悬浮细胞再生表达外壳蛋白的转基因Indica水稻对水稻条纹病毒的抗病性(英文)

合成、克隆了水稻条纹病毒中国株的外壳蛋白基因并进行了序列分析，由Indica水稻成熟胚的愈伤组织形成胚性运浮细胞。用含有CP基因的pROK2表达载体的DNA包被1.09μm直径钨粉颗粒轰击培养细胞。被轰击的培养物在含有G418（40mg／mL，）的培养基中进行选择培养，由对G418抵抗的愈伤组织中获得10株再生株。用32P－dCTP标记的CP基因作为探针，以Southernblot测定其转化特性。由抗病的和对照的植株抽提基因组DNA用EcoRI和BamHI进行酶切，其中两个植株显示出0.6kh和0.7kb两条条交带．其大小与CP基因相对应。Westernblot和ELISA测定进步证明CP（32kDa）在转基因水稻中表达。16株转基因植株和100株对照植株用带毒的叶蝉接种，接种病毒后24d只有37.5％的CP转基因植株产生病毒症状，而对照植株为96％。进一步证明转基因水稻植株具有对RSV的抗病性。转基因植株T1代CP的表达分离比例为3.6:1。

氮素水平对籼粳杂交稻产量和贮藏蛋白的影响

氮素对稻米蛋白质含量的影响研究颇广,但籼粳杂交稻强弱势粒蛋白组分的积累动态、蛋白质分布及其对氮素的响应鲜有报道。以两个籼粳杂交稻(甬优12和甬优17)为材料,设置4个氮肥水平,即N0(不施氮)、低氮(100 kg·hm^(-2))、中氮(200 kg·hm^(-2))和高氮(300 kg·hm^(-2)),比较了产量、粒型、强弱势粒干物质积累与贮藏蛋白的积累特征。结果显示,施氮显著提高两品种的产量以及蛋白质含量,但品种间对氮素响应存在差异。甬优12在低氮下就能获得较高产量,且其蛋白质积累对氮素响应也较稳定,能实现高产优质的平衡。低氮对粒型无显著影响,高氮显著降低长宽比,导致粒重轻微下降。醇溶蛋白和谷蛋白积累过程存在此起彼伏的现象,从而维持总蛋白的相对平衡。弱势粒蛋白质含量高于强势粒,但因其粒重小导致总积累量仍然低于强势粒。贮藏蛋白主要富集在籽粒外层胚乳中,甬优17对氮素响应较甬优12更敏感。研究结果可为籼粳杂交稻的高产优质栽培技术提供理论依据。

脱除不同溶解性内源蛋白质对早籼米粉理化性质的影响

为通过利用内源蛋白质调控早籼米粉理化性质提高其制品品质,本文研究脱除不同溶解性内源蛋白质(清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白)对早籼米粉溶解度、膨胀度、成糊特性及其糊化后水分结合状态、流变学特性和冻融稳定性的影响。结果表明,脱除球蛋白和谷蛋白可提高早籼米粉的溶解度,而脱除醇溶蛋白和谷蛋白均可在高温下提高其膨胀度。脱除清蛋白使早籼米粉成糊的峰值粘度、终值粘度、崩解值和回生值分别降低16%、21%、50%和43%;脱除球蛋白可提高其糊化温度并降低其峰值粘度,脱除醇溶蛋白则相反;脱除谷蛋白使其峰值粘度和终值粘度分别降低22%和12%,并使其崩解值和回生值分别提高49%和53%。脱除谷蛋白使早籼米粉糊化后的弱结合水含量降低14%;脱除球蛋白和谷蛋白均可提高其糊化后与水结合的强度,脱除醇溶蛋白则相反。脱除醇溶蛋白使早籼米粉糊化后的似固状态增强20%;脱除球蛋白和谷蛋白均可降低其糊化后的弹性,脱除醇溶蛋白则相反。脱除球蛋白和谷蛋白使早籼米粉糊化后的冻融稳定性分别降低121%和56%。该研究工作为利用不同溶解性内源蛋白质提高早籼米粉制品品质提供了重要的参考依据。

