化提示:模型组VEGF、CXCR4表达水平最高,较舒肝颗粒组明显升高,与对照组相比也有升高趋势。结论:长期慢性不可预计应激是大鼠毒瘀互结证形成的主要因素。对心理应激的干预,能延缓乳腺癌癌前病变的进一步发展。毒瘀互结证模型组VEFG、CXCR4表达明显升高,组织非典型增生程度较高,易转化成乳腺癌。

阳和化岩汤干预乳腺癌癌前病变的效果及机制研究

目的探讨阳和化岩汤干预乳腺癌癌前病变的效果及机制。方法选取健康雌性未育SD大鼠110只,随机分为空白对照组、模型组、低剂量阳和化岩汤组、高剂量阳和化岩汤组和三苯氧胺组,每组22只。其中模型组、低剂量阳和化岩汤组、高剂量阳和化岩汤组和三苯氧胺组大鼠建立乳腺癌癌前病变模型,低剂量阳和化岩汤组、高剂量阳和化岩汤组和三苯氧胺组分别给予低剂量、高剂量阳和化岩汤和三苯氧胺,采用HE染色观察各组乳腺组织,免疫组化染色检测FGF-2和FIK-1蛋白表达,RT-PCR检测FGF-2和FIK-1 mRNA表达。结果模型组癌前病变、浸润性癌比例分别为66.67%(12/18)和27.78%(5/18),明显高于空白对照组(P<0.05);高剂量阳和化岩汤组癌前病变、浸润性癌比例分别为19.05%(4/21)和0.00%,较模型组降低(P<0.05);模型组FGF-2和FIK-1表达OD值、mRNA相对表达量分别为(0.892±0.121)和(0.913±0.112),(0.901±0.113)和(0.892±0.103),明显高于空白对照组(P<0.05);高剂量阳和化岩汤组FGF-2和FIK-1表达OD值、mRNA相对表达量分别为(0.640±0.103)和(0.722±0.100),(0.602±0.101)和(0.670±0.098),较模型组和剂量阳和化岩汤组降低(P<0.05),与三苯氧胺组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论阳和化岩汤抑制乳腺癌癌前病变,可能与调节FGF-2和FIK-1表达有关。

亚硝基胍复制胃癌癌前病变大鼠模型的研究概况

N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)是一种化学诱变剂及致癌剂,人类在长期摄入MNNG后易致慢性萎缩性胃炎甚至胃癌,许多学者将MNNG作为诱发胃癌癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)动物模型造模制剂,以制备出符合实验要求的PLGC动物模型。本文通过搜索近年来使用MNNG复制PLGC动物模型的相关研究,根据使用MNNG造模过程中所涉及到的造模方式分类,比较构建PLGC大鼠模型的多种方法,探寻更为简单易行的PLGC动物模型造模方式,为深入开展该病的相关研究提供更符合科研与临床实际要求的模型支撑。

基于Sonic Hedgehog通路探讨复方胃炎合剂干预慢性萎缩性胃炎癌前病变的机制

目的观察复方胃炎合剂对慢性萎缩性胃炎癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)脾虚痰湿热瘀证大鼠Sonic Hedgehog(Shh)通路相关基因表达的影响,并探讨其抑制PLGC进展的机制。方法SPF级雄性Wistar大鼠随机分为空白组、空白+中药组、模型组、维酶素组、中药低剂量组、中药中剂量组和中药高剂量组,每组8只。造模组采用复合造模法构建PLGC脾虚痰湿热瘀证大鼠模型,造模成功后,各组予以相应干预,干预30 d后进行标本采集,采用HE染色检测大鼠胃黏膜病变情况,RT-qPCR检测胃组织Shh通路相关基因SHH、PTCH1、SMO、Gli1、Gli2、Gli3 mRNA的表达。结果HE染色提示空白组和空白+中药组大鼠胃组织病理组织学正常,模型组大鼠胃黏膜萎缩,并可见肠上皮化生(intestinal metaplasia,IM)和上皮内瘤变(intraepithelial neoplasia,IN);维酶素组和中药各剂量组病理组织学可见不同程度改善,以中药中、高剂量组改善最为明显。与空白组比较,模型组大鼠SHH、SMO、PTCH、Gli1 mRNA表达量下降,Gli2、Gli3 mRNA表达量上升,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,各治疗组大鼠胃组织SHH、SMO、PTCH、Gli1 mRNA表达量均上升,Gli2、Gli3 mRNA表达量均降低,其中空白+中药组、维酶素组、中药中剂量组、中药高剂量组SHH、SMO、PTCH mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),中药高剂量组大鼠胃组织Gli1 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05),空白+中药组、维酶素组、中药中剂量组、中药高剂量组大鼠胃组织Gli2 mRNA表达差异有统计学意义(P<0.01),中药各剂量组Gli3 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论复方胃炎合剂可通过激活Shh通路改善胃黏膜病变,从而抑制PLGC的进展。

