基于法尼醇X受体通路探讨壮药依山红对胆汁淤积大鼠的影响

目的探讨壮药依山红对α-萘异硫氰酸酯(alpha-naphtyl isothiocyanate,ANIT)诱导胆汁淤积大鼠的影响及其作用机制。方法采用120只SD大鼠,随机分成6组,分别为正常组、模型组、熊去氧胆酸组及壮药依山红高、中、低剂量组,每组20只。除正常组外,余用ANIT灌胃建立胆汁淤积大鼠模型。连续给药15天后,称量计算大鼠肝脾指数;血清生化法检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)等转氨酶指标,测定总胆红素(total bilirubin,TBIL)、直接胆红素(direct bilirubin,DBIL)、总胆汁酸(total bile acids,TBA)等胆红素指标;苏木素—伊红(hematoxylin-Eosin,HE)染色法评估肝组织病理学变化,油红O染色评估肝脏脂滴代谢情况;蛋白免疫印迹法及实时荧光定量聚合酶链式反应检测法尼醇X受体(farnesoid X receptor,FXR)、钠牛磺胆酸共转运肽(Na+-taurocholate co-transporting polypeptide,NTCP)、多药耐药相关蛋白2(multidrug resistance-associated protein 2,MRP2)、胆汁盐转运蛋白(bile salt export pump,BSEP)蛋白和mRNA表达水平。结果与正常组比,模型组大鼠肝脾指数、血清转氨酶(ALT、AST、AKP)及胆红素(TBIL、DBIL、TBA)显著升高(P<0.05),肝组织受损。壮药依山红各剂量及熊去氧胆酸显著降低这些指标(P<0.05),改善肝组织学病变,减少脂滴沉积,效果呈剂量依赖性。同时,依山红各剂量组大鼠肝组织中NTCP、MRP2蛋白的表达量均明显升高(P<0.05);高剂量组大鼠肝组织中BSEP蛋白相对表达量显著下降(P<0.05)。与模型组相比,依山红高、中剂量组大鼠肝组织中Fxr、Ntcp、Mrp2 mRNA的相对表达量显著升高(P<0.05);依山红低剂量组大鼠仅Mrp2 mRNA表达量显著升高(P<0.05);依山红各剂量大鼠肝组织中Bsep mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。结论壮药依山红可通过调节FXR及其调控的胆汁转运相关蛋白的表达,对ANIT诱导胆汁淤积模型大鼠起到保肝利胆的作用。

多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵与外膜蛋白表达水平分析

目的分析鲍曼不动杆菌对常用抗生素的敏感性,检测外排泵基因和外膜蛋白基因的表达水平,探讨上述基因表达与抗生素耐药之间的关系。方法选择下呼吸道标本分离的鲍曼不动杆菌共213株,对其进行菌种鉴定、药敏试验;根据药敏试验将其分为不敏感组(NS组)与敏感组(S组),应用荧光定量PCR检测外排泵基因(adeB、adeJ、adeG、craA、abeM、amvA)、外膜蛋白基因(omp25、omp33-36、carO)的表达水平,比较上述基因在NS组与S组表达水平的差异。结果鲍曼不动杆菌对阿米卡星、亚胺培南不敏感率分别为89.2%、81.2%,对哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、庆大霉素等药物的不敏感率均超过92%。adeB基因相对表达量升高(RE≥1)在各抗生素(AMK、IPM、CFP、FEP、TZP、CAZ、SXT、CIP、SCF、CN)NS组的比例高于S组,差异有统计学意义(P<0.05)。外排泵adeB基因mRNA的RE值在上述各抗生素NS组和S组之间差异有统计学意义(P<0.05),NS组adeB基因的RE值平均水平较高。外排泵adeJ、adeG、craA、abeM、amvA基因平均RE水平无升高,且经比较分析差异无统计学意义(P>0.05)。外膜蛋白omp25、omp33-36、carO基因平均RE值均超过1.0,提示相对表达量升高。结论本院鲍曼不动杆菌对多种抗生素耐药率较高。外排泵基因adeB过度表达在本院鲍曼不动杆菌耐药中起着重要作用;其余外排泵基因adeJ、adeG、craA、abeM、amvA和外膜蛋白基因omp25、omp33-36、carO在本研究的多数菌株耐药机制中可能不起作用。