碱提残余蛋白对籼米糊化特性的影响

通过碱处理籼米粉(蛋白含量为7.85%)分离得到蛋白含量分别为2.36%,4.23%,0.38%的籼米淀粉、黄淀粉和白淀粉,并对3种淀粉的糊化与结构特性进行研究。RVA分析结果表明,籼米粉的糊化峰值粘度、热糊粘度和最终粘度均极显著低于籼米淀粉、黄淀粉与白淀粉(P<0.01),与DSC对样品糊化温度的分析结果一致;RVA分析发现籼米淀粉和黄淀粉的粘度值没有显著差异(P>0.05),而DSC结果表明黄淀粉和白淀粉的糊化温度最为接近。对样品的结构进行分析发现:碱处理籼米粉后3种淀粉的透光率均降低;平均链长白淀粉最长、籼米粉最短,聚合度白淀粉最大、籼米粉最小,黄淀粉和籼米淀粉的聚合度和直、支链淀粉的链长接近;蛋白亚基籼米粉和籼米淀粉主要含60,33,22,13ku亚基,黄淀粉主要含60,22,13ku亚基,白淀粉中主要含60,33ku亚基。显微结构分析发现不同的淀粉中,存在少量的蛋白质和纤维素。说明淀粉以外,蛋白质的含量与组成及其与纤维素的相互作用对籼米粉的糊化特性也有一定的影响。

蛋白含量对早籼米粉的微观结构和功能特性的影响

本文采用数学方程拟合的方法制备出了不同蛋白含量的早籼米粉,并研究蛋白含量对籼米粉的糊化、长期回生性质、微观结构、结晶结构和凝胶强度的影响。结果表明:蛋白含量越低,籼米粉表面越光滑,糊化后的凝胶网络结构聚合也越紧密。随着蛋白含量减少,早籼米粉长期回生后的热焓值逐渐降低,表明蛋白含量减少可延缓回生。籼米粉的凝胶强度也发生改变,回复力、咀嚼性和硬度都增大,而胶粘性减小。并且,不同蛋白含量籼米粉样品的X-射线衍射图均显示为A型结晶,在15.17°有一个峰,在17.17°和18.14°处为一个双峰,在23.32°处又有一个单峰;结晶度也相差不大,分别为24.26%、21.79%、19.91%、21.45%、18.73%和21.74%,可见,蛋白含量对该籼米粉的结晶结构影响不显著(p>0.05)。从以上结果分析可推测,蛋白含量和籼米粉原料的相关性能性质确实存在密切的联系。

高蛋白华03早籼新品系的研究

高蛋白华03早籼新品系是在1978～1988年,应用花培、化诱生物技术结合常规杂交育种方法,以IR_8/二九青F_2代优穗为花培起始材料培育成的。华03比推广品种广陆矮4号早熟3～5天,广泛适应于北纬23.0～32.0°,东经107～120°范围的湖北、湖南、江西、广西等地。1985～1988在江西、湖北等地大田试种结果,平均亩产稻谷400公斤以上,比当地对照品种增产6～10%,并具有较好的适口性、精米率和营养品质。它的突出特点是稻米蛋白质含量特别高,五年先后经中国农科院测试分析中心等单位分析不同产地华03试种稻米样品,其蛋白质含量平均达糙米干重的13.72%,八种必需氨基酸有六种超过联合国粮农组织和世界卫生组织(FAO/WHO)1973年提出的理想蛋白质的标准。