基于“毒瘀交阻”探讨金果胃康胶囊对PLGC大鼠Wnt/Lgr5通路调控的影响

目的研究基于"毒瘀交阻"理论组方金果胃康胶囊对胃癌前病变大鼠模型Wnt/Lgr5信号通路调控的分子机制。方法选用SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、金果胃康胶囊(高、中、低剂量)治疗组、维酶素治疗组,我们使用MNNG结合饥饱失常等综合造模法复制PLGC大鼠病理模型,确定模型复制成功,连续灌胃治疗6周后,使用蛋白免疫印迹法检测大鼠胃粘膜组织Wnt/Lgr5信号通路基因及蛋白表达水平。结果与模型组相比较,金果胃康胶囊治疗组大鼠胃黏膜上皮组织中Wnt1mRNA、β-cateninmRNA、Lgr5mRNA表达水平均显著降低,有统计学意义(P<0.01)。结论金果胃康胶囊能够有效治疗PLGC,降低胃癌发生风险,可能与通过调控Wnt/Lgr5信号通路,降低大鼠胃黏膜组织Wnt1、β-catenin、Lgr5的蛋白表达及基因转录相关。

胃安泰胶囊对胃癌前期病变大鼠胃壁微循环的影响

目的:研究中药复方胃安泰胶囊对PLGC大鼠胃壁微循环的影响,探讨胃安泰胶囊对PLGC的防治作用及作用机制。方法:采用综合造模方法建立PLGC的大鼠模型。造模以前,将实验大鼠随机分为正常组、预防组、造模组。预防组大鼠在造模的同时灌服胃安泰胶囊,最后和其他各组进行比较。确认造模成功后,将参与造模的大鼠随机分为高剂量胃安泰给药组、中剂量胃安泰给药组、低剂量胃安泰给药组、维酶素给药组和病理对照组,分别进行灌胃。实验结束后摘取胃,测定胃壁血液的流速、浓度、流量,探讨胃安泰胶囊对胃癌前期病变大鼠胃壁微循环的影响。结果:胃安泰胶囊能够改善胃癌前期病变大鼠胃壁微循环。结论:胃安泰胶囊对胃癌前期病变有很好的预防和逆转作用。

金果胃康胶囊对PLGC大鼠Wnt/Lgr5信号通路的干预研究

目的探讨金果胃康胶囊对胃癌前病变大鼠细胞信号传导通路中Wnt1、β-catenin、Lgr5基因及其蛋白表达的干预机制。方法选用90只雄性SD大鼠,随机分为空白组12只,造模组78只,采用MNNG结合浓盐水灌胃及饥饱失常等综合造模方法复制PLGC模型,确定造模成功后随机分为模型组、中药高、中、低剂量治疗组及维酶素治疗组,分别给予生理盐水、不同剂量的金果胃康胶囊、维酶素,治疗6w。采用HE染色、AB-PAS染色光镜下观察大鼠胃黏膜病理改变情况;RT-PCR法检测Wnt/Lgr5信号通路中Wnt1、β-catenin、Lgr5基因及蛋白表达情况。结果与模型组相比,金果胃康胶囊治疗组大鼠胃黏膜上皮组织病理改变情况有所改善,Wnt1 mRNA、β-cateninmRNA、Lgr5mRNA表达量均显著下降,有统计学意义(P<0.01)。结论金果胃康胶囊可通过降低大鼠胃黏膜的Wnt1、β-catenin、Lgr5的蛋白表达及基因转录,促进细胞凋亡,降低胃癌发生的可能,达到治疗PLGC的目的。