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8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ与T2MD患者血糖在目标范围内时间的相关性及预测糖尿病周围神经病变的价值
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作者 徐云 陈雪辉 +3 位作者 白立炜 耿锐娜 孟祥雨 覃艳 《海南医学》 CAS 2024年第10期1390-1395,共6页
目的探讨8-异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)、镍纹样蛋白(Metrnl)、微管相关蛋白3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)/微管相关蛋白-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)与2型糖尿病(T2MD)患者血糖在目标范围内时间(TIR)的相关性及对糖尿病周围神经病变(DPN)预测价值。方法选取2020年5... 目的探讨8-异前列腺素F2α(8-isoPGF2α)、镍纹样蛋白(Metrnl)、微管相关蛋白3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)/微管相关蛋白-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)与2型糖尿病(T2MD)患者血糖在目标范围内时间(TIR)的相关性及对糖尿病周围神经病变(DPN)预测价值。方法选取2020年5月至2022年10月新乡医学院第一附属医院收治的187例T2DM患者进行前瞻性研究,根据是否合并DPN分为DPN组(n=48)和无DPN组(n=139)。比较两组患者及根据TIR四分位数分组的患者8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ水平,采用Pearson相关性分析8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ与TIR相关性,采用多因素Logistic回归分析DPN的相关影响因素;绘制受试者工作特征曲线(ROC)评价8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ预测DPN的价值。结果DPN组患者的TIR为(51.43±7.68)%,明显低于无DPN组的(56.94±8.12)%,差异有统计学意义(P<0.05);DPN组患者的8-isoPGF2α、Metrnl分别为(162.78±51.33)pg/mL、(259.18±74.42)pg/mL,明显高于无DPN组的(129.56±43.00)pg/mL、(208.37±65.61)pg/mL,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ为0.89±0.27,明显低于无DPN组的1.15±0.31,差异均有统计学意义(P<0.05);根据TIR第25、50、75百分位数将全部患者分为Q1~Q4四组,8-isoPGF2α、Metrnl在Q4组最低,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ在Q4组最高;8-isoPGF2α、Metrnl随着TIR降低逐渐升高,LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ随着TIR降低而降低,四组间比较差异均有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,8-isoPGF2α、Metrnl与TIR呈显著负相关(r=-0.786、-0.665,P<0.01),LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ与TIR呈显著正相关(r=0.711,P<0.01);多因素Logistic回归分析结果显示,TIR、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ是DPN的独立相关保护因素(P<0.05),8-isoPGF2α、Metrnl是DPN的独立相关危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,单一指标中,Metrnl预测DPN的AUC最大(0.830),特异度最高(87.05%),8-isoPGF2α+Metrnl+LC3B-Ⅱ预测DPN的AUC为0.923(95%CI:0.875~0.957),大于Metrnl,预测敏感度为87.50%,特异度为85.61%(P<0.05)。结论8-isoPGF2α、Metrnl、LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ与T2MD患者TIR有关,均是患者并发DPN的预警因素。联合检测三者能为临床分层管理和早期识别DPN高风险人群提供参考。 展开更多
关键词 8-异前列腺素F2Α 镍纹样蛋白 微管相关蛋白3B-Ⅱ/微管相关蛋白- 2型糖尿病 血糖在目标范围内时间 糖尿病周围神经病变 相关性 预测价值
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Effects of gentiana scabra bage on expression of hepatic type Ⅰ,Ⅲ collagen proteins in Paragonimus skrjabini rats with liver fibrosis 被引量:2
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作者 Zhao-Xia Qu Fang Li +3 位作者 Chao-Dong Ma Jun Liu Shu-De Li Wen-Lin Wang 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2015年第1期60-63,共4页