园艺作物果实苹果酸代谢与转运及其调控研究进展

番茄、苹果、梨、枣等园艺作物是典型的苹果酸型果实,其果实酸度主要取决于液泡中苹果酸的积累量。苹果酸不仅决定果实的风味品质,还可作为呼吸底物为植物体提供必需的物质和能量,在调节植物细胞渗透势、酸碱平衡、抗逆性等方面起着重要作用。苹果酸代谢途径比较复杂,涉及众多结构催化酶的参与,而苹果酸主要贮存于液泡中,从细胞质向液泡的跨膜运输和储存是复杂的生物学过程,需要多种转运蛋白、质子泵的参与。总结了苹果酸型果实酸度性状遗传研究、转运蛋白及质子泵在苹果酸跨膜转运中的作用,并将转录因子对苹果酸的代谢调控进行了概述,以深入理解苹果酸代谢调控网络,为园艺作物品质育种提供理论基础。

鲍曼不动杆菌在环境美罗培南浓度变化时耐药性的改变及其机制

目的探寻鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)在环境中碳青霉烯类药物美罗培南浓度改变时耐药性变化的机制。方法通过改变鲍曼不动杆菌标准敏感株ATCC19606和临床耐药株AB.2014培养环境中的美罗培南浓度等条件,诱导对美罗培南不同耐药程度的衍生株。测量所得菌株的生长曲线,并提取各菌株的DNA和RNA,采用PCR分析菌株耐药性改变后的碳青霉烯酶基因IMI、KPC、GES-1、IMP、VIM、NDM-1、OXA23、OXA24、OXA51、OXA58的表达情况;通过实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,RT-qPCR)分析不同耐药程度的鲍曼不动杆菌耐药基因,包括OXA51,外排泵基因adeB、adeG、adeJ,孔蛋白基因carO、omp33-36、oprC,青霉素结合蛋白基因ponA的表达水平变化;通过全基因组测序及生物信息学工具分析耐药性改变后菌株的差异基因富集情况的变化。结果获得了鲍曼不动杆菌ATCC19606与AB.2014对美罗培南不同耐药程度的11个衍生株,最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)为1~128μg/mL。ATCC19606及其衍生株的生长速度和峰值随着耐药性的增加而降低,但AB.2014及其衍生株并没有表现出这种趋势。ATCC19606及其衍生株表达3个碳青霉烯酶基因OXA51、VIM和IMP,AB.2014及其多数衍生株表达4个碳青霉烯酶基因OXA23、OXA51、VIM和IMP,仅AB.2014的一个复敏衍生株出现了OXA23丢失。RT-qPCR结果显示,仅在ATCC19606及其耐药衍生株中oprC基因的表达量随着耐药性的升高而降低,多数耐药基因的表达水平与菌株的耐药水平变化一致。生物信息学分析提示ATCC19606不同衍生株之间的差异基因主要富集于铁载体摄取跨膜转运体活性、细胞外膜、细菌分泌系统和群体感应等,而AB.2014不同衍生株之间的差异基因主要富集于细胞外膜、细胞对化学刺激的反应、阿特拉津降解和RNA聚合酶等。结论碳青霉烯类药物环境压力会引起鲍曼不动杆菌耐药性发生变化,碳青霉烯酶、外排泵、孔蛋白、青霉素结合蛋白多种基因可能同时参与了菌株耐药性的变化;碳青霉烯酶OXA23丢失可能导致耐药鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物复敏。

