孕马尿中主要结合雌激素的TLC定性鉴别

为了建立薄层色谱法快速评价新疆孕马尿中结合雌激素品质的方法,将孕马尿样品采用大孔吸附树脂固相萃取进行前处理,薄层板为硅胶G板(20×10 cm),展开剂为乙酸乙酯-二氯甲烷-甲醇(30∶90∶22,体积比),显色剂为20%的硫酸乙醇溶液。孕马尿中3种主要结合雌激素在薄层板上呈现蓝绿色斑点,尿中其他杂质无干扰。建立的薄层色谱法能够对孕马尿中主要结合雌激素快速鉴别,可用于孕马尿结合雌激素品质评价。

孕马尿中异黄酮类成分的研究

目的:分离孕马尿中的异黄酮类成分。方法:采用甲醇梯度洗脱,以柱色谱进行分离、纯化,通过光谱分析的方法鉴定化合物结构。结果:从孕马尿中分离获得2个化合物,分别为芒柄花黄素(Formononetin,Ⅰ)和鸡豆黄素(Biochanina,Ⅱ)。结论:所得化合物均为首次从孕马尿中通过柱色谱分离方法得到。

孕马尿中雌激素成分的研究

目的:了解孕马尿液中主要雌激素成分雌酮硫酸钠,马烯雌酮硫酸钠及17α-二氢马烯雌酮硫酸钠浓度在孕马孕期不同阶段浓度变化趋势,为孕马尿收集时间的选择提供科学依据。方法:相同孕期、相同品种的9匹怀孕母马自怀孕20周～44周,隔2周连续采集尿样,采用高效液相色谱(HPLC)法测定尿液中结合雌激素成分的含量,比较各成分浓度变化情况,并做出含量变化趋势图。结果:雌酮硫酸钠在孕马怀孕22周尿液中浓度达到最高水平,自怀孕22周～44周呈现逐渐下降的趋势,马烯雌酮硫酸钠和17α-二氢马烯雌酮硫酸钠在采集开始阶段浓度较低,随着怀孕时间延长浓度逐渐上升,到怀孕32周达到最高值后逐渐下降。结论:母马在孕期中形成的结合雌激素含量存在较大的个体差异,雌酮硫酸钠在母马怀孕22周尿液中浓度达到最高峰,马烯雌酮硫酸钠和17α-二氢马烯雌酮硫酸钠浓度在母马怀孕32周尿液中浓度达到最高值。

近红外光谱技术快速测定孕马尿中雌酮硫酸钠的含量

目的建立近红外光谱技术快速测定孕马尿中雌酮硫酸钠含量的方法。方法采用SupNIR-2600型近红外光谱仪采集孕马尿的光谱数据,用高效液相色谱法(HPLC)测定110个孕马尿样品中雌酮硫酸钠的含量作为参考值。根据HPLC法含量测定结果,划分为校正集样品88个,验证集22个,结合偏最小二乘法,建立孕马尿中雌酮硫酸钠近红外光谱定量校正模型。结果采用二阶卷积求导的光谱预处理方法,选择1000~1799 cm^-1波段进行孕马尿中雌酮硫酸钠近红外光谱定量校正模型的建立,主成分因子数为3,内部交叉验证决定系数为(R2)为0.9443,校正标准偏差(SEC)为1.77,交互验证校正标准偏差(SECV)为4.16。预测集样品平均相对偏差为1.45%。结论该方法快速、准确、简便,可以用于孕马尿中雌酮硫酸钠含量快速测定。

结合雌激素纯化及组分分析研究进展

从孕期马尿中提取出的雌激素代谢产物称为结合雌激素,临床上可用于治疗多种雌激素缺乏所导致的更年期症状。近一个世纪对其的研究取得了较多成果,本文对其分离纯化方法,组分及化学结构分析的研究进展进行了综述,并对该领域有待进一步深入研究的方面做了展望。

