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Expression and effect of proline hydroxylase domain 2 in retina of diabetic rats
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作者 Zhen Li Yi-Qiao Xing +1 位作者 Wei Cui Qiang Lu 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2016年第3期357-362,共6页
AIM: To observe the expression of proline hydroxylase domain 2 (PHD2) in the retina of diabetic rats and investigate the relationship between PHD2 and relevant intraocular vascular proliferation factors, METHODS: ... AIM: To observe the expression of proline hydroxylase domain 2 (PHD2) in the retina of diabetic rats and investigate the relationship between PHD2 and relevant intraocular vascular proliferation factors, METHODS: Sixty male specific pathogen free (SPF) Sprague-Dawley (SD) rats were randomly divided into two groups: the diabetic group and the control group. The rats in the diabetic group were intraperitoneally injected with 60 mg/kg (0.60 mL/100 g) of streptozotocin to induce a diabetic rat model. The rats in the control group were injected with an equal volume of sodium citrate buffer solution by the same method. Hematoxylin- eosin (HE) staining and immumofiuorescence (IF) method were adopted to observe the pathological changes of retinal tissues and the expression of PHD2, glial fibrillary acidic protein (GFAP), vascular endothelial growth factor (VEGF) by 8wk. RT-PCR method was applied to detect the expressions of mRNA of PHD2, VEGF and GFAP. The relationship between PHD2 and other vascular proliferation factors was analyzed. RESULTS: HE staining showed that there was the retinal tissue edema in the diabetic group, and the arrangement was in disorder, and proliferation could be seen. IF staining: in the retina of normal rats, PHD2 was not expressed, GFAP and VEGF were mainly expressed in astrocytes; while in the diabetic rats, PHD2, GFAP and VEGF staining showed strong positivity in all retinal layers, mainly in neurogliocytes. PHD2 was co-expressed with VEGF and GFAP. The mRNA expression levels of PHD2, GFAP and VEGF in the diabetic group were obviously higher than that in the control group, respectively 1.83 times, 1.75 times and 2.08 times. The difference had statistical significance (P〈0.01). CONCLUSION: The high expression of PHD2 in the retina of early-stage diabetic rats might result from secretion of neurogliocytes induced by local high- concentration blood glucose, thus promoting the expression of VEGF and GFAP, PHD2 plays an important role during the occurrence of diabetic retinopathy. 展开更多
关键词 proline hydroxylase domain 2 DIABETICRETINOPATHY retinal neovascularization
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红景天苷对类风湿关节炎患者血清脯氨酸羟化酶2及蛋白磷酸酯酶2A和丝裂原活化蛋白激酶表达水平的影响