Objective:To exploit- the effects of gentiana scabra bage on the expression of hepatic collagen proteins in Paragonimus skrjabini rats with liver fibrosis.Methods:Immunohistochemical technique was used to observe the ... Objective:To exploit- the effects of gentiana scabra bage on the expression of hepatic collagen proteins in Paragonimus skrjabini rats with liver fibrosis.Methods:Immunohistochemical technique was used to observe the changes of content of hepatic type Ⅰ,Ⅲ collagen proteins in Paragonimus skrjabini rats with Liver fibrosis before and after the gentiana scabra bage treatmeat.Results:Comparing with the model group,changes of hepatic tvpe Ⅰ and type Ⅲ collagen proteins in gentiana scabra bage treated group were significantly weakened.Conclusions:Gentiana scabra bage treatment can reduce the content of hepatic type Ⅲ and type Ⅰ collagen protein significantly in Paragonimus skrjabini rats with liver fibrosis,thereby,playing the role against hepatic fibrosis. 展开更多
关键词 GENTIANA scabra bage Liver fibrosis PARAGONIMUS skrjabini COLLAGEN protein COLLAGEN protein
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Expression and role of specificity protein 1 and collagenⅠin recurrent pterygial tissues 被引量:1
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作者 Chun-Sheng Shi Yue Wu +2 位作者 Na Shu Li-Li Jiang Bo Jiang 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2021年第2期223-227,共5页
AIM:To investigate the expression profiles of the transcription factor specificity protein 1(Sp1)and collagenⅠin recurrent pterygial tissues.What is more,to compare the changes of Sp1 and collagen I among primary pte... AIM:To investigate the expression profiles of the transcription factor specificity protein 1(Sp1)and collagenⅠin recurrent pterygial tissues.What is more,to compare the changes of Sp1 and collagen I among primary pterygial tissue,recurrent pterygial tissue and conjunctival tissue.METHODS:In the prospective study,we collected the pterygial tissues of 40 patients who underwent resection of primary pterygial tissue and recurrent pterygial tissue,and the conjunctival tissues of 10 patients with enucleation due to trauma.The relative expression levels of Sp1 and collagen I were analyzed by reverse transcription quantitative-polymerase chain reaction and Western blot.Paired t-test was performed to compare the Sp1 and collagen I of recurrent pterygial tissues,as well as the primary pterygial tissues and conjunctival tissues.In further,Pearson’s hypothesis testing of correlation coefficients was used to compare the correlations of Sp1 and Collagen I.RESULTS:The content of Sp1 and collagen I m RNA and protein was significantly greater in recurrent pterygial tissue than that was in primary and conjunctival tissue(P<0.05).There was a positive correlation between the m RNA and protein levels of Sp1 and collagen I in recurrent pterygial tissues(protein:r=0.913,P<0.05;m RNA:r=0.945,P<0.05).CONCLUSION:Sp1 and collagen I are expressed in normal conjunctival,primary,and recurrent pterygial tissues,but expression is significantly greater in the latter.Sp1 and collagen I may be involved in the regulation of the development of recurrent pterygium. 展开更多
关键词 recurrent pterygium CONJUNCTIVA specificity protein 1 collagen
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透明质酸联合注射血小板血浆及A型肉毒毒素对猪真皮Ⅰ型胶原蛋白表达的影响 被引量:1
