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Prelamin A相互作用蛋白的筛选及验证(英文)
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作者 刘振杰 高春海 +4 位作者 张丹丹 李涛 徐宁 李曼 黄丽英 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期531-537,共7页
【目的】筛选衰老相关蛋白prelamin A的相互作用蛋白并验证其相互作用情况。【方法】通过酵母双杂交方法从人骨骼肌c DNA文库中筛选prelamin A的相互作用蛋白。一对一回复性杂交,GST pull-down,免疫共沉淀和Western blotting验证其在细... 【目的】筛选衰老相关蛋白prelamin A的相互作用蛋白并验证其相互作用情况。【方法】通过酵母双杂交方法从人骨骼肌c DNA文库中筛选prelamin A的相互作用蛋白。一对一回复性杂交,GST pull-down,免疫共沉淀和Western blotting验证其在细胞外的相互作用,构建Ran BPM与绿色荧光蛋白融合表达载体p EGFP-N1-Ran BPM,与红色荧光蛋白-prelamin A融合表达质粒p Ds Red1-N1-prelamin A.共转染HEK293细胞,激光共聚焦显微观察细胞内的共定位情况。【结果】筛选得到包括Ran BPM在内的21个候选相互作用蛋白。一对一回复性杂交,GST pull-down,免疫共沉淀和Western blotting证明两者能在细胞外相互作用。激光共聚焦显微观察发现Ran BPM能与带红色荧光蛋白的prelamin A蛋白在核膜共定位。【结论】Ran BPM可能通过与Prelamin A发生相互作用参与了细胞衰老的过程。 展开更多
关键词 prelamin A RanBPM/RanBP9 酵母双杂交 HGPS
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衰老相关蛋白prelamin A与MT-2A的相互作用
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作者 熊兴东 刘振杰 +2 位作者 王君文 周中军 刘新光 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第14期2972-2974,共3页
目的分析衰老相关蛋白prelamin A是否与MT-2A相互作用,以及MT-2A与衰老的关系。方法采用酵母双杂交方法从人骨骼肌文库中筛选prelamin A的相互作用蛋白,酵母一对一回复性杂交和荧光共定位验证MT-2A与prelamin A是否相互作用。RT-PCR分析... 目的分析衰老相关蛋白prelamin A是否与MT-2A相互作用,以及MT-2A与衰老的关系。方法采用酵母双杂交方法从人骨骼肌文库中筛选prelamin A的相互作用蛋白,酵母一对一回复性杂交和荧光共定位验证MT-2A与prelamin A是否相互作用。RT-PCR分析MT-2A在正常和早老细胞中的表达。结果通过酵母双杂交方法从人骨骼肌文库中筛选到prelamin A的候选相互作用蛋白MT-2A,一对一回复性验证也证明两者能在酵母细胞中相互作用。构建含绿色荧光蛋白的MT-2A融合表达载体转染HEK-293细胞,激光共聚焦显微观察发现MT-2A能与带红色荧光蛋白的prelamin A蛋白在核膜共定位。研究还发现MT-2A的表达在早老细胞中显著下调(P<0.01)。结论 MT-2A作为一个新的prelamin A结合蛋白,可能在细胞早老过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 MT-2A prelamin A 相互作用 酵母双杂交 衰老
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Twenty years of experience with the rabbit model,a versatile model for tracheal transplantation research
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作者 Margot Den Hondt Bart M.Vanaudenaerde +1 位作者 Pierre Delaere Jan J.Vranckx 《Plastic and Aesthetic Research》 2016年第1期223-230,共8页
Pathologies comprising more than half the length of the trachea are a challenge to the reconstructive surgeon.Innovative tracheal transplantation techniques aim to offer the patient a curative solution with a sustaine... Pathologies comprising more than half the length of the trachea are a challenge to the reconstructive surgeon.Innovative tracheal transplantation techniques aim to offer the patient a curative solution with a sustained improvement in quality of life.This review summarizes the authors’experience with the rabbit as a versatile model for research regarding tracheal transplantation.Because of the segmental blood supply of the trachea,it is not feasible to transplant the organ together with a well-defined vascular pedicle.As such,the key element of successful tracheal transplantation is the creation of a new blood supply.This vascularized construct is created by prelaminating the rabbit trachea heterotopically,within the lateral thoracic fascia.After prelamination,the construct and its vascular pedicle are transferred to the orthotopic position in the neck.This model has become gold standard because of the advantages of working with rabbits,the anatomy of the rabbit trachea,and the reliability of the lateral thoracic artery flap.In this paper,the key elements of surgery in the rabbit are discussed,as well as the tracheal anastomosis and the harvest of the lateral thoracic artery flap.Practical tips and tricks are presented.The data described in this review represent the fundaments of ongoing translational research in the center over the past twenty years. 展开更多
关键词 TRACHEA transplantation rabbit lateral thoracic artery flap prelamination PREFABRICATION
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