20(s)-原人参二醇对肝癌血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子蛋白表达的影响

目的探讨20(s)-原人参二醇(Ppd)对肝癌血管内皮生长因子(VEGF)及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法建立肝癌动物模型,将实验动物分为五组,每组10只,分对照组、环磷酰胺组(CTX)、20(s)-原人参二醇25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg给药组,给药二周后处死动物。称肿瘤重量及肿瘤体积,制成组织切片,以备免疫组化应用。结果与对照组相比,给药组VEGF、bFGF表达受到抑制,肿瘤的重量及体积明显减轻,组间有显著性差异(P<0.01)。结论提示Ppd抑制了VEGF、bFGF蛋白的表达,抑制了肿瘤生长。

20(s)-原人参二醇的抗肿瘤及免疫调节作用研究

目的:探讨20(s)-原人参二醇(Protopanaxdiol,Ppd)的抗肿瘤及免疫调节作用。方法:建立小鼠肝癌H_(22)、Lewis肺癌和黑色素瘤B_(16)三种移植瘤动物模型,小鼠每日灌胃给予Ppd(25,50,100mg·kg^(-1))1次,连续12d,末次药后称取小鼠体重及肿瘤重量,同时测定H_(22)荷瘤小鼠T淋巴细胞转化率、NK细胞杀伤活性及IL-2含量。结果:Ppd 25,50,100mg·kg^(-1)剂量对小鼠肝癌H_(22)的抑瘤率分别为28.85%,43.55%,49.11%;对小鼠Lewis肺癌的抑瘤率分别为23.07%,44.96%,49.61%;对小鼠黑色素瘤B_(16)的抑瘤率分别为30.21%,37.43%,43.20%。Ppd 50,100mg·kg^(-1)可明显提高肝癌H_(22)小鼠的T淋巴细胞增殖能力、NK细胞活性和IL-2含量。结论:Ppd对小鼠三种移植瘤均具有明显的抗肿瘤活性并与免疫调节作用呈相关性,提示其抗肿瘤作用可能与激活体内免疫系统有关。

20(S)-原人参二醇对肝癌间质血管密度和肿瘤细胞增殖活性的影响

探讨20(S)-原人参二醇对肝癌间质微血管密度和肿瘤细胞增殖活性的影响。建立肝癌动物模型,将实验动物分为五组,每组10只,分对照组、环磷酰胺组、20(S)-原人参二醇25mg/kg、50mg/kg、100mg／kg给药组,给药二周后处死动物,称肿瘤重量及肿瘤体积,制成组织切片,以备免疫组化应用。与对照组相比,给药组肿瘤间质血管密度低,其细胞增殖活性亦低,肿瘤的重量及体积明显减少,组间有显著性差异(P<0．01)。提示20(S)-原人参二醇抑制了肝癌间质血管密度及肿瘤细胞增殖活性,从而抑制了肿瘤生长。

西洋参总皂苷酶水解产物成分研究

西洋参总皂苷经β-糖苷酶催化水解,采用HPLC检测分析确定西洋参总皂苷中的主要原人参二醇型皂苷Rb1、Rd、Rc和Rb2已经完全被水解。水解产物通过反复硅胶柱层析和反向硅胶柱层析分离纯化得到7个皂苷,通过NMR谱图分析分别鉴定为人参皂苷compound K(1)、人参皂苷Mc(2)、人参皂苷Rg1(3)、人参皂苷Rg2(4)、人参皂苷Re(5)、人参皂苷F1(6)和拟人参皂苷F11(7)。β-糖苷酶催化西洋参总皂苷水解实验表明,西洋参中原人参二醇型皂苷的水解产物是人参皂苷compound K和人参皂苷Mc。

毛细管气相色谱法测定原人参二醇中有机溶剂残留物

目的:建立原人参二醇中3种有机溶剂残留物的检测方法。方法:采用毛细管气相色谱法,色谱柱为PLOTQ毛细管柱,N,N-二甲基乙酰胺为溶解介质,FID检测器,载气为氮气,以异丙醇为内标测定原人参二醇中甲醇、乙酸乙酯、正丁醇的有机溶剂残留量。结果:本法线性关系良好,r=0.99996～0.99999,精密度RSD均小于6.0%,甲醇、乙酸乙酯和正丁醇的加样回收率为98.2%～102.2%,其RSD在1.1～2.4%。结论:该方法操作简便快速、灵敏度高,准确度好,可作为原人参二醇原料中有机溶剂残留量的测定方法。