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作者 童玲 陈瑶 +3 位作者 王雪 杨艳 方洪伟 张振 《实用皮肤病学杂志》 2023年第2期67-71,共5页
目的探讨透明质酸联合A型肉毒毒素(botulinum toxin type-A,Botox A)和富含血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)进行猪真皮内注射,检测真皮层成纤维细胞数目及Ⅰ型胶原蛋白mRNA分泌代谢的变化。方法采用巴马猪建立动物模型,使用交联... 目的探讨透明质酸联合A型肉毒毒素(botulinum toxin type-A,Botox A)和富含血小板血浆(platelet rich plasma,PRP)进行猪真皮内注射,检测真皮层成纤维细胞数目及Ⅰ型胶原蛋白mRNA分泌代谢的变化。方法采用巴马猪建立动物模型,使用交联透明质酸(cross-linked hyaluronic acid,HA)和非交联透明质酸(non-cross-linked hyaluronic acid,N-HA)分别与Botox A、PRP联合作为实验组(HA组、HA+Botox A组、HA+PRP组、N-HA组、N-HA+Botox A组、N-HA+PRP组),并与生理盐水组和正常组比较。于注射第1和4周后,通过组织切片染色、实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)等方法,定性定量观察、比较真皮层成纤维细胞数量变化,真皮层Ⅰ型胶原蛋白mRNA分泌表达变化。结果HA组的成纤维细胞数量、Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达量在第1周和第4周时比N-HA组高,并且HA+PRP组的成纤维细胞数量、Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达水平显著高于同期HA+Botox A组、生理盐水组和正常组(P<0.05)。结论应用HA与PRP联合注射更易促进成纤维细胞的增殖和Ⅰ型胶原蛋白mRNA的表达,其主要机制可能是通过改变细胞外基质的理化性质进而促进真皮层细胞因子的合成,从而影响胶原合成。 展开更多
关键词 型胶原蛋白 成纤维细胞 透明质酸 富含血小板血浆 A型肉毒毒素
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Protein Flexibility and Multiple Docking in Ligand Docking and Virtual Screening to the BRAF(TypeⅠ1/2)Inhibitors
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作者 王路 张艳敏 +4 位作者 卢帅 唐伟方 陈亚东 陆涛 刘海春 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 2018年第7期1057-1070,共14页
BRAF has been recognized as a promising target for cancer therapy. A number of crystal structures have been published. Molecular docking is one of the most effective techniques in the field of computer-aided drug des... BRAF has been recognized as a promising target for cancer therapy. A number of crystal structures have been published. Molecular docking is one of the most effective techniques in the field of computer-aided drug design(CADD). Appropriate protein conformation and docking method are essential for the successful virtual screening experiments. One approach considering protein flexibility and multiple docking methods was proposed in this study. Six DFG-in/αC-helix-out crystal structures of BRAF, three docking programs(Glide, GOLD and Ligand Fit) and 12 scoring functions were applied for the best combination by judging from the results of pose prediction and retrospective virtual screening(VS). The most accurate results(mean RMSD of about 0.6 A) of pose prediction were obtained with two complex structures(PDB: 3 C4 C and 3 SKC) using Glide SP. From the retrospective VS, the most active compounds were identified by using the complex structure of 3 SKC, indicated by a ROC/AUC score of 0.998 and an EF of 20.6 at 5% of the database screen with Glide-SP. On the whole, PDB 3 SKC could achieve a higher rate of correct reproduction, a better enrichment and more diverse compounds. A comparison of 3 SKC and the other X-ray crystal structures led to a rationale for the docking results. PDB 3 SKC could achieve a broad range of sulfonamide substitutions through an expanded hydrophobic pocket formed by a further shift of the αC-helix. Our study emphasized the necessity and significance of protein flexibility and scoring functions in both ligand docking and virtual screening. 展开更多
