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产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因在大肠杆菌中的表达
1
作者
杜郭君
张一平
+3 位作者
王红连
朱晓宏
柏建新
邓崇亮
《生物技术》
CAS
CSCD
2005年第4期15-16,共2页
为了克隆产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因。用PCR扩增的方法,从产肌苷的枯草杆菌BacillussubtilisJSIM-1019中克隆出一个长1kb长的DNA片段,经功能检测,证明正向插入片段与大肠杆菌的磷酸核糖焦磷酸营养缺陷特性(PRPP-)能够营养互补。含有...
为了克隆产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因。用PCR扩增的方法,从产肌苷的枯草杆菌BacillussubtilisJSIM-1019中克隆出一个长1kb长的DNA片段,经功能检测,证明正向插入片段与大肠杆菌的磷酸核糖焦磷酸营养缺陷特性(PRPP-)能够营养互补。含有该重组质粒的PRPP缺陷大肠杆菌JSIM-DH-27在基本培养基上的能够生长。
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关键词
prsa基因
基因
表达
枯草芽孢杆菌
下载PDF
职称材料
分子伴侣prsA2基因缺失对单增李斯特菌致病性的影响
2
作者
胡文洁
方小伟
+5 位作者
郭骞
杨雨婷
刘晶
梁雄燕
杨玉莹
方春
《中国畜牧兽医》
CSCD
北大核心
2024年第1期338-346,共9页
【目的】构建单增李斯特菌分子伴侣prsA2基因缺失株与回补株,探究其对单增李斯特菌内化素B(InlB)锚定能力以及致病性的影响。【方法】利用穿梭质粒pKSV7和回补质粒pIMK2分别构建prsA2基因缺失株与回补株;通过生长曲线分析亲本株10403S...
【目的】构建单增李斯特菌分子伴侣prsA2基因缺失株与回补株,探究其对单增李斯特菌内化素B(InlB)锚定能力以及致病性的影响。【方法】利用穿梭质粒pKSV7和回补质粒pIMK2分别构建prsA2基因缺失株与回补株;通过生长曲线分析亲本株10403S、缺失株ΔprsA2和回补株CΔprsA2生长能力;利用Western blotting检测prsA2基因缺失对单增李斯特菌InlB锚定的影响;通过肠上皮细胞(Caco-2)黏附侵袭试验与免疫荧光试验、小鼠毒力试验分析prsA2基因缺失对单增李斯特菌黏附侵袭能力、在宿主细胞间迁移能力及小鼠致病性的影响。【结果】PCR扩增结果显示,试验成功构建了缺失株ΔprsA2和回补株CΔprsA2。生长曲线结果显示,prsA2基因缺失不影响单增李斯特菌在BHI培养基中的生长能力(P>0.05)。Western blotting结果显示,缺失株ΔprsA2细菌表面的InlB锚定量极显著低于10403S和CΔprsA2(P<0.01),细菌培养上清中InlB锚定量极显著高于10403S和CΔprsA2(P<0.01)。细胞试验结果显示,缺失株ΔprsA2对Caco-2细胞的黏附率、侵袭率均极显著低于10403S和CΔprsA2(P<0.01);prsA2基因缺失减弱了单增李斯特菌募集肌动蛋白形成肌动蛋白尾巴在细胞间迁移的能力。小鼠毒力试验结果显示,缺失株ΔprsA2在小鼠肝脏与脾脏中的细菌载量均显著低于10403S和CΔprsA2(P<0.05)。【结论】分子伴侣prsA2基因缺失不影响单增李斯特菌在BHI培养基中的生长能力,但缺失株ΔprsA2表面的InlB锚定量显著下降,缺失prsA2基因减弱单增李斯特菌对Caco-2细胞的黏附侵袭能力、在细胞间迁移能力以及对小鼠的致病性。
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关键词
单增李斯特菌
分子伴侣
prsa
2
基因
缺失
致病性
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职称材料
题名
产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因在大肠杆菌中的表达
