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Gene Expression Pattern of Signal Transduction in Chronic Myeloid Leukemia
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作者 LI Huiyu JIE Shenghua GUO Tiannan HUANG Shi'ang 《Wuhan University Journal of Natural Sciences》 EI CAS 2006年第3期732-736,共5页
To explore the transcriptional gene expression profiles of signaling pathway in Chronic myeloid leukemia (CML), a series of cDNA microarray chips were tested. The results showed that differentially expressed genes r... To explore the transcriptional gene expression profiles of signaling pathway in Chronic myeloid leukemia (CML), a series of cDNA microarray chips were tested. The results showed that differentially expressed genes related to singal transduction in CML were screened out and the genes involved in Phosphoinositide 3-kinases (PI3K), Ras-MAPK (mitogen-activated protein kinase) and other signaling pathway genes simultaneously. The results also showed that most of these genes were up-expression genes , which suggested that signal transduction be overactivated in CML. Further analysis of these differentially expressed signal transduction genes will be helpful to understand the molecular mechanism of CML and find new targets of treatment. 展开更多
关键词 signal transduction cDNA microarray gene expression parterre chronic myeloid leukemia bcr-abl
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带有蛋白转导结构域的Bcr/Abl癌蛋白片段的表达及其跨膜转运 被引量:8
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作者 梁英民 孙强 +7 位作者 蒋姗姗 陈萍 王冀姝 李荣 周鹏 王键 黄红艳 韩骅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期574-578,共5页
HIV 1编码的反式激活蛋白TAT具有将细胞外蛋白转导进入细胞的基序 ,称为蛋白转导结构域 (PTD) .为研究PTD介导的PTD Bcr Abl融合蛋白的跨膜转运 ,合成了编码PTD的基因片段 ,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr abl基因片段融合 .... HIV 1编码的反式激活蛋白TAT具有将细胞外蛋白转导进入细胞的基序 ,称为蛋白转导结构域 (PTD) .为研究PTD介导的PTD Bcr Abl融合蛋白的跨膜转运 ,合成了编码PTD的基因片段 ,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr abl基因片段融合 .在大肠杆菌中表达纯化了融合蛋白 ,将纯化的融合蛋白加入培养的HL60细胞和C2C12细胞后 ,发现PTD基序可以介导Bcr Abl蛋白自由从细胞外跨膜转导进入细胞内 .研究结果可能为用外源蛋白负载 (loading)免疫活性细胞如抗原提呈细胞提供新的途径 . 展开更多
关键词 蛋白转导结构域 bcr/abl 慢性粒细胞白血病 基因表达 癌蛋白
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PTD-bcr/abl融合癌蛋白片段的表达及其跨膜转运 被引量:8
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作者 梁英民 孙强 +4 位作者 蒋姗姗 陈萍 王冀姝 刘利 韩骅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期377-380,共4页