酶法制取早籼米浓缩蛋白

以早籼米为原料,采用高温α-淀粉酶酶解工艺,制取浓缩蛋白。实验得到的最佳工艺条件是:高温α-淀粉酶6ml/100g(米粉)、固液比1∶4、酶解温度95℃、酶解时间1h。在此工艺条件下制取的早籼米浓缩蛋白纯度达82.41%,提取率达94.69%,比已有的同类方法制取的蛋白纯度75.26%、提取率78.95%分别提高了7.15%、15.74%。聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白质分子量的分析结果证实,高温酶解并没有引发大的蛋白质聚合;氨基酸组成也没有明显的变化,表明酶法是制取早籼米浓缩蛋白的一种较为优越的方法。

早籼米制备大米蛋白和酒精的联产工艺研究

该文以早籼米为原料,采用碱法提取大米蛋白并利用残余淀粉发酵制备酒精。通过研究碱液浓度、提取温度、料液比和时间对大米蛋白提取的影响,确定了提取大米蛋白的较佳工艺条件为:碱液浓度0.05mol/L、提取温度30℃、料液比1∶4、提取时间2h。此条件下提取的大米蛋白纯度为94.9%,提取率为52.4%。残余淀粉中添加25%的玉米粉有较好的发酵效果:发酵时间45h,酒精度为12.78%,残余还原糖为0.13%。

早籼稻米的蛋白质含量及其氨基酸组成

分析了在早季和晚季种植的１８个早籼品种（组合）的精米蛋白质含量及其氨基酸组成．结果表明，稻米蛋白质含量及其氨基酸组成与栽培品种和栽植季节有关，早季略高于晚季；稻米蛋白质普遍缺乏赖氨酸和苏氨酸，并被分别作为稻米的第１和第２限制性氨基酸；各种氨基酸含量的高低顺序在不同品种中基本相似，均以谷氨酸、亮氨酸较高，色氨酸、蛋氨酸较低；蛋白质与氨基酸总量、必需氨基酸总量及天冬氨酸、谷氨酸、丝氨酸、精氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸等呈显著和极显著正相关，而与赖氨酸、色氨酸呈负相关．但只有赖氨酸达显著水准；与其他８种氨基酸呈正相关，但不显著．

江苏省中籼水稻品种演进过程中米质的变化

以江苏省近60年来各阶段具有代表性的13个中熟籼稻品种(含杂交稻组合)为材料,依据品种种植年代结合株型特点将其分为早期高秆、矮秆、半矮秆常规稻、半矮秆杂交稻和超级稻5个类型,研究了品种演进过程中米质的变化。结果表明,稻米的碾磨品质(糙米率、精米率和整精米率)在同一类品种间有较大差异,在品种演进过程中无明显变化。与早期品种相比,现代品种(半矮秆杂交稻和超级稻)稻米的垩白度显著降低,崩解值变大,消减值变小,稻米中的清蛋白、谷蛋白、赖氨酸、甘氨酸和精氨酸含量显著增加,醇溶蛋白含量显著降低。随着品种演进,产量逐步提高,其原因主要是总颖花量的增加及每穗粒数的显著增多。说明中籼水稻品种演进过程中,米质和产量协同提高。

利用RFP标记进行水稻籼粳杂种偏分离的遗传分析

为了研究水稻籼粳杂种偏分离的遗传基础,用转化红色荧光蛋白(RFP)的7个粳稻株系与籼稻杂交,以整合在不同基因组位点的RFP为可视遗传标记,对F1花粉及F2植株进行遗传分析。根据‘7F5’转基因系的研究结果,在粳稻‘日本晴’和籼稻‘9311’杂交的遗传背景中,水稻基因组chr02:33465170位置附近存在一个花粉偏分离位点。‘9A2’转基因系组配的籼粳杂种产生1∶1(RFP+∶RFP-)比例的花粉,并且其F2植株群体发生偏分离,说明相应RFP位点(chr04:29587748)附近有一个控制F2植株偏分离的连锁位点,该位点的遗传机制与F1的花粉比例无关。RFP标记提高了籼粳杂种花粉及后代植株的研究效率,为探索偏分离遗传机理提供了新的研究手段。

