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Application of the sun line-of-sight vector in the optimal attitude estimation of deep-space probe
1
作者 常晓华 崔祜涛 邵巍 《Journal of Harbin Institute of Technology(New Series)》 EI CAS 2011年第2期96-100,共5页
This paper proposed an optimal algorithm using the sun line-of-sight vector to improve the probe attitude estimation accuracy in deep-space mission.Firstly,the elaborate analysis of the attitude estimation error from ... This paper proposed an optimal algorithm using the sun line-of-sight vector to improve the probe attitude estimation accuracy in deep-space mission.Firstly,the elaborate analysis of the attitude estimation error from vector observations was done to demonstrate that the geometric relation between the reference vectors is an important factor which influences the accuracy of attitude estimation.Then,with introduction of the sun line-of-sight vector,the attitude quaternion obtained from the star-sensor was converted into a pair of mutually perpendicular reference vectors perpendicular to the sun vector.The normalized weights were calculated according to the accuracy of the sensors.Furthermore,the optimal attitude estimation in the least squares sense was achieved with the quaternion estimation method.Finally,the results of simulation demonstrated the validity of the proposed optimal algorithm based on the practical data of the Deep Impact mission. 展开更多
关键词 sun line-of-sight vector attitude estimation deep-space probe
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电导探针向量信号处理的泡状流参数分析
2
作者 陈宪丙 刘慎忍 +2 位作者 杨雨菲 屈晓航 王昆 《山东建筑大学学报》 2024年第2期89-94,121,共7页
泡状流广泛存在于化工、石油、电力等工业场合,对其主要参数的测量不仅是工程设计的必须参考,也是进一步开发两相流理论模型的依据。文章提出并制作了小型四电极电导探针测量空气-水盖泡状流,可以获得局部含气率、界面面积浓度和气泡弦... 泡状流广泛存在于化工、石油、电力等工业场合,对其主要参数的测量不仅是工程设计的必须参考,也是进一步开发两相流理论模型的依据。文章提出并制作了小型四电极电导探针测量空气-水盖泡状流,可以获得局部含气率、界面面积浓度和气泡弦长,且通过已知或合理假设的界面运动方向可获得界面的指向和速度,并通过实验对比四电极电导探针和可视化两种测量方法。结果表明:两种方法具有良好的一致性,四电极电导探针简单、高效,可以准确地测量泡状流中相界面指向等参数,还能有效地解决多维两相流参数测量问题。 展开更多
关键词 工程热物理 气液两相流 电导探针 向量信号处理 可视化方法
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向量血流技术在腹部凸阵超声探头上的应用研究
3
作者 郝鹏慧 杜宜纲 +2 位作者 李双双 朱磊 何绪金 《中国医疗器械杂志》 2024年第1期1-5,25,共6页