目的探讨蛋白转导结构域(PTD)介导的转导bcr/abl癌蛋白片段的方法,为进行免疫治疗提供实验依据。方法合成编码PTD的基因片段,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr/abl基因片段融合,在大肠杆菌中表达。将纯化的融合蛋白PTD-bcr/abl... 目的探讨蛋白转导结构域(PTD)介导的转导bcr/abl癌蛋白片段的方法,为进行免疫治疗提供实验依据。方法合成编码PTD的基因片段,并与PCR扩增的慢性粒细胞白血病癌蛋白bcr/abl基因片段融合,在大肠杆菌中表达。将纯化的融合蛋白PTD-bcr/abl与HL-60 细胞共孵育,用Western blot分析融合蛋白的跨膜转运。结果PTD基序可介导bcr/abl蛋白由细胞外跨膜转导进入细胞内。结论这一结果可能为应用外源蛋白负载(loading)抗原提呈细胞(APC)提供新的途径。 展开更多
关键词 蛋白转导 bcr/abl 慢性粒细胞白血病 基因表达 融合癌蛋白片段
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蛋白转导域介导BCR/ABL抗原对CML患者T细胞的活化作用 被引量:3
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作者 刘强 梁英民 +4 位作者 郑瑾 李学义 陈任安 蒋姗姗 吴绒丽 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期377-379,共3页
目的 :研究蛋白转导域 (PTD)介导的BCR/ABL抗原对慢性髓细胞白血病 (CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法 :利用基因工程技术 ,将PTD基因与CMLb3a2bcr/abl基因融合并原核表达。将纯化的PTD BCR/ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞 (... 目的 :研究蛋白转导域 (PTD)介导的BCR/ABL抗原对慢性髓细胞白血病 (CML)患者T细胞的特异性活化作用。方法 :利用基因工程技术 ,将PTD基因与CMLb3a2bcr/abl基因融合并原核表达。将纯化的PTD BCR/ABL融合蛋白与CML患者外周血单个核细胞 (PBMC)体外共孵育 ,用流式细胞仪分别检测CD4 + 、CD8+ T细胞上活化抗原CD2 5的表达。结果 :终浓度为 10 0mg/L的PTD BCR/ABL抗原体外刺激 4d后 ,10例CML患者中 ,5例表现为CD8+ T细胞活化 ,2例表现为CD4 + T细胞活化 ,其中有 1例CD8+ 和CD4 + T细胞同时活化 ;而作为对照的BCR/ABL抗原刺激组无一例表现为CD8+ 或CD4 + T细胞活化。结论 :PTD能将外源性BCR/ABL抗原转导入抗原呈递细胞内 ,加工呈递后激活抗原特异性CD8+ 及CD4 + T细胞 ,为CML特异性CD8+ 、CD4 + 展开更多
关键词 蛋白转导 免疫原性 融合蛋白、bcr-abl 白血病 髓细胞 慢性 CD25抗原
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慢性髓细胞白血病BCR-ABL融合基因片段的克隆表达及其单克隆抗体的制备 被引量:2
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作者 张保平 潘兴元 +3 位作者 钱莉 晋秋孺 龚卫娟 季明春 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期549-551,共3页
目的制备针对慢性髓细胞白血病(CML)bcr-abl融合蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法采用PCR方法扩增包含BCR-ABL(b3a2)融合位点周围约450bp的基因片段,将其定向克隆到pQE-31载体内,转化大肠杆菌M15菌株,诱导表达6×His标签的融合蛋白p18bc... 目的制备针对慢性髓细胞白血病(CML)bcr-abl融合蛋白的单克隆抗体(mAb)。方法采用PCR方法扩增包含BCR-ABL(b3a2)融合位点周围约450bp的基因片段,将其定向克隆到pQE-31载体内,转化大肠杆菌M15菌株,诱导表达6×His标签的融合蛋白p18bcr-abl并对其进行纯化,用纯化后的蛋白免疫Balb/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备针对bcr-abl蛋白的mAb并对其特性进行鉴定。结果获得了6株分泌抗bcr-abl融合蛋白mAb的杂交瘤细胞株,所分泌的mAbs均特异性识别bcr-abl蛋白abl端。结论本研究中所表达的融合蛋白p18bcr-abl及其mAb的获得为慢性髓细胞白血病的研究提供了有效的工具。 展开更多
关键词 慢性髓细胞白血病 bcr-abl融合蛋白 克隆表达 单克隆抗体
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HA-2FKBP-ABD融合蛋白的原核表达及与BCR-ABL的相互作用 被引量:1