肿瘤坏死因子-α通过激活A549细胞Wnt/β-catenin通路降低肺泡液体清除功能

目的探讨炎症环境下Wnt/β-catenin通路对肺泡液体清除功能的影响。方法用不同浓度(10、40、80、160 ng·mL^(-1))肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理人肺泡上皮Ⅱ型细胞(A549)24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测炎性因子白介素(IL)-1β、IL-18、IL-6表达水平,Western blot检测钠水转运蛋白上皮细胞钠通道β亚型(βENaC)、NA^(+)、K^(+)-ATP酶(NKA)和水通道蛋白(AQP)4的表达,综合实验结果选取TNF-α最佳干预浓度;然后A549分为control组、TNF-α40 ng·mL^(-1)组、Wnt通路抑制组(TNF-α+XAV939组),分别检测细胞存活率、凋亡率、炎性因子表达水平及β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、腺瘤息肉病基因蛋白(APC)、βENaC、NKA和AQP4的表达水平。结果自TNF-α的40 ng·mL^(-1)起,A549细胞存活率逐渐降低,炎性因子表达水平逐渐升高,钠水转运蛋白βENaC、NKA表达逐渐降低,AQP4表达逐渐升高(P<0.05),选出最佳干预浓度为TNF-α40 ng·mL^(-1);与control组相比,TNF-α40 ng·mL^(-1)组A549细胞存活率降低,凋亡率、炎性因子表达水平升高,βENaC、NKA、APC蛋白表达降低,AQP4、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达升高(P均<0.05)。应用XAV939后,与TNF-α40 ng·mL^(-1)组相比,TNF-α+XAV939组A549细胞存活率升高,凋亡率、炎性因子表达水平降低,βENaC、NKA、APC蛋白表达升高,AQP4、β-catenin、Cyclin D1蛋白表达降低(P均<0.05)。结论TNF-α可通过激活A549细胞Wnt/β-catenin通路,使钠水转运蛋白βENaC、NKA表达减少,AQP4表达增加,降低肺泡液体清除功能。

PPI联合生长抑素治疗急性胰腺炎的临床效果

目的观察质子泵抑制剂(PPI)联合生长抑素治疗急性胰腺炎的临床效果。方法196例急性胰腺炎患者,根据治疗方案不同分为观察组(114例)和对照组(82例)。对照组患者给予生长抑素治疗,观察组在对照组基础上给予PPI治疗。比较两组患者症状、临床指标恢复时间(腹痛缓解时间、血清淀粉酶(AMS)与C反应蛋白(CRP)恢复正常时间及住院时间),临床疗效,治疗前后生化指标变化情况及视觉模拟评分法(VAS)评分。结果观察组患者腹痛缓解时间(1.59±0.41)d、AMS恢复正常时间(3.09±1.30)d、CRP恢复正常时间(6.82±1.72)d、住院时间(14.73±3.75)d均明显短于对照组的(2.48±0.69)、(5.90±1.80)、(9.20±1.07)、(19.66±3.05)d,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗总有效率为98.25%,明显高于对照组的90.24%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者血清白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、AMS、CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患者ALB、TP水平明显高于本组治疗前,AMS、CRP水平明显低于本组治疗前,且观察组患者ALB(33.67±5.12)g/L、TP(74.05±9.47)g/L均明显高于对照组的(27.02±4.68)、(62.45±10.14)g/L,AMS(120.48±10.29)U/L、CRP(10.29±2.24)mg/L均明显低于对照组的(158.33±13.05)U/L、(14.15±3.72)mg/L,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者VAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后24、72 h,两组患者VAS评分均明显低于本组治疗前,且观察组VAS评分(4.94±0.96)、(3.48±0.47)分均明显低于对照组的(5.81±0.81)、(4.08±0.99)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论PPI联合生长抑素能够明显缩短急性胰腺炎病程,改善疗效,缓解临床症状,具有显著的临床效果。

高尔基器钙库

回顾学科在高尔基器钙库钙研究方面所作出的贡献,以及该领域的近期概况.重点阐述高尔基器钙库概念的提出,以及目前已知的高尔基器钙库相关功能蛋白如SPCA1/2、GAAP的结构与功能.