向量血流成像是一种新型的超声血流测量技术。相对于传统的彩色多普勒和频谱多普勒,它具有不依赖角度校正、可直接获取血流的实时幅值和方向(血流速度矢量)等优势。横向振荡法(transverse oscillation,TO)是实现向量血流成像的有效方法... 向量血流成像是一种新型的超声血流测量技术。相对于传统的彩色多普勒和频谱多普勒,它具有不依赖角度校正、可直接获取血流的实时幅值和方向(血流速度矢量)等优势。横向振荡法(transverse oscillation,TO)是实现向量血流成像的有效方法之一。然而,对于结构更加复杂的凸阵探头,目前仍然缺乏基于商用超声机的完整且详细的算法验证过程。该研究先介绍了TO成像过程和成像原理,然后通过仿真实验,计算设定速度值与测量速度值之间的误差,再通过多普勒体模实验,验证设定速度值与测量速度值之间的误差。其中仿真实验中TO向量血流技术测得的速度值为0.48 m/s,与预设值0.50 m/s的误差为−4%;多普勒体模实验中测得的速度值为8.33、11.14、14.44、16.67 cm/s,与实际速度值7.97、10.78、14.06、17.34 cm/s的误差均在±5%内。2个实验都验证了向量血流技术在腹部凸阵探头上应用的可行性。 展开更多
关键词 向量血流 腹部凸阵探头 多普勒体模 横向振动
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Vector系统在轻中度牙周病治疗中的应用研究 被引量:4
4
作者 刘宗响 王鹏来 +1 位作者 牛文芝 陈涵 《口腔生物医学》 2010年第2期94-95,共2页
目的观察Vector系统治疗轻中度牙周炎的临床疗效。方法 200例牙周病患者随机分为对照组和实验组,分别采用Gracey刮治器和Vector系统治疗技术,在治疗后15、45、90d时分别测量并记录牙牙周探诊深度(probing depth,PD)和出血指数(bleeding ... 目的观察Vector系统治疗轻中度牙周炎的临床疗效。方法 200例牙周病患者随机分为对照组和实验组,分别采用Gracey刮治器和Vector系统治疗技术,在治疗后15、45、90d时分别测量并记录牙牙周探诊深度(probing depth,PD)和出血指数(bleeding index,BI)。结果对照组和实验组治疗前后的各项指标均有显著改善,实验组PD在治疗后15d时明显小于对照组(P<0.05),而45d和90d时两组的差异无统计学意义(P>0.05),实验组的BI改善优于对照组(P<0.05)。结论 Vector系统在牙周治疗中有确切的临床效果。 展开更多
关键词 牙周病 vector系统 牙周探诊深度 出血指数
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基于Matlab分析常压塔塔顶挥发线腐蚀影响因素相关性
5
作者 郭庆举 曹澜威 《炼油技术与工程》 CAS 2023年第3期58-60,共3页
国内某千万吨级炼油厂常压塔塔顶探针出现长期腐蚀速率超高的情况。常压塔塔顶的腐蚀类型包括HCl腐蚀、H_(2)S腐蚀、铵盐结晶、冲刷腐蚀等,影响因素包括温度、流速、注水量等,检测的数据包括pH值,Fe^(2+)含量,Cl^(-)含量,H_(2)S含量,NH_... 国内某千万吨级炼油厂常压塔塔顶探针出现长期腐蚀速率超高的情况。常压塔塔顶的腐蚀类型包括HCl腐蚀、H_(2)S腐蚀、铵盐结晶、冲刷腐蚀等,影响因素包括温度、流速、注水量等,检测的数据包括pH值,Fe^(2+)含量,Cl^(-)含量,H_(2)S含量,NH_(4)^(+)含量,石脑油馏程等。各操作参数、分析检测项目对于探针腐蚀变化趋势的影响程度不同,各数值间可能存在关联,因而,确定主要影响因素并提出解决办法存在较大的困难。基于Matlab(矩阵实验室)多元数据分析功能,应用主成分分析(PCA)对腐蚀因素进行分析和排序,找到86.5%的腐蚀贡献率,进而为防腐措施的实施提供理论支持。为复杂条件下常压塔塔顶腐蚀因素的判定提供了一条解决途径。 展开更多
关键词 MATLAB 常压塔塔顶挥发线 腐蚀影响因素 探针 腐蚀速率 PCA 特征向量 NH_(4)Cl
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鸟枪法筛选枯草芽孢杆菌基因强启动子及对黄牛GHRL基因的表达 被引量:4
6
作者 张爱玲 张丽 +2 位作者 杨明明 张良志 陈宏 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期92-96,共5页
利用鸟枪法通过大肠埃希菌-枯草芽孢杆菌启动子探针载体分离到枯草芽孢杆菌168菌株的103个基因启动子片段,发现1个672 bp的启动子片段P3.4.23,能够在大肠埃希菌和枯草芽孢杆菌高效启动报告基因β-半乳糖苷酶的表达,其酶活性分别达到3 41... 利用鸟枪法通过大肠埃希菌-枯草芽孢杆菌启动子探针载体分离到枯草芽孢杆菌168菌株的103个基因启动子片段,发现1个672 bp的启动子片段P3.4.23,能够在大肠埃希菌和枯草芽孢杆菌高效启动报告基因β-半乳糖苷酶的表达,其酶活性分别达到3 418、2 877 U/mL.相似性分析表明P3.4.23启动子片段具有枯草芽孢杆菌基因启动子的保守序列,并确定其转录活性区域位于5~333 bp,为yxiE基因的调控序列.将黄牛GHRL基因导入到启动子亚克隆序列下游,使该基因在枯草芽孢杆菌中得到了表达. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 大肠埃希菌 启动子探针载体 GHRL基因 鸟枪法
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粗毛栓菌(Trametes gallic)基因启动子的分离与鉴定 被引量:5
7