关键词 BRAF type 1/2 inhibitors protein flexibility multiple docking methods pose prediction virtual screening
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Effects of Nephrolithiasis on Serum DNase(Deoxyribonuclease Ⅰ and Ⅱ) Activity and E3 SUMO-Protein Ligase NSE2(NSMCE2) in Malaysian Individuals 被引量:1
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作者 Faridah Yusof Atheer Awad Mehde +3 位作者 Wesen Adel Mehdi Raha Ahmed Raus Hamid Ghazali Azlina Abd Rahman 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2015年第9期660-665,共6页
Objective Nephrolithiasis is one of the most common disorders of the urinary tract. The aim of this study was to examine a possible relationship between DNase Ⅰ/Ⅱ activity and E3 SUMO-protein ligase NSE2 in the sera... Objective Nephrolithiasis is one of the most common disorders of the urinary tract. The aim of this study was to examine a possible relationship between DNase Ⅰ/Ⅱ activity and E3 SUMO-protein ligase NSE2 in the sera of nephrolithiasis patients to evaluate the possibility of a new biomarker for evaluating kidney damage. Methods Sixty nephrolithiasis patients and 50 control patients were enrolled in a case-control study. Their blood urea, creatinine, protein levels and DNase Ⅰ/Ⅱ activity levels were measured by spectrometry. Serum NSMCE2 levels were measured by ELISA. Blood was collected from patients of the government health clinics in Kuantan-Pahang and fulfilled the inclusion criteria. Results The result indicated that mean levels of sera NSMCE2 have a significantly increase(P〈0.01) in patients compared to control group. Compared with control subjects, activities and specific activities of serum DNase Ⅰ and Ⅱ were significantly elevated in nephrolithiasis patients(P〈0.01). Conclusion This study suggests that an increase in serum concentrations of DNase Ⅰ/Ⅱ and E3 SUMO-protein ligase NSE2 level can be used as indicators for the diagnosis of kidney injury in patients with nephrolithiasis. 展开更多
关键词 Nephrolithiasis DNase DNase E3 SUMO-protein ligase NSE2 NSMCE2
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小鼠前扣带回皮质PKG-Ⅰ介导吗啡诱导的痛敏和焦虑样行为 被引量:3
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作者 王涛之 李珍珍 +5 位作者 刘万能 徐蕾 李海涛 席烨 王菲 罗层 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 2023年第1期8-14,共7页
目的:探讨前扣带回皮质cGMP依赖的蛋白激酶-Ⅰ(PKG-Ⅰ)在吗啡诱致的小鼠痛敏及焦虑样行为中的调控作用。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为2组:对照组和吗啡组,在小鼠皮下每天两次、连续4 d注射吗啡建立吗啡诱致的痛敏模型。分别采用von F... 目的:探讨前扣带回皮质cGMP依赖的蛋白激酶-Ⅰ(PKG-Ⅰ)在吗啡诱致的小鼠痛敏及焦虑样行为中的调控作用。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为2组:对照组和吗啡组,在小鼠皮下每天两次、连续4 d注射吗啡建立吗啡诱致的痛敏模型。分别采用von Frey纤维丝和高架十字迷宫检测小鼠机械性痛阈变化和焦虑样行为。通过Western Blot和免疫荧光组织化学染色技术检测前扣带回皮质PKG-Ⅰ表达水平的变化。结果:长期大量皮下注射吗啡可诱致小鼠产生显著的痛觉敏化和焦虑样行为。Western Blot结果显示小鼠前扣带回皮质PKG-Ⅰ在吗啡诱致的痛敏后表达显著下调,同时免疫荧光组织化学染色结果显示前扣带回皮质PKG-Ⅰ在吗啡痛敏后的平均荧光强度显著下降。结论:前扣带回皮质PKG-Ⅰ在吗啡诱致的小鼠痛觉过敏和焦虑样行为中发挥关键作用。 展开更多