血清miR-499联合PLTP水平对不停跳冠状动脉旁路移植术后心房颤动的预测价值

目的:探讨血清微小RNA-499(miR-499)联合磷脂转移蛋白(PLTP)水平对不停跳冠状动脉旁路移植术(OPCABG)后心房颤动(AF)的预测价值。方法:选取2018年1月至2022年6月我院收治的237例接受OPCABG术的冠心病患者,根据OPCABG术后是否发生AF分为AF组69例和非AF组168例。采用qPCR和酶联免疫吸附法检测血清miR-499与PLTP水平。采用Spearman相关性分析OPCABG后AF患者血清miR-499与PLTP水平的相关性,采用多因素Logistic回归分析OPCABG后AF的影响因素,采用ROC曲线分析血清miR-499、PLTP水平对OPCABG后AF的预测价值。结果:AF组血清miR-499水平(1.53±0.29)高于非AF组(1.22±0.33),PLTP水平[1.36(1.00,2.01)]低于非AF组[2.33(1.39,3.53)],差异有统计学意义(t/Z=6.731、5.879,P均<0.001)。Spearman相关性分析显示,OPCABG后AF患者血清miR-499与PLTP水平呈负相关(rs=-0.789,P<0.001)。多因素Logistic回归分析显示,年龄(OR=1.085,95%CI:1.036~1.136)、糖尿病(OR=3.399,95%CI:1.472~7.853)、左心房内径(OR=1.194,95%CI:1.063~1.341)、miR-499(OR=2.961,95%CI:1.944~4.508)为OPCABG后AF的独立危险因素,PLTP(OR=0.319,95%CI:0.195~0.522)为独立保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-499联合PLTP水平(AUC=0.842,95%CI:0.789~0.886)预测OPCABG后AF的AUC大于miR-499(AUC=0.759,95%CI:0.699~0.812)、PLTP(AUC=0.743,95%CI:0.683~0.798)单独预测(Z=3.154、3.804,P均<0.05)。结论:血清miR-499水平升高和PLTP水平降低与OPCABG后AF独立相关,血清miR-499联合PLTP水平预测OPCABG后AF的价值较高。

多重耐药鲍曼不动杆菌β-内酰胺酶、膜孔蛋白及β-内酰胺类靶位编码基因研究

目的研究一株多重耐药鲍曼不动杆菌(Multi-drug-resistant Acinetobacter baumannii,MDR-ABA)J65可能存在的β-内酰胺类药物耐药机制。方法 MDR-ABA J65株分离自2011年12月某三甲医院住院患者痰标本,用gyrA和parC基因PCR扩增、测序和BLASTn比对确认菌种。用PCR法分析该菌株的PBP1a、PBP2、CarO和33种A^D类β-内酰胺酶编码基因,并对检出的β-内酰胺酶编码基因作了插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测。结果 MDR-ABA J65检出β-内酰胺酶编码基因bla TEM-1、bla ADC-62、bla OXA-23、bla OXA-66,插入序列与β-内酰胺酶编码基因连锁检测显示ISaba1-ADC-62和ISaba1-OXA-23为阳性。PBP1a、PBP2和CarO编码基因序列与鲍曼不动杆菌敏感株(SDF)相比均存在有义突变,且三维结构同源建模显示,与SDF株PBP1a、PBP2和CarO蛋白分子立体结构有明显差别。结论 MDR-ABA J65对β-内酰胺类耐药机制为PBPs和孔蛋白CarO变异及可移动遗传元件介异的β-内酰胺酶编码基因。

四株盐杆菌中类紫质分子的探测

研究了四株盐杆菌Halobacterium sp. xiz 515.H.sp.dal s_2-1和H.sp.ausH_3a光驱动的质子泵功能及相应视黄醛蛋白的光化学反应.用pH电极测定了细胞悬浮液和胞外被膜(cellenvelope)介质中的光致△pH变化.实验发现,xiz.515和dals_2-1在照光时介质酸化.而另两株则相反,介质碱化.在这些盐杆菌中,进行了细胞膜各组份离心分离,其操作过程如同在Hhalobium上R中分离紫膜一样.最后得到的相应于紫膜组份的细胞膜中,没有发现表微菌紫质(BR)分子存在的吸收峰值.但是,在动力学光谱仪上却都发现此组份内具有与BR分子类似的光循环反应.本文假定,在这些盐杆菌中存在有微量的BR或类BR分子,它们以单体形式分散的小的聚集体散落在部份细胞膜上.

