马蹄荷化学成分研究

从马蹄荷 (ExbucklandiapopulneaR .W .Br .)茎皮中首次分离得到 6个化合物 ,通过波谱分析鉴定为 β 谷甾醇 (Ⅰ )、胡萝卜甙 (Ⅱ )、樱桃甙 (Ⅲ )、芒花甙 (Ⅳ )、圣草酚 (Ⅴ )和白藜芦醇 (Ⅵ )。

马铃薯花杀螨活性成分分离、鉴定及其杀螨活性

以马铃薯花乙酸乙酯粗提物为分离对象,以朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus等4种叶螨为供试靶标,采用生物活性追踪法,分离得到2种具有杀螨活性的化合物(6a和2′a)。依据质谱、核磁共振氢谱和碳谱,并结合相关文献数据鉴定了其化学结构,分别为江户樱花苷(5,7, 4′-三羟基二氢黄酮-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷)(6a)和α-卡茄碱(2′a),前者系首次从茄科植物马铃薯中分离得到。采用玻片浸渍法测定了2个化合物对朱砂叶螨等4种叶螨的触杀活性。结果表明,化合物6a(江户樱花苷)对朱砂叶螨、二斑叶螨T. urticae和山楂叶螨T. viennensis 24 h LC_(50)值分别为461.98、338.76和732.08 mg/L,其触杀活性强于对照药剂鱼藤酮,相对毒力分别为鱼藤酮的1.17、1.52和3.07倍;化合物2′a(α-卡茄碱)对二斑叶螨和山楂叶螨24 h LC_(50)分别为480.79和834.98 mg/L,相对毒力分别为鱼藤酮的1.07和2.69倍。可见,江户樱花苷和α-卡茄碱具有一定的杀螨活性和潜在的应用价值。

洋金花中黄酮类化合物研究

目的:研究茄科植物洋金花(Datura metel L.)的黄酮类化学成分。方法:对洋金花的黄酮类组分进行分离。利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱和高相液相色谱(制备型)法进行分离纯化,并通过波谱和质谱数据鉴定化合物的结构。结果:分离得到3个化合物,分别为杨属苷(populnin)(1)、山柰酚-3-O-[β-D-葡萄吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖基[Kaempferol-3-O-β-D-glucopyra Nosyl-(1→2)-β-D-glucopyra Noside](2)、樱桃苷(pruning)(3)。结论:化合物3为首次从该植物中分离得到。

交联柚苷酶聚集体水解柚皮苷制备普鲁宁

为了提高普鲁宁的收率、简化分离提纯的工艺、得到较高纯度的普鲁宁,本实验采用交联柚苷酶聚集体水解柚皮苷制备普鲁宁,以普鲁宁浓度为优化指标,研究了底物浓度、p H、温度、加酶量、反应时间对制备普鲁宁的影响。利用正交设计对水解过程进行优化,确定最佳工艺条件为：柚皮苷浓度13.79 mmol/L、p H=8.0、温度65℃、加酶量18.0 mg/m L、反应时间12.0 h,优化后制备得到的普鲁宁浓度为13.36 mmol/L、收率达到96.87%。连续使用3个批次后,普鲁宁的收率可以达到91.29%,交联酶聚集体的稳定性较好。采用聚酰胺树脂对水解产物进行吸附,体积分数为40%~60%的异丙醇线性梯度洗脱,从0.36 g柚皮苷反应液中可以分离得到0.22 g普鲁宁。

黑曲霉所产α-L-鼠李糖苷酶制备普鲁宁

前期筛选得到一株产α-L-鼠李糖苷酶的黑曲霉,并利用该酶转化柚皮苷制备普鲁宁。该黑曲霉在以芦丁作为诱导剂的液体培养基中发酵72h,对发酵液用70%硫酸铵沉淀,透析得到α-L-鼠李糖苷酶的粗酶液。经优化该酶的最适转化温度为50℃,最适pH为5.0,在此条件柚皮苷转化2h后的转化率高达到97%以上。本研究可为α-L-鼠李糖苷酶用于制备普鲁宁这一类生物转化提供有效借鉴。

杜仲雄花中黄酮类化学成分及其抗氧化活性研究

目的研究杜仲Eucommia ulmoides雄花的黄酮类化学成分，并进行抗氧化活性筛选。方法运用硅胶、Sephadex LH-20和ODS等各种色谱技术进行分离纯化，根据理化性质和谱学数据鉴定化合物结构，并运用DPPH自由基和H2O2诱导PC12细胞凋亡实验测定其抗氧化活性。结果从杜仲雄花95％乙醇提取物中共分离得到10个黄酮类化合物，分别鉴定为柚皮素（1）、槲皮素（2）、槲皮素-3-O-a-L-阿拉伯糖基（1→2）-β-D-葡萄糖苷（3）、异槲皮苷（4）、江户樱花苷（5）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基（1—2）-β-D-葡萄糖苷（6）、山柰酚-3-O-β-D-（6”-O-乙酰基）-β-D-葡萄糖苷（7）、芦丁（8）、异鼠李素-3-O-β-D-葡萄糖苷（9）、紫云英苷（10）。结论化合物1、5、6、9为首次从杜仲雄花中分离得到；活性测试结果表明化合物2～4、6、8具有较强的抗氧化活性，能明显抑制H2O2诱导PC12细胞凋亡。

酶法转化柚皮苷产普鲁宁工艺研究

优化柚苷酶转化柚皮苷生成普鲁宁的工艺,在此基础上分离纯化得到浓度较高的普鲁宁。利用碱性缓冲液处理柚苷酶,使其β-葡萄糖苷酶的活力大部分丧失,而保留α-鼠李糖苷酶的活性,从而使酶水解柚皮苷的产物——普鲁宁得到积累。利用水解过程中还原糖生成量与普鲁宁生成量成正比的关系,用DNS法检测柚皮苷水解过程中还原糖的含量,分析不同工艺参数中普鲁宁的含量。通过对柚皮苷水解过程的动态分析,得到柚苷酶转化柚皮苷的最适条件:温度50℃,p H 4.0,酶用量10 U/m L,底物含量0.16%。在此条件下酶解90 min,普鲁宁还保持较高的浓度而柚皮苷基本转化完全。酶解液经化学萃取和硅胶柱层析,得到纯化的普鲁宁,用高效液相色谱检测,其纯度达到99%。

HPLC法同时测定珍珠菜提取物中5种黄酮

目的建立同时测定珍珠菜提取物中芦丁、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、江户樱花苷、槲皮素、山柰酚的HPLC方法。方法采用Chromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5.0μm),柱温35℃,以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,双波长检测(λ1=283 nm,λ2=370 nm),体积流量1.0 mL/min。结果 5个成分均能达到基线分离,线性回归方程分别为芦丁Y=14 958 X+179.22(r=0.999 3),异鼠李素-3-O-芸香糖苷Y=12 126 X+3.14(r=0.999 4),江户樱花苷Y=23 821 X+76.81(r=0.999 4),槲皮素Y=35 761 X-20.30(r=0.999 5),山柰酚Y=39 078 X+1.81(r=0.999 1),芦丁、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、江户樱花苷、槲皮素、山柰酚进样量分别在228.60～1 143.00、99.60～498.00、232.20～1 161.00、22.08～110.40、15.12～75.60 ng与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为97.8%、98.9%、102.4%、98.4%、92.2%。结论本检测方法简便、准确,为珍珠菜提取物中黄酮类成分的质量控制提供了依据。