一种高纯度小分子解酒护肝肽的制备

目前海洋生物活性肽在功能食品中的应用已成为研究热点。针对中西药类解酒产品不足的问题,该研究制备了一种高纯度、高活性的小分子解酒护肝肽产品。采用多酶中度水解鱿鱼蛋白,以蛋白质回收率和乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)激活率为指标。确定了最佳酶解条件为胃蛋白酶∶碱性蛋白酶∶风味蛋白酶=1∶1∶1(质量比),酶添加量为0.2%(质量分数)、料液比为1∶10(g∶mL)、反应时间3 h。在最佳酶解条件下的酶解液,其蛋白回收率为80.34%,ADH激活率为83.37%。为进一步提纯小肽并提升其功能活性,对酶解液进行精制工艺研究,采用树脂吸附疏水性肽组分,用梯度乙醇洗脱,收集液浓缩、干燥,获得淡黄色产品肽粉末。其蛋白肽纯度为95.33%,其分子质量<3000 Da的占99.96%,对ADH的酶活率为122.71%,对DPPH自由基的清除率可达92.01%。该研究制备的小肽产品在功能食品领域具有广阔的应用前景。

基于保肝降酶作用的舒肝宁注射液相对生物活性测定法的建立与生物均一性评价

目的考察舒肝宁注射液(SGN)的保肝降酶退黄作用,并基于保肝降酶作用,以谷丙转氨酶(ALT)活性抑制率为指标建立SGN相对生物活性测定法,评价其批内及批间的生物均一性。方法采用120μg·mL^(-1)脂多糖(LPS)刺激人正常肝细胞(L-O2)12 h建立体外急性肝损伤模型,利用微板法考察SGN对谷草转氨酶(AST)、ALT、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、丙二醛(MDA)含量的影响,评价其保肝降酶退黄作用,再通过考察SGN中12个主要成分(黄芩苷、黄芩素、绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、次黄嘌呤、L-亮氨酸、栀子苷、鸟苷、尿苷、腺苷、京尼平龙胆双糖苷)对上述指标的影响,筛选具有明显量效关系的成分与指标。通过可靠性检验筛选标准品和检测指标,并标定效价,按照“量反应平行线(3,3)法”计算SGN保肝降酶生物活性相对效价,并评价SGN批内和批间生物均一性。结果与Control组比较,LPS组AST、ALT活性明显增强,TBIL、DBIL、MDA含量明显升高,GSH-Px活性明显减弱;与LPS组比较,SGN-M、SGN-H组AST、ALT活性明显减弱,TBIL、DBIL、MDA含量明显降低,GSH-Px活性明显增强;SGN-L组TBIL、DBIL、MDA含量明显降低。SGN的12个成分中同时具有保肝降酶退黄作用的为黄芩苷和绿原酸,并筛选出呈剂量依赖性的指标和成分。通过可靠性检验结果选择以SGN批次(20210112)为标准品,ALT活性抑制率为检测指标,建立基于保肝降酶作用的SGN生物活性测定法。利用“量反应平行线(3,3)法”计算SGN保肝降酶生物活性相对效价,同一批次10个不同SGN(批次:20210324)保肝降酶生物效价在95.6%~111.9%;不同批次的9个不同SGN保肝降酶生物效价在95.6%~103.8%。结论SGN能减轻LPS诱导的L-O2细胞急性肝损伤,改善肝功能,降低胆红素及氧化应激水平,从而发挥保肝降酶退黄作用。SGN的12个主要成分中黄芩苷和绿原酸可以同时抑制AST、ALT活性,降低TBIL、DBIL、MDA含量,增强GSH-Px活性,是其保肝降酶退黄的主要有效成分。建立的SGN生物活性测定方法精密度高、结果可靠,可用于SGN生物学质量控制。

广西藤茶中杨梅树皮素的保肝作用研究

目的 :研究广西藤茶中杨梅树皮素的保肝作用。方法 :采用四氯化碳、D 半乳糖胺和异硫氰酸萘酯致小鼠急性肝损伤模型 ,观察杨梅树皮素对肝损伤的保护作用 ;采用小鼠单核巨噬细胞吞噬和免疫低下小鼠和溶血素试验 ,观察杨梅树皮素的免疫增强作用。结果 :杨梅树皮素能明显降低四氯化碳、D 半乳糖胺和异硫氰酸萘酯致小鼠急性肝损伤模型血清中ALT、AST活性和T BIL含量 ,减轻肝组织的变性和坏死 ;并提高单核巨噬细胞吞噬功能和溶血素含量。结论 :杨梅树皮素具有保肝降酶退黄 ,提高免疫功能作用。