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作者 高淼 黄峥兰 +3 位作者 李千音 李会 钟梁 冯文莉 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期268-271,共4页
目的构建经原核表达和纯化的HA-2FKBP-ABD(HF2A)融合蛋白,探讨HF2A对BCR-ABL的靶向作用。方法用PCR扩增HF2A片段,将HF2A克隆入pET32a(+)原核表达载体,IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化HF2A蛋白,SDS-PAGE分析诱导和纯化的条件,western ... 目的构建经原核表达和纯化的HA-2FKBP-ABD(HF2A)融合蛋白,探讨HF2A对BCR-ABL的靶向作用。方法用PCR扩增HF2A片段,将HF2A克隆入pET32a(+)原核表达载体,IPTG诱导表达,镍离子亲和层析柱纯化HF2A蛋白,SDS-PAGE分析诱导和纯化的条件,western blot鉴定HF2A蛋白的表达,pull down实验检测HF2A与BCR-ABL的相互作用。结果重组原核表达载体经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确;0.1 mmol/L IPTG 25℃诱导4 h获得HF2A蛋白的高表达,其分子量(Mr)约为74 000,纯化后可获得高纯度的HF2A蛋白;HF2A与BCR-ABL能相互作用。结论成功表达并纯化了HF2A融合蛋白,HF2A能够靶向作用BCR-ABL。 展开更多
关键词 原核表达 蛋白质纯化 bcr-abl 慢性粒细胞白血病 abl结合结构域
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PTD-OD-HA融合蛋白对K562细胞中Bcr-Abl的抑制作用观察
7
作者 高淼 黄峥兰 +4 位作者 季茂胜 黄世峰 曾建明 李千音 冯文莉 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期951-954,共4页
目的探讨PTD-OD-HA融合蛋白转导K562细胞的动力学、定位及其与Bcr-Abl定位的关系,以及对Bcr-Abl寡聚化和Bcr-Abl酪氨酸激酶活性的影响。方法采用FITC标记PTD-OD-HA融合蛋白,观察蛋白转导K562细胞的效率与剂量和时间的关系,激光共聚焦显... 目的探讨PTD-OD-HA融合蛋白转导K562细胞的动力学、定位及其与Bcr-Abl定位的关系,以及对Bcr-Abl寡聚化和Bcr-Abl酪氨酸激酶活性的影响。方法采用FITC标记PTD-OD-HA融合蛋白,观察蛋白转导K562细胞的效率与剂量和时间的关系,激光共聚焦显微镜检测融合蛋白在细胞内的定位,免疫共沉淀法检测融合蛋白与Bcr-Abl的相互作用,Western blotting检测Bcr-Abl的磷酸化水平。结果 PTD-OD-HA转导K562细胞呈剂量和时间依赖性。PTD-OD-HA定位于K562细胞胞质,与Bcr-Abl共定位,且能与Bcr-Abl蛋白相互作用,进而干扰Bcr-Abl同源寡聚化,并可降低Bcr-Abl的磷酸化水平。结论在K562细胞中,PTD-OD-HA融合蛋白能有效抑制Bcr-Abl同源寡聚化及磷酸化水平。 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 蛋白转导域 融合蛋白质类 bcr-abl
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BCR-ABL融合基因检测方法的进展 被引量:5
8
作者 王春霞 温柏平 《医学综述》 2013年第1期137-141,共5页
BCR-ABL融合基因可编码产生BCR-ABL融合蛋白,是慢性粒细胞白血病的特征性标志,对慢性粒细胞白血病的诊断、治疗具有重要意义。目前临床有多种方法可对其进行检测,主要有细胞遗传学、荧光原位杂交、聚合酶链式反应、Western Blot印迹法... BCR-ABL融合基因可编码产生BCR-ABL融合蛋白,是慢性粒细胞白血病的特征性标志,对慢性粒细胞白血病的诊断、治疗具有重要意义。目前临床有多种方法可对其进行检测,主要有细胞遗传学、荧光原位杂交、聚合酶链式反应、Western Blot印迹法、流式免疫磁珠(CBA)等检测方法。这些检测方法有的费时费力,有的需要专门的实验设备等,故在临床应用中受限。随着对BCR-ABL融合基因检测技术的发展,CBA法对BCR-ABL融合蛋白的检测具有其特有的优越性而得到越来越多的应用。 展开更多
关键词 bcr-abl融合基因 bcr-abl融合蛋白 常规染色体检测 聚合酶链式反应 荧光原位杂交法 流式免疫磁珠法 慢性粒细胞白血病
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蛋白转导结构域-bcr/abl融合基因的构建和表达 被引量:8
9
作者 梁英民 孙强 +5 位作者 蒋姗姗 王冀姝 吴绒丽 陈萍 刘利 韩骅 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期5-8,共4页
