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Discriminative Latent Model Based Chinese Multiword Expression Extraction 被引量:2
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作者 Xiao, Sun 《China Communications》 SCIE CSCD 2012年第3期124-133,共10页
Discriminative Latent Model(DLM) is proposed for Multiword Expressions(MWEs) extraction in Chinese text to improve the performance of Machine Translation(MT) system such as Template Based MT(TBMT).For MT systems to be... Discriminative Latent Model(DLM) is proposed for Multiword Expressions(MWEs) extraction in Chinese text to improve the performance of Machine Translation(MT) system such as Template Based MT(TBMT).For MT systems to become of further practical use,they need to be enhanced with MWEs processing capability.As our study towards this goal,we propose DLM,which is developed for sequence labeling task including hidden structures,to extract MWEs for MT systems.DLM combines the advantages of existing discriminative models,which can learn hidden structures in sequence labeling task.In our evaluations,DLM achieves precisions ranging up to 90.73% for some type of MWEs,which is higher than state-of-the-art discriminative models.Such results demonstrate that it is feasible to automatically identify many Chinese MWEs using our DLM tool.With MWEs processing model,BLEU score of MT system has also been increased by up to 0.3 in close test. 展开更多
关键词 模型基 提取 中国 机器翻译系统 DLM 中文文本 判别模型 自动识别
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Hippocampal gene expression in a rat model of depression after electroacupuncture at the Baihui and Yintang acupoints 被引量:19
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作者 Dongmei Duan Xiuyan Yang2 Institute of Health Maintenance +2 位作者 Beijing University of Chinese Medicine Ya Tu Liping Chen 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2014年第1期76-83,共8页
Preliminary basic research and clinical findings have demonstrated that electroacupuncture ther- apy exhibits positive effects in ameliorating depression. However, most studies of the underlying mechanism are at the s... Preliminary basic research and clinical findings have demonstrated that electroacupuncture ther- apy exhibits positive effects in ameliorating depression. However, most studies of the underlying mechanism are at the single gene level; there are few reports regarding the mechanism at the whole-genome level. Using a rat genomic gene-chip, we profiled hippocampal gene expression changes in rats after electroacupuncture therapy. Electroacupuncture therapy alleviated depres- sion-related manifestations in the model rats. Using gene-chip analysis, we demonstrated that electroacupuncture at Baihui (DU20) and Yintang (EX-HN3) regulates the expression of 21 genes. Real-time PCR showed that the genes Vgf, lgf2, Trnp32, Loc500373, Hifla, Folrl, Nrnb, and Rtn were upregulated or downregulated in depression and that their expression tended to nor- malize after electroacupuncture therapy. These results indicate that electroacupuncture at Baihui and Yintang modulates depression by regulating the expression of particular genes. 展开更多