异鼠李素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷的保肝降酶试验

目的 :验证异鼠李素 - 3 ,7-二 - O-β- D-葡萄糖苷的保肝降酶作用 ,考察其作为垂盆草药材质控指标的可行性。方法 :用垂盆草药材 n- Bu OH部分经过溶剂分离和色谱分离制得的异鼠李素 - 3 ,7-二 - O-β- D-葡萄糖苷 ,配成一定浓度的溶液 ,通过保肝降酶试验 (D-氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤 ) ,考察其活性。结果 :和模型组比较 ,该成分具有一定的保肝降酶活性 ,高剂量组更加明显。结论 :异鼠李素 - 3 ,7-二 - O-β-

垂盆草的现代实验和临床研究综述

垂盆草是景天科植物垂盆草的新鲜或干燥全草,本草记录不一,据考最早出自《本草纲目拾遗》。现代通过动物实验研究了垂盆草的保肝降酶、免疫调节、抗肿瘤等功效;临床实验研究了垂盆草的利胆退黄、清热解毒功效。在现代临床应用中,垂盆草分为鲜垂盆草、干垂盆草、垂盆草颗粒和垂盆草配方颗粒4种。

雄芍汤保肝降酶及抗氧化有效部位的研究

目的:研究雄芍汤抗肝纤维化的药效物质基础,分别筛选其保肝降酶及抗氧化的有效部位。方法:Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、扶正组、雄芍组、多糖组、总碱组和总苷组,采用DMN腹腔注射法制备大鼠肝纤维化模型,造模成功后灌胃给药,治疗组分别给予扶正化瘀胶囊(0.105 g·mL-1)、雄芍汤药液(1.610 g·mL-1)、雄芍汤粗多糖提取物(35.420 mg·mL-1)、雄芍汤总苷提取物(25.725 mg·mL-1)、雄芍汤总生物碱提取物(0.196 mg·mL-1),正常组与模型组灌服等量生理盐水,每日1次,疗程4周。4周后处死取材,全自动生化分析仪检测血清肝功能指标ALT、AST、TIBL和ALB;黄嘌呤氧化酶法检测血清SOD活力;DTNB还原法检测血清GSH-PX活力;TBA法检测血清MDA含量;HE染色及Masson染色观察肝组织病理学改变。结果:与模型组比较,除总碱组无显著性差异外,其余各治疗组ALT、AST及TBIL均显著降低(P<0.05或P<0.01),ALB均显著升高(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,扶正组、雄芍组和总碱组SOD及GSH-PX均显著升高(P<0.01),MDA均显著降低(P<0.05或P<0.01),多糖组、总苷组无显著性意义。结论:粗多糖部位和总苷部位为雄芍汤保肝降酶的有效部位,总生物碱部位为雄芍汤抗氧化的有效部位。

中医药保肝降酶治疗慢性乙型病毒性肝炎进展

慢性乙型肝炎患者,因HBV在体内不断复制,肝脏出现炎症坏死及其肝纤维化,导致病情进展、恶化,因此,对于ALT明显升高者或肝组织学明显炎症坏死者,在抗病毒治疗的基础上,当选用抗炎保肝药物尤其重要。中医药在慢性肝炎的保肝降酶治疗方面,积累了丰富的经验,提供了坚实的临床基础,文章从中医防治慢性乙型肝炎的理论基础、慢性乙型肝炎的辨证分型与肝功能的关系、中药复方及中药单体成分对慢性乙型肝炎的保肝降酶作用等方面,将近年来中医药对慢性乙型肝炎的保肝降酶的研究进行了综述。