目的 构建含蛋白转导结构域 (PTD)与慢性粒细胞白血病 (CML)bcr/abl融合基因片段的质粒 ,并在大肠杆菌中表达。方法 PCR扩增的CMLbcr/abl基因片段 ,经DNA测序后 ,与合成编码PTD的DNA片段一起插入质粒pET 16b ,构建表达载体pEPb ,转化... 目的 构建含蛋白转导结构域 (PTD)与慢性粒细胞白血病 (CML)bcr/abl融合基因片段的质粒 ,并在大肠杆菌中表达。方法 PCR扩增的CMLbcr/abl基因片段 ,经DNA测序后 ,与合成编码PTD的DNA片段一起插入质粒pET 16b ,构建表达载体pEPb ,转化大肠杆菌并进行了PTD bcr/abl蛋白的诱导表达和纯化。结果 跨越bcr/abl断裂点的 5 2 3bp的目的片段被有效地扩增。DNA序列分析表明所构建的含PTD bcr/abl融合基因的质粒与设计相同。PTD bcr/abl融合蛋白在转化大肠杆菌获得了高效表达并纯化。结论 成功地获得了PTD bcr/abl融合蛋白片段的基因表达产物 。 展开更多
关键词 遗传转导 bcr/abl融合基因 白血病 慢性 基因表达 大肠杆菌
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慢性粒细胞白血病Bcr/Abl基因OD域融合蛋白的原核表达及纯化 被引量:5
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作者 季茂胜 黄峥兰 +5 位作者 黄世峰 曾建明 刘钉宾 罗红伟 曹唯希 冯文莉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2010年第4期354-357,共4页
目的原核表达并纯化慢性粒细胞白血病(CML)Bcr/Abl基因OD域融合蛋白。方法将TAT、OD和HA基因片段顺次克隆入pET32a(+)原核表达载体,构建重组原核表达质粒pTAT-OD-HA,经PCR、双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化E.coliBL2(lDE3),IPTG诱... 目的原核表达并纯化慢性粒细胞白血病(CML)Bcr/Abl基因OD域融合蛋白。方法将TAT、OD和HA基因片段顺次克隆入pET32a(+)原核表达载体,构建重组原核表达质粒pTAT-OD-HA,经PCR、双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化E.coliBL2(lDE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE及Westernblot分析后,用镍离子亲和层析柱纯化。结果所构建的重组质粒pTAT-OD-HA经PCR、双酶切及测序鉴定正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为30000,诱导6h蛋白表达量达最高,约为10%;Westernblot分析显示,该蛋白可与鼠抗HA单克隆抗体发生特异性反应;纯化后纯度约为95%。结论已成功原核表达并纯化了TAT-OD-HA融合蛋白,为进一步研究其在CML中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 bcr/abl基因 OD域 原核表达 纯化
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趋化因子MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达 被引量:2
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作者 王伟良 沈悌 +2 位作者 惠玉荣 顾惜春 李蓉生 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期433-436,共4页
本文旨在研究MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达,同时观察P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶对MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2mRNA表达的影响。在bcr/abl融合基因阴性和阳性慢性髓系白血病细胞中,采... 本文旨在研究MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2在慢性髓系白血病细胞中的表达,同时观察P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶对MIP-1α和MCP-1及其受体CCR-1和CCR-2mRNA表达的影响。在bcr/abl融合基因阴性和阳性慢性髓系白血病细胞中,采用半定量RT-PCR方法检测MIP-1α、MCP-1、CCR-1、CCR-2mRNA的表达水平。结果表明MIP-1αmRNA和CCR-1mRNA在bcr/abl融合基因阳性细胞中不表达,但在bcr/abl融合基因阴性细胞中表达,而MCP-1mRNA和CCR-2mRNA在bcr/abl融合基因阳性和阴性细胞中均不表达。当P210bcr/abl融合蛋白中酪氨酸激酶被抑制后,MIP-1α和CCR-1的mRNA表达水平恢复至正常水平。结论:P210bcr/abl融合蛋白抑制慢性髓系白血病细胞中MIP-1α和CCR-1mRNA的表达,但对MCP-1和CCR-2mRNA的表达无影响。 展开更多