作者 胡敏珊 张义正 曾凡亚 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期340-344,共5页
粗毛栓菌 (Trametesgallic)总DNA经Sau3AI酶切后插入到启动子探针型载体pSUPV8的BamHI位点 ,在含氨苄青霉素与潮霉素双抗平板上筛选到 8个潮霉素抗性(Hygr)重组子 (命名为 pTP1~ 8) ,其插入片段大小为 0 .5~ 1.7kb ,抗性水平为 0 .15&... 粗毛栓菌 (Trametesgallic)总DNA经Sau3AI酶切后插入到启动子探针型载体pSUPV8的BamHI位点 ,在含氨苄青霉素与潮霉素双抗平板上筛选到 8个潮霉素抗性(Hygr)重组子 (命名为 pTP1~ 8) ,其插入片段大小为 0 .5~ 1.7kb ,抗性水平为 0 .15× 10 - 3 ~0 .35× 10 - 3 g/mL .对 pTP6进行酶切分析表明 ,插入片段中含有KpnI ,XbaI和SacI位点各一个 ,用限制酶SacI和XbaI去掉其 5’端 0 .7kb和 1.2kb片段后 ,其潮霉素抗性由 0 .2 5×10 - 3 g/mL均降为 0 .15× 10 - 3 g/mL .将TP5片段与粗毛栓菌总DNA进行Southern杂交 ,结果证明 ,TP5片段来源于粗毛栓菌总DNA .对片段TP5的 3’端进行序列分析 。 展开更多
关键词 粗毛栓菌 基因启动子 Hyg^r基因 启动子探针型载体 基因分基 基因表达 潮霉素抗性 序列分析
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黄孢原毛平革菌基因启动子的分离与鉴定 被引量:8
8
作者 李维 张义正 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期599-602,共4页
利用启动子探针型载体 pSUPV8直接在大肠杆菌 (Escherichiacoli)中分离黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium)基因启动子片段 ,获得 6个潮霉素抗性 (Hygr)重组子。对重组子CH2、CH6进行序列分析 ,结果发现它们都存在真核生物基... 利用启动子探针型载体 pSUPV8直接在大肠杆菌 (Escherichiacoli)中分离黄孢原毛平革菌 (Phanerochaetechrysosporium)基因启动子片段 ,获得 6个潮霉素抗性 (Hygr)重组子。对重组子CH2、CH6进行序列分析 ,结果发现它们都存在真核生物基因启动子的保守序列 ;用原生质体转化法将其转化黄孢原毛平革菌 ,仅 pCH6获得了潮霉素抗性转化子 ;PCR和斑点杂交分析表明 ,pCH6已成功导入黄孢原毛平革菌 ,并启动潮霉素抗性基因的表达。 展开更多
关键词 黄孢原毛平革菌 启动子 分离 鉴定 基因表达
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乳酸菌启动子探针载体的构建及其功能验证 被引量:4
9
作者 张维 姚璐 +2 位作者 张世湘 罗云波 郝彦玲 《中国乳品工业》 CAS 北大核心 2010年第11期4-6,29,共4页
以β-葡萄糖醛酸酶基因gusA作为报告基因,在乳酸菌表达载体pMG36e基础上,利用平滑化技术删除表达载体自带启动子P32,构建了乳酸菌启动子探针载体pMGPP。将已知的嗜酸乳杆菌S-layer蛋白基因启动子slpA插入到pMGPP无启动子的gusA基因上游... 以β-葡萄糖醛酸酶基因gusA作为报告基因,在乳酸菌表达载体pMG36e基础上,利用平滑化技术删除表达载体自带启动子P32,构建了乳酸菌启动子探针载体pMGPP。将已知的嗜酸乳杆菌S-layer蛋白基因启动子slpA插入到pMGPP无启动子的gusA基因上游验证其功能,GUS染色结果表明:pMGPP在大肠杆菌KW1和植物乳杆菌WQ0815中皆具有启动子探针载体的功能。因此,具有自主知识产权的启动子探针载体pMGPP的构建不仅为筛选乳酸菌启动子提供了有效的工具,同时为高效乳酸菌表达载体的构建奠定基础。 展开更多
关键词 乳酸菌 启动子探针载体 报告基因gusA 功能验证
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低温菌启动子探针质粒的构建 被引量:3
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作者 魏云林 林连兵 +1 位作者 季秀玲 井申荣 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期530-534,共5页
为了在宿主菌Acinetobacter sp.DWC6中构建低温菌蛋白表达载体,以pBR322质粒为基础,去除质粒上β-内酰胺酶基因的启动子片段,取而代之为来源于质粒pJRD215的卡那霉素抗性基因片段,并在pBR322中插入Acinetobacter菌属特异性ori的DNA片段... 为了在宿主菌Acinetobacter sp.DWC6中构建低温菌蛋白表达载体,以pBR322质粒为基础,去除质粒上β-内酰胺酶基因的启动子片段,取而代之为来源于质粒pJRD215的卡那霉素抗性基因片段,并在pBR322中插入Acinetobacter菌属特异性ori的DNA片段,构建了能在Acinetobacter sp.DWC6和E.coli中正常复制的启动子探针质粒pBAP1。通过在质粒pBAP1中的β-内酰胺酶基因上游随机导入Acinetobacter sp.DWC6基因组片段,通过检测宿主细胞的氨苄青霉素抗性和β-内酰胺酶活性,来筛选强启动子片段,并分析了启动子探针质粒载体的功能及启动子的强度。 展开更多