关键词 前扣带回皮质 cGMP依赖的蛋白激酶- 吗啡 痛觉敏化 焦虑样行为 小鼠
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血清分泌型卷曲蛋白5载脂蛋白A-Ⅰ载脂蛋白B超敏C反应蛋白在2型糖尿病颈动脉粥样硬化中的应用价值
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作者 李晓童 杨娟娟 《实用医技杂志》 2023年第5期326-329,共4页
目的分析血清分泌型卷曲蛋白5(SFRP5)、载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)、载脂蛋白B(ApoB)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)在2型糖尿病(T2DM)颈动脉粥样硬化中的应用价值。方法选取2021年1月至2023年1月郑州大学附属郑州中心医院收治T2DM伴颈动脉粥样硬... 目的分析血清分泌型卷曲蛋白5(SFRP5)、载脂蛋白A-Ⅰ(ApoA-Ⅰ)、载脂蛋白B(ApoB)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)在2型糖尿病(T2DM)颈动脉粥样硬化中的应用价值。方法选取2021年1月至2023年1月郑州大学附属郑州中心医院收治T2DM伴颈动脉粥样硬化患者共43例。另选取43例单纯T2DM患者。回顾性分析2组的血清SFRP5、ApoA-Ⅰ、ApoB、hs-CRP水平。结果观察组患者血清SFRP5为(45±6)pg/ml、ApoA-Ⅰ为(1.13±0.11)g/L低于对照组的(48±6)pg/ml和(1.19±0.12)g/L,(t=2.350,P=0.020;t=2.417,P=0.018)。观察组患者血清ApoB为(1.19±0.16)g/L、hs-CRP为(12.9±3.3)mg/L高于对照组的(1.08±0.13)g/L和(9.6±2.6)mg/L(t=3.499,P=0.001;t=2.417,P=0.018)。患者SFRP5、ApoA-Ⅰ、ApoB、hs-CRP四项指标间均具有相关性(P<0.05)。血清SFRP5、ApoA-Ⅰ、ApoB、hs-CRP及四项指标联合检测在预测T2DM伴颈动脉粥样硬化的ROC曲线下面积分别为0.683、0.653、0.637、0.706、0.657(P=0.004,0.008,0.026,0.001)。结论血清SFRP5、ApoA-Ⅰ、ApoB、hs-CRP在T2DM患者颈动脉粥样硬化诊断中均具有较好的价值。 展开更多
关键词 分泌型卷曲蛋白5 载脂蛋白A- 载脂蛋白B 颈动脉粥样硬化
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用铀试剂Ⅰ共振光散射法测定蛋白质的研究 被引量:9
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作者 李树伟 李娜 +1 位作者 赵凤林 李克安 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2002年第4期619-622,共4页
本文提出一种新的光散射探针染料———铀试剂Ⅰ (ArsenazoⅠ ) ,在pH 3 2 9的条件下 ,ArsenazoⅠ本身只有极弱的光散射 ,它与蛋白质的结合物有强烈的共振光散射作用。在λ =4 0 0nm处 ,光散射有最大强度 ,光散射强度与蛋白质的浓度成... 本文提出一种新的光散射探针染料———铀试剂Ⅰ (ArsenazoⅠ ) ,在pH 3 2 9的条件下 ,ArsenazoⅠ本身只有极弱的光散射 ,它与蛋白质的结合物有强烈的共振光散射作用。在λ =4 0 0nm处 ,光散射有最大强度 ,光散射强度与蛋白质的浓度成正比。据此建立了一种测定蛋白质的新方法。该方法简便、快速、灵敏度高 ,对HSA的检测限达到 6 0ng·mL-1 ,线性范围达到 0~ 18μg·mL-1 ,用于人体血清样品的分析并同考马斯亮蓝法比较 ,取得了令人满意的结果。本文也研究了牛血清白蛋白 (BSA)、γ球蛋白、鸡蛋白蛋白、溶菌酶、胃蛋白酶与染料ArsonazoⅠ之间的作用 。 展开更多
关键词 共振光散射法 测定 蛋白质 铀试剂I 光散射探针试剂 染料 分析
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催乳复合物、胰岛素样生长因子-Ⅰ对奶牛乳腺上皮细胞中AKT-1和mTOR表达的作用 被引量:13
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作者 史琳琳 赵锋 +3 位作者 高学军 毕微微 武彩霞 李庆章 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第3期23-27,共5页
信号转导分子AKT-1、mTOR对于乳腺上皮细胞中乳蛋白的转录和翻译至关重要,胰岛素、地塞米松和催乳素组成的催乳复合物(DIP)是包括AKT-1/mTOR在内的多种泌乳信号途径激活的必要条件。采用qRT-RCR和Western blotting分别检测不同培养时间... 信号转导分子AKT-1、mTOR对于乳腺上皮细胞中乳蛋白的转录和翻译至关重要,胰岛素、地塞米松和催乳素组成的催乳复合物(DIP)是包括AKT-1/mTOR在内的多种泌乳信号途径激活的必要条件。采用qRT-RCR和Western blotting分别检测不同培养时间点奶牛乳腺上皮细胞AKT-1、mTOR的mRNA和蛋白质水平表达情况,结果显示,在DIP培养条件下,AKT-1和mTOR表达量均上升。添加胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)后进一步促进了AKT-1mRNA和蛋白质的表达;同时,mTOR mRNA和蛋白质水平的表达也增加,且均有显著差异(P<0.05),结果表明DIP存在时,IGF-Ⅰ上调AKT-1和mTOR的表达,增强了AKT/mTOR途径。 展开更多
关键词 乳腺上皮细胞 IGF- DIP mRNA 蛋白质
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黄瓜花叶病毒亚组Ⅰ和Ⅱ分离物外壳蛋白基因的序列分析与比较 被引量:53
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作者 徐平东 周仲驹 +1 位作者 林奇英 谢联辉 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第2期164-171,共8页