关键词 慢性髓系白血病 bcr/abl融合基因 P210bcr/abl融合蛋白 MIP-1Α CCR-1 MCP-1 CCR-2
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青蒿琥酯对原代慢性粒细胞白血病细胞生长抑制、凋亡诱导及bcr/abl融合基因、P210蛋白、磷酸化SHP-2蛋白表达的影响 被引量:4
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作者 罗曼 黄晓华 +1 位作者 古学奎 杨洪涌 《中药新药与临床药理》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期1289-1295,共7页
目的探讨青蒿琥酯对原代慢性粒细胞白血病细胞生长抑制、凋亡诱导及bcr/abl融合基因、P210蛋白、Src同源区2含域磷酸酶-2(SHP-2)蛋白磷酸化的影响。方法分离培养原代慢性粒细胞白血病细胞,采用不同浓度青蒿琥酯(0、5、10、20μg·mL... 目的探讨青蒿琥酯对原代慢性粒细胞白血病细胞生长抑制、凋亡诱导及bcr/abl融合基因、P210蛋白、Src同源区2含域磷酸酶-2(SHP-2)蛋白磷酸化的影响。方法分离培养原代慢性粒细胞白血病细胞,采用不同浓度青蒿琥酯(0、5、10、20μg·mL^(-1))进行干预,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞生长抑制情况;细胞计数法检测细胞生存情况;罗丹明123染色法检测细胞线粒体膜电位的变化;电镜观察细胞超微结构的变化;流式细胞术(FCM)检测青蒿琥酯对细胞凋亡及胀亡的影响;荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测bcr/abl融合基因mRNA表达;Western Blot检测P210、SHP-2及磷酸化SHP-2蛋白表达。结果青蒿琥酯可抑制原代慢性粒细胞白血病细胞的生长,降低细胞存活率和线粒体膜电位水平(P<0.05),且与药物浓度和时间呈现一定的依赖性;不同浓度药物和不同作用时间可导致细胞凋亡率及胀亡率明显升高(P<0.01),同时可降低bcr/abl融合基因mRNA、P210、SHP-2和磷酸化SHP-2蛋白的表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论青蒿琥酯可通过抑制原代慢性粒细胞白血病细胞的生长,促进其凋亡和胀亡,以及降低bcr/abl融合基因mRNA、P210、SHP-2、磷酸化SHP-2蛋白在原代慢性粒细胞白血病细胞中的表达水平,达到治疗慢性粒细胞白血病(CML)的目的。 展开更多
关键词 青蒿琥酯 慢性粒细胞白血病 细胞生长 细胞凋亡 bcr/abl融合基因 P210蛋白 磷酸化SHP-2蛋白
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酪氨酸激酶抑制剂STI571治疗慢性粒细胞白血病的研究 被引量:1
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作者 王玮 孙秉中 +1 位作者 药立波 刘新平 《实用医学杂志》 CAS 2005年第19期2108-2111,共4页
目的:研究特异性酪氨酸激酶抑制剂STI571对慢性粒细胞白血病(简称慢粒)细胞增殖、凋亡、周期调控及bcr-abl融合基因表达的影响,为慢粒的基因治疗提供理论依据。方法:细胞培养慢粒急变细胞系K562细胞株,通过MTT检测STI571作用下细胞存活... 目的:研究特异性酪氨酸激酶抑制剂STI571对慢性粒细胞白血病(简称慢粒)细胞增殖、凋亡、周期调控及bcr-abl融合基因表达的影响,为慢粒的基因治疗提供理论依据。方法:细胞培养慢粒急变细胞系K562细胞株,通过MTT检测STI571作用下细胞存活率,流式细胞仪检测周期变化,电镜及DNA电泳检测细胞凋亡,半定量RT-PCR检测STI571对bcr-abl融合基因表达的影响。结果:STI571作用后K562细胞中G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少。流式细胞图中的二倍体峰前可见一明显亚二倍体峰———凋亡峰(apoptosispeak),提示STI571能明显诱导K562细胞凋亡。电镜发现STI571作用于K562细胞12~72h后,诱导出各期凋亡细胞及凋亡小体。半定量PCR灰度扫描结果显示bcr-abl基因的mRNA表达下降,电泳检测扩增产物,荧光亮度减弱。结论:STI571能明显抑制白血病细胞增殖,细胞阻滞于G0/G1期,且具有明显的诱导凋亡作用,反馈抑制bcr-abl融合基因的表达。 展开更多
关键词 蛋白质酪氨酸激酶 白血病 髓样 慢性 细胞周期 凋亡 STI571 bcr-abl融合基因 慢性粒细胞白血病 酪氨酸激酶抑制剂 基因治疗 K562细胞凋亡
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bcr—abl基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达