水稻广亲和与非广亲和品种蛋白质的比较研究

本文对水稻广亲和与非广亲和品种种子蛋白质组分进行了单向和双向电泳分析,获得了较清晰而稳定的结果。发现籼稻和粳稻亚种间电泳图谱有明显差异,而广亲和与非广亲和品种间蛋白组分未发现规律性的差异。又用SDS—PAGE方法比较了广亲和与非广亲和品种水稻叶片,花药的蛋白组分,发现4个广亲和品种水稻花药蛋白质中均有一条共同的特征带。

高温对早籼稻花后籽粒氮代谢关键酶活性及蛋白质含量的影响

为探讨高温对不同早籼稻品种(食用稻株两优611和饲用稻湘早籼24号)开花后籽粒中氮代谢关键酶活性及蛋白质含量的影响,利用人工气候室在籽粒灌浆成熟期进行高温(昼/夜温度为34℃/29℃)和适温(昼/夜温度为25℃/22℃)处理,光照13 h/d,对2个早籼稻品种灌浆成熟期籽粒重、籽粒中蛋白质含量及谷氨酰胺合成酶(GS)和谷氨酸合成酶(GOGAT)活性的变化进行了研究。结果表明,供试2个早籼稻品种花后在高温下籽粒增重快,增重持续时间短,成熟后粒重较适温处理低;蛋白质含量较适温处理高;灌浆过程中GS和GOGAT活性先升后降,均在开花后10 d出现峰值。适温下籽粒增重慢,持续时间长,粒重高于高温处理;花后GS和GOGAT活性呈缓慢下降趋势。花后高温对籽粒蛋白质含量的影响因不同品种而异,高温条件下湘早籼24号花后25 d籽粒中蛋白质含量比适温条件下增加4.45 mg/g,株两优611增加2.23 mg/g。以上结果说明,灌浆成熟期高温有利于提高早籼稻尤其是饲用早籼稻籽粒氮代谢关键酶活性及蛋白质含量。在生产中选择适宜的播种期,使籽粒灌浆成熟期处于适宜高温度条件下,有利于提高早籼稻稻米蛋白质含量。

籼稻杂交亲本与其F1代胚乳蛋白最高营养pI范围内组分之量变及种植季节对其影响

以华南地区7个早籼品种及其所配12对正反交组合F1代为材料，在对它们胚乳全蛋白进行等电聚焦-聚丙烯酰胺凝胶电泳（Isoelectrofocusing-polyacrylamidIEF-PAGE）分离定量基础上，确定最高营养pl（等电点）范围蛋白组分之比率；用统计学方法分析其变动与杂交方式及种植季节的关系。结果表明，无论所试材料遗传背景如何，它们的IEF－PAGE图谱均具有十分相似的特征；最高营养pl范围组分含量比率，正交与反交无显著差异，而早晚季间差异显著。

几个早籼新品种（组合）的饲用前景分析

通过５个不同生态点的品比试验，分析了５个早籼新品种（组合）的丰产性、稳产性和生育期，结合田间抗性以及室内测定的出糙率、糙米粗蛋白质和氨基酸含量，提出近期内适于作饲料稻开发的早籼良种为威优５６。

优质籼稻剑叶SPAD值与稻米品质相关性研究

【目的】为揭示优质籼稻关键生育时期剑叶SPAD值与稻米品质性状间的关系,为今后的优质籼稻育种和生产提供理论依据。【方法】以优质籼稻美香占2号、黄华占和五山丝苗等12个品种(系)为研究材料,测定各品种(系)的稻米品质性状、蒸煮食味品质、淀粉RVA谱和始穗期、齐穗期、乳熟期、蜡熟期、黄熟期的剑叶SPAD值,并对5个时期剑叶SPAD值与品质性状进行相关性分析。【结果】籼稻蜡熟期和黄熟期剑叶SPAD值与稻米食味值均呈极显著正相关,与稻米蛋白质含量均呈极显著负相关,与稻米淀粉峰值黏度和崩解值呈显著或极显著正相关。【结论】籼稻黄熟期剑叶SPAD值与稻米食味值和蛋白质含量的相关性比蜡熟期高。黄熟期剑叶SPAD值越高,稻米蛋白质含量越低,食味品质越好。通过黄熟期剑叶SPAD值可以预测籼稻食味值和蛋白质含量。黄熟期剑叶SPAD值(x)与稻米食味值(y)的直线拟合方程为y=0.0901x+65.76,决定系数R~2=0.687;与蛋白质含量(y)的直线拟合方程为y=-0.098x+9.217,决定系数R~2=0.602。