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作者 李琴 朱光昭 +3 位作者 庄志毅 星媛 严婕 方璐 《中国医药》 2024年第7期1061-1065,共5页
目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察... 目的分析红景天苷对类风湿关节炎(RA)患者血清脯氨酸羟化酶2(PHD2)及蛋白磷酸酯酶2A(PP2A)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达水平的影响。方法选取青海省中医院2022年12月至2023年7月收治的RA患者96例。采用随机数字表法分为对照组和观察组,各48例。对照组采用常规西医治疗,观察组在常规西医治疗的同时予以红景天苷治疗,2组均治疗3个月。比较治疗前后2组中医证候评分、临床症状与体征、实验室检查指标[包括红细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(anti-CCP)]、临床疗效,健康状况评定量表(HAQ)与28个关节疾病活动度评估(DAS28)评分,血清PHD2、PP2A、MAPK水平与基因表达,不良反应。结果治疗后2组主症、次症评分均低于治疗前且观察组均低于对照组(均P<0.05)。治疗后观察组临床症状与体征均轻于对照组,ESR、CRP、RF和anti-CCP水平均低于对照组(均P<0.05)。观察组总有效率高于对照组[95.8%(46/48)比80.4%(37/46)](P=0.020)。治疗后观察组HAQ与DAS28评分均低于对照组[(5.0±1.0)分比(7.2±1.2)分、(3.1±0.5)分比(4.1±0.7)分](t=9.528、7.444,均P<0.001)。治疗后观察组PHD2、MAPK水平及基因表达均低于对照组,PP2A水平及基因表达均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组不良反应发生率差异无统计学意义(P=0.528)。结论红景天苷治疗RA可增强临床效果、减轻患者症状、改善实验室指标且安全。推测与降低PHD2和MAPK表达、增加PP2A表达有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 红景天苷 脯氨酸羟化酶2 蛋白磷酸酯酶2A 丝裂原活化蛋白激酶
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抑制脯氨酸羟化酶-2对胰腺癌吉西他滨化疗敏感性及肿瘤转移的影响
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作者 郭伟胜 付利然 +2 位作者 张娟 赵林 魏光亚 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2023年第13期3180-3187,共8页
目的探究抑制脯氨酸羟化酶结构域(PHD)2对胰腺癌化疗敏感性与肿瘤转移的影响。方法将SW1990细胞随机分为对照组、sh-NC组和sh-PHD2组,分别使用shRNA-NC与shRNA-PHD2慢病毒感染sh-NC组和sh-PHD2组细胞,对照组细胞不进行处理,实时荧光定... 目的探究抑制脯氨酸羟化酶结构域(PHD)2对胰腺癌化疗敏感性与肿瘤转移的影响。方法将SW1990细胞随机分为对照组、sh-NC组和sh-PHD2组,分别使用shRNA-NC与shRNA-PHD2慢病毒感染sh-NC组和sh-PHD2组细胞,对照组细胞不进行处理,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和Western印迹检测转染效果;细胞划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力,免疫荧光染色检测细胞上皮-间质转化能力,细胞计数试剂盒(CCK)-8检测吉西他滨处理下的细胞存活率。将45只裸鼠随机分为3组,每组15只,通过接种转染后的SW1990细胞构建移植瘤模型,分组包括sh-NC组、sh-NC+吉西他滨组和sh-PHD2+吉西他滨组,治疗8 w后,计算肿瘤组织体积、重量及肝转移情况,苏木素-伊红(HE)染色观察肿瘤组织病理学改变,免疫组织化学染色检测肿瘤组织Ki-67表达,TUNEL染色检测肿瘤组织细胞凋亡。结果shRNA-PHD2慢病毒感染SW1990细胞后,与对照组比较,sh-PHD2组PHD2 mRNA与蛋白表达水平显著下降(P<0.05),细胞划痕愈合率显著减小,细胞迁移与侵袭数目显著减少(P<0.01),E-钙黏蛋白(cadherin)荧光表达强度增强,波形蛋白(Vimentin)荧光表达强度减弱,吉西他滨处理下的细胞存活率显著降低(P<0.01);与sh-NC组比较,sh-NC+吉西他滨组肿瘤体积与重量均显著减小,出现肝转移比例减小,肿瘤组织内Ki-67阳性率显著降低,TUNEL阳性细胞比例显著增加(P<0.01);而sh-PHD2+吉西他滨组的肿瘤体积与重量较sh-NC+吉西他滨组均显著减小,肝转移比例更少,同时,肿瘤组织内Ki-67阳性率显著降低而TUNEL阳性细胞比例显著增加(P<0.01)。结论抑制PHD2表达可在体内与体外降低胰腺癌肿瘤细胞的转移能力,并增强肿瘤细胞对吉他西滨的化疗敏感性。 展开更多
关键词 胰腺癌 脯氨酸羟化酶-2 肿瘤转移 吉西他滨 化疗敏感性
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缺氧诱导因子-1α及脯氨酸羟化酶2在子宫内膜腺癌中的表达意义
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作者 宫琦 侯立春 马毅兵 《当代医学》 2023年第27期143-145,共3页
