银杏叶制剂治疗肺间质纤维化的实验研究

目的：探讨银杏叶制剂（百路达）对博莱霉素A_5所致大鼠肺间质纤维化的治疗作用及机制。方法：以博莱霉素A_5所致大鼠肺间质纤维化为模型，观察百路达治疗后病理、胶原蛋白、核因子kB活性、转化生长因子-β（TGF-β）mRNA表达及蛋白水平的变化。结果：百路达治疗组肺泡炎、纤维化病变均较博莱霉素模型组减轻（P＜0．05），其胶原蛋白含量较模型组减少（P＜0．01），百路达治疗组1周肺泡巨噬细胞核因子kB（N－kB）活性明显降低（47．3％），TGF-βmRNA表达及其蛋白水平均有所降低（P＜0．05）。结论：百路达治疗肺间质纤维化确有疗效。其机制可能通过抑制核因予kB活性，减少了TGF-βmRNA表达及蛋白产生，使炎症及纤维化病变减轻。

银杏叶提取物对大鼠肺纤维化初期肺结缔组织生长因子表达的影响

目的:研究银杏叶提取物(GbE)对博莱霉素(BLM)性肺纤维化初期大鼠肺内结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法:气管内滴注BLM,用Western blotting法检测肺组织CTGF含量;用氯胺-T法测定肺组织羟脯氨酸含量;用比色法检测血浆丙二醛(MDA)含量。结果:注BLM后14d肺组织CTGF含量和出肺血MDA含量,BLM+NS组均分别高于NS组(P<0.05;P<0.01)。注BLM后30d肺组织羟脯氨酸含量和出肺血MDA含量,BLM+NS组均分别高于NS组(BothP<0.01)。GbE处理可显著缓解上述变化。结论:GbE缓解BLM性肺纤维化初期肺内CTGF上调;GbE的抗氧化损伤作用可能是其缓解CTGF增多的机制之一。

基于网络药理学和基因表达数据库探讨银杏叶-葶苈子延缓心肌纤维化的作用机制

目的:借助网络药理学分析,联合分子对接及基因表达芯片分析验证,探讨银杏叶-葶苈子延缓心肌纤维化的作用机制。方法:利用中药系统药理学数据库与分析平台筛选银杏叶-葶苈子的有效成分和靶点,通过人类基因数据库(GeneCards)、人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获取心肌纤维化的靶点。将有效成分靶点与心肌纤维化靶点分别导入Cytoscape 3.8.0软件构建药物-成分-靶点网络、STRING平台构建蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络,再利用Cytoscape自带的网络分析工具计算网络拓扑参数,分析获取关键靶点。将交集靶点通过R软件进行基因本体(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。最后利用基因表达数据库(GEO)的芯片数据进行数据分析,并利用AutoDock软件进行有效成分与核心靶点分子对接,Pymol软件绘制分子对接模式图验证核心靶点。结果:通过相关数据库,获得药物有效成分39个,筛选出有效成分作用靶点116个,心肌纤维化靶点3322个。网络拓扑图分析获得转录因子P65(RELA)、雄性激素受体(AR)、前列腺素G/H合酶1(PTGS1)、肿瘤蛋白质P53(TP53)、核因子-κB(NF-κB)抑制剂α(NFKBIA)等关键靶点。GO分析主要涉及对化学应激的细胞反应、对类固醇激素反应、DNA结合转录因子结合、核受体活动、泛素蛋白连接酶等过程,KEGG富集分析主要有脂质和动脉粥样硬化、磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路(MAPK)等信号通路。基因表达数据库分析验证表明,前6个核心靶点中,AR、RELA、TP53、NFKBIA、PTGS1差异有统计学意义(P<0.05)。分子对接结果显示主要活性成分与靶点均能自发结合且大部分结合能力良好。结论:银杏叶-葶苈子可能通过NF-κB、MAPK、PI3K/AKT信号通路等发挥抗炎、抗氧化应激作用,抑制成纤维细胞相关增殖和活化过程,减少细胞外基质沉积,从而发挥延缓心肌纤维化作用。

银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠TGF-β_(1)、MMP-9及NF-κB表达的影响

[目的]探讨银杏叶提取物对肺纤维化模型大鼠转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、核转录因子-κB(NF-κB)表达和肺组织病理变化的影响。[方法]选取72只雄性SD大鼠,按随机数字表法分为正常对照组、肺纤维化模型组、吡非尼酮组、银杏叶提取物高剂量组、银杏叶提取物中剂量组、银杏叶提取物低剂量组,每组各12只。采用气管滴注博来霉素进行肺纤维化造模,于造模后29 d取标本,HE染色和Masson染色法评估肺组织肺泡炎症和纤维化程度,酶联免疫法(ELISA法)测定血清中TGF-β_(1)含量,免疫组化法检测MMP-9、NF-κB表达水平。[结果]肺纤维化模型组肺泡结构紊乱,肺泡壁增厚变形,管腔狭窄,胶原纤维明显增厚;吡非尼酮组及银杏叶提取物组肺泡结构破坏较少,胶原纤维沉积较为缓慢,银杏叶提取物组肺泡炎症积分及纤维化程度均低于肺纤维化模型组,TGF-β_(1)、MMP-9和NF-κB表达水平均低于肺纤维化模型组(P<0.05)。[结论]银杏叶提取物可缓解肺纤维化大鼠的肺泡炎症和纤维化程度,机制可能与其抑制肺组织中TGF-β_(1)、MMP-9与NF-κB表达水平有关。

