口服银耳多糖对自然衰老小鼠皮肤的改善作用及机制实验研究

目的:探讨口服银耳多糖(TFPS)对自然衰老小鼠皮肤的改善作用及可能机制。方法:将75只12月龄雌性KM小鼠随机分成衰老模型组(M组)、TP-100组[给予100 mg/(kg·d)TFPS]、TP-200组[给予200 mg/(kg·d)TFPS]、TP-400组[给予400 mg/(kg·d)TFPS]和透明质酸(HA)组[200 mg/(kg·d)],每组15只。每周在实验组小鼠饮水中加入不同剂量TFPS和HA,干预12周。另取15只2月龄雌性KM小鼠作为年轻对照组(Y组)。干预结束后,取小鼠背部皮肤,检测小鼠皮肤理化特性、氧化应激指标[过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]、内源性组分[HA、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)]及胶原降解指标[基质金属蛋白酶(MMP)-1、MMP-3、MMP-9]。结果:与Y组比较,M组皮肤水分含量下降(P<0.05);与M组比较,HA组和TFPS各剂量组皮肤水分含量升高(均P<0.05)。与Y组比较,M组皮肤重量下降(P<0.05);与M组比较,HA组和TP-400组皮肤重量升高(均P<0.05)。与Y组比较,M组皮肤GSH-Px、CAT和T-AOC水平下降(均P<0.05)。与M组比较,HA组、TP-100组和TP-200组皮肤GSH-Px升高,TP-400组皮肤CAT水平升高,HA组和TFPS各剂量组皮肤T-AOC升高(均P<0.05)。与Y组比较,M组皮肤ColⅠ、ColⅢ、HA含量下降(均P<0.05)。与M组比较,TP-100和TP-400组皮肤ColⅠ含量升高,HA组和TFPS各剂量组皮肤ColⅢ含量升高,TP-400组皮肤HA含量升高(均P<0.05)。与Y组比较,M组皮肤MMP-3和MMP-9含量升高(均P<0.05)。TFPS各剂量组和HA组皮肤MMP-3和MMP-9含量与M组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。各组皮肤MMP-1含量比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:口服TFPS能够延缓小鼠皮肤自然衰老,其机制可能是通过增强小鼠皮肤抗氧化酶活性减少氧自由基产生来抑制皮肤MMP活性,从而减少皮肤胶原蛋白的流失。

乌贼皮胶原蛋白的提取及结构表征

为了充分利用乌贼加工废弃物,分析了乌贼皮的基本组成成分,优化了从乌贼皮中提取胶原蛋白的工艺条件,并利用SDS-PAGE垂直电泳、紫外扫描和傅里叶变换红外光谱对所提取的胶原蛋白进行了结构表征。结果表明,乌贼皮中含有大量胶原蛋白,可作为胶原蛋白来源的补充。采用酸酶复合提取胶原蛋白的最佳条件为:酒石酸浓度为0.1 mol/L,胃蛋白酶添加量为1400 U/g,料液比为1∶20(m∶V,原料),4℃提取18 h,提取率为12.08%。SDS-PAGE垂直电泳、紫外扫描和傅里叶变换红外光谱的结果表明,采用酸酶复合法从乌贼皮中提取的胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白,保持了完整的三螺旋结构。

有机酸提取草鱼皮胶原蛋白的工艺研究

[目的]研究草鱼皮基本成分及鱼皮胶原蛋白的提取工艺。[方法]通过正交试验确定有机酸提取草鱼胶原蛋白的最佳提取工艺条件,并对所提取的胶原蛋白进行紫外光谱分析和氨基酸组成分析。[结果]结果表明,采用0.5 mol/L的柠檬酸,料液比为1∶10,溶胀时间为24 h时,可充分提取草鱼皮中的胶原蛋白,提取率可达92.88%。[结论]该研究可为开发草鱼的附产物提供科研依据。

有机酸提取鮰鱼皮胶原蛋白的工艺研究

采用酸法对鮰鱼皮中胶原蛋白进行提取,对提取胶原蛋白过程中酸的种类、酸的浓度、固液比、提取时间和提取温度对胶原蛋白提取率的影响进行研究。结果表明,酸法提取鮰鱼皮中胶原蛋白的最佳工艺为:0.5mol/L的醋酸作为浸提剂,采用1:50(m:V)的固液比,在15℃下提取72h,提取率最高为62.05%。同时,测定了鮰鱼皮中胶原蛋白的氨基酸组成。