目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及脯氨酸羟化酶2(PHD2)在子宫内膜腺癌中的表达意义。方法选取2019年7月至2020年6月丹东市中心医院收治的40例子宫内膜腺癌患者作为子宫内膜腺癌组,选取同期40例增殖期子宫内膜患者作为增殖期内膜组,... 目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)及脯氨酸羟化酶2(PHD2)在子宫内膜腺癌中的表达意义。方法选取2019年7月至2020年6月丹东市中心医院收治的40例子宫内膜腺癌患者作为子宫内膜腺癌组,选取同期40例增殖期子宫内膜患者作为增殖期内膜组,另选取同期40例不典型增生子宫内膜患者作为不典型增生组。3组均使用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测HIF-1α、PHD2,比较3组HIF-1α、PHD2表达,分析子宫内膜腺癌病理特征与HIF-1α、PHD2阳性表达情况。结果3组HIF-1α、PHD2阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜腺癌组HIF-1α阳性率高于不典型增生组、增殖期内膜组,且不典型增生组高于增殖期内膜组,差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜腺癌组PHD2阳性率低于不典型增生组、增殖期内膜组,且不典型增生组低于增殖期内膜组,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜腺癌患者HIF-1α、PHD2的组织学分级、临床分期、肌层浸润、淋巴结转移占比比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论HIF-1α和PHD2表达异常会影响子宫内膜腺癌患者的肌层侵润、组织学分级、临床分期,因此,在子宫内膜腺癌疾病检查、诊断和治疗具有重要意义,能为子宫内膜腺癌的诊治提供可靠依据。 展开更多
关键词 缺氧诱导因子-1Α 脯氨酸羟化酶2 子宫内膜腺癌 子宫内膜增生
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脯氨酸羟化酶2对氧诱导视网膜病变新生血管生成的影响 被引量:2
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作者 屈晓杰 王雨生 +1 位作者 张鹏 储昭节 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第6期511-515,共5页
目的观察脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)对氧诱导小鼠视网膜病变动物模型新生血管生成的影响。方法 40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,即正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组,每组各10只。后3组... 目的观察脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)对氧诱导小鼠视网膜病变动物模型新生血管生成的影响。方法 40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,即正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组,每组各10只。后3组放入动物氧舱,在氧气含量为体积分数(75±2)%的高氧环境中连续饲养5d,正常对照组于正常大气环境中饲养。300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组在结束高浓度给氧后,腹腔注射不同剂量的PHD2抑制剂(黄芩素),高氧组和正常对照组给予腹腔注射生理盐水,每天1次,连续5d。于末次注射结束后处死小鼠,Western blotting法检测视网膜中PHD2蛋白的表达,视网膜铺片法观察视网膜血管的情况,HE染色后计数突破内界膜的内皮细胞核数,免疫组织化学法检测视网膜a-SMA和VEGF蛋白的表达。结果 Western blotting显示视网膜中存在PHD2蛋白的表达,且高氧组蛋白表达量明显高于正常对照组(P=0.002),正常对照组高于300mg.kg-1、500mg.kg-1PHD2抑制剂组(P=0.004、0.001)。视网膜铺片结果显示高氧组自视盘发出的血管扩张迂曲,中周部视网膜有大量新生血管生成,近视盘周围有明显的血管无灌注区;300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组较高氧组明显改善。突破视网膜内界膜的内皮细胞核数正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组分别为(0.60±0.84)个、(39.40±5.17)个、(15.80±1.93)个和(6.30±1.57)个,4组比较差异有统计学意义(P<0.05),高氧组最多,正常对照组最少。免疫组织化学染色结果显示300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组a-SMA表达较高氧组明显增加;高氧组、300mg.kg-1及500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组的VEGF表达量均较正常对照组明显升高,300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组与高氧组比较,VEGF表达量无明显降低。结论视网膜存在PHD2的表达,抑制其表达后能有效改善高氧所致小鼠视网膜血管的异常,提示PHD2可能在其发病机制中具有一定的作用。 展开更多
关键词 视网膜新生血管 脯氨酸羟化酶2 氧诱导视网膜病变
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黄芩素对缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中脯氨酸羟化酶2表达的抑制作用 被引量:5