关键词 低温菌 启动子探针质粒载体 Β-内酰胺酶
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两种杆状病毒的限制性消化和p10基因的定位 被引量:3
11
作者 黄永秀 齐义鹏 +1 位作者 李凌云 金天全 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期191-197,共7页
以5和6种限制性内切酶分别消化昆虫杆状病毒SeNPV和LsNPV DNA,求出它们的基因组平均长133kb和164kb.为了定位这两种杆状病毒的p10基因,构建了含有AcNPVp10基因序列的两个探针载体pAcHP106和pAcEP102.从探针载体回收0.18kb和0.42kb的AcNP... 以5和6种限制性内切酶分别消化昆虫杆状病毒SeNPV和LsNPV DNA,求出它们的基因组平均长133kb和164kb.为了定位这两种杆状病毒的p10基因,构建了含有AcNPVp10基因序列的两个探针载体pAcHP106和pAcEP102.从探针载体回收0.18kb和0.42kb的AcNPV p10基因序列,制备探针,与SeNPV和LsNPV的酶切片段杂交,得到清晰的杂交图谱,准确的定位了这两种病毒的p10基因. 展开更多
关键词 杆状病毒 P10 基因 基因定位
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乳酸杆菌组成型启动子探测载体pgateway-612的构建 被引量:2
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作者 陈家锃 崔红玉 +4 位作者 田志军 葛俊伟 安同庆 彭金美 李一经 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期849-853,共5页
为筛选适宜乳酸菌(LAB)宿主表达载体的启动子,本研究以大肠杆菌-LAB穿梭载体pPG612为基本骨架,利用GatewayTM克隆技术操作构建了LAB组成型启动子探测载体,并利用该载体筛选了短乳杆菌的S层启动子。我们利用底物X-gluC与报告基因gusA编... 为筛选适宜乳酸菌(LAB)宿主表达载体的启动子,本研究以大肠杆菌-LAB穿梭载体pPG612为基本骨架,利用GatewayTM克隆技术操作构建了LAB组成型启动子探测载体,并利用该载体筛选了短乳杆菌的S层启动子。我们利用底物X-gluC与报告基因gusA编码的蛋白酶之间的特异性显色反应筛选阳性菌落,超声破碎后的菌体蛋白经SDS-PAGE和western blot分析表明该启动子在宿主菌中具有组成型启动子活性。本研究为进一步利用表达载体及筛选其他LAB启动子奠定基础。 展开更多
关键词 乳酸菌 启动子探测载体 Gateway克隆技术 X-gluC
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利用大肠杆菌克隆在原核生物中有活性的油菜基因启动子 被引量:5
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作者 王海燕 张义正 《Acta Botanica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1999年第5期494-497,共4页
利用本室构建的基因启动子探针型载体pSUPV4直接在大肠杆菌(Escherichiacoli(Migula)CastelanietChalmers)中分离油菜(BrasicanapusL.)基因启动子片段,获得卡那霉... 利用本室构建的基因启动子探针型载体pSUPV4直接在大肠杆菌(Escherichiacoli(Migula)CastelanietChalmers)中分离油菜(BrasicanapusL.)基因启动子片段,获得卡那霉素抗性重组子33个。对重组子pRP10做了进一步鉴定:Southern杂交表明RP10片段来自油菜基因组,并与基因组中的另一些序列具有同源性;RP10片段5′端区域的缺失可使卡那霉素抗性水平从100mg/L降至25mg/L,说明缺失的序列可能影响基因转录效率;序列分析发现RP10片段内存在几个真核基因启动子的保守序列;用根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens(SmithetTownsend)Conn)转化法将RP10GUS基因转入油菜。 展开更多
关键词 大肠杆菌 油菜 基因启动子
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诸葛菜基因启动子的分离 被引量:3
14
作者 梁明山 陶震 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 1997年第3期1-5,共5页