杜仲叶饲料添加剂对鸡肉及鸡皮中胶原蛋白含量的影响

目的：探讨杜仲叶饲料对鸡肉及鸡皮中胶原蛋白含量的影响。方法：采用HPLC-ELSD法,色谱柱：Thermo Hypersil Gold C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;体积分数为0.05%醋酸溶液-乙腈（96∶4）为流动相;柱温为15℃;流速为0.1 mL/min;蒸发光散射检测器漂移管温度40℃,气流压强3.5 Bar。结果：羟脯氨酸的线性范围为0.562~6.744μg（r=0.999 4）,平均加样回收率为97.04%,RSD为2.35%（n=6）。结论：用杜仲叶作为饲料添加剂喂养鸡可增加鸡皮中胶原蛋白的含量。

白头翁皂苷酶解产物促进皮肤纤维芽细胞的胶原蛋白合成

天然存在的白头翁皂苷不利于人体吸收,且具有溶血性。研究了白头翁皂苷的4种低糖基酶解产物对皮肤纤维芽细胞中胶原蛋白合成的影响。结果显示,白头翁皂苷酶解产物明显提高了纤维芽细胞的胶原蛋白含量。经酶转化后的低糖基白头翁皂苷既有利于人体吸收又具有良好的生理活性。人体皮肤试用初步试验证明,含白头翁皂苷酶解产物的化妆品没有副作用。

制备金枪鱼皮胶原蛋白肽的预处理工艺研究

对金枪鱼皮脱脂和预处理的工艺进行研究,以制备金枪鱼皮胶原蛋白肽。试验结果表明,金枪鱼皮脱脂和预处理的最佳工艺:金枪鱼皮与乙醚以13(W/V)的比例浸泡脱脂72h,乙醚溶剂换液2次后,脂肪残留率为0.12%;脱脂金枪鱼皮与0.25mol/L NaOH溶液以130(W/V)的比例在4℃下脱杂蛋白3h,得到纯度为94.87%的胶原蛋白。再将脱杂金枪鱼皮在60℃热处理15min,肽得率达27.36%。

耳垂瘢痕疙瘩的综合治疗

目的为耳垂瘢痕疙瘩的治疗提供一种简单易行的方法。方法对12例耳垂瘢痕疙瘩患者采用局部瘢痕皮瓣恢复耳垂正常外形及剩余瘢痕内注射曲安奈德,胶原蛋白敷贴覆盖创面,弹性绷带加压包扎的方法治疗耳垂瘢痕疙瘩。结果临床应用12例,20个耳垂,随访6～24个月,取得满意疗效。结论本方法简单可行且效果良好。

禽源性皮胶原蛋白的提取及水解多肽的制备

以禽类皮肤组织为原料 ,经过酸液预处理 ,热水抽提法提取胶原蛋白 ,并通过酸法水解、有机溶剂沉淀分离、干燥等工艺过程 ,制备胶原水解多肽。所得成品的多肽平均分子质量 7.7kDa,收率为原料湿重的 3 .5 %～7.0 % ,水溶性良好 ,含氮量达 1 6% ,氨基酸含量达 84% (羟脯氨酸含量未计 ) ,重金属含量小于 1 0mg/kg。文中还对禽源性皮胶原蛋白的提取原理和影响水解过程的因素 ,进行了分析。

复合培养人工皮肤的细胞生物学规律

目的:探讨复合培养人工皮肤构建过程中的细胞生物学规律。方法:应用组织工程学技术制备人工皮肤,计算收缩指数,3HTdR掺入法测定DNA合成能力,3H脯氨酸掺入法测定培养人工皮肤胶原蛋白合成能力。结果:培养12d之内,人工皮肤的收缩指数只有5%左右;14d后开始出现较大的同心圆收缩,收缩指数14%～27%;23d后收缩指数维持在30%左右。3HTdR掺入率及3H脯氨酸掺入率随着培养时间的延长而逐渐升高。结论:复合培养人工皮肤增殖活跃,收缩不明显,具有合成细胞外基质的能力。

秘鲁鱿鱼皮酸溶性胶原蛋白提取工艺优化及其特性

以秘鲁鱿鱼皮为原料,通过单因素试验及响应面优化法得到秘鲁鱿鱼皮酸溶性胶原蛋白(acid soluble collagen,ASC)最佳提取工艺,并对ASC的理化特性进行研究。结果表明:最佳提取工艺为在4℃条件下,冰醋酸浓度0.47 mol/L、液料比24.5 mL/g,浸泡43 h后,ASC提取率为31.76%;紫外全波长扫描结果表明,所得ASC在231 nm波长处有最大吸收峰,符合Ⅰ型胶原蛋白特征;凝胶电泳分析表明,提取的ASC含有α1、α2和β链;拉曼光谱分析表明,所得ASC结构完整,三螺旋结构未受到破坏;ASC的相变温度为50.07℃。