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作者 杨宁 路强 +2 位作者 袁梦克 张晗 崔巍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期990-996,共7页
背景 脯氨酸羟化酶2(PHD2)是缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)降解酶,能够调控缺氧诱导的新生血管形成过程中血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)等多种促血管生成因子的表达。黄芩素对PHD2有抑制作用,了解其对缺氧诱导... 背景 脯氨酸羟化酶2(PHD2)是缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)降解酶,能够调控缺氧诱导的新生血管形成过程中血管内皮生长因子(VEGF)和促红细胞生成素(EPO)等多种促血管生成因子的表达。黄芩素对PHD2有抑制作用,了解其对缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中PHD2表达的抑制作用有助于了解相关新生血管性眼病的机制及其防治。 目的 观察PHD2在缺氧诱导的视网膜神经胶质细胞中的表达变化,探讨黄芩素对PHD2过表达的抑制作用及其意义。 方法 将出生48 h以内SPF级SD乳鼠用体积分数10%水合氯醛麻醉后以颈椎脱臼法处死,分离双侧视网膜后采用组织块培养法分离培养鼠视网膜神经胶质细胞,采用兔抗羊胶质纤维酸性蛋白(GFAP)对神经胶质细胞进行鉴定。将培养的细胞分为正常对照组、CoCl2组和CoCl2+黄芩素组,其中正常对照组细胞进行常规培养,CoCl2组细胞培养液中添加200 μmol/L CoCl2以制备缺氧细胞模型,CoCl2+黄芩素组细胞培养液中添加200 μmol/L CoCl2和50 μmol/L黄芩素溶液。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞增生情况;采用免疫荧光染色法检测各组鼠视网膜神经胶质细胞中PHD2和VEGF的表达及其定位;采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中PHD2和VEGF mRNA的相对表达量;采用Western blot法定量检测各组细胞中PHD2和VEGF蛋白的表达量。 结果 各组鼠视网膜神经胶质细胞增生值(吸光度,A值)总体比较差异有统计学意义(F=132.05,P=0.00),其中CoCl2组鼠视网膜神经胶质细胞增生值明显高于正常对照组和CoCl2+黄芩素组,差异均有统计学意义(均P〈0.01)。免疫荧光检测显示,正常对照组细胞中PHD2和VEGF均呈弱表达,CoCl2组细胞中PHD2和VEGF均呈强阳性表达,CoCl2+黄芩素组细胞中PHD2和VEGF表达较CoCl2组减弱。正常对照组、CoCl2组和CoCl2+黄芩素组细胞中PHD2 mRNA相对表达量分别为0.366±0.034、0.894±0.015和0.445±0.017,PHD2蛋白相对表达量分别为131.27±2.61、140.12±4.29和133.14±2.11,VEGF mRNA相对表达量分别为1.346±0.008、3.465±0.048和2.264±0.073,VEGF蛋白相对表达量分别为532.25±19.92、601.13±10.21和537.34±5.96,组间总体比较差异均有统计学意义(PHD2:F=905.89、43.18,均P〈0.01;VEGF:F=27.13、185.79,均P〈0.01),其中CoCl2组PHD2和VEGF mRNA及蛋白相对表达量均明显高于正常对照组和CoCl2+黄芩素组,差异均有统计学意义(均P〈0.05)。 结论 体外低氧环境促进鼠视网膜神经胶质细胞增生,同时诱导视网膜神经胶质细胞中PHD2和VEGF的表达上调。黄芩素可有效抑制低氧环境下PHD2过表达引起的神经胶质细胞的增生和相关促血管生成因子的表达,PHD2有望成为缺氧性视网膜血管新生疾病的防治靶点。 展开更多
关键词 脯氨酸羟化酶2 缺氧 视网膜神经胶质细胞 血管内皮生长因子 增生 黄芩素
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电针干预后透镜诱导型近视豚鼠巩膜形态改变及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和脯氨酰羟化酶2(PHD-2)表达的变化 被引量:9
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作者 於亭 宋继科 +4 位作者 魏慧霞 田庆梅 纪海峰 毕宏生 解孝锋 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2021年第2期125-129,共5页
目的探讨电针干预后透镜诱导型近视(LIM)豚鼠巩膜形态变化及巩膜中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和脯氨酰羟化酶2(PHD-2)表达变化。方法将90只2周龄豚鼠随机分为正常对照(NC)组、LIM组和电针+透镜诱导型近视(LIM+EA)组,每组30只。NC组正常... 目的探讨电针干预后透镜诱导型近视(LIM)豚鼠巩膜形态变化及巩膜中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和脯氨酰羟化酶2(PHD-2)表达变化。方法将90只2周龄豚鼠随机分为正常对照(NC)组、LIM组和电针+透镜诱导型近视(LIM+EA)组,每组30只。NC组正常饲养,不干预;LIM组和LIM+EA组豚鼠右眼配戴-6.0 D透镜片,建立近视模型;LIM+EA组戴镜同时给予针刺合谷穴和太阳穴30 min。造模后2周和4周测量各组豚鼠的屈光度和眼轴长度,同时通过实时荧光定量PCR(q-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组豚鼠巩膜中HIF-1α和PHD-2的mRNA相对表达及蛋白含量。另外,于造模后4周利用电镜观察各组豚鼠巩膜超微结构变化。