关键词 nerve regeneration acupuncture traditional Chinese medicine DEPRESsion gene expres-sion profiling GENE-CHIP ELECTROACUPUNCTURE Baihui (DU20) Yintang (EX-HN3) chronic stress behavior NSFC grant neural regeneration
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Facial Robot Expression Simulator(FRESi)——A Simulator to Implement Dynamic Facial Expression
3
作者 Jeong-woo PARK Myung-jin CHUNG 《Journal of Measurement Science and Instrumentation》 CAS 2011年第2期132-135,共4页
Most of the robots are nowadays evolving and imitating human social skills to achieve sociable interaction with humans.Socially interactive robots require different characteristics than conventional robots.Likewise hu... Most of the robots are nowadays evolving and imitating human social skills to achieve sociable interaction with humans.Socially interactive robots require different characteristics than conventional robots.Likewise human-human interaction,human-robot interaction is also accompanied with emotional interaction.Therefore,the robot’s emotional expression is very important for human,especially facial expressions play an important role among the whole part of the human body.In this paper,we introduce a facial robot expression simulator FRESi. 展开更多
关键词 面部表情 机器人 模拟器 情感交流 情感表达 社会 人类 分发
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莲草直胸跳甲短神经肽F受体基因sNPFR的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 王康 赵雪莹 +4 位作者 霍楠 胡军 王苑馨 杨军 贾栋 《山西农业科学》 2024年第1期137-144,共8页
为明确莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)短神经肽F受体AhsNPFR功能及其表达特点,为探索莲草直胸跳甲生防作用奠定理论基础,利用PCR技术克隆鉴定莲草直胸跳甲AhsNPFR基因并进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR技术分析其在莲草直... 为明确莲草直胸跳甲(Agasicles hygrophila)短神经肽F受体AhsNPFR功能及其表达特点,为探索莲草直胸跳甲生防作用奠定理论基础,利用PCR技术克隆鉴定莲草直胸跳甲AhsNPFR基因并进行生物信息学分析,通过实时荧光定量PCR技术分析其在莲草直胸跳甲不同发育时期和组织中的时空表达谱。结果表明,克隆获得基因AhsNPFR全长1 669 bp,开放阅读框1 257 bp,编码418个氨基酸;预测其蛋白质分子质量为48.11 ku,理论等电点为8.21,AhsNPFR具有7个典型保守跨膜结构域,属于GPCRs家族,系统进化树分析表明,其与玉米根萤叶甲Diabrotica virgifera virgifera sNPFR亲缘关系最近。AhsNPFR基因在不同发育阶段均有表达,在1龄幼虫中的表达量最高,是卵中表达量的9.06倍;在卵中表达量最低;雌成虫的表达量显著高于雄成虫。AhsNPFR基因在不同组织中均有表达,在3龄幼虫后肠中显著高表达,是脂肪体表达量的12.21倍;在雌雄成虫后肠显著高表达,并在所有组织中均没有雌雄表达差异。 展开更多
关键词 莲草直胸跳甲 短神经肽F受体基因sNPFR 基因克隆 发育时期表达 组织表达
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小黑杨RAV1与RAV2基因的克隆与表达分析 被引量:2
5
作者 靳春慧 文小卉 +5 位作者 刘羽婷 李月 王丽丽 刘立洋 董新宇 李慧玉 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第9期58-69,共12页