利用启动子探针型载体pSUPV2首次从诸葛菜总DNA中克隆了7个具有启动功能的DNA片段。转化E.coli表明最高卡那霉素(kna)抗性为140μg/ml,最低为20μg/ml。含启动子片段的7个重组质粒分别命名为p... 利用启动子探针型载体pSUPV2首次从诸葛菜总DNA中克隆了7个具有启动功能的DNA片段。转化E.coli表明最高卡那霉素(kna)抗性为140μg/ml,最低为20μg/ml。含启动子片段的7个重组质粒分别命名为pSUPZ1-7。Southren印迹表明pSUPZ6对Kna的抗性功能来源于诸葛菜的10kb、5kb和3.9kb片段。 展开更多
关键词 油料 诸葛菜 基因启动子 pSUPV2 DNA重组
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乳酸菌启动子——信号肽探测载体pZLB的构建及应用 被引量:2
15
作者 陈秀珠 刘宗旨 还连栋 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期101-104,共4页
A promoter\|signal peptide probe vector of lactic acid bacteria,designated pZLB based on pMG36e has been constructed.The vector contained a reporterd gene encoding for β lactamase,which lacked a promoter and a functi... A promoter\|signal peptide probe vector of lactic acid bacteria,designated pZLB based on pMG36e has been constructed.The vector contained a reporterd gene encoding for β lactamase,which lacked a promoter and a functional signal sequence.Sau3A restriction fragments (80-400bp) from L.lactis ATCC 7962 total DNA were cloned into Bam HI site of pZLB.A lot of different size framents were selected.These fragments promoted transcription and secretion of β lactamase in L.lac tis. Sequence analysis revealed that inserted fragment in pZLBe7 contained typical promoter,SD sequence and atypical signal sequence. 展开更多
关键词 乳酸菌 启动子 信号肽探测载体 DN序列分析
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以潮霉素B磷酸转移酶基因为遗传标记的启动子探针型载体的构建 被引量:4
16
作者 李维 张义正 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期736-740,共5页
用来自大肠杆菌的潮霉素B磷酸转移酶基因(hygr)作为遗传标记构建了启动子探针型载体pSUPV8,该基因的转录和翻译起始区以及5’-端编码区两个密码子均被除去,载体骨架为大肠杆菌质粒pUGV2。
关键词 启动子 探针型载体 潮霉素B 磷酸转移酶
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海甘蓝基因启动子的分离和鉴定 被引量:2
17
作者 梁明山 曾宇 王幼平 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第1期1-6,共6页
海甘蓝总DNA经Sau3AⅠ部分酶切后,插入启动子探针型载体pSUPV4的BamHⅠ位点,转化大肠杆菌JM107,获得卡那霉素抗性重组质粒13个,依次命名为pRP1~pRP13。电泳分析表明它们均含有插入片段,大小为... 海甘蓝总DNA经Sau3AⅠ部分酶切后,插入启动子探针型载体pSUPV4的BamHⅠ位点,转化大肠杆菌JM107,获得卡那霉素抗性重组质粒13个,依次命名为pRP1~pRP13。电泳分析表明它们均含有插入片段,大小为0.5~1.8Kb。各基因启动子在大肠杆菌细胞中的启动效率采用卡那霉素抗性水平测定,最高者pRP2达180μg/ml,选择pRP2作进一步的分析和鉴定。以pRP2插入片段为探针,与经BamHⅠ,PstⅠ酶切的海甘蓝总DNA进行Southern杂交,证明该插入片段来源于海甘蓝基因组,推测其在基因组中很可能以单考贝形式存在,斑点杂交也证明其来源。选用海甘蓝无菌苗的子叶和下胚轴为起始材料,应用根癌农杆菌(LBA4404)双元载体成功地建立了一种方法简单、速度快和频率高的遗传转化体系。将pRP2重组质粒导入海甘蓝,在附加一定量的Amp,Kan的相应培养基上进行筛选,2~3周就产生出卡那抗性愈伤组织和抗性小芽。 展开更多
关键词 海甘蓝 基因启动子 油料作物 分离 鉴定
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体声波滤波器的片上测试与性能表征 被引量:4