结果造模后2周和4周,与NC组(2.20±0.48)D、(1.63±0.41)D;(8.22±0.03)mm、(8.40±0.04)mm相比,LIM组(-4.23±0.43)D、(-5.88±0.49)D;(8.36±0.05)mm、(8.57±0.06)mm和LIM+EA组(-3.63±0.49)D、(-2.55±0.48)D;(8.32±0.03)mm、(8.51±0.03)mm豚鼠右眼屈光度均增加,眼轴均延长(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组豚鼠右眼屈光度均减小,眼轴延长均减慢(均为P<0.05)。电镜观察结果显示,与NC组(82.94±26.03)nm相比,LIM组(48.90±23.38)nm和LIM+EA组(62.83±21.72)nm豚鼠巩膜胶原纤维直径变小(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组巩膜胶原纤维直径变大(P<0.05)。q-PCR及ELISA检测结果表明,造模后2周和4周,与NC组相比,LIM组后极部巩膜HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均增加(均为P<0.05),PHD-2 mRNA和蛋白表达水平均下降(均为P<0.05);与LIM组相比,LIM+EA组巩膜HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均显著下降(均为P<0.05),PHD-2 mRNA和蛋白表达水平均上升(均为P<0.05)。结论电针干预近视豚鼠可影响巩膜胶原纤维直径及HIF-1α和PHD-2的表达水平,进而延缓近视的发展。 展开更多
关键词 电针 透镜诱导型近视 巩膜 缺氧诱导因子-1Α 脯氨酰羟化酶2
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2型脯氨酸羟化酶在结直肠癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 周荣斌 周杰 +3 位作者 吴双 谢赣丰 彭媛 梁后杰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期336-339,共4页
目的检测脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain 2,PHD2)在结直肠癌及癌旁肠黏膜中的表达,探讨分析其临床意义。方法应用组织芯片技术结合免疫组化法检测本校3所附属医院收治的结直肠癌患者术后149例组织标本以及相应50例癌旁肠黏膜... 目的检测脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain 2,PHD2)在结直肠癌及癌旁肠黏膜中的表达,探讨分析其临床意义。方法应用组织芯片技术结合免疫组化法检测本校3所附属医院收治的结直肠癌患者术后149例组织标本以及相应50例癌旁肠黏膜和50例结直肠癌原发及转移灶中PHD2蛋白的表达。结果 PHD2在149例结直肠癌组织中阳性表达率显著低于癌旁肠黏膜(48.9%vs 72.0%,P<0.01),并与肿瘤的分化程度、临床分期、转移等密切相关(P<0.01);在50例结直肠癌原发灶中阳性表达率高于相应转移灶(64.0%vs 46.0%,P<0.01)。结论 PHD2在结直肠癌组织中表达低于癌旁肠黏膜,在结直肠癌原发灶中表达高于相应转移灶,在结直肠癌的恶性进展中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 组织芯片 脯氨酸羟化酶
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脯氨酸羟化酶2在消化系统恶性肿瘤中的研究进展
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作者 滕霞丽 周晶 +1 位作者 周慧玲(综述) 于鸿(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第10期1112-1116,共5页
脯氨酸羟化酶2(PHD2)是脯氨酸羟化酶家族(PHDs)最重要的氧感受器,通过氧依赖性途径催化降解缺氧诱导因子(HIF),从而影响其转录活性。近年来研究发现PHD2在肿瘤发展、侵袭和转移中发挥着重要作用,因此,深入探究PHD2与肿瘤之间的关系显得... 脯氨酸羟化酶2(PHD2)是脯氨酸羟化酶家族(PHDs)最重要的氧感受器,通过氧依赖性途径催化降解缺氧诱导因子(HIF),从而影响其转录活性。近年来研究发现PHD2在肿瘤发展、侵袭和转移中发挥着重要作用,因此,深入探究PHD2与肿瘤之间的关系显得尤为重要。文章就PHD2的基本特征、与缺氧诱导因子(HIF)以及肿瘤血管生成的关系,及其在消化系统恶性肿瘤中的研究进展进行综述。 展开更多
关键词 脯氨酸羟化酶2 缺氧诱导因子 消化系统 肿瘤
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脯氨酸羟化酶2在增生性糖尿病视网膜病变增生膜中的表达 被引量:1
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作者 张晗 路强 崔巍 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期779-784,共6页