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作者 王艳芳 苏丽萍 周永安 《白血病.淋巴瘤》 CAS 2010年第10期596-599,共4页
目的构建慢性粒细胞白血病bcr—abl融合基因的真核表达载体,并在哺乳动物细胞COS-7中高效表达。方法提取慢性粒细胞白血病K562细胞的RNA,经RT—PCR技术扩增得到bcr—abl基因后,将其克隆人真核表达载体pEGFP—N3中,并进行PCR和酶切... 目的构建慢性粒细胞白血病bcr—abl融合基因的真核表达载体,并在哺乳动物细胞COS-7中高效表达。方法提取慢性粒细胞白血病K562细胞的RNA,经RT—PCR技术扩增得到bcr—abl基因后,将其克隆人真核表达载体pEGFP—N3中,并进行PCR和酶切鉴定。鉴定为阳性的克隆,再进一步进行测序分析。将构建成功的真核表达载体转入COS-7细胞中进行瞬时表达。结果反转录PCR扩增后的产物,经琼脂糖凝胶电泳可以在约874bp处看见一特异性的条带,序列分析证明扩增产物与GeneBank中的bcr-abl基因序列相同。将pEGFP—bcr-abl真核表达载体转入COS-7细胞后,经RT—PCR、Westernblotting检测证明表达产物正确。结论成功构建了含有bcr-abl融合基因的真核表达质粒,从而为进一步研究其结构和功能,寻找CML诊疗的新方法奠定了基础。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 bcrabl P210蛋白 基因克隆 基因表达
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小檗胺对K562细胞体外及体内作用的实验研究 被引量:8
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作者 吴东 林茂芳 赵小英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期373-378,共6页
为了探讨小檗胺(berbamine,BER)在体外及体内抗人白血病细胞株K562细胞的作用及其可能的机制,用MTT法测定K562细胞的增殖抑制,用流式细胞术检测凋亡细胞,用RTPCR方法检测bcr/abl基因表达,用Westernblot方法检测BCR/ABL蛋白质水平表达,利... 为了探讨小檗胺(berbamine,BER)在体外及体内抗人白血病细胞株K562细胞的作用及其可能的机制,用MTT法测定K562细胞的增殖抑制,用流式细胞术检测凋亡细胞,用RTPCR方法检测bcr/abl基因表达,用Westernblot方法检测BCR/ABL蛋白质水平表达,利用K562细胞荷瘤裸鼠模型观察小檗胺治疗后瘤体大小、组织病理及bcr/abl基因表达的改变。结果表明:小檗胺对K562细胞有明显的增殖抑制作用,呈时间浓度依赖关系。经8.0μg/mlBER作用24、48、72小时,对K562细胞的抑制率分别为(26.63±3.57)%,(61.84±4.74)%,(75.32±1.95)%,与对照组相比,P<0.01。IC50值(72小时)为(5.227±1.307)μg/ml。与空白对照组相比,经8.0μg/ml小檗胺处理72小时后,K562细胞凋亡率明显增加[(61.77±4.35)%vs(0.50±0.14)%,P<0.01]。小檗胺能下调K562细胞bcr/ablmRNA表达和P210水平,且呈浓度时间依赖效应,并与细胞凋亡率有一定的相关性。经8.0μg/mlBER处理后,与同浓度点对照组相比,72小时组的表达明显地减弱(0.97±0.01vs1.38±0.02,P<0.01)。4.0-16.0μg/mlBER处理24小时后,P210的相对表达量由未加药对照组的1.04±0.02降至16.0μg/ml组的0.63±0.01(P<0.01),与所设的对照组药物酪氨酸蛋白激酶抑制剂STI571的作用结果相似。在K562荷瘤裸鼠模型,小檗? 展开更多
关键词 小檗胺 K562细胞 细胞凋亡 bcr/abl基因 bcr/abl融合蛋白 慢性粒细胞白血病
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慢性粒细胞白血病cyclin D2基因的表达研究 被引量:5
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作者 宋俊敏 徐冬 +3 位作者 范尔进 徐世荣 李董 赵春华 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期103-105,共3页