多重耐药淋病流行株孔蛋白和泵蛋白的表达

为探讨外排系统、外膜通透性与淋病流行株多重耐药性的关系,应用KB法和琼脂稀释法从湛江地区分离出62株淋球菌多重耐药株;利用SDS-PAGE法测定淋球菌外膜孔蛋白的表达;采用直接荧光法测定能量抑制剂NaN3加入前后淋球菌对抗生素的摄入和积累情况,比较耐药菌与敏感菌内膜泵蛋白表达的差异。结果显示,5株多重耐药菌均有外膜孔蛋白表达的缺失或下降,同时伴有外排泵蛋白的表达。提示外排系统、外膜通透性与淋病流行株的多重耐药性密切相关。

多重耐药鲍曼不动杆菌外排泵基因和外膜蛋白基因的检测

目的了解鲍曼不动杆菌主动外排系统和外膜蛋白基因的表达情况,探讨其在介导细菌多重耐药中的作用。方法 K-B法和琼脂二倍稀释法检测100株鲍曼不动杆菌临床分离株的药物敏感性;PCR扩增adeB、adeJ、carO基因;实时荧光定量PCR检测外排泵AdeABC、AdeIJK的mRNA表达水平。结果 100株中有75株多重耐药株,对米诺环素和多黏菌素B的耐药率分别为60.0%和0%;多重耐药组与敏感组adeB基因阳性率分别为82.7%(62/75)和44.0%(11/25),carO基因阳性率分别为98.7%(74/75)和40.0%(10/25),差异均有统计学意义(χ2分别为14.223和48.016,P均<0.05)。敏感和多重耐药两组间adeB基因相对表达量差异有统计学意义(t=4.209,P<0.01),而两组间adeJ基因相对表达量结果无显著性差异。结论鲍曼不动杆菌临床分离株的耐药情况严重;adeB基因在多重耐药及部分敏感株中表达量明显增加;AdeABC主动外排系统在鲍曼不动杆菌多重耐药性的形成中具有一定的作用。

功能性泪溢患者泪道泵功能及泪液蛋白成分的初步研究

目的:分析功能性泪溢患者泪道泵功能及泪液蛋白成分与正常泪液的异同。方法:功能性泪溢患者100例200眼,正常对照20例40眼。观察指标包括SchirmerⅠ试验、按压泪囊部时SchirmerⅠ试验、泪膜破裂时间,同时采用ELISA测定功能性泪溢患者泪液主要蛋白含量,并与正常人的泪液对比。结果:正常受试者按压泪囊部时与开放泪囊部时的SchirmerⅠ测试值比较,差异有显著意义(t=-4.008,P<0.05),而功能性泪溢患者在不同时间点的SchirmerⅠ试验测试值比较,差异无显著意义(t=-0.811,P>0.05)。功能性泪溢患者泪膜破裂时间缩短(t=-5.382,P<0.01),功能性泪溢组与对照组泪液蛋白含量比较,溶菌酶、白蛋白浓度降低(P<0.05),乳铁蛋白、分泌型免疫球蛋白A含量无明显差异(P>0.05)。结论:泪道泵功能破坏在功能性泪溢中存在重要影响,功能性溢泪患者泪液蛋白质发生变化。

淋病流行株外排系统与外膜通透性和多重耐药性的关系

探讨外排系统、外膜通透性与淋病流行株多重耐药性的关系。应用K-B法和琼脂稀释法从湛江地区分离出62株淋球菌多重耐药株。利用SDS-PAGE测定淋球菌外膜孔蛋白的表达;应用直接荧光法测定能量抑制剂加入前后淋球菌对抗生素的摄入和积累情况,比较耐药菌与敏感菌内膜泵蛋白表达的差异;利用煮沸法提取细菌DNA,PCR扩增mtrR基因,并对扩增产物测序,比较敏感株与多重耐药株的差异。结果5株多重耐药菌均有外膜孔蛋白表达的缺失或下降,同时伴有外排泵蛋白的表达;5株敏感淋球菌无mtrR的突变,10株多重耐药株均有mtrR基因的突变。表明外排系统、外膜通透性与淋病流行株的多重耐药性密切相关。