1
作者
杜郭君
张一平
王红连
朱晓宏
柏建新
邓崇亮
机构
江苏省微生物研究所有限责任公司
出处
《生物技术》
CAS
CSCD
2005年第4期15-16,共2页
基金
国家"十五"攻关项目(编号:2004BA713B05-09)
文摘
为了克隆产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因。用PCR扩增的方法,从产肌苷的枯草杆菌BacillussubtilisJSIM-1019中克隆出一个长1kb长的DNA片段,经功能检测,证明正向插入片段与大肠杆菌的磷酸核糖焦磷酸营养缺陷特性(PRPP-)能够营养互补。含有该重组质粒的PRPP缺陷大肠杆菌JSIM-DH-27在基本培养基上的能够生长。
关键词
prsa基因
基因
表达
枯草芽孢杆菌
Keywords
prsa
gene
gene expression
Bacillus subtilis
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
分子伴侣prsA2基因缺失对单增李斯特菌致病性的影响
2
作者
胡文洁
方小伟
郭骞
杨雨婷
刘晶
梁雄燕
杨玉莹
方春
机构
长江大学动物科学学院
出处
《中国畜牧兽医》
CSCD
北大核心
2024年第1期338-346,共9页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(31802208)
湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20221302)。
文摘
【目的】构建单增李斯特菌分子伴侣prsA2基因缺失株与回补株,探究其对单增李斯特菌内化素B(InlB)锚定能力以及致病性的影响。【方法】利用穿梭质粒pKSV7和回补质粒pIMK2分别构建prsA2基因缺失株与回补株;通过生长曲线分析亲本株10403S、缺失株ΔprsA2和回补株CΔprsA2生长能力;利用Western blotting检测prsA2基因缺失对单增李斯特菌InlB锚定的影响;通过肠上皮细胞(Caco-2)黏附侵袭试验与免疫荧光试验、小鼠毒力试验分析prsA2基因缺失对单增李斯特菌黏附侵袭能力、在宿主细胞间迁移能力及小鼠致病性的影响。【结果】PCR扩增结果显示,试验成功构建了缺失株ΔprsA2和回补株CΔprsA2。生长曲线结果显示,prsA2基因缺失不影响单增李斯特菌在BHI培养基中的生长能力(P>0.05)。Western blotting结果显示,缺失株ΔprsA2细菌表面的InlB锚定量极显著低于10403S和CΔprsA2(P<0.01),细菌培养上清中InlB锚定量极显著高于10403S和CΔprsA2(P<0.01)。细胞试验结果显示,缺失株ΔprsA2对Caco-2细胞的黏附率、侵袭率均极显著低于10403S和CΔprsA2(P<0.01);prsA2基因缺失减弱了单增李斯特菌募集肌动蛋白形成肌动蛋白尾巴在细胞间迁移的能力。小鼠毒力试验结果显示,缺失株ΔprsA2在小鼠肝脏与脾脏中的细菌载量均显著低于10403S和CΔprsA2(P<0.05)。【结论】分子伴侣prsA2基因缺失不影响单增李斯特菌在BHI培养基中的生长能力,但缺失株ΔprsA2表面的InlB锚定量显著下降,缺失prsA2基因减弱单增李斯特菌对Caco-2细胞的黏附侵袭能力、在细胞间迁移能力以及对小鼠的致病性。
关键词
单增李斯特菌
分子伴侣
prsa
2
基因
缺失
致病性
Keywords
Listeria monocytogenes
chaperone
prsa
2 gene
deletion
pathogenicity
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
产嘌呤核苷的枯草杆菌prsA基因在大肠杆菌中的表达
杜郭君
张一平
王红连
朱晓宏
柏建新
邓崇亮
《生物技术》
CAS
CSCD
2005
0
下载PDF
职称材料
2
分子伴侣prsA2基因缺失对单增李斯特菌致病性的影响
胡文洁
方小伟
郭骞
杨雨婷
刘晶
梁雄燕
杨玉莹
方春
《中国畜牧兽医》
CSCD
北大核心
2024
0
下载PDF
职称材料
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