葛根中总黄酮含量测定方法比较研究

目的:紫外-可见分光光度测定葛根总黄酮含量的两种方法(显色法、直接测定)结果具有显著差异,因此将两种测定方法与HPLC法进行对比,找出导致其差异的原因和解决方案。方法:以芦丁为对照品,采用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠显色,通过UV法测定葛根总黄酮含量;以葛根素为对照品,直接于250 nm处测定吸光度计算葛根总黄酮含量;采用高效液相色谱法测定葛根素的含量,对比三种方法的含量差异,评价两种紫外测定法所得结果的准确性。结果:显色法测定23批野葛总黄酮含量为0.93%~8.02%,23批粉葛总黄酮含量为0.04%~1.12%,直接测定法测得23批野葛总黄酮含量为3.31%~15.74%,23批粉葛总黄酮含量为0.80%~7.59%;显色法测得葛根总黄酮含量均显著低于非显色法。HPLC测定23批葛根的葛根素含量为1.98%~5.85%,23批粉葛的葛根素含量为0.17%~2.37%。结论:显色法测定的总黄酮含量大部分低于单一成分葛根素的含量,不显色法测得总黄酮含量均高于单一成分葛根素的量。在葛根总黄酮的测定中,以葛根素为对照品的直接测定法更加合理准确。

葛根总黄酮诱导人早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞凋亡的实验研究

本研究探讨葛根有效成分对恶性白血病可能的凋亡诱导作用及其分子机制。采用葛根总黄酮(flavonoids of puerarin,PR)处理人早幼粒细胞白血病(APL)细胞株NB4,用MTT法检测细胞增殖抑制率;FITC-Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率;实时定量PCR检测pml/rarα、bcl-2、survivin基因表达;Western blot检测JNK、p38MAPK、FasL及caspase相关酶的变化。结果发现,PR能明显抑制NB4细胞增殖,并诱导细胞凋亡。随着PR浓度的增加,pml/rarα、bcl-2及survivin基因在mRNA水平表达下调,JNK、FasL、caspase3及caspase8蛋白表达增加,与PR浓度呈正相关;PR联合三氧化二砷(arsenic trioxide,ATO)处理后上述作用更为明显。结论:PR诱导NB4细胞凋亡的机制可能与JNK相关信号分子的活化有关;PR联合ATO具有协同诱导NB4细胞凋亡的作用。

饲粮中添加葛根总黄酮对爱拔益加肉鸡生长性能及肉品质的影响

本试验旨在研究饲粮中添加不同水平葛根总黄酮对爱拔益加（AA）肉鸡生长性能及肉品质的影响。选择健康1日龄AA肉鸡275羽,随机分为5个组,每组5个重复,每个重复11羽鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加10、50、250、1 250 mg/kg葛根总黄酮。试验期42 d。结果表明：1）10 mg/kg添加组AA肉鸡的平均日增重在8～14日龄、15～21日龄和29～35日龄时均显著高于对照组（P〈0.05）,但在22～28日龄时显著低于对照组（P〈0.05）;250 mg/kg添加组AA肉鸡的平均日增重在8～14日龄时显著高于对照组（P〈0.05）。10 mg/kg添加组AA肉鸡的料重比在15～21日龄、29～35日龄和36～42日龄时显著低于对照组（P〈0.05）,但在22～28日龄时显著高于对照组（P〈0.05）。各组AA肉鸡的平均日采食量差异不显著（P〉0.05）。2）与对照组相比,10 mg/kg添加组AA肉鸡胸肌、腿肌的亮度（L＊）值显著降低（P〈0.05）,红度（a＊）值有升高趋势但差异不显著（P〉0.05）;250 mg/kg添加组腿肌亮度值显著低于对照组（P〈0.05）;50 mg/kg添加组胸肌、腿肌的黄度（b＊）值均显著低于对照组（P〈0.05）。与对照组相比,250、1 250 mg/kg添加组AA肉鸡的胸肌剪切力显著降低（P〈0.05）;250 mg/kg添加组的胸肌水分含量显著高于对照组（P〈0.05）。结果表明,饲粮中添加10 mg/kg的葛根总黄酮可提高AA肉鸡的生长性能,但添加250 mg/kg的葛根总黄酮可改善肌肉的色泽和嫩度。