细菌AcrAB-TolC型外排泵中AcrA蛋白的进化分析

研究不同耐药细菌AcrAB-Tolc型外排泵中关键蛋白AcrA的序列,针对其保守及非保守氨基酸残基进行该类蛋白的进化分析,构建蛋白进化树。收集来源于不同细菌的已知序列的AcrA蛋白,去除冗余并进行序列比对之后,根据其序列比对结果的相似性、氨基酸残基的保守性研究其进化特征。结果表明,不同细菌的AcrA蛋白部分氨基酸残基具有高度的保守性,这与其实现生物学功能有关,非保守区域是主要的进化区域。可为不同菌株的进化提供参考,同时为以AcrAB-Tolc型外排泵为靶标的新药研究提供相关数据。

参附注射液对急性ST段抬高型心肌梗死并发心源性休克患者炎性因子水平的影响

目的 探讨参附注射液对急性ST段抬高型心肌梗死（STEMI）并发心源性休克（CS）患者炎性因子水平的影响.方法 选取2013年6月至2015年6月于首都医科大学附属北京安贞医院住院接受急诊经皮冠状动脉介入及主动脉内球囊反搏（IABP）治疗的STEMI并发CS患者60例.所有患者完全随机分为IABP组和IABP＋参附组,各30例.IABP＋参附组给予IABP＋参附注射液（100 ml/24 h微量泵泵入）治疗,IABP组只给予IABP治疗.比较2组患者入院即刻和入院后24、48、72 h的C反应蛋白（CRP）、白细胞介素6（IL-6）水平.比较2组IABP支持时间、住院时间、院内及随访主要不良心脑血管事件（MACE）发生率,分析院内MACE事件的独立危险因素.结果 2组患者入院后24、48、72 h的CRP水平均明显高于入院即刻[IABP组：（33±5）、（35±3）、（30±3） g/L比（23±5）g/L,IABP＋参附组：（31±4）、（31±5）、（28 ±5）g/L比（26±3）g/L],IABP＋参附组患者入院后48、72 h的CRP水平明显低于IABP组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.IABP＋参附组患者入院即刻IL-6水平明显高于IABP组[（112±19） ng/L比（104±10） ng/L],差异有统计学意义（P＜0.05）,但入院后24、48、72 h的IL-6水平与IABP组比较,差异均无统计学意义（均P＞0.05）.IABP＋参附组IABP支持时间明显短于IABP组[（53±5）h比（87±16）h],差异有统计学意义（P =0.047）;IABP＋参附组住院时间与IABP组比较[（14±9）d比（12±8）d],差异无统计学意义（P＞0.05）.2组患者院内及随访MACE事件发生率比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）.Logistic回归分析发现,IL-6是STEMI并发CS患者发生院内MACE事件的独立危险因素（P=0.001）.结论 STEMI并发CS患者在接受IABP治疗的同时,给予参附注射液治疗可能通过降低IL-6浓度减轻心肌细胞和全身的炎性反应,从而减少CS患者对IABP的依赖,缩短CS患者疾病进程.

菜豆下胚轴质膜微囊和液泡膜微囊体外热稳定性的研究

从抗热潜势较高的“８５ＣＴ－４９７６２”菜豆（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓ ｖｕｌｇａｒｉｓ Ｌ．）的下胚轴分离出微粒体、质膜微囊和液泡膜微囊。通过比较正常细胞的膜微囊、热锻炼细胞的膜微囊以及热锻炼过程中放线菌酮抑制了蛋白质合成的细胞膜微囊的质子泵在体外的热稳定性，发现热锻炼可使细胞膜微囊质子泵体外热稳定性提高，热锻炼过程中合成的蛋白质与此效应有关。进一步分析膜外周蛋白对质子泵体外热稳定性的影响，证明热激蛋白ＨＳＰ７０ 和小分子量热激蛋白（ＬＭＷ

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药机制研究

目的对临床分离的14株耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药机制进行研究。方法药敏试验检测对15种常用抗菌药物的耐药情况;协同试验筛选产金属酶菌株和聚合酶链反应检测金属酶基因及oprD基因;氰氯苯腙检测主动外排情况及其对亚胺培南最低抑菌浓度(MIC)的影响。结果耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对其它常用抗菌药物耐药率也很高,其中,5株产VIM-2型金属酶,11株oprD基因检测阴性。2株在有氰氯苯腙存在时对亚胺培南的MIC降低至原值的1/4,表明这2株有主动外排系统参与对亚胺培南的耐药。结论OprD2蛋白表达缺失是本研究中铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因,其次为产VIM-2型金属酶和主动外排系统,且至少有4株存在两种以上耐亚胺培南的机制。