对我国分离的经生物学和血清学鉴定为黄瓜花叶病毒(CMV)亚组Ⅰ和Ⅱ的各一分离物(GB、XB)的外壳蛋白(CP)基因进行了序列分析和比较。以提纯病毒RNA为模板,进行逆转录及PCR扩增,并通过常规基因克隆方法得到插入C... 对我国分离的经生物学和血清学鉴定为黄瓜花叶病毒(CMV)亚组Ⅰ和Ⅱ的各一分离物(GB、XB)的外壳蛋白(CP)基因进行了序列分析和比较。以提纯病毒RNA为模板,进行逆转录及PCR扩增,并通过常规基因克隆方法得到插入CP基因片段的重组克隆。对插入GB和XB两个分离物CP基因片段的重组克隆进行全序列测定,结果表明重组克隆序列长分别为777bp和792bp,均只含一个开放读框(ORF),长度为657nt,可编码218个氨基酸;两个分离物的CP基因核苷酸序列同源率为775%,氨基酸序列同源率为826%。与我国已报道的7个CMV分离物的CP基因序列比较,分离物GB的同源率为913%~973%,分离物XB的同源率为766%~784%。与国际上已报道部分CMV株系的CP基因序列相比较,分离物GB与亚组Ⅰ株系有更密切的亲缘关系,而分离物XB则与亚组Ⅱ株系的亲缘关系更密切。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 亚组I 亚组Ⅱ 外壳蛋白基因
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Ⅰ群禽腺病毒Hexon蛋白的截短表达与鉴定 被引量:6
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作者 罗思思 谢芝勋 +4 位作者 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期550-555,共6页
本研究利用PCR方法扩增出Ⅰ群禽腺病毒FAVⅠhexon基因主要抗原区,连接于表达载体pGEX-4T-1中,构建成重组质粒pGEX-hexon,并转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,对表达的Hexon蛋白进行SDS-PAGE电泳和Western-blot分析。结果显示,试验成功... 本研究利用PCR方法扩增出Ⅰ群禽腺病毒FAVⅠhexon基因主要抗原区,连接于表达载体pGEX-4T-1中,构建成重组质粒pGEX-hexon,并转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达,对表达的Hexon蛋白进行SDS-PAGE电泳和Western-blot分析。结果显示,试验成功扩增获得hexon基因主要抗原区序列,大小为1020bp。重组蛋白主要以包涵体形式存在,融合蛋白大小为63.1ku,与预测值相符。经Western-blot分析,表明重组蛋白与FAVⅠ的阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性,为FAVⅠ诊断试剂盒的研制奠定基础。 展开更多
关键词 群禽腺病毒 Hexon蛋白 克隆 表达
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偶氮羧Ⅰ-铽(Ⅲ)配合物与蛋白质相互作用的吸光光谱行为的研究及应用 被引量:4
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作者 魏琴 李燕 +2 位作者 于海琴 李乐义 杜斌 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1175-1178,共4页
研究了偶氮羧Ⅰ-铽(Ⅲ) 与蛋白质的相互作用及其应用.在pH 1.20的HCl-KCl缓冲溶液中,蛋白质的加入使得偶氮羧Ⅰ-铽 (Ⅲ) 在510 nm 处的吸收峰峰值明显降低,且吸光度的变化与加入的蛋白质的浓度呈线性关系,于510 nm处测得摩尔吸光系数为... 研究了偶氮羧Ⅰ-铽(Ⅲ) 与蛋白质的相互作用及其应用.在pH 1.20的HCl-KCl缓冲溶液中,蛋白质的加入使得偶氮羧Ⅰ-铽 (Ⅲ) 在510 nm 处的吸收峰峰值明显降低,且吸光度的变化与加入的蛋白质的浓度呈线性关系,于510 nm处测得摩尔吸光系数为ε=7.75×105L/(mol·cm)-1,牛血清白蛋白在0~55 mg/L范围内符合朗伯-比尔定律.将此方法用于尿样和奶粉中蛋白质的测定,结果令人满意. 展开更多
关键词 偶氮羧-铽配合物 蛋白质 相互作用 吸光光谱 光谱探针
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草地螟普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)蛋白表达纯化及结合特性分析 被引量:13
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作者 孙红岩 尹姣 +3 位作者 冯红林 李克斌 席景会 曹雅忠 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期381-389,共9页
气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能。本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1蛋白。并利用N-苯基-1-... 气味结合蛋白在昆虫对寄主挥发性气味识别过程中有着重要的生理功能。本研究通过对草地螟Loxostege sticticalis L.普通气味结合蛋白Ⅰ(Lsti-GOBP1)进行克隆及原核表达的基础上,分离纯化得到体外重组的Lsti-GOBP1蛋白。并利用N-苯基-1-萘胺(N-phenyl-1-naphthylamine,1-NPN)作为荧光探针研究了Lsti-GOBP1蛋白与醇类、醛类、酯、烯等50种气味标样的结合特性,结果表明Lsti-GOBP1可与其中35种气味化合物结合,但只有1-己醇、1-庚醇、肉桂醛和莰烯4种气味标样能在20μmol/L浓度(探针与蛋白结合的饱和浓度值)下将1-NPN从Lsti-GOBP1中替换50%,其结合常数分别为8.997,7.283,7.289和9.814μmol/L。据此可以得出,Lsti-GOBP1蛋白的气味物质结合谱很广,同时具有较强的特异性,其中1-己醇、1-庚醇、肉桂醛、莰烯等化合物在草地螟识别寄主植物气味物质的过程中起重要作用。 展开更多
关键词 草地螟 普通气味结合蛋白 蛋白表达 纯化 N-苯基-1-萘胺 荧光结合实验
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光系统Ⅰ(PSⅠ)的结构与功能研究进展 被引量:23
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作者 郁飞 唐崇钦 +4 位作者 辛越勇 彭德川 许亦农 李良璧 匡廷云 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2001年第3期266-275,共10页