孕马尿收集及树脂柱自动化提取集成装置开发研究

本文首次将制药厂常用柱式树脂填料吸附工艺与自动化数控技术相结合,创造性地微缩集成为单个马匹可穿戴移动吸附系统,开发出新型"孕马尿液收集及树脂柱自动化提取集成装置",用于孕马尿中结合雌激素的吸附提取。该装置改变了原有工厂的原料收购和生产模式,循环收购富集结合雌激素的树脂取代了集中收集大量马尿,既提高了起始原料的质量水平,又避免了集中大量马尿带来的环境污染,同时大大降低了牧民的劳动强度,还增加了运输便利性。该装置可以精准帮扶因交通不便而增收困难的牧民,其推广应用具备良好的经济效益和生态效益。

LC-MS法检测新疆孕马尿中的3种主要结合雌激素

目的采用液-质联用方法同时测定孕马尿中的3种主要结合雌激素。方法用固相萃取进行样品的前处理，采用AgilentZorbaxSBC18色谱柱（100mm×2．1mm，3．5μm），流动相为乙腈-0．01mol·L-1醋酸铵水溶液，流速0．4mL·min-1，梯度洗脱；ESI负离子模式下选择离子监测（SIM），m／z为349、347、349。结果雌酮硫酸钠、马烯雌酮硫酸钠、17α-双氢马烯雌酮硫酸钠的线性范围分别为0．16～8．0μg·mL-1（r=0．9997）、0．08～4．0μg·mL-1（r=0．9992）、0．06～3．0μg·mL-1（r=0．9994），平均回收率分别为96．3％、95．2％、95．7％。结论所用方法快速、准确，可用于孕马尿中结合雌激素的质量评价。

孕马尿提取物中多种元素含量的ICP-MS法测定

目的测定孕马尿提取物中多种无机元素的含量。方法采用微波消解法对孕马尿提取物进行消解,利用电感耦合等离子体质谱建立了孕马尿提取物中钠(Na)、钾(K)、钙(Ca)、镁(Mg)、铅(Pb)、镉(Cd)、铜(Cu)、砷(As)、汞(Hg)等9种元素同时检测的方法,以内标法进行定量测定。结果各元素的线性关系良好,相关系数R2≥0.9994,该方法的检测限为0.05~0.27ng·g^(-1),加样回收率在94.3%~103.7%。结论该方法操作简便,灵敏度高,精密度高,重复性好,为孕马尿提取物的质量评价提供依据。

孕马尿中3种主要结合雌激素的固相萃取-UPLC法测定

建立了固相萃取-超高效液相色谱法快速检测新疆孕马尿中的3种主要结合雌激素——雌酮硫酸钠、马烯雌酮硫酸钠和17α-双氢马烯雌酮硫酸钠。采用大孔树脂固相萃取柱(SPE)富集孕马尿中的结合雌激素,以UPLC-PDA检测。采用C_(18)色谱柱,以0.025 mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈(77:23)为流动相,检测波长215 nm。3种结合雌激素分别在0.6～6.0、0.3～3.0和0.2～2 0μg/ml浓度范围内线性关系良好。平均回收率分别为97.0%、96.4%和98.3%,RSD分别为0.9%、1.7%和1.6%。

替代对照品法测定新疆孕马尿中3种主要结合雌激素含量

目的建立HPLC替代对照品法测定新疆孕马尿中3种主要结合雌激素的含量。方法采用HPLC在不同条件下测定替代对照品雌酮硫酸钠对于马烯雌酮硫酸钠及17α-双氢马烯雌酮硫酸钠对照品的校正因子,利用校正因子和替代对照品雌酮硫酸钠测定孕马尿中3种主要结合雌激素的含量。结果以替代对照品法测得的结果与常规含量测定方法结果一致。结论在高效液相色谱仪上使用替代对照品法测定孕马尿中的3种主要结合雌激素的含量,此方法准确可靠,可节约检测成本。