银杏叶提取物联合糖皮质激素治疗特发性肺纤维化疗效及对血清TGF-β_1、IL-13、SOD、MDA的影响

目的观察银杏叶提取物联合糖皮质激素治疗特发性肺纤维化(IPF)的疗效及对血清转化生长因子-β_1(TGF-β_1)、白细胞介素-13(IL-13)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平的影响。方法将86例IPF患者随机分为观察组43例及对照组43例,对照组给予糖皮质激素治疗,观察组在常规治疗基础上给予银杏叶提取物治疗,疗程12周。观察2组治疗前后血气分析、肺功能、肺纤维指标变化情况;检测2组治疗前后血清TGF-β_1、IL-13、SOD、MDA水平。结果 2组治疗后p(O_2)、Sa(O_2)均明显升高(P均<0.05),p(CO_2)、p_(A-a)(O_2)均明显降低(P均<0.05),且观察组p(O_2)、p_(A-a)(O_2)改善情况均优于对照组(P均<0.05);2组治疗后FVC、FEV_1/FVC、MVV、DLCO均明显升高(P均<0.05),且观察组上述指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05);2组治疗后PCⅢ、CⅣ、PICP、LN均明显降低(P均<0.05),且观察组上述指标改善情况均明显优于对照组(P均<0.05);2组治疗后血清TGF-β_1、IL-13、MDA水平均明显降低(P均<0.05),SOD水平均明显升高(P均<0.05),且观察组上述指标改善情况均优于对照组(P均<0.05)。结论银杏叶提取物联合糖皮质激素能够显著改善IPF患者动脉血气指标及肺功能,并阻断肺纤维化进程,可能与降低血清TGF-β_1、IL-13、MDA水平,提高SOD活性有关。

银杏叶提取物对大鼠肺纤维化的影响及其机制的研究

目的:观察银杏叶提取物(GbE)对博莱霉素(BLM)所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法:将SD大鼠随机分对照组、BLM+NS组和BLM+GbE组,每个时间点每组6只。各组分别于给药后14,30 d处死动物。光镜下观察肺组织损伤(HE染色)和肺组织纤维化(M asson染色)的程度;采用生化法测定肺组织中胶原蛋白含量及血浆MDA含量;采用免疫组织化学法和免疫细胞化学法观察肺组织和支气管肺泡灌洗液细胞(BALF)中TGF-β1蛋白表达的变化。结果:与对照组大鼠相比,BLM+NS组大鼠各时间点各指标呈明显变化,提示模型制作成功。与BLM+NS(14 d)组大鼠相比,BLM+GbE(14 d)组大鼠血浆MDA含量,支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞TGF-β1蛋白表达显著减少;与BLM+NS(30 d)组大鼠相比,BLM+GbE(30 d)组大鼠肺组织损伤、肺组织纤维化显著减轻,肺胶原含量和血浆MDA含量显著减少,肺组织TGF-1β蛋白表达显著减少,但BALF细胞TGF-β1蛋白表达无明显变化。结论:银杏叶提取物具有抗BLM诱导的大鼠肺纤维化作用,其机制可能与减少纤维化早期(14 d)肺泡巨噬细胞和纤维化期(30 d)肺非炎症细胞TGF-β1蛋白表达及减轻BLM所致的氧化应激有关。

银杏叶提取物治疗百草枯中毒小鼠的初步观察

目的:探讨银杏叶提取物(金纳多)对百草枯(PQ)染毒小鼠的治疗作用。方法:将110只小鼠随机分成3组:正常对照组10只、模型组和治疗组各50只。模型组和治疗组以110mg/kg PQ一次性灌胃染毒,对照组给予等量蒸馏水灌胃;2h后治疗组予100mg/kg金纳多灌胃治疗,模型组与对照组灌胃等量蒸馏水,每天1次,连续21d。观察给药后小鼠的每天死亡情况,比较21d的生存率差异;在第21天处死所有存活的小鼠并收集肺组织,用免疫组织化学法测定肺组织血管内皮生长因子(VEGF)的表达,苏木精-伊红及Masson染色观察小鼠肺组织病理变化。结果:模型组21d存活18只,生存率36%,与对照组(存活10只,生存率100%)和治疗组(存活29只,生存率58%)比较差异有统计学意义(P<0.05)。第21天模型组肺组织VEGF免疫组化累积光密度(IOD)值(38 149.79±7 960.10)与对照组(4 315.06±2 351.94)和治疗组(18 027.09±5 251.88)比较差异有统计学意义(P<0.01)。苏木精-伊红和Masson染色显示第21天模型组肺组织炎性细胞浸润及纤维化改变明显,治疗组较模型组炎性细胞浸润较少,肺纤维化程度较轻(P<0.01)。结论:银杏叶提取物对PQ中毒小鼠具有治疗作用,其机制可能与抑制肺纤维化、抑制VEGF表达等有关。