抗氧化效应法研究葛根黄酮微丸的药动学

目的:研究葛根黄酮微丸的药动学。方法:采用抗氧化效应法测定给药后不同时间点大鼠血浆中所含黄酮类成分的抗氧化能力,计算出血浆中黄酮类物质的含量,得到大鼠给药葛根黄酮后血浆中黄酮类物质的含量的变化曲线,得出微丸制剂在体内的药动学过程。结果:葛根黄酮微丸给药后的AUC为愈风宁心片的4.40倍。结论:将葛根黄酮制成微丸能够有效提高葛根中黄酮类物质的生物利用度。

6种晋产野生葛根中葛根素、大豆苷和总黄酮含量比较

采用高效液相色谱法对山西省5地6处野生葛根中主要有效成分葛根素、大豆苷及总黄酮含量进行了分析,并对HPLC法的测定条件（流动相和洗脱程序）进行了优化。结果表明,6种晋产野生葛根中主要有效成分含量差异显著,葛根素的含量为1.46%~4.48%,大豆苷的含量为0.11%~0.62%,总黄酮的含量为11.19%~26.14%。葛根素、总黄酮含量与纬度高低呈正相关。晋南绛县么里镇小北山与夏县泗交镇太宽河自然保护区的野生葛根中葛根素含量低于《中国药典》规定的2.4%,而晋北灵丘县的野生葛根中葛根素含量则高达4.48%。

葛根中有效成分的微波辅助萃取研究

采用均匀设计法对微波辅助萃取葛根中有效成分的提取工艺进行考察 ,用紫外分光光度法和 HPL C法分别测定葛根中总黄酮和葛根素的含量。结果表明在采用 95 %乙醇作为溶剂时 ,优选出的最佳工艺条件为 :微波功率2 5 5 W、原料粉碎度 4 0目、微波辐射时间 15 min、固液比为 1∶ 9,浸泡时间 1h,且验证表明所建立的数学模型是合理的。

葛根总黄酮的提取研究

用超声辅助提取葛根总黄酮,考察了超声功率、超声作用时间、提取温度和乙醇浓度等因素对葛根总黄酮提取率的影响。结果表明,超声提取葛根总黄酮的较佳工艺条件为:超声功率270 W,超声作用时间20 min,提取温度70℃,乙醇浓度为65%,此条件下总黄酮提取率为167.974 mg/100 g葛根粉。

不同采集时间野葛不同部位总黄酮和葛根素含量比较

The contents of flavonoids and puerarin in Pueraria lobata(Willd.) Ohwi were measured by UV-spectrophotometry and HPLC.The results showed that contents of flavonoids and puerarin in P.lobata were related to different parts and gathering season.The flavonoids and puerarin content from vines gathered in autumn and winter were the highest,reached to 5.18%-6.12% and 0.982%-1.718% respectively.The vine is regarded as the available medicinal resources and is worth exploiting.

大孔树脂纯化葛根的使用次数和再生方法

[目的]研究HPD-200A型大孔树脂在纯化葛根素及葛根总黄酮时的使用寿命和再生方法。[方法]以葛根总黄酮和葛根素的吸附容量和精致后的纯度为指标,考察大孔树脂在多次吸附洗脱和再生后的吸附洗脱能力的变化。[结果]树脂初次使用时,葛根素吸附容量约为17.29 g/L,总黄酮的吸附容量约为46.00 g/L,两者的纯度为32.40%和75.52%,连续使用11次后葛根素吸附容量为原来的82.26%,总黄酮的吸附容量为原来的80.99%,两者纯度为27.23%和67.99%,纯度略有降低。用95%乙醇再生处理后,HPD-200A大孔树脂对葛根素和总黄酮的吸附容量分别可达到新树脂的94.35%和91.87%,两者的纯度也均可达到新树脂的97%以上。[结论]使用HPD-200A型大孔树脂精制葛根时,新树脂可连续使用11次,用95%乙醇再生后,至少可连续使用3次,即一批HPD-200A型树脂至少可使用14次,本研究为葛根纯化工艺的产业化确定提供了实验基础和参考。