光系统Ⅰ (PSⅠ )是整合于光合膜上的由多个蛋白亚基组成的色素蛋白复合物 ,它在光合电子传递链中催化电子从PC经过一系列电子传递体到Fd的传递。近 2 0年特别是近几年来 ,有关光合作用PSⅠ结构与功能的研究取得了显著的进展 ,获得了很... 光系统Ⅰ (PSⅠ )是整合于光合膜上的由多个蛋白亚基组成的色素蛋白复合物 ,它在光合电子传递链中催化电子从PC经过一系列电子传递体到Fd的传递。近 2 0年特别是近几年来 ,有关光合作用PSⅠ结构与功能的研究取得了显著的进展 ,获得了很多具有重要意义的结果。本文综合介绍了近年来在PSⅠ的蛋白亚基组成及其特性、PSⅠ介导的 3种电子传递过程、PSⅠ特有的外周捕光色素蛋白复合物系统 (LHCⅠ )以及最新的有关PSⅠ 4 分辨率的三维晶体结构生物学研究的进展情况 ,并对未来的研究进行了展望。 展开更多
关键词 光系统 蛋白组成 电子传递 外周天线 三维晶体结构 功能 植物
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采用RNAi技术抑制PeroxiredoxinⅠ的表达 被引量:3
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作者 章波 艾国平 +3 位作者 王燕 王峰超 白云 粟永萍 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期709-712,共4页
Peroxiredoxin Ⅰ(PrxⅠ) is involved in many important cellular progresses such as cell proliferation and differentiation. To further elucidate its roles in ionizing radiation, eukaryotic expression vector containing s... Peroxiredoxin Ⅰ(PrxⅠ) is involved in many important cellular progresses such as cell proliferation and differentiation. To further elucidate its roles in ionizing radiation, eukaryotic expression vector containing siRNA targeting mRNA of peroxiredoxin 1 gene was constructed and transected into NIH3T3 cell line following sequencing.Western blot analysis showed that this siRNA significantly inhibited PrxⅠ expression by 65% at protein level; cell proliferation experiment demonstrated that the double proliferation time of NIH 3T3PrxⅠ cells was postponed for 1.8 hours as compared with control group. MTT results showed that 12 and 48 hours after irradiation the survival rate of NIH 3T3PrxⅠ was dramatically decreased when comparing with sham-irradiated group.These results suggested that peroxiredoxin 1 has radiation-cytoprotection role. 展开更多
关键词 RNAI技术 硫氧还蛋白 过氧化物 哺乳动物 真核生物 原核生物 超氧化物 生化功能 肿瘤细胞 NK细胞
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着丝粒特异性蛋白CENP-Ⅰ的原核表达、纯化及抗体制备 被引量:3
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作者 蔡燕 翁亚光 +3 位作者 施琼 徐远久 刘子杰 王应雄 《西南大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期143-148,共6页
用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获得编码CENP-Ⅰ蛋白第1-293位氨基酸的CENP-ⅠcDNA序列,采用基因体外重组法将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)内;将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达、Ni2+-NTA亲和层析纯化获得高纯... 用RT-PCR的方法从Hela细胞总RNA中获得编码CENP-Ⅰ蛋白第1-293位氨基酸的CENP-ⅠcDNA序列,采用基因体外重组法将其克隆到原核表达载体pET-32a(+)内;将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达、Ni2+-NTA亲和层析纯化获得高纯度的重组蛋白质;用纯化的蛋白质免疫家兔制备抗血清,琼脂糖免疫双扩法和Western blot鉴定得到高效价的特异性抗CENP-Ⅰ抗体. 展开更多
关键词 着丝粒特异性蛋白质 CENP- 染色体不稳定性
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重组鲢鱼抗菌肽parasinⅠ原核表达、纯化与抗菌活性 被引量:6
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作者 赵华 张艳艳 +3 位作者 汤加勇 李珂 周继昌 王康宁 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1731-1736,共6页