【目的】克隆小黑杨(Populus×xiaohei T.S.Hwang et Liang)RAV1和RAV2基因,分析这2个基因在非生物胁迫下的表达模式,为进一步研究小黑杨基因功能提供理论依据。【方法】以抗逆性强的小黑杨根为试材,克隆2个RAV家族成员。利用生物... 【目的】克隆小黑杨(Populus×xiaohei T.S.Hwang et Liang)RAV1和RAV2基因,分析这2个基因在非生物胁迫下的表达模式,为进一步研究小黑杨基因功能提供理论依据。【方法】以抗逆性强的小黑杨根为试材,克隆2个RAV家族成员。利用生物信息学方法对小黑杨2个RAV基因的理化性质、保守基序、保守结构域、系统进化进行分析,并采用半定量RT-PCR方法探讨这2个基因在小黑杨顶芽、叶、木质部、韧皮部、根、第1~14片叶、第1~11茎节中的表达情况,以及在CdCl2、NaCl、NaHCO3、PEG和ABA胁迫下的表达特性。【结果】从小黑杨中克隆出2个RAV基因,命名为PsnRAV1和PsnRAV2。PsnRAV1编码405个氨基酸,预测分子质量约为99.46 ku,等电点5.06,不存在信号肽;PsnRAV2编码407个氨基酸,预测分子质量约为99.33 ku,等电点5.06,存在信号肽;2个基因均位于细胞核上。保守结构域和保守基序分析结果表明,小黑杨RAV蛋白具有RAV家族特有的AP2和B3这2个保守蛋白结构域,基序1、2、3是构成2个结构域的主要基序。系统进化分析表明,20种植物的RAV蛋白分为3组,其中PsnRAV1和PsnRAV2与毛果杨(Populus trichocarpa)RAV同源性很高。半定量RT-PCR分析结果显示,2个PsnRAVs基因在小黑杨的顶芽、叶、木质部、韧皮部和根中均有表达;且随着叶和茎的发育,2个基因的表达量均呈现升高的趋势。在CdCl2、NaCl、NaHCO3模拟的重金属及盐胁迫下,2个基因的表达模式虽不相同,但在根部均受到诱导;在PEG模拟的干旱胁迫下,PsnRAV1和PsnRAV2在叶片和根部均有响应,其中在根部受到的诱导更为明显,尤以PsnRAV2的表达更为显著;此外,PsnRAV1和PsnRAV2也受到ABA的诱导,其在叶中的表达量在初期表现为上升,而后期下降。【结论】2个PsnRAVs基因与小黑杨的抗逆性密切相关,可能参与了小黑杨的非生物胁迫应答,其中PsnRAV2在胁迫下的作用更为显著。 展开更多
关键词 小黑杨 RAV 生物信息学 非生物胁迫 基因表达分析 林木遗传育种
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基于黄酮合成通路基因表达特性的木薯对二斑叶螨防御机理初探
6
作者 乔阳 梁晓 +5 位作者 陈青 伍春玲 刘迎 刘小强 税军 姚晓文 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2023年第8期1679-1688,共10页
木薯是全球重要的粮食作物和经济作物。二斑叶螨(Tetranychus urticae Koch)是重要的外来入侵生物和我国木薯主产区的四大有害生物之一。抗螨品种的选育与利用是实现害螨绿色综合防控的重要手段,作物中具有抗螨功能的次生代谢物质和其... 木薯是全球重要的粮食作物和经济作物。二斑叶螨(Tetranychus urticae Koch)是重要的外来入侵生物和我国木薯主产区的四大有害生物之一。抗螨品种的选育与利用是实现害螨绿色综合防控的重要手段,作物中具有抗螨功能的次生代谢物质和其调控基因的挖掘与利用是培育抗性品种的有效途径。黄酮类次生代谢物质在作物抵御虫害中发挥重要作用,但其合成通路基因在木薯抗二斑叶螨中的功能尚不清楚。基于此,本研究分析抗、感螨木薯品种被二斑叶螨取食不同时间(1、4 d)后,黄酮合成通路关键基因表达量的变化情况。结果表明:与螨害前相比,感螨木薯品种面包、SC9和BAR900的CHS、PGT1、F3H、FLS、LAR、C3'H和CYP93B_16基因的相对表达量总体呈先降低(1 d)再升高(4 d)至螨害前(0 d)水平的趋势,而抗螨木薯品种C1115、SC9和缅甸中的上述基因相对表达量总体呈先显著升高(1d)再降低(4d)的趋势,但均显著高于螨害前(0d)的水平。进一步比较螨害前后抗、感螨木薯品种黄酮合成通路基因表达量的差异发现,二斑叶螨为害1 d后,抗螨木薯品种中CHS、PGT1、FLS和C3'H的表达量显著高于感螨木薯品种。相关性分析表明,这4个基因的表达量与木薯抗螨性呈显著正相关。螨害前(0d)和螨害4d后,抗螨木薯品种中上述基因的表达量总体也高于感螨木薯品种。该研究结果表明,抗螨木薯品种受螨害后,可能通过诱导黄酮合成基因的上调,从而增加具有抗虫功能的黄酮类代谢物含量以抵御二斑叶螨为害。该研究为深入阐明木薯抗螨分子机理、选育和创制抗螨木薯品种提供理论基础。 展开更多
关键词 二斑叶螨 抗、感螨木薯品种 黄酮合成通路 基因表达
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黄瓜肌醇半乳糖苷合成酶基因GolS2克隆与表达调控
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作者 袁晓 杨盼迪 +2 位作者 朱云娜 王玉昆 王斌 《山东农业科学》 北大核心 2023年第6期15-24,共10页
肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)是合成棉子糖系列寡糖(RFOs)的关键酶,在植物抵抗非生物胁迫过程中发挥重要作用。为探究GolS2基因在黄瓜应答非生物胁迫中的作用,本研究采用RT-PCR法从黄瓜中克隆了GolS2基因,其开放阅读框长度为981 bp,编码32... 肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)是合成棉子糖系列寡糖(RFOs)的关键酶,在植物抵抗非生物胁迫过程中发挥重要作用。为探究GolS2基因在黄瓜应答非生物胁迫中的作用,本研究采用RT-PCR法从黄瓜中克隆了GolS2基因,其开放阅读框长度为981 bp,编码326个氨基酸,植物GolS2蛋白氨基酸序列一致性很高。进化树中,黄瓜GolS2蛋白与拟南芥GolS2和GolS3蛋白聚在同一分支,亲缘关系最近。盐胁迫和低温胁迫处理显著诱导GolS2基因在黄瓜幼苗中的表达,但低温处理显著抑制GolS2基因在采后黄瓜果实中的表达。对其启动子顺式作用元件的分析结果显示,GolS2基因启动子中含有多个与逆境胁迫响应有关的顺式作用元件。在采后黄瓜果实中沉默HHO2和GRP3基因的表达,显著下调GolS2基因表达,表明这两个基因调控GolS2基因表达。本研究结果明确了GolS2基因在不同类型黄瓜组织中应答非生物胁迫的功能存在差异,这为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 黄瓜 肌醇半乳糖苷合成酶基因GolS2 基因克隆 非生物胁迫 表达调控