不同籼稻品种的矮生性与内源ABA水平及其结合蛋白的关系

试验研究了内源脱落酸及其结合蛋白与含有不同矮秆主基因的籼稻矮生性状的关系。结果表明：籼稻的矮生性也受内源ＡＢＡ及其结合蛋白协同调控。矮秆品种幼苗内源ＡＢＡ及其幼芽膜上ＡＢＡ结合蛋白水平显著高于高秆品种，且含有强矮化效应的ｓｄ－ｇ基因的新桂矮、双矮的内源ＡＢＡ及其结合蛋白水平又明显高于含ｓｄ－１半矮秆基因的广场矮。外源ＡＢＡ能显著抑制籼稻幼苗伸长，苗高下降率与ＡＢＡ结合蛋白水平有一定的关系，且矮秆品种的苗高下降值与内源ＡＢＡ水平有关。

大米蛋白质和脂肪含量对鲜湿米粉品质的影响

通过对15种籼米原料蛋白质和脂肪含量的测定,分析了其与鲜湿米粉各项品质指标的相关性,并以与蛋白质和脂肪含量显著相关的鲜湿米粉品质指标作因变量,蛋白质含量和脂肪含量作自变量,得到相对应的标准化回归系数。结果表明:大米蛋白质含量与鲜湿米粉的口感、感官评分、硬度、黏性、咀嚼性呈显著正相关;与内聚性、弹性、回复性呈显著负相关;大米蛋白质含量对鲜湿米粉各项品质指标的作用大小依次为硬度>黏性>咀嚼性>总感官评分>口感>弹性>内聚性>回复性;大米脂肪含量与鲜湿米粉的口感、感官评分、硬度、咀嚼性呈显著正相关,与内聚性、弹性、回复性呈显著负相关;大米脂肪含量对鲜湿米粉各项品质指标的作用大小依次为硬度>黏性>口感>总感官评分>弹性>内聚性>回复性。

高蛋白香稻不育系绵香3A的选育与利用

绵香3A是绵阳市农业科学研究所以新香A为母本、大粒B香/改B的F2代优良单株为父本测交,经多代择优回交转育而成的野败不育胞质高蛋白三系香稻不育系。该不育系育性稳定,农艺性状优良,蛋白质含量高达15.5%,配合力强,所配组合产量高、米饭香味浓郁。绵香3A于2003年8月通过四川省技术鉴定,配制的组合绵香3优725于2005年3月通过陕西省农作物品种审定委员会审定。

碎籼米蛋白质中性蛋白酶酶法提取工艺优化

为提高碎籼米蛋白质提取率,在析因设计和爬陡坡实验基础上,利用中心组合响应面优化技术对碎籼米蛋白质中性蛋白酶酶法提取工艺进行了优化分析,建立了碎籼米蛋白质酶法提取工艺二阶多项式非线性回归方程和数值模型,验证了模型精准度并分析了加酶量(X_1)、酶解时间(X_2)和固液比(X_3)对蛋白质提取率的影响规律,以蛋白质提取率和蛋白质纯度为评价指标。优化方案为加酶量0.98%,固液比1∶10.20,酶解时间74.4 min,pH7.0和50℃。在优化条件下蛋白质提取率为89.82%±1.06%(n=3),与模型预测值91.23%基本吻合,偏差为-1.55%,所提取大米蛋白质纯度为81.02%。