基质金属蛋白酶-9抑制剂对犬体外循环肺损伤的影响

目的研究外源性基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinases-9,MMP-9)抑制剂多西环素(Doxycycline)对体外循环(CPB)引起肺损伤的保护作用。方法将20只健康杂种幼犬(体重10～12kg),采用随机数字表法随机分为对照组(n=10)和实验组(n=10);对照组:CPB前后不采取任何肺保护措施;实验组:CPB术前3d每天饲料拌食多西环素(30mg/kg体重)。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆MMP-9浓度;监测两组犬血流动力学和呼吸参数,计算术前和术后肺泡-动脉氧分压差(A-aDO2)和呼吸指数(RI);比色法测定支气管肺泡灌洗液(BALF)髓过氧化物酶(MPO)活性;考马斯亮蓝G-250法测定BALF总蛋白。CPB后,在光学显微镜和电子显微镜下观察肺组织形态学改变;计算肺组织干湿重系数(W/D)。结果两组犬血浆MMP-9浓度随CPB时间延长而显著增高,CBP150min和270min时实验组血浆中MMP-9含量较对照组显著下降(9.45±5.29ng/mlvs.18.66±5.90ng/ml,t=3.664,P=0.005;16.63±2.90ng/mlvs.26.17±5.96ng/ml,t=5.216,P=0.001)。实验组MPO活性,BALF中总蛋白浓度,肺组织W/D,术后A-aDO2和RI均较对照组均明显减低,差异有统计学意义(t=5.622,P=0.000;t=5.081,P=0.001;t=2.266,P=0.050;t=4.927,P=0.001;t=6.679,P=0.000)。肺组织病理和电子显微镜显示实验组损伤明显减轻。结论多西环素通过抑制MMP-9的分泌,降低细胞基底膜的降解,减轻肺泡白细胞浸润和肺水肿,可起到对肺的保护作用。

解酒养肝散的醒酒功效及保肝作用研究

目的:观察解酒养肝散的醒酒功效并探讨其醒酒机制及保肝作用机制。方法:醒酒药效学实验:建立醉酒小鼠模型,随机分成模型对照组、蒸馏水对照组、解酒养肝散A组,解酒养肝散B组,C组(7.5、15和10 mg/mL浓度)和海王金樽对照组,观察小鼠翻正反射消失时间和翻正反射恢复时间,计算小鼠醉倒率、醉酒潜伏期和醉酒维持时间。醒酒机制及保肝实验:建立醉酒小鼠模型,随机分成蒸馏水对照组、A组、海王金樽对照组。血清用全自动生化分析仪测定血清谷草转氨酶(Aspartate Aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(Alanine Aminotransferase,ALT),总蛋白(Total Protein,TP);肝组织经全自动生化仪测定TP、紫外可见光分光光度计检测超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、乙醇脱氢酶(Adipic Dihydrazide,ADH)、乙醛脱氢酶(Acetaldehyde Dehydrogenase,ALDH)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、还原性谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)含量。采用气相色谱仪检测血清和肝组织匀浆液中乙醇浓度变化。结果:A组的小鼠醒酒数明显增多,醉酒潜伏期延长,醉酒维持时间明显缩短,与同期模型对照组相比,具有显著性差异(P<0.05);与同期蒸馏水组相比,A组不同时间的血清ALT水平降低,能够明显提高小鼠体内的ADH和ALDH水平,降低小鼠肝组织的MDA水平,提高SOD和CAT水平,不同时间段降低醉酒小鼠的血清和肝组织乙醇含量,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:7.5 mg/mL浓度解酒养肝散能够降低醉倒率,延长醉酒潜伏期,缩短醉酒维持时间。进一步对其醒酒机制及保肝实验发现,其能够降低血清ALT,促进ADH和ALDH活力,提高SOD、CAT活力,降低MDA含量,能够明显降低血清和肝组织的乙醇含量,具有较好的解酒保肝药理作用。

浅谈片仔癀保肝作用研究

传统中成药在保肝护肝方面具有多种独特的优势,近年来在临床应用中受到越来越多的重视。本文着重就片仔癀保肝药效临床研究、化学成分以及潜在作用机制等方面的最新研究进展进行综述,并就其可能的作用机制进行探讨,为其临床合理应用提供参考。

自拟降酶护肝汤治疗急性黄疸型肝炎的效果观察

目的观察自拟降酶护肝汤对急性黄疸型肝炎的疗效。方法选取2010年1月-2012年12月万江医院收住院的52例急性黄疸型肝炎患者，随机分为观察组和对照组，观察组给予自拟护肝降酶汤治疗，对照组给予茵栀黄口服液治疗，观察两组患者治疗前后总胆红素（TBiL）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的变化及不良反应发生率。结果两组患者的TBiL、ALT治疗后坷明显下降，且观察组下降水平优于对照组，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组患者无一例不良反应发生。结论自拟降酶护肝汤治疗急性黄疸型肝炎的临床效果良好，不良反应发生率低。