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香苏杂交猪IGFBP2基因克隆、组织表达及生物信息学分析
8
作者 蒋传美 阮涌 +4 位作者 李吉凤 肖美美 许家利 黄家锦 许厚强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期3064-3072,共9页
【目的】探究胰岛素样生长因子结合蛋白2基因(IGFBP2)在香苏杂交猪不同生长时期及组织中的表达差异,为进一步分析IGFBP2基因对香苏杂交猪生长发育分子机制提供基础数据。【方法】采用PCR扩增得到香苏杂交猪IGFBP2基因的编码区(CDS)序列... 【目的】探究胰岛素样生长因子结合蛋白2基因(IGFBP2)在香苏杂交猪不同生长时期及组织中的表达差异,为进一步分析IGFBP2基因对香苏杂交猪生长发育分子机制提供基础数据。【方法】采用PCR扩增得到香苏杂交猪IGFBP2基因的编码区(CDS)序列,利用在线软件对IGFBP2基因的CDS序列进行生物信息学分析,利用克隆的CDS构建系统发育进化树。使用实时荧光定量PCR检测IGFBP2基因在香苏杂交猪不同阶段各组织中表达情况。【结果】猪IGFBP2基因CDS全长951 bp,共编码316个氨基酸残基,蛋白二级和三级结构以无规卷曲为主,为亲水性稳定蛋白,且IGFBP2蛋白氨基酸序列中以甘氨酸(13.0%)和亮氨酸(12.3%)为主。同源性分析发现,香苏杂交猪IGFBP2基因与野猪、牛、绵羊和山羊的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果显示,IGFBP2基因在3日龄、6月龄和12月龄香苏杂交猪的心脏中相对表达量存在极显著差异(P<0.01,下同),且3日龄的相对表达量较高;在肝脏中,12月龄的相对表达量显著高于3日龄和6月龄(P<0.05,下同),3日龄与6月龄无显著差异(P>0.05,下同);在脾脏中,3日龄的相对表达量极显著高于6月龄和12月龄,12月龄的相对表达量显著高于6月龄;在肺脏中,3日龄的相对表达量极显著高于6月龄和12月龄,而6月龄与12月龄的相对表达量无显著差异;在肾脏中,3日龄、6月龄和12月龄的相对表达量间均存在显著差异;在背最长肌中,6月龄与12月龄的相对表达量存在显著差异,且IGFBP2基因在3个年龄阶段的背最长肌中的相对表达量均较低。【结论】IGFBP2基因在香苏杂交猪不同生长时期各组织中均差异表达,且在与甘油三酯和脂肪酸合成代谢相关组织(肝脏)中高特异性表达,可能表明IGFBP2基因对脂肪的合成、代谢和沉积具有重要调控作用。 展开更多
关键词 香苏杂交猪 IGFBP2基因 组织表达 生物信息学分析
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大黄鱼变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的原核表达及其多克隆抗体制备
9
作者 叶毅铭 何亮银 +4 位作者 廖青青 林永翔 刘敏 陈虹坚 文宇鑫 《宁德师范学院学报(自然科学版)》 2023年第1期57-64,共8页
为获取变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的重组蛋白,研究克隆了ompH和ompW的基因序列,构建重组表达载体并转化宿主菌,成功实现了外膜蛋白的原核表达.结果显示,ompH和ompW基因全长分别为603和690bp,对应编码200和229个氨基酸;变性聚丙烯... 为获取变形假单胞菌外膜蛋白OMPH和OMPW的重组蛋白,研究克隆了ompH和ompW的基因序列,构建重组表达载体并转化宿主菌,成功实现了外膜蛋白的原核表达.结果显示,ompH和ompW基因全长分别为603和690bp,对应编码200和229个氨基酸;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,OMPH和OMPW重组蛋白相对分子质量分别为25.0和28.5ku,通过Ni+亲和层析纯化后的重组蛋白条带单一.以纯化后的重组蛋白OMPH和OMPW分别免疫小鼠制备其多克隆抗体,酶联免疫吸附试验测得鼠源OMPH和OMPW多克隆抗体的效价分别为40000和50000;免疫印迹显示了抗血清与重组蛋白结合活性良好. 展开更多
关键词 大黄鱼 变形假单胞菌 外膜蛋白 原核表达 多克隆抗体
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Facial Expression Enhances Emotion Perception Compared to Vocal Prosody: Behavioral and fMRI Studies
10
作者 Heming Zhang Xuhai Chen +4 位作者 Shengdong Chen Yansong Li Changming Chen Quanshan Long Jiajin Yuan 《Neuroscience Bulletin》 SCIE CAS CSCD 2018年第5期801-815,共15页