目的 研究cyclinD2基因表达与慢性粒细胞白血病 (CML)特征性的P2 10 BCR ABL蛋白酪氨酸激酶活性之间的相关性。方法 以RT PCR、免疫印迹法及流式细胞术检测cyclinD2基因在BCR ABL +K5 6 2细胞系中的表达。通过表达抗ABL蛋白酪氨酸激... 目的 研究cyclinD2基因表达与慢性粒细胞白血病 (CML)特征性的P2 10 BCR ABL蛋白酪氨酸激酶活性之间的相关性。方法 以RT PCR、免疫印迹法及流式细胞术检测cyclinD2基因在BCR ABL +K5 6 2细胞系中的表达。通过表达抗ABL蛋白酪氨酸激酶区胞内抗体的模型即K5 6 2 ib eGFP细胞 ,检测cyclinD2表达的变化。结果 在P2 10 BCR ABL 蛋白酪氨酸激酶活性受抑制的K5 6 2 ib eGFP细胞中 ,cyclinD2的表达 (18.90 % )明显低于K5 6 2细胞组 (48.10 % ) ,且K5 6 2 ib eGFP组S期细胞比例(40 4 0 % )也明显低于K5 6 2细胞组 (6 4 .34% )。结论 cyclinD2可能是CMLP2 10 BCR ABL 蛋白酪氨酸激酶下游相关信号传递分子 ,其表达增高可能促进了CML细胞的过度增殖。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 CYCLIN D2基因 信号传递分子 酪氨酸激酶 恶性克隆性疾病
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慢性粒细胞白血病错配修复基因的研究 被引量:1
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作者 罗军 彭志刚 +3 位作者 陈燕 赖永榕 卢玉英 宋善俊 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期103-106,共4页
目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)错配修复(MMR)基因的表达水平及调控机制。方法用半定量RT-PCR方法检测62例CML患者及K562细胞的5个MMR基因(hMSH2、hMSH3、 hMSH6、hMLH1、hPMS2)mRNA的表达;用RT.PCR方法动态检测26例进行异基因外周血... 目的探讨慢性粒细胞白血病(CML)错配修复(MMR)基因的表达水平及调控机制。方法用半定量RT-PCR方法检测62例CML患者及K562细胞的5个MMR基因(hMSH2、hMSH3、 hMSH6、hMLH1、hPMS2)mRNA的表达;用RT.PCR方法动态检测26例进行异基因外周血造血干细胞移植(allo-PBSCT)及4例使用伊马替尼治疗的CML患者bcr.abl及MMR mRNA的表达水平;用伊马替尼体外作用于CML患者的单个核细胞(MNC)及K562细胞后,用Western blot方法检测BCR-ABL融合蛋白的酪氨酸磷酸化水平,RT-PCR方法检测MMR mRNA表达水平。结果与正常人比较,CML患者及K562细胞的hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达明显降低(P<0.05);26例行allo-PBSCT及4例使用伊马替尼治疗的CML患者,其hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达随着bcr-abl mRNA的表达降低而升高;伊马替尼体外作用于CML患者MNC及K562细胞后,其hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达随着BCR-ABL融合蛋白酪氨酸磷酸化水平的降低而升高。结论CML患者、K562细胞hMSH2、 hMSH3、hMLH1 mRNA比正常人降低,bcr-abl融合基因抑制hMSH2、hMSH3、hMLH1 mRNA的表达。 展开更多
关键词 白血病 髓样 慢性 基因 错配修复 伊马替尼 聚合酶链反应 融合蛋白质类 bcrabl
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PTD-OD-HA融合蛋白对BALB/c裸鼠皮下K562细胞实体瘤的治疗作用 被引量:1
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作者 季茂胜 黄峥兰 +5 位作者 李亚娟 黄世峰 曾建明 刘钉宾 曹唯希 冯文莉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2011年第8期945-947,共3页
目的观察PTD-OD-HA融合蛋白对BALB/c裸鼠皮下K562细胞实体瘤的治疗作用。方法采用皮下注射K562细胞的方法建立裸鼠皮下实体瘤模型,每两天向实体瘤中间部位多点注射200μl浓度为10 mg/ml的PTD-OD-HA融合蛋白,观察裸鼠瘤体生长情况;HE染... 目的观察PTD-OD-HA融合蛋白对BALB/c裸鼠皮下K562细胞实体瘤的治疗作用。方法采用皮下注射K562细胞的方法建立裸鼠皮下实体瘤模型,每两天向实体瘤中间部位多点注射200μl浓度为10 mg/ml的PTD-OD-HA融合蛋白,观察裸鼠瘤体生长情况;HE染色观察肿瘤组织病理学变化;TUNEL法和透射电镜观察肿瘤组织细胞的凋亡。结果经PTD-OD-HA治疗的肿瘤体积明显缩小;肿瘤组织切片经HE染色可见细胞核浓缩和细胞染色加深;TUNEL法和透射电镜检测可见肿瘤细胞发生了凋亡的改变。结论在BALB/c裸鼠体内,PTD-OD-HA融合蛋白具有抑制K562细胞增殖和促进其凋亡的作用。 展开更多
关键词 慢性粒细胞白血病 融合蛋白 bcr/abl融合基因 小鼠
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