人参皂苷Rd的分离提纯

为了得到人参皂苷Rd,从西洋参中提取人参总皂苷,再分离得到人参二醇皂苷,其得率为6%.并采用硅胶柱层析法对人参二醇皂苷进行分离,从而得到较纯的人参皂苷Rd.结果表明,在硅胶柱分离中,从30 g二醇类皂苷分离得到含人参皂苷Rd的皂苷9.46 g,得率为32.5%,得到较纯人参皂苷Rd4.70 g,得率为15.6%.采用结晶的方法对1 g样品(硅胶柱分离后的较纯人参皂苷Rd)进行提纯,得到人参皂苷Rd 500 mg,得率为50%,其纯度为98%左右.

RP-HPLC法测定西洋参茎叶中二醇皂苷5种成分含量

目的建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定西洋参茎叶二醇皂苷中5个成分(人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd)含量测定方法。方法采用高效液相色谱法。色谱柱AgilentTC-C18(4.6mm×250mm,5μm);乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱;检测波长203nm;体积流量1.0ml/min;柱温40℃。结果5种成分均达到基线分离,线性良好。人参皂苷Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd平均回收率分别为98.39%、97.36%、98.02%、97.70%、97.01%。结论该方法能快速、准确地测定西洋叁茎叶二醇皂苷5种成分的含量,而且重复性好。

柱层析法在人参皂甙组分分离中的应用

人参中所含的主要药理成分为人参二醇类皂甙、人参三醇类皂甙和齐墩果酸三种 ,其中的二醇类皂甙是制备人参皂甙Rg3 的主要原料 ,这种药物活性较高的微量皂甙可以由人参二醇皂甙通过化学法转化而来。本论文为得到大量的人参二醇 ,采用柱层析法对人参总皂甙进行分离。在对 98.1g西洋参人参总皂甙进行分离后 ,得到二醇类皂甙 36 .6 g ,其分离率是 37.3 %。这样 ,就为大批量的从人参皂甙Rg3 制备Rh2

UPLC-MS/MS法用于大鼠血浆中20(S)-原人参二醇药动学研究

目的:建立沉淀蛋白法结合超高效液相色谱-三重四级杆质谱法灵敏检测大鼠血浆中20(S)-原人参二醇的分析方法。方法:血浆样品用0.05%甲酸/乙腈沉淀蛋白处理后,采用Waters ACQUITY BEH C18(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱进行分离,以乙腈-水(80∶20)为流动相进行等度洗脱,在电喷雾负离子模式下,采用多反应监测模式进行定性定量分析。结果:20(S)-原人参二醇在1~2500 ng/mL浓度范围内呈现良好线性(r≥0.998),定量限为0.5 ng/mL;方法批内与批间精密度均小于15%,准确度RE在±12.2%以内;方法提取回收率在84.8%~94.1%;大鼠单次灌胃20(S)-原人参二醇样品后,血浆中20(S)-PPD的C_(max)、t_(max)、t_(1/2)和AUC_(0-∞)分别为3520 ng/mL、2 h、10.65 h和21760 ng·mL^(-1)·h^(-1)。结论:本方法准确度、灵敏度高,样品前处理方法简单、快速,可用于血浆样品中20(S)-原人参二醇的药动学研究。

原人参二醇对非小细胞肺癌的抑制作用及机制

目的研究人参活性成分原人参二醇(Protopanaxdiol,PPD)对非小细胞肺癌的抑制作用及机制。方法将人非小细胞肺癌A549细胞分为对照组(等量二甲基亚砜DMSO)和实验组(30μg·mL-1 PPD)。用JC-1标记的流式细胞术检测细胞线粒体膜电位,用激光共聚焦显微镜观察线粒体通透性转换孔道(mitochondrial permeability transition pore,mPTP)变化,用Western blot实验检测解偶连蛋白-2(Uncoupling protein 2,UCP2)的表达水平。结果实验组和对照组红绿荧光的相对比例分别为0.29±0.05和2.44±0.03,钙黄绿素的荧光强度分别为2.79±0.25和8.58±1.83,UCP2蛋白相对表达量分别为0.44±0.03和1.00±0.15,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 PPD可诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡,其机制可能与抑制UCP2的基因表达和调节线粒体功能相关。