Facial and vocal expressions are essential modalities mediating the perception of emotion and social communication. Nonetheless, currently little is known about how emotion perception and its neural substrates differ ... Facial and vocal expressions are essential modalities mediating the perception of emotion and social communication. Nonetheless, currently little is known about how emotion perception and its neural substrates differ across facial expression and vocal prosody. To clarify this issue, functional MRI scans were acquired in Study 1, in which participants were asked to discriminate the valence of emotional expression (angry, happy or neutral) from facial, vocal, or bimodal stimuli. In Study 2, we used an affective priming task (unimodal materials as primers and bimodal materials as target) and participants were asked to rate the intensity, valence, and arousal of the targets. Study 1 showed higher accuracy and shorter response latencies in the facial than in the vocal modality for a happy expression. Whole-brain analysis showed enhanced activation during facial compared to vocal emotions in the inferior temporal-occipital regions. Region of interest analysis showed a higher percentage signal change for facial than for vocal anger in the superior temporal sulcus. Study 2 showed that facial relative to vocal priming of anger had a greater influence on perceived emotion for bimodal targets, irrespective of the target valence. These findings suggest that facial expression is associated with enhanced emotion perception compared to equivalent vocal prosodies. 展开更多
关键词 FMRI Emotion perception Facial expres-sion Vocal prosody MODALITY
原文传递
Active expression of Gγ globin gene on chromosome 11 with Yunnanese (Ayγδβ)~0-thalasseinia deletion in MEL cells
11
作者 张俊武 乔军 +1 位作者 宋文风 邱志明 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1996年第3期329-336,共8页
A permanent lymphocyte cell line of a heterozygote with Yunnanese (Aγδβ)0-thalassemia deletion, associated with an increased production of Cry globin in adult, was founded using Epstein-Barr virus transformation. T... A permanent lymphocyte cell line of a heterozygote with Yunnanese (Aγδβ)0-thalassemia deletion, associated with an increased production of Cry globin in adult, was founded using Epstein-Barr virus transformation. The hybrids of the lymphocyte cell and mouse erythroleukemia cell (MEL) were achieved and the hybrids containing human chromosome 11 were selected with the monoclonal antibody 53/6. The subclones containing only either the normal or the abnormal human chromosome 11 were separated and the expression of the human globin genes was studied. Expression of the β-globin gene, but not the Cγ and Aγ, was observed in the hybrids containing only the normal human chromosome 11, while active expression of the Cγ globin gene was observed in the hybrids containing only the abnormal human chromosome 11. These results have confirmed that the DNA deletion in the β-globin gene cluster is the cause of persistent active expression of the Cγ globin gene in the Yunnanese mutant. 展开更多