PEF协同酶提取猪皮蛋白工艺条件的研究

研究高压脉冲电场(PEF)对枯草杆菌中性蛋白酶提取猪皮胶原蛋白的影响及提取的工艺条件。首先考查高压脉冲电场强度、脉冲数、酶用量、酶解时间等因素对生猪皮胶原蛋白提取效果的影响,然后以此为依据采用正交法优化提取条件。试验结果为,经高压脉冲电场处理的猪皮,其胶原蛋白的溶出率远高于未经高压脉冲电场处理的猪皮,而且酶解所用的时间短。在料液比1∶10(g/mL)、温度40℃、pH=6.5、酶用量10.0μkat/g、电场强度25 kV/cm、脉冲数40次、酶提时间30 min等条件下,胶原蛋白溶出率可达84.2%。

酸解提取胶原的研究

以新鲜猪皮为原料,采用有机溶剂无水乙醇、异丙醇两部法除去碎猪皮液的脂肪,再用二氯甲烷抽提,完全去除碎猪皮液中的脂肪,然后用盐酸水解的方法提取胶原.在单因素实验的基础上,通过正交实验确定胶原蛋白提取的最佳条件为超声时间2h、盐酸的浓度10%、温度30℃、液比1∶3.5,在此条件下的胶原纯度达95.45%.红外光谱测试显示,胶原蛋白具有三股螺旋结构.

乌贼皮胶原蛋白特性与抗氧化能力研究

为提高乌贼综合利用率,采用乌贼皮为主要原料,对胃蛋白酶和酒石酸复合提取胶原蛋白的特性与抗氧化性进行综合研究。研究表明:所提取的乌贼皮胶原蛋白溶解性受pH和Na Cl浓度影响显著,pH为5时溶解度最小,降低46%;Na Cl浓度由0 mol/L增至1.2 mol/L,溶解度逐渐降低80%。黏度受样品浓度、pH、离子强度、贮存时间影响明显,随着样品浓度的增高,黏度逐渐增大;同一浓度,在pH3处黏度取得最大值;随着Na Cl浓度的增高,黏度逐渐降低;贮存24 h^48 h,黏度保持最大。抗氧化能力随胶原样品浓度的增加呈上升趋势,DPPH清除率在5 mg/m L时达到最大值49.66%;样品浓度大于10 mg/m L后,还原能力明显增加;胶原样品浓度10 mg/m L时·OH清除率达到最大为95.66%。实验为乌贼皮胶原蛋白的开发利用提供了理论基础。

胶原基生物材料在医学美容领域的研究进展

胶原是哺乳动物体内含量最多的蛋白质,在人体皮肤内的含量约为70%,是细胞外基质的主要成分,对皮肤的弹性、光泽、毛孔和水分等具有重要影响。作为天然高分子材料,胶原具有抗原性低、可吸收降解、美白保湿和填充修复等特性,基于天然胶原、水解胶原和重组人源胶原开发研制的产品可以满足不同患者、不同病症的治疗需求,已被广泛用于医学整形美容领域。纯胶原的湿热稳定性、耐酶解性和力学性能较差,将其与天然高分子材料共混制备复合材料可以弥补单一组分的不足,兼具多种材料的优势,胶原蛋白的复合改性是胶原基生物医用材料的研究热点之一。本文介绍了胶原蛋白、水解胶原和重组人源胶原的结构与性能,分析了胶原基复合材料对纯胶原材料缺陷的改善机理,列举了胶原基生物材料在注射医美、人工皮肤、美容敷贴和日用化妆品领域的应用进展,指出了胶原基材料目前存在的问题及今后的发展前景,以期为胶原基生物材料在医学美容领域的产品开发和临床应用提供参考。

鳕鱼皮胶原蛋白的制备及其成分分析

目的探索如何提高鱼皮胶原蛋白的得率和质量,从而为水产品下脚料的开发利用研究提供参考。方法采用以酶法为主、热水浸提和酸法浸提为辅的方法提取鳕鱼皮胶原蛋白,对在胃蛋白酶添加量和料液比两参数不同的情况下提取的胶原蛋白得率进行统计,并对所提胶原蛋白进行了成分分析。结果与讨论胃蛋白酶添加量为1%,料液比为1∶10时胶原蛋白得率较高。提取鳕鱼皮胶原蛋白最适宜的胃蛋白酶添加量为1%,料液比为1∶10。