中药离子导入联合常规治疗肝郁脾虚慢性乙型病毒性肝炎随机平行对照研究

[目的]观察中药离子导入联合常规治疗肝郁脾虚慢性乙型病毒性肝炎疗效。[方法]使用随机平行对照方法,将60例住院和门诊患者按就诊顺序编号简单随机分为两组。对照组30例抗病毒、护肝降酶、中药对症等常规治疗。治疗组30例肝病治疗仪中药离子导入。选穴:阳陵泉、足三里、阴陵泉、阿是穴、肝俞、期门、章门;离子导入:柴胡、白术各150g,水煎350m L,放入烧杯中,通过电热恒温水箱加热至100℃浓缩成300m L,10m L/次,用2×2cm纱布浸取药汁贴于肝病治疗仪电极板上,嘱患者平卧位或坐位,照上述穴位放置,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三个频率交替使用,以Ⅰ频为主,30min/次,1次/d,6次/周;常规治疗同对照组。连续治疗4周为1疗程。观测临床症状、肝功能指标(ALT、AST、TBIL)、症状积分、不良反应。治疗1疗程,判定疗效。[结果]治疗组痊愈7例,有效21例,无效2例,总有效率93.33%。对照组痊愈4例,有效20例,无效5例,总有效率80.00%。治疗组疗效优于对照组(P<0.05)。临床症状积分、肝功能指标(ALT、AST、TBIL)两组均有改善(P<0.01),治疗组改善优于对照组(P<0.05)。[结论]中药离子导入联合常规治疗肝郁脾虚型慢性乙型病毒性肝炎,疗效满意,无严重不良反应,值得推广。

复方丹参注射液退黄降酶保肝作用的实验研究

本实验主要研究复方丹参注射液的退黄降酶保肝作用。采用四氯化碳(CCl4)、D-半乳糖胺(D-Gla)致小鼠急性肝损伤模型,观察复方丹参注射液对肝损伤的保护作用;采用异硫氰酸萘酯(ANIT)致小鼠急性黄疸模型,观察复方丹参注射液对急性黄疸的退黄降酶作用。通过以上实验可以得出复方丹参注射液能明显降低CCl4和D-Gla致小鼠急性肝损伤模型血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和总胆红素(T-BIL)含量;复方丹参注射液能明显降低ANIT致小鼠急性黄疸模型血清中ALT、AST、T-BIL和丙二醛(MDA)含量,升高超氧化物歧化酶(SOD)活性。综上所述,复方丹参注射液具有退黄降酶保肝作用,其机制可能与抗氧化作用有关。

小儿非肝炎病毒性肝损害的临床特点及治疗分析

目的探讨小儿非肝炎病毒性肝损害的临床特点及治疗方法。方法选取2017年12月至2020年12月梅州市第二中医医院儿科收治的210例非肝炎病毒性肝损害儿童的临床资料,通过回顾性分析得出该病的临床特点,总结治疗方法和疗效。结果引起患儿非肝炎病毒性肝损害的常见原发病是呼吸道感染(83例,39.52%)、腹泻病(51例,24.29%)和传染性单核细胞增多症(32例,15.24%);患儿的主要临床症状为发热(130例,61.90%)、纳差(98例,46.67%)、腹痛腹泻(67例,31.90%);患儿主要体征为扁桃体肿大(78例,37.14%)、淋巴结肿大(68例,32.38%)、皮疹(53例,25.24%)。患儿的丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的异常发生率从治疗前的94.29%和88.57%降至9.05%和7.14%;患儿的ALT和AST水平从治疗前的(345.68±35.77)IU/L和(285.68±36.92)IU/L降至治疗后的(146.28±25.36)IU/L和(94.18±11.21)IU/L,差异有统计学意义(P<0.05)。结论儿童非肝炎病毒性肝损害的临床症状常常被忽视,需要引起医护人员和家长的重视,对于这类患儿需同时进行降酶护肝和原发病治疗。