关键词 (Aγδβ)~0-thalassemia mouse ERYTHROLEUKEMIA CELLS cell fusion fetal GLOBIN GENE GENE expres-sion.
原文传递
猪圆环病毒2型ORF4基因编码蛋白的体外表达 被引量:11
12
作者 李增魁 陈婷飞 +1 位作者 李益飞 周继勇 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期837-841,共5页
为了探讨猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF4基因结构及其所编码蛋白在PK15细胞中的表达特性,以PCV-2杭州株病毒DNA为模板进行PCR,结果扩增出了ORF4基因,并分别构建了pGEX-4T-1-ORF4原核表达载体和pEGFP-C2-ORF4真核表达载体。序列分析、SDS-PAG... 为了探讨猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF4基因结构及其所编码蛋白在PK15细胞中的表达特性,以PCV-2杭州株病毒DNA为模板进行PCR,结果扩增出了ORF4基因,并分别构建了pGEX-4T-1-ORF4原核表达载体和pEGFP-C2-ORF4真核表达载体。序列分析、SDS-PAGE分析和Western-blot检测表明,PCV-2 ORF4基因长180 bp,共编码60个氨基酸;其编码蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式存在,分子质量大小约为6.685 ku。真核PK15细胞的转染试验显示,ORF4重组蛋白在PK15细胞的细胞核和细胞浆中均有表达,但对其有一定的毒性。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 ORF4基因 原核表达 真核表达 纯化
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血管基膜衍生多功能肽在大肠杆菌中的表达及抗肿瘤活性的测定 被引量:10
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作者 彭淑平 方唯意 +3 位作者 蒋日成 周建国 董琳 曹建国 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期678-682,共5页
目的 构建血管基膜衍生多功能肽(VBMDMP)原核表达载体、诱导表达GST-VBMDMP融合蛋白,观察其对Lewis肺癌自发转移瘤模型的影响。方法 人工合成VB-MDMP DNA序列(人源性IgG3上游铰链区连接肽连接的Tumstatin的两个功能区获得性肽基因序列)... 目的 构建血管基膜衍生多功能肽(VBMDMP)原核表达载体、诱导表达GST-VBMDMP融合蛋白,观察其对Lewis肺癌自发转移瘤模型的影响。方法 人工合成VB-MDMP DNA序列(人源性IgG3上游铰链区连接肽连接的Tumstatin的两个功能区获得性肽基因序列),构建克隆载体PUC19-VBMDMP,亚克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经测序和酶切分析鉴定获得了未发生移码突变的PGEX-4T-1-VBMDMP融合载体质粒。转化入大肠杆菌后,用 IPTG诱导表达融合蛋白。Glutathione sepharose 4B层析柱纯化蛋白表达产物。采用Lewis肺癌自发转移瘤模型,检测VBMDMP的抗肿瘤作用。结果 成功的构建pUC19-VB-MDMP克隆和pGEX-4T-1-VBMDMP表达载体,在大肠杆菌获得稳定表达,用Glutathione sepharose 4B层析柱获得纯化的GST-VBMDMP融合蛋白。VBMDMP(GST-VBM-DMP 10、6、2 mg·kg^(-1))对小鼠Lewis肺癌原发瘤具有抑制作用(瘤重抑制率分别为95.5%,80.4%,60.05%)。VBMDMP(GST-VBMDMP 10,6,2 mg·kg^(-1))对小鼠Lewis肺癌自发性肺转移具有抑制作用(自发性肺转移瘤结节抑制率分别为94.8%,86.4%,73.9%)。结论 VBM-DMP对小鼠Lewis肺癌原发瘤和肺转移具有抑制作用。 展开更多
关键词 血管基膜衍生多功能肽 原核表达 LEWIS肺癌 治疗作用
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鸭病毒性肝炎病毒VP1基因表达及其抗体检测ELISA方法的建立 被引量:21
14
作者 马秀丽 宋敏训 +2 位作者 于可响 廖明 辛朝安 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1110-1114,共5页
【目的】研究DHV VP1基因在大肠杆菌中的表达,并以纯化的重组蛋白为抗原建立鸭病毒性肝炎抗体检测ELISA方法。【方法】采用RT-PCR技术,扩增VP1基因,与pMD18-T载体进行连接,构建DHV VP1基因克隆重组质粒。然后定向插入到pET-32a(+)表达载... 【目的】研究DHV VP1基因在大肠杆菌中的表达,并以纯化的重组蛋白为抗原建立鸭病毒性肝炎抗体检测ELISA方法。【方法】采用RT-PCR技术,扩增VP1基因,与pMD18-T载体进行连接,构建DHV VP1基因克隆重组质粒。然后定向插入到pET-32a(+)表达载体,筛选原核表达载体pET-32a-VP1,进行ITPG诱导表达分析。以纯化的重组蛋白为抗原建立间接ELISA方法并初步应用于临床。【结果】DHV VP1基因可在大肠杆菌中稳定、高效地表达。Western blot检测表明,表达的重组蛋白能与鸭肝炎阳性血清发生特异性反应。确定间接ELISA方法的抗原最佳包被浓度为5μg/孔,血清最佳稀释度为1∶100,临界值为OD450值≥0.302,建立的ELISA方法具有较好的敏感性、特异性和重复性。通过对80份血清样品的检测表明,该方法与中和试验的符合率为97.5%,初步临床应用结果表明该方法可用于雏鸭母源抗体和免疫后抗体的消长变化的检测。【结论】以大肠杆菌表达的DHV VP1重组蛋白为抗原建立的间接ELISA方法可用于鸭病毒性肝炎抗体的检测。 展开更多
关键词 鸭肝炎病毒 VP1基因 表达 ELISA 抗体 检测