目的研究脯氨酸羟化酶2(PHD2)在增生性糖尿病视网膜病变(PDR)增生膜中的表达及其与PDR的关系.方法采用前瞻性临床对照研究设计.选取2016年6月至2017年3月于内蒙古自治区人民医院确诊为PDR的患者16例16眼,其中包括行标准三通道玻璃体切... 目的研究脯氨酸羟化酶2(PHD2)在增生性糖尿病视网膜病变(PDR)增生膜中的表达及其与PDR的关系.方法采用前瞻性临床对照研究设计.选取2016年6月至2017年3月于内蒙古自治区人民医院确诊为PDR的患者16例16眼,其中包括行标准三通道玻璃体切割手术治疗的PDR患者视网膜增生膜8例8眼和术前行雷珠单抗玻璃体腔注药的PDR患者视网膜增生膜8例8眼,另取无糖尿病患者特发性黄斑前膜8例8眼,分别作为PDR组、雷珠单抗组和对照组.苏木精-伊红染色进行组织学观察,采用免疫荧光化学染色法分别观察3个组PHD2、血管内皮生长因子(VEGF)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)的表达情况,并比较PHD2、VEGF及GFAP免疫荧光强度值.结果PDR增生膜形态具有多样性,主要由较多的新生血管、成纤维细胞样细胞以及单核巨噬细胞、中性粒细胞和淋巴细胞等构成.特发性黄斑前膜以胶质细胞为主,伴有少量纤维细胞和巨噬细胞.雷珠单抗组可见血管萎缩,仅留少量血管,血管内皮细胞和纤维细胞减少.在PDR患者增生膜中PHD2、VEGF、GFAP和CD31均呈强阳性,且PHD2与VEGF、GFAP和CD31在增生膜中共同表达,表达部位一致;且无血管区域神经胶质细胞聚集明显,GFAP蛋白表达较有血管区域明显增强;雷球单抗组患者视网膜增生膜中PHD2、VEGF、GFAP和CD31均呈弱表达;对照组中,PHD2、VEGF和GFAP仅在有细胞区域表达,且呈弱阳性,在无胶质细胞区域表达阴性.PDR组、雷珠单抗组和对照组患者增生膜PHD2荧光强度值分别为0.082±0.003、0.031±0.002和0.028±0.001,PDR组PHD2荧光强度值较雷珠单抗组和对照组均升高,差异均有统计学意义(t=14.09、15.40,P<0.001).PDR组、雷珠单抗组和对照组患者的增生膜中VEGF荧光强度值分别为0.104±0.003、0.051±0.002和0.034±0.003,PDR组较雷珠单抗组和对照组升高,雷珠单抗组较对照组升高,差异均有统计学意义(t=15.00、16.31、4.58,均P<0.001).PDR组、雷珠单抗组和对照组患者的增生膜中GFAP荧光强度值分别为0.077±0.003、0.038±0.002和0.032±0.002,PDR组GFAP荧光强度值较雷珠单抗组和对照组均升高,差异均有统计学意义(t=10.52、12.01,均P<0.001).结论PHD2与VEGF、GFAP和CD31在PDR患者增生膜中共同高表达,提示PHD2在PDR增生膜形成中起一定作用,其在形成和维持增生膜中发挥作用.雷珠单抗能明显降低PHD2表达,PHD2与VEGF之间可能存在通路关系.黄斑前膜中细胞区域PHD2呈弱表达,说明其也部分参与了特发性前膜的形成. 展开更多
关键词 糖尿病视网膜病变/增生性 脯氨酸羟化酶2 血管内皮生长因子
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PHD2和HIF-1α与子宫内膜癌临床病理参数的相关性研究
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作者 未亚兰 朱诚程 +3 位作者 张莹 丁锦 李佳嘉 倪观太 《牡丹江医学院学报》 2018年第6期1-4,共4页
目的探讨子宫内膜癌中脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain2,PHD2)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白表达与其临床病理参数的相关性。方法采用Envision法测定PHD2和HIF-1α蛋白在正常子宫内膜、子宫... 目的探讨子宫内膜癌中脯氨酸羟化酶(proline hydroxylase domain2,PHD2)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)蛋白表达与其临床病理参数的相关性。方法采用Envision法测定PHD2和HIF-1α蛋白在正常子宫内膜、子宫内膜增生症、子宫内膜癌组织中的表达。结果 PHD2阳性表达在子宫内膜癌组为32.5%,比正常子宫内膜组(100%,P<0.05)及子宫内膜增生症组(100%,P<0.05)显著低表达; HIF-1α阳性表达在子宫内膜癌组为67.5%,比正常子宫内膜组(15%,P<0.05)及子宫内膜增生症组(30%,P<0.05)显著高表达; PHD2、HIF-1α蛋白表达在子宫内膜癌FIGO分期及淋巴结转移方面有统计学差异(P<0.05)。结论 PHD2和HIF-1α表达情况可能与子宫内膜癌病程进展存在相关性。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 子宫内膜复杂性增生 子宫内膜不典型增生 PHD2 HIF-1Α
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脯氨酸羟化酶抑制剂对缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中脯氨酸羟化酶2表达的影响研究
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作者 李臻 畅叶叶 路强 《内蒙古师范大学学报(自然科学汉文版)》 CAS 2020年第2期148-155,共8页
观察在脯氨酸羟化酶抑制剂(PHI)干预下,脯氨酸羟化酶2(PHD 2)在缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中的表达变化,探讨其与眼内相关增生因子表达的关系。原代培养大鼠视网膜神经胶质细胞,鉴定后传代培养,并分为3组:正常对照组(control)、... 观察在脯氨酸羟化酶抑制剂(PHI)干预下,脯氨酸羟化酶2(PHD 2)在缺氧环境下大鼠视网膜神经胶质细胞中的表达变化,探讨其与眼内相关增生因子表达的关系。原代培养大鼠视网膜神经胶质细胞,鉴定后传代培养,并分为3组:正常对照组(control)、缺氧组(hypoxia)、干预组(intervention)。正常对照组不做特殊处理;缺氧组加入200μmol/L缺氧诱导剂氯化钴(CoCl2);干预组加入500μmol/L的脯氨酸羟化酶抑制剂。免疫荧光化学染色法观察各组PHD 2和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达,RT-PCR检测PHD 2、VEGF mRNA水平,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测各组细胞增殖活性,Annexin V-FITC鉴定各组细胞凋亡情况。