大鲵肌肉与皮中胶原蛋白比较研究

针对大鲵肉中肌基质蛋白和大鲵皮提取的胶原蛋白基础特性进行比较研究。采用酸法、胃蛋白酶法提取大鲵肌基质蛋白和大鲵皮中的胶原蛋白,测定胶原蛋白的分子质量、光谱特性、羟脯氨酸含量、微观结构与黏度。结果表明:大鲵皮、大鲵肉中肌基质蛋白的酸溶性胶原蛋白提取率分别达18.29%和7.08%,酶提胶原蛋白提取率分别为25.67%和18.65%;酸提大鲵皮、大鲵肌基质蛋白中胶原蛋白羟脯氨酸含量分别为(16.05±0.16)%和(10.49±0.42)%,酶提分别为(18.04±0.08)%和(8.67±0.12)%;酸提与酶提胶原蛋白紫外光谱及红外光谱特性基本相似,酸提大鲵皮胶原蛋白的种类比肌基质蛋白中提取的胶原蛋白种类更多,酶提大鲵皮中胶原蛋白电泳条带比肌基质蛋白中提取的胶原蛋白条带更为清晰,但分子质量基本一致;扫描电子显微镜观察结果表明,酸提的2种来源胶原蛋白网状结构较酶提更为完整;2种来源的胶原蛋白黏度存在显著差异(P<0.05)。大鲵肉中肌基质蛋白与大鲵皮胶原蛋白特性相同,可作为补充胶原蛋白制品及化妆品原料进行开发。

中草药复方的抗氧化与改善皮肤水分的作用研究

目的:观察由杭白菊、珍珠粉、当归、胶原蛋白组成的中草药复方的抗氧化与保湿作用。方法:采用裸小鼠皮下注射D-半乳糖建立亚急性衰老模型,昆明小鼠建立黄褐斑模型,观察中草药复方的抗氧化与改善皮肤水分的作用。结果:中草药复方(26.4g生药/kg)能改善D-半乳糖衰老模型造成的皮肤水分减少,增加皮肤超氧化歧化酶(SOD)、1型胶原蛋白、羟脯氨酸;减少皮肤中丙二醛(MDA)的生成。中草药复方(26.4g生药/kg)能增加黄褐斑小鼠肝脏的GSH-Px、SOD,减少肝脏脂褐质、MDA、酪氯酸酶;增加皮肤中的GSH-Px、NO;中草药复方各剂量组对皮肤酪氯酸酶、透明质酸及血液流变学各参数无显著影响。结论:由杭白菊、珍珠粉、当归、胶原蛋白组成的中草药复方,具有一定的促进皮肤抗氧化及保湿的作用。

再生牛皮胶原蛋白复合纤维的性能

介绍了一种再生牛皮胶原蛋白复合纤维,通过相关实验和方法,初步分析了再生牛皮胶原蛋白复合纤维的微观结构、表面形态、物理机械性能及耐热性能。结果表明:再生牛皮胶原蛋白复合纤维线密度离散系数为22.64%,常用长度规格为38 mm和51 mm 2种;纤维横截面呈圆形,中间有微孔,纵向有沟槽和小颗粒状物质;纤维断裂强力为3.77 c N,断裂伸长率为16.89%,模量为15.84 c N/dtex;纤维回潮率为18.16%,结晶度为21.68%,取向度为71.2%,纤维与纤维间静态摩擦因数为0.433;在使用过程中以不超过110℃为宜。

脂质体包裹胶原蛋白的制备及其透皮性能

为提高胶原蛋白体外透皮吸收性能,以卵磷脂和胆固醇为成膜材料,采用薄膜分散法制备了鱼皮水解胶原蛋白脂质体。以模拟Franze扩散池进行小鼠离体皮肤渗透扩散实验,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定胶原蛋白含量,考察胶原蛋白脂质体的透皮吸收量与吸收率。实验结果表明,相对分子质量(简称分子量,下同)3 500的鱼皮水解胶原蛋白经脂质体包封后,透皮吸收量在24 h内达到21.9%,较直接涂抹胶原蛋白的透皮吸收率提高一倍。证明小分子胶原蛋白经脂质体包封能够改善其体外透皮吸收性能。