18
作者 高杨 蔡洵 +1 位作者 贺学锋 刘海涛 《压电与声光》 CSCD 北大核心 2015年第5期729-733,共5页
为了表征制备的L波段体声波(BAW)滤波器的性能,采用射频探针台和矢量网络分析仪片上测试获得了BAW滤波器的S参数;在ADS软件环境下计算了BAW滤波器的各项性能参数。比较实测与仿真得到的S参数曲线,发现:低阻硅衬底会使BAW滤波器的带内插... 为了表征制备的L波段体声波(BAW)滤波器的性能,采用射频探针台和矢量网络分析仪片上测试获得了BAW滤波器的S参数;在ADS软件环境下计算了BAW滤波器的各项性能参数。比较实测与仿真得到的S参数曲线,发现:低阻硅衬底会使BAW滤波器的带内插损显著增加;BAW滤波器中各薄膜体声波谐振器(FBAR)单元的薄膜沉积厚度误差会使BAW滤波器的带内波动偏大,且FBAR薄膜厚度较设计值增大时BAW滤波器的中心频率会向下偏移。以制备的一只BAW滤波器为例,测得其中心频率为1 495MHz,带宽为17MHz,带内插损为-46.413dB,带内波动为2.816dB,带外抑制为-72.525dB/-79.356dB,电压驻波比为1.940。该文给出的BAW滤波器片上测试与性能表征方法具有通用性。 展开更多
关键词 体声波 滤波器 射频探针台 矢量网络分析仪 低阻硅
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在大肠杆菌中直接克隆白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium)基因启动子 被引量:1
19
作者 宋旭 曾凡亚 张义正 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期940-946,共7页
利用启动子探钍型载体pSUPV4 直接在大肠杆菌细胞中克隆到多个来自白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium )的基因启动子片段.这些基因启动子片段能在大肠杆菌细胞中启动重组卡那... 利用启动子探钍型载体pSUPV4 直接在大肠杆菌细胞中克隆到多个来自白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium )的基因启动子片段.这些基因启动子片段能在大肠杆菌细胞中启动重组卡那霉素抗性基因(rkanr)的表达,不同片段赋予宿主细胞以不同的卡那霉素抗性水平,最高的可达1000μg/m L,最低的则为50μg/m L.琼脂糖凝胶电泳显示这些重组质粒DNA 中均有不同大小的插入片段,其范围是0.5~6.0kb.选取一个插入3.9kb 的重组质粒pPC33 所作的Southern 杂交结果表明,插入片段以单拷贝形式存在于P.chrysosporium 的基因组中.当此片段5′-端被除去1.8kb 后,余下的2.1kb 片段可使融合的Kanr 基因的表达效率提高60% . 展开更多
关键词 黄孢平革菌 基因启动子 大肠杆菌 克隆 真菌
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嗜酸氧化亚铁硫杆菌启动子探针载体的构建 被引量:1
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作者 杨宇 黄芝英 +1 位作者 刁梦雪 邱冠周 《生物技术》 CAS CSCD 2008年第5期7-9,共3页
目的:为了研究嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)启动子结构与功能。方法:以pSV-β-galactosidase质粒为骨架,通过定点突变的方法引入一个新的BstBⅠ单酶切位点,构建能在大肠杆菌(Escherichia coli)中正常复制的启动... 目的:为了研究嗜酸氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacillus ferrooxidans)启动子结构与功能。方法:以pSV-β-galactosidase质粒为骨架,通过定点突变的方法引入一个新的BstBⅠ单酶切位点,构建能在大肠杆菌(Escherichia coli)中正常复制的启动子探针载体。利用PCR的方法将A.ferrooxidans菌cycA2基因上游5'段上游DNA片段克隆到探针载体β-半乳糖苷酶基因上游以替代其原有启动子(gpt启动子),并将重组的质粒转化E.coliDH5α菌株。通过检测宿主细胞的β-半乳糖苷酶活性,来鉴定启动子片段,并分析了启动子探针质粒载体的功能及启动子的强度。结果:pSV-β-galactosidase质粒被正确突变,成功构建了启动子探针载体pSVB。来源于A. ferrooxidans菌的启动子片段可驱动β-半乳糖苷酶基因在E.coli细胞中表达,转化子酶活性约为gpt 启动子驱动下活性的70 %。结论:启动子探针载体(pSVB)可用于A. ferrooxidans菌或者其它原核生物启动子的分离及进一步的分析研究。酶活性分析结果表明,来源于A. ferrooxidans菌cycA2基因上游5'段上游DNA片段具有显著启动子活性。 展开更多
关键词 嗜酸氧化亚铁硫杆菌 启动子探针载体 Β-半乳糖苷酶 定点突变
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