对照组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF的表达比较弱,呈弱荧光染色;缺氧组视网膜神经胶质细胞中PHD 2及VEGF的表达明显增强,呈强红色荧光及强绿色荧光;干预组PHD 2及VEGF的表达明显低于缺氧组。RT-PCR分析结果表明:对照组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF mRNA都呈弱表达;缺氧组视网膜神经胶质细胞中PHD 2和VEGF mRNA表达量明显增多;干预组中PHD 2、VEGF mRNA表达量较对照组轻度增多,但较缺氧组明显减少。缺氧组视网膜神经胶质细胞的增殖活性明显高于正常对照组(P<0.001);干预组视网膜神经胶质细胞的增殖活性高于正常对照组(P=0.001);但是干预组视网膜神经胶质细胞增殖活性明显低于缺氧组(P=0.001)。干预组和对照组视网膜神经胶质细胞的凋亡明显高于缺氧组(P<0.001);干预组视网膜神经胶质细胞的凋亡高于正常对照组(P<0.001)。缺氧环境可诱导视网膜神经胶质细胞中PHD 2、VEGF mRNA的表达增高,刺激神经胶质细胞的增殖,减缓细胞凋亡;脯氨酸羟化酶抑制剂可有效抑制缺氧环境下PHD 2增高引起的神经胶质细胞的增殖和VEGF mRNA的表达。 展开更多
关键词 脯氨酸羟化酶2 脯氨酸羟化酶抑制剂 神经胶质细胞 血管内皮生长因子
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心肌缺血病人脯氨酸羟化酶2的表达及其干预HL-1缺氧损害的机制
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作者 骆元平 吴钟伟 曾垂旭 《中西医结合心脑血管病杂志》 2022年第12期2168-2173,共6页
目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)在心肌缺血病人中的表达及对心肌细胞HL-1缺氧损害的影响和相关机制。方法采集我院健康体检者和心血管科心肌缺血病人血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PHD2水平。体外培养HL-1,将细胞培养在94%N2、5%CO_... 目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)在心肌缺血病人中的表达及对心肌细胞HL-1缺氧损害的影响和相关机制。方法采集我院健康体检者和心血管科心肌缺血病人血清,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测PHD2水平。体外培养HL-1,将细胞培养在94%N2、5%CO_(2)和1%O_(2)的培养箱中构建缺氧损伤模型。分别采用四唑盐(MTT)、Transwell和流式细胞术检测细胞存活率、迁移和侵袭能力及细胞凋亡证实缺氧损伤。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测缺氧后PHD2表达;同时观察过表达PHD2对缺氧诱导的HL-1缺氧损伤的影响。采用Western Blot和ELISA分析过表达PHD2对HL-1核转录因子κB(NF-κB)信号通路相关蛋白的影响。结果相较于健康体检者,心肌缺血病人血清PHD2水平降低。相较于常氧,缺氧损伤模型HL-1存活率下降,迁移和侵袭能力下降,细胞凋亡增加,PHD2下调。过表达PHD2可抑制缺氧诱导的细胞损伤,同时抑制NF-κB信号通路相关蛋白表达。结论心肌缺血病人血清PHD2低表达,同时低氧诱导的HL-1中PHD2低表达,过表达的PHD2可能通过抑制NF-κB信号通路抑制因缺氧诱导的HL-1损伤。 展开更多
关键词 心肌缺血 脯氨酸羟化酶2 缺氧 实验研究
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六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠PHD2和HIF-1α表达的影响 被引量:8
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作者 唐群 吴华 +3 位作者 张熙 雷久士 蓝文蕖 刘春燕 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期290-296,共7页
目的观察六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠肾组织中脯氨酸羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨慢性肾衰的发病机制以及六味地黄汤防治慢性肾脏病的分子机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,六味地黄汤低剂... 目的观察六味地黄汤对慢性肾衰模型大鼠肾组织中脯氨酸羟化酶2(PHD2)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响,探讨慢性肾衰的发病机制以及六味地黄汤防治慢性肾脏病的分子机制。方法 60只SD大鼠随机分为假手术组,模型组,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组。5/6肾切除法复制慢性肾衰模型。六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组分别给予3.38 g/(kg·d)、6.75 g/(kg·d)、13.5 g/(kg·d)六味地黄汤灌胃。假手术组和模型组给予10 mL/(kg·d)生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃12周。造模12周后,检测各组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐,HE染色观察各组大鼠肾组织形态学变化,免疫组化法和RT-PCR法分别检测各组大鼠肾组织中PHD2、HIF-1α蛋白水平和基因表达。