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肿瘤血管生成新靶点LRG1研究进展 被引量:8
15
作者 刘兆国 范方田 +5 位作者 赵林钢 吴红雁 陶羽 郑仕中 王爱云 陆茵 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期6-9,共4页
LRG1(leucine-rich-alpha-2-glycoprotein 1)蛋白是富亮氨酸重复(leucine-rich repeat,LRR)蛋白家族高度保守的成员之一,它不仅参与蛋白与蛋白之间的相互作用,同时在信号转导、细胞黏附以及发育过程中也发挥重要作用。LRG1蛋白的异常表... LRG1(leucine-rich-alpha-2-glycoprotein 1)蛋白是富亮氨酸重复(leucine-rich repeat,LRR)蛋白家族高度保守的成员之一,它不仅参与蛋白与蛋白之间的相互作用,同时在信号转导、细胞黏附以及发育过程中也发挥重要作用。LRG1蛋白的异常表达与多种组织恶性肿瘤的发病有关。最新研究结果表明,LRG1蛋白能够促进血管的生长,尤其是异常血管的生长,而肿瘤血管生长是肿瘤这类疾病的典型特征。更为重要的是,LRG1蛋白在正常血管生长中较少发挥作用,LRG1有可能与异常的血管生长密切相关。这使得LRG1作为治疗靶点,备受人们关注。该文对LRG1蛋白的异常表达与肿瘤研究进展进行综述,探讨LRG1蛋白促进肿瘤血管生成的相关机制及其与肿瘤治疗的关系,为临床的后续研究和治疗提供参考。 展开更多
关键词 LRG1蛋白 信号调节 异常表达 血管生成 分子机 治疗策略
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半滑舌鳎生长激素及其受体基因的原核表达 被引量:5
16
作者 马骞 柳淑芳 +1 位作者 庄志猛 唐启升 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期956-962,共7页
根据已克隆的半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生长激素(GH)基因和生长激素受体Ⅰ(GHR-Ⅰ)基因的cDNA序列信息设计引物,用于扩增半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因序列。随后,分别利用表达载体pET-32a和pGEX-6P-1成功构建了包含半滑舌鳎GH、GHR-... 根据已克隆的半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生长激素(GH)基因和生长激素受体Ⅰ(GHR-Ⅰ)基因的cDNA序列信息设计引物,用于扩增半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因序列。随后,分别利用表达载体pET-32a和pGEX-6P-1成功构建了包含半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因ORF全序列及不同ORF片段的6个重组质粒,并将获得的重组质粒在表达宿主菌大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示:重组GH的pET-32a-CSGH质粒在40 kD处有特异性的蛋白条带,重组GHR-Ⅰ胞内区的pGEX-6P-1-CSGHR1-2质粒在70 kD处发现诱导的蛋白条带,其表达量分别占细胞蛋白总量的37.6%和20.2%;而构建的pGEX-6P-1-CSGH重组质粒和含有GHR-Ⅰ基因跨膜区的重组质粒(pET-32a-CSGHR1-1、pET-32a-CSGHR1-2和pGEX-6P-1-CSGHR1-1)均未获得表达产物。由此可见,半滑舌鳎GHR-Ⅰ基因的跨膜区可能影响其在大肠杆菌中的表达。研究结果为实现半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ制剂的开发及应用于养殖生产实践奠定基础。 展开更多
关键词 半滑舌鳎 生长激素基因 生长激素受体Ⅰ基因 原核表达
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番石榴酸对INS-1胰岛β细胞增殖、胰岛素合成与分泌的促进作用及其机制分析 被引量:10
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作者 叶开和 王婧茹 +4 位作者 马锦锦 王小康 张晓琦 叶文才 叶春玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期1681-1687,共7页
目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞,给予GA(0.3、1、3、10、30 n·L^-1),并设空白对照组、溶媒对照组(... 目的考察番石榴酸(guavenoic acid,GA)对 INS-1胰岛β细胞增殖、细胞内胰岛素含量及分泌功能的影响,并探讨其可能的作用机制。方法培养 INS-1胰岛β细胞,给予GA(0.3、1、3、10、30 n·L^-1),并设空白对照组、溶媒对照组(0.1% DMSO)、分泌模型组及阳性药组(150 nmol·L^-1格列苯脲含1‰DMSO),药物作用48 h。应用 MTT 法检测药物对 INS-1的影响。使用酸醇提取液提取细胞中胰岛素,用放射免疫法检测药物对 I 细胞增殖 NS-1细胞内胰岛素含量的影响。分别用5.6、16.7 mmol·L^-1葡萄糖干预细胞1 h建立基础胰岛素分泌模型(BIS)、高糖刺激胰岛素分泌模型(GSIS),用放射免疫法测定药物对 INS-1细胞胰岛素分泌的影响,结果以总蛋白量校正。荧光定量 PCR 法检测药物对INS-1细胞内胰岛素基因、PDX-1、MafA mRNA 表达的影响。结果与溶媒对照组比较,GA 能明显地促进 INS-1胰岛细胞的增殖(P <0.01)并能明显增加 INS-1细胞内胰岛素含量(P <0.01),0.3~30 nmol·L -1 GA 对 BIS 及 GSIS 均有明显促进作用(P <0.05或 P <0.01),0.3~30 nmol·L^-1 GA 明显地上调 Insulin mRNA 的相对表达(P <0.01)。3、30 nmol·L^-1 GA 明显地上调 PDX-1 mRNA 的相对表达(P <0.01)。3、30 nmol·L^-1 GA 能明显地上调 MafA mRNA 的相对表达(P <0.01)。结论GA 能促进 INS-1胰岛β细胞增殖;增加细胞内胰岛素含量与分泌量,可能与其上调 Insulin、PDX-1、MafA 基因表达有关。 展开更多