微波辅助萃取葛根中有效成份的研究

目的 以总黄酮和葛根素的含量为指标,研究微波辅助革取葛根的提取工艺。方法 采用连续微波辐射方式进行微波萃取参数的单一因素考察。结果 微波功率、辐射时间、溶剂用量、原料粉碎度、原料含水量等工艺参数的选择对葛根中有效成分的提取均有影响。结论 微波辅助革取比传统加热回流提取葛根的效果好。从单一因素观察,优化工艺条件为:微波功率510W、辐射时问10 min;同时增加溶剂用量、提高原料粉碎度、延长原料浸泡时间将有利于葛根中有效成分的提取。

不同来源的粉葛中总黄酮和葛根素的含量测定

目的考察不同来源粉葛中总黄酮、葛根素的含量。方法采用紫外分光光度法（UV）测定总黄酮含量；采用高效液相色谱法（HPLC）测定葛根素含量，kromasil C18色谱柱（4．6mm×250nm，5μm），流动相为甲醇-水（33：67），流速为1．0ml·min^-1，柱温30℃，检测波长为250nm。结果总黄酮含量为0．53％～1．03％，回收率为99．69％，RSD〈2％（n=6）；葛根素含量为0．21％～0．49％，回收率为96．11％，RSD〈2％（n=6）。结论不同来源的粉葛药材中总黄酮和葛根素含量间变异较大，其中广东产粉葛，其总黄酮和葛根素含量均较高，平均质量优于广西产粉葛。

葛渣总黄酮提取及葛根素含量测定

目的:优化葛渣中总黄酮提取工艺条件,测定葛渣中葛根素含量。方法:以葛渣为原料、总黄酮得率为评价指标,采用L9(34)正交试验设计,考察乙醇体积分数、提取时间、固料比、提取温度对葛渣总黄酮提取效果的影响,同时采用高效液相色谱法(HPLC法)测定葛根素的含量。结果:葛渣中总黄酮的最佳提取工艺条件为以体积分数70%乙醇溶液为溶剂、提取150min、料液比1:40(g/mL)、提取温度80℃,此条件下的总黄酮得率最高,为32.41mg/g。在该提取条件下,葛根、葛渣和葛粉中总黄酮的含量分别为46.11、32.41mg/g和11.23mg/g;葛根、葛渣和葛粉中葛根素的含量分别为40.63、21.24mg/g和4.71mg/g。结论:葛渣中含有丰富的总黄酮和葛根素,该方法可作为从葛渣中提取总黄酮和葛根素的方法。

海金沙黄酮-葛根素复配物对芝麻油过氧化值的影响

在芝麻油中添加海金沙总黄酮-葛根素复配物,考查了温度、过氧水和紫外光对芝麻油过氧化值的影响。实验结果表明:芝麻油中添加1∶1(v/v)复配物的抗氧化活性最好;用235.7nm紫外光照射5h,芝麻油中添加复配物后的过氧化值比加BHT和不加的分别小7.89%和13.13%;分别在70℃加热和1mL0.1%H2O2氧化5h,芝麻油中添加复配物后的过氧化值比加BHT的小16.36%和9.56%,比不加的小44%和27.35%。

葛根总黄酮提取工艺的研究

目的:筛选提取葛根总黄酮的最佳工艺条件。方法:采用单因素和正交试验对提取葛根总黄酮的工艺条件进行优化;利用紫外可见分光光度计测量葛根总黄酮的含量;利用高效液相色谱仪测量葛根素的含量;分别以葛根素和葛根总黄酮的含量为指标进行最优工艺的评价。结果:最佳工艺条件是以9倍量的30%乙醇提取3次,每次1h。结论:该提取工艺简单,成本低,适合于生产应用。

炮制对葛根中总黄酮及葛根素含量的影响

目的:比较不同炮制方法对葛根中总黄酮及葛根素含量的影响。方法:采用乙醇回流及薄层层析,应用紫外分光光度法检测总黄酮及葛根素含量。结果:总黄酮及葛根素含量,麸煨品高于麸烘品和生葛根。结论:总黄酮及葛根素含量以麸煨法为好。