结果模型组大鼠24 h尿蛋白、血尿素氮和血肌酐较假手术组明显升高(P<0.05),六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组较模型组明显降低(P<0.05)。HE染色假手术组大鼠肾组织肾间质纤维化不明显,模型组肾间质纤维化明显,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组较模型组肾间质纤维化程度明显减轻。与假手术组比较,模型组大鼠肾组织PHD2蛋白水平和mRNA表达均明显降低(P<0.05),HIF-1α蛋白水平和mRNA表达均明显升高(P<0.05)。与模型组比较,六味地黄汤低剂量、中剂量和高剂量组大鼠肾组织中PHD2蛋白水平和mRNA表达均明显升高(P<0.05),HIF-1α蛋白水平和mRNA表达均明显降低(P<0.05),且PHD2与HIF-1αmRNA的表达呈负相关(r=-0.653,P=0.00)。结论 PHD2/HIF-1α信号途径参与肾间质纤维化,六味地黄汤可有效防治慢性肾脏病,其作用机制可能与上调PHD2、降低HIF-1α表达有关。 展开更多
关键词 六味地黄汤 慢性肾脏病 肾间质纤维化 脯氨酸羟化酶2 缺氧诱导因子-1Α 大鼠
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肝细胞癌缺氧微环境下PHD2的表达及其与血管生成的关系 被引量:5
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作者 王照红 王志明 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期1113-1117,共5页
目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)蛋白在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用。方法 (1)采用免疫组织化学S-P法,检测72例肝细胞癌组织中的PHD2表达,结合肝细胞癌临床病理和MVD资料加以分析。(2)以不同浓度二氯化钴(CoCl2)诱导体外培养微血管内皮... 目的探讨脯氨酸羟化酶2(PHD2)蛋白在肝细胞癌(HCC)血管生成中的作用。方法 (1)采用免疫组织化学S-P法,检测72例肝细胞癌组织中的PHD2表达,结合肝细胞癌临床病理和MVD资料加以分析。(2)以不同浓度二氯化钴(CoCl2)诱导体外培养微血管内皮细胞(HMEC-1)缺氧。Western-blot方法检测PHD2、HIF-1α、VEGF蛋白表达水平,基质胶内皮细胞二维成管实验检测HMEC-1细胞的成管能力。结果 PHD2在72例HCC组织中的阳性表达率22.2%(16/72),低于在癌旁肝组织中阳性表达率68.1%(49/72)。HCC组织中PHD2高表达组MVD计数(52.1±4.3)显著性低于PHD2低表达组(69.2±5.5)。CoCl2处理后HMEC-1细胞PHD2蛋白表达下调,HIF-1α蛋白降解减少,VEGF表达上调,HMEC-1细胞成管能力下降,与对照组(正常肝组织)比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧微环境下,PHD2表达水平下调,内皮细胞增殖,但细胞成管能力下降,是导致HCC瘤体血管成熟度下降,促进HCC侵袭转移的重要影响因素之一。 展开更多
关键词 肝细胞癌 微环境 脯氨酸羟化酶2 血管生成 侵袭转移
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六味地黄汤含药血清对HK-2细胞PHD2/HIF-1α信号途径的影响 被引量:1
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作者 唐群 吴华 +4 位作者 刘春燕 罗琳 易纯 徐文峰 庄高建 《北京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期60-64,75,共6页
目的以缺氧诱导的HK-2细胞为研究对象,探讨脯氨酸羟化酶2/缺氧诱导因子1α(PHD2/HIF-1α)信号途径对肾间质纤维化的影响,以及六味地黄汤含药血清干预作用。方法 40只SPF级雄性SD大鼠分为空白组和给药组,每组20只,空白组以10 m L/(kg... 目的以缺氧诱导的HK-2细胞为研究对象,探讨脯氨酸羟化酶2/缺氧诱导因子1α(PHD2/HIF-1α)信号途径对肾间质纤维化的影响,以及六味地黄汤含药血清干预作用。方法 40只SPF级雄性SD大鼠分为空白组和给药组,每组20只,空白组以10 m L/(kg·d)生理盐水,给药组以67.5 g/(kg·d)六味地黄汤灌胃连续1周,腹主动脉取血,离心后分离血清。体外培养HK-2细胞,将实验分为空白对照组(10%胎牛血清)、正常血清组(10%正常大鼠血清)、氯化钴(Co Cl2)处理组(150μmol/LCo Cl2+10%正常大鼠血清)和含药血清组(150μmol/LCo Cl2+10%六味地黄汤含药血清)。体外培养HK-2,分组处理24 h后,用Western Blot法和RT-PCR法分别检测六味地黄汤含药血清对缺氧诱导的HK-2细胞中PHD2、HIF-1α、结缔组织生长因子(CTGF)的蛋白水平和mRNA表达的影响。结果与正常血清组比较,Co Cl2处理组HK-2细胞中PHD2的蛋白水平和mRNA表达均降低(P<0.05),而HIF-1α、CTGF的蛋白水平和mRNA表达均升高(P<0.05);与Co Cl2处理组比较,含药血清组HK-2细胞中PHD2的蛋白水平和mRNA表达均升高(P<0.05),而HIF-1α、CTGF的蛋白水平和mRNA表达均降低(P<0.05)。结论 PHD2/HIF-1α信号途径参与肾间质纤维化,六味地黄汤可能通过上调PHD2的表达,促进HIF-1α的降解,后者下调CTGF的表达,从而抑制肾间质纤维化。 展开更多
关键词 HK-细胞 肾间质纤维化 脯氨酸羟化酶2 缺氧诱导因子1Α 结缔组织生长因子 六味地黄 汤含药血清 大鼠
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