关键词 番石榴酸 INS-1胰岛β细胞 增殖 胰岛素合成 胰岛素分泌 基因表达
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大鼠去卵巢后骨髓源性破骨细胞形成的动态变化及其与骨髓IL-6、IL-6受体表达的关系 被引量:11
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作者 曾天舒 陈璐璐 +2 位作者 夏文芳 周慜 黎慧清 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2003年第4期291-294,共4页
目的 观察大鼠去卵巢后骨髓源性破骨细胞形成的动态变化及其与骨髓细胞IL-6、IL-6受体以及gpl30基因表达水平改变的关系。方法 健康3月龄雌性SD大鼠60只,30只作为假手术对照组,30只经腹手术去卵巢。分别于去卵巢后2,4,6,8,12周取去卵巢... 目的 观察大鼠去卵巢后骨髓源性破骨细胞形成的动态变化及其与骨髓细胞IL-6、IL-6受体以及gpl30基因表达水平改变的关系。方法 健康3月龄雌性SD大鼠60只,30只作为假手术对照组,30只经腹手术去卵巢。分别于去卵巢后2,4,6,8,12周取去卵巢组和对照组各6只大鼠骨髓细胞作细胞培养和提取RNA。培养的第6天分别作瑞氏-吉姆萨染色和抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,以胞核3个或3个以上以及TRAP(+)为破骨细胞标志,计数细胞数。骨髓细胞提取总RNA进行逆转录PCR。结果 术后2周去卵巢组破骨细胞形成数即多于对照组(P<0.05);第4-6周,去卵巢组破骨细胞形成达高峰,明显多于2周(P<0.01);去卵巢后的8周,较峰值下降,直至12周去卵巢组破骨细胞形成数仍高于对照组(P<0.05)。与破骨细胞的变化相对应,术后2周,骨髓细胞IL-6及IL-6RmRNA表达均明显增高(分别为P<0.01,P<0.05);第4周时,IL-6表达水平达到高峰,保持至第6周,IL-6R表达则在第6周达最高;第8周,IL-6、IL-6R基因表达水平较峰值下降,但直至第12周仍高于对照组。去卵巢后全程未见gp130基因表达水平有明显变化。结论 大鼠去卵巢后骨髓干细胞分化形成破骨细胞明显增加,呈时间相关动态过程,第6周达高峰,这一过程与骨髓细胞IL-6、IL-6R基因表达的动态变化一致,提示去卵巢后骨髓细? 展开更多
关键词 大鼠 卵巢 骨髓 破骨细胞 白介素6受体
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蜱传脑炎病毒E基因的重组质粒构建及其在原核细胞的表达 被引量:5
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作者 邵宾 陈斌 +2 位作者 谢菲 王林 黄会岭 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期87-91,共5页
通过表达蜱传脑炎病毒E蛋白,为制备蜱传脑炎快速检测试纸条的奠定基础。根据GenBank数据库中已发表的蜱传脑炎病毒的基因序列,检索并合成蜱传脑炎病毒目的基因E,设计引物,PCR扩增,克隆至原核表达载体pET-30a(+)构建重组质粒,在BL21细菌... 通过表达蜱传脑炎病毒E蛋白,为制备蜱传脑炎快速检测试纸条的奠定基础。根据GenBank数据库中已发表的蜱传脑炎病毒的基因序列,检索并合成蜱传脑炎病毒目的基因E,设计引物,PCR扩增,克隆至原核表达载体pET-30a(+)构建重组质粒,在BL21细菌内表达蜱传脑炎病毒E蛋白。结果表明:经过PCR试验和双酶切试验鉴定,克隆测序正确,通过重组质粒,成功地表达出蜱传脑炎病毒E蛋白。 展开更多
关键词 蜱传脑炎病毒 重组质粒 E蛋白 原核表达
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大肠杆菌天门冬酰胺酶Ⅱ的基因克隆与表达 被引量:14
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作者 李晶 刘景晶 +1 位作者 吴梧桐 胡梅清 《药物生物技术》 CAS CSCD 1995年第4期8-15,共8页
本文报道用一对与大肠杆菌编码L-天门冬酰胺酶Ⅱ(L-AsPsⅡ)的基因ansB两侧序列互补的寡核苷酸L1、L2作引物,以L-ASPsⅡ的野生型生产菌cPU210009染色体为模板,经PCR扩增得到长约1.6Kb的DN... 本文报道用一对与大肠杆菌编码L-天门冬酰胺酶Ⅱ(L-AsPsⅡ)的基因ansB两侧序列互补的寡核苷酸L1、L2作引物,以L-ASPsⅡ的野生型生产菌cPU210009染色体为模板,经PCR扩增得到长约1.6Kb的DNA片段。该片段通过以LP1、LP2为内引物的PCK反应,证明包含了ansB基因的编码序列。将此片段经xba1、HindⅡ消化,插入质粒PUC18、PUC19上构建重组质粒PUA18、PUA19,分别转化As1.1187,As1.1193,HB101,9637,JM107,71/18,CPU210009等宿主菌,筛选得到L-ASPsⅡ酶活力明显提高的8株阳性转化子。在1L生物反应器中,LB培养基37℃下培养24h,其酶活在6.2~31.81U。ml之间。其中CTA8表达L-ASPsⅡ水平最高,达到31.81U/ml.各基因工程菌株较之野生型生产菌体CPU210009,其生产L-ASPsⅡ水平提高了5~26倍。而且IPTG诱导对工程菌表达L-ASPsⅡ的水平几无影响。SDS-PAGE测得工程菌表达的L-ASPsⅡ分子量约为140Kd.薄层扫描结果显示:CTA7、CTB8、CTA9所产生的L-ASPs? 展开更多
关键词 大肠杆菌 ansB L-天门冬酰胺酶Ⅱ 基因克隆 基因表达
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