葛根总黄酮对不同急性髓系白血病细胞株增殖抑制的影响

为了探讨葛根总黄酮对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的作用及其可能的机制,观察不同浓度葛根总黄酮体外对4种AML细胞株Kasumi-1、HL-60、NB4和U937的增殖抑制影响和细胞周期的变化。应用MTT法检测细胞株细胞的增殖抑制作用,用流式细胞术检测细胞周期的变化。结果表明:一定浓度葛根总黄酮对4种AML细胞株增殖抑制作用差异显著,抑制强度依次为NB4细胞>Kasumi-1细胞>U937细胞>HL-60细胞;葛根总黄酮不同程度地改变NB4、Kasumi-1、U937及HL-60细胞周期进程,使G1期细胞比例下降,S期细胞比例增高,出现亚二倍体峰,呈现浓度依赖性。结论:葛根总黄酮体外对不同AML细胞株具有选择性增殖抑制作用,以对NB4细胞株的影响最为显著。

样品处理方法对皖南葛根和粉葛中总黄酮和葛根素含量的影响

目的建立葛根和粉葛中总黄酮和葛根素含量测定方法,比较室温超声法、超声加热法和加热回流法等样品处理方法对葛根和粉葛中总黄酮和葛根素含量测定结果的影响。方法总黄酮含量测定采用紫外分光光度法,在波长250 nm处测定吸光度;葛根素含量测定采用HPLC,固定相为十八烷基硅烷键合硅胶,流动相为甲醇-水(25∶75),检测波长为250 nm,流速为1.0 m L/min。结果室温超声法、加热回流法和超声加热法葛根中总黄酮含量分别为15.09%、14.48%、12.71%(n=3),葛根素含量分别为4.37%、4.09%、3.80%(n=3);粉葛中总黄酮含量分别为2.09%、2.23%、2.17%(n=3),葛根素含量分别为0.50%、0.53%、0.52%(n=3)。结论室温超声法、超声加热法可替代加热回流法分别用于葛根和粉葛中总黄酮和葛根素含量测定时供试液制备;皖南野生葛根和粉葛中葛根素含量均符合药典标准。

外加磁场作用下强化磁性树脂吸附葛根黄酮的应用效能

在外加磁场磁感应强度为1.0T时,对原液质量浓度为4.88mg/ml的葛根黄酮溶液,在pH值为7的中性环境下,分别研究磁性树脂的静态和动态吸附,并就使用次数与普通树脂进行比较。结果显示:静态吸附时磁性树脂与普通树脂的吸附效能相差不大;当吸附流速为2BV/h时,磁性树脂达到饱和吸附时可处理12BV量的黄酮溶液,优于普通树脂;在使用4次后,磁性吸附树脂的吸附效果明显优于AB-8树脂。

不同产地葛根中总黄酮和葛根素的含量测定

目的：考察不同产地葛根中总黄酮和葛根素的含量。方法：采用紫外分光光度法（UV）测定总黄酮含量；采用高效液相色谱法（HPLC）测定葛根素含量，kromasil C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），流动相为甲醇-水（33：67），流速为1．0mL·min^-1，柱温30℃，检测波长为250nm。结果：总黄酮含量为0．66％-18.41％；葛根素含量为0．21%-4．06％。结论：各产地的葛根药材中总黄酮和葛根素含量间变异较大，以四川产葛根中总黄酮和葛根素含量最高。

葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠抗氧化作用的研究

目的:考察葛根黄酮对衰老模型小鼠抗氧化能力的影响。方法:用D-半乳糖制备衰老模型小鼠,分为正常对照组、模型组、阳性对照组、高、低剂量组,检测各组小鼠血清丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—PX)水平变化。结果:葛根黄酮能显著降低衰老小鼠血清MDA水平,同时可提高SOD和GSH—PX活力水平。结论:葛根黄酮对亚急性衰老模型小鼠具有抗氧化作用。