本文旨在构建抗菌肽parasinⅠ大肠杆菌重组表达载体,表达人工重组parasinⅠ,并检测其抑菌活性。根据parasinⅠ的成熟肽序列和大肠杆菌密码子偏好性,人工合成1段57 bp的基因编码cDNA,通过PCR技术构建大肠杆菌重组表达质粒pET32-ParaⅠ,并... 本文旨在构建抗菌肽parasinⅠ大肠杆菌重组表达载体,表达人工重组parasinⅠ,并检测其抑菌活性。根据parasinⅠ的成熟肽序列和大肠杆菌密码子偏好性,人工合成1段57 bp的基因编码cDNA,通过PCR技术构建大肠杆菌重组表达质粒pET32-ParaⅠ,并在parasinⅠ基因5'-端引入Xa因子酶切位点。重组载体转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株后,在不同温度(37和20℃)条件下对阳性转化子进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。结果表明:IPTG成功诱导了1个21 ku的融合蛋白表达,重组蛋白占菌体总蛋白质的45%~50%。在低温条件下产生的融合蛋白主要以可溶性形式存在。可溶性重组蛋白经亲和层析纯化后,用Χa因子进行酶切,酶切产物经琼脂孔扩散法抑菌活性检测,结果显示其对金黄色葡萄球菌有一定抑制作用。本试验实现了parasinⅠ的重组表达,表达产物经Χa因子酶切后具抑菌活性。 展开更多
关键词 抗菌肽parasin 大肠杆菌 融合蛋白 表达 抑菌活性
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健脾化瘀祛痰法对apoA-Ⅰ/AMPK/CPT1A信号通路介导的脂肪酸β氧化改善血脂异常的调控作用及其机制 被引量:7
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作者 张琦 赵秋宇 +7 位作者 隋国媛 刘慧慧 翟亚荣 于宁 王杰 裘雪莹 孟嘉伟 贾连群 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1395-1402,共8页
目的:探讨健脾化瘀祛痰法对高脂血症大鼠血脂异常的影响,基于载脂蛋白AⅠ(apoA-Ⅰ)/单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)/肉毒碱棕榈酰转移酶ⅠA(CPT1A)信号通路阐明其分子机制。方法:32只大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组(给予1.5... 目的:探讨健脾化瘀祛痰法对高脂血症大鼠血脂异常的影响,基于载脂蛋白AⅠ(apoA-Ⅰ)/单磷酸腺苷激活蛋白激酶(AMPK)/肉毒碱棕榈酰转移酶ⅠA(CPT1A)信号通路阐明其分子机制。方法:32只大鼠随机分为空白对照组、模型组、辛伐他汀组(给予1.575 mg·kg^(-1)·d^(-1)辛伐他汀)和化瘀祛痰方(HYQTP)组(给予13.846 mg·kg^(-1)·d^(-1)化瘀祛痰方药物),每组8只。空白对照组大鼠给予正常饮食,模型组、辛伐他汀组和HYQTP组大鼠给予高脂饲料,建立高脂血症大鼠模型。8周后,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠灌胃相应药物;空白对照组和模型组大鼠给予等体积生理盐水。全自动生化分析仪检测各组大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)水平,HE染色观察各组大鼠肝组织病理形态表现,油红O染色观察各组大鼠肝组织脂质沉积情况,检测各组大鼠肝组织中TG水平,ELISA法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠肝组织中apoA-Ⅰ、B族Ⅰ型清道夫受体(SR-B1)和CPT1A mRNA表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肝组织中高密度脂蛋白受体(SR-B1)、AMPK、磷酸化AMPK(p-AMPK)和CPT1A蛋白表达水平。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠血清TC、TG和LDL-c水平升高(P<0.05),HDL-c水平降低(P<0.05);肝组织中TG水平升高(P<0.05);肝细胞出现明显肿胀,体积增大;并且可见明显红色脂滴分布;肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),p-AMPK/AMPK比值降低(P<0.05);与模型组比较,辛伐他汀组和HYQTP组大鼠血清TC、TG和LDL-c水平降低(P<0.05),HDL-c水平升高(P<0.05);肝组织中TG水平降低(P<0.05);肝细胞肿胀明显减轻,脂滴分布明显减少,肝组织中apoA-Ⅰ、SR-B1和CPT1A mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05),p-AMPK/AMPK比值升高(P<0.05)。结论:健脾化瘀祛痰法能够改善高脂血症大鼠血脂异常,减轻肝脏损伤及脂质沉积,其作用机制可能与调控apoA-1/AMPK/CPT1A信号通路促进大鼠脂肪酸β氧化有关。 展开更多
关键词 血脂异常 脂肪酸β氧化 载脂蛋白A 单磷酸腺苷激活蛋白激酶 肉毒碱棕榈酰转移酶A
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Ⅰ群禽腺病毒间接33K-ELISA检测方法的建立 被引量:3
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作者 邓显文 罗思思 +5 位作者 谢芝勋 谢丽基 刘加波 谢志勤 庞耀珊 范晴 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1405-1408,共4页
【目的】建立一种鉴别I群禽腺病毒(FAVI)灭活苗免疫和野毒感染的检测方法,为FAVI的防控与净化提供技术支撑。【方法】以FAVI33K重组蛋白为包被抗原,筛选和优化间接ELISA的条件,建立FAVI抗体的间接33K-ELISA检测方法,检验其特异性、敏感... 【目的】建立一种鉴别I群禽腺病毒(FAVI)灭活苗免疫和野毒感染的检测方法,为FAVI的防控与净化提供技术支撑。【方法】以FAVI33K重组蛋白为包被抗原,筛选和优化间接ELISA的条件,建立FAVI抗体的间接33K-ELISA检测方法,检验其特异性、敏感性和重复性,并鉴别检测FAVI活病毒感染血清和灭活苗免疫血清各50份。【结果】33K重组抗原最佳包被浓度6.0μg/mL,包被条件为37℃孵育1h后4℃过夜,最佳封闭液为5%脱脂奶,封闭时间1.0h;待检血清稀释度1:100,抗原抗体最佳作用时间1.0h;酶标二抗最佳稀释度1:3000,作用时间45min。优化后的间接33K-ELISA的阴、阳性临界值为0.316。其特异性、敏感性、重复性试验及鉴别检测结果表明,优化后的间接33K-ELISA具有特异性强、灵敏度高、重复性好等优点,且能成功鉴别FAVI感染与灭活疫苗接种。【结论】间接33K-ELISA操作简便、特异性强、灵敏度高、重复性好、适于批量检测,可有效鉴别FAVI感染和灭活苗免疫接种,利于挑选出FAVI感染动物,为FAVI的防控与净化提供了新思路和新方法。 展开更多
关键词 I群禽腺病毒 33K蛋白 间接ELISA 优化
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