利福平对小鼠肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2表达与定位的影响

目的利福平(Rifampicin,RIF)具有肝毒性,但其机制尚不清楚。本研究在RIF诱导的肝内胆汁淤积小鼠中,探讨RIF对肝细胞胆汁酸转运体胆汁酸输出泵(bile salt exportpump,Bsep)和多药抵抗相关蛋白-2(multidrug resistance-associated protein-2,Mrp2)表达和定位影响。方法 48只♀ICR小鼠随机分为4组,RIF1wk组:经灌胃给予RIF(200mg.kg-1.d-1),连续1周,于末次给药后6h取材;RIF6h组:单次灌胃给予RIF(200mg.kg-1)后6h取材;RIF1周对照组(CON1wk)与RIF6h对照组(CON6h):经灌胃给予等容积生理盐水。所有小鼠均收集血液和肝组织,常规生化检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆红素(TB)和结合胆红素(DB),并检测小鼠血清和肝组织总胆汁酸(TBA)水平。HE染色分析肝组织病理改变。RT-PCR测定肝脏肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2mRNA表达。免疫荧光法分析Bsep和Mrp2在肝细胞的位置。结果给予RIF1周后,小鼠血清TB由(1.25±0.69)μmol.L-1上升至(65.73±12.08)μmol.L-1,上升近70倍,DB由(0.77±0.40)μmol.L-1上升至(53.33±12.43)μmol.L-1,上升约80倍,ALP由(110.2±13.8)U.L-1上升至(279.5±80.4)U.L-1,上升约1.5倍,TBA由(3.15±0.89)μmol.L-1上升至(13.54±6.51)μmol.L-1,上升约5倍并伴有血清ALT和AST轻度升高;肝脏组织TBA由(0.15±0.04)μmol.g-1liver上升至(0.30±0.19)μmol.g-1liver,上升约2倍;肝脏组织HE染色显示肝细胞出现脂肪变性、轻度坏死和炎症。单次给予RIF6h后血清TB、DB、ALP、ALT、AST和TBA明显上升,但未观察到小鼠肝脏组织病理发生改变。免疫荧光分析显示,给予小鼠RIF1wk与单次给予RIF6h后肝细胞中Bsep和Mrp2的定位发生了改变。而无论单次给予RIF还是连续给药1周,肝细胞Bsep和Mrp2mRNA表达水平均未发生变化。结论肝细胞胆汁酸转运体Bsep和Mrp2定位改变可能是RIF诱发肝内胆汁淤积的重要机制。

不同麻醉用药对老年非体外循环冠脉搭桥术后认知功能影响的比较

目的:探讨适宜老年非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCABG)患者的麻醉用药方法。方法:择期拟行OPCABG的冠心病患者60例,年龄65～82岁,心功能Ⅱ级或Ⅲ级。随机分为七氟烷组(S组)和异氟烷组(I组),每组30例。于麻醉诱导后(T0)、术毕(T1)、术后6h(T2)和术后24h(T3)4个时间点采集颈内静脉球部血5mL,测定血清S-100蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度。分别于麻醉前1d和术后3d、7d时对患者进行简易智能状态检查(MMSE)评分(总分30分),<24分为认知功能障碍。结果:术后所有患者镇痛效果均良好。术后7d内发生认知功能障碍者S组4例(13.3%),I组16例(53.3%),2组发生率差别有统计学意义(P<0.05)。2组术后3、7dMMSE评分均低于同组术前1d(P<0.05);I组术后7dMMSE评分低于S组(P<0.05)。2组血清S-100蛋白和NSE浓度于手术开始后升高,T1时达到高峰(P<0.05),T2下降,但仍高于基础值(P<0.05),至T3时恢复至基础水平(P>0.05);与I组比较,T1和T2时S组血清S-100蛋白和NSE浓度降低(P<0.05)。结论:在OPCABG中,与吸入异氟烷比较,吸入七氟烷维持麻醉脑损伤程度轻,可推荐为预防心脏术后认知功能障碍的麻醉方法。