米诺环素改性纯钛抗菌性能及其对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的探讨米诺环素改性纯钛的抗菌性能及其对人骨髓间充质干细胞(hMSC)成骨分化的影响。方法用聚多巴胺(PD)接枝米诺环素,用PD包被纯钛(Ti),将PD涂层的Ti片分别浸入100、200、500μg/mL米诺环素溶液中(100μg/mL组、200μg/mL组、500μg/mL组),制备米诺环素涂层Ti片(MHCI-Ti)。荧光光谱仪测定接枝的米诺环素,X射线光电子能谱表分析MHCI-Ti表面的化学成分,LIVE/DEADBacLaght染色检测细菌黏附能力。常规培养hMSC,并分别接种在抛光的Ti、MHCI-Ti(200μg/mL)上,于成骨培养基中培养。分别于培养第1、4、7天采用MTT法检测细胞活力,在成骨诱导后的第7、14、21、28天用荧光光谱仪检测碱性磷酸酶(ALP)活性,用茜素红染色法检测细胞钙沉积。结果200μg/mL组米诺环素量高于100μg/mL组(P<0.05),200μg/mL组米诺环素量与500μg/mL组比较差异无统计学意义(P>0.05)。扫描电镜图像显示,Ti和MHCI-Ti表面形态相似,MHCI-Ti表面的N1s(399 eV)峰的强度高于Ti表面,表明PD和米诺环素被成功覆盖。变形链球菌在样品上培养7 d,电镜下观察到大量的细菌簇,与MHCI-Ti相比,Ti表面附着的细菌多。激光共聚焦显微镜结果显示,Ti表面有一层明显的细菌层绿色细菌,MHCI-Ti表面有一层死亡的微生物层,其中200μg/mL组抗菌性能最高。与Ti比较,MHCI-Ti表面hMSC培养第4、7天活力高,培养第28天ALP活性高,培养第21、28天钙沉积高(P<0.05)。结论MHCI-Ti抗菌性能高,且可促进hMSC成骨分化。

ABO血型不合的同胞异基因外周血干细胞移植

目的探讨HLA配型相合、ABO血型不合的同胞异基因外周血干细胞移植(alloPBSCT)的疗效。方法对27名HLA配型相合、ABO血型不合的血液恶性肿瘤患者作同胞alloPBSCT(实验组,供、受者ABO血型主侧不合的有15例,次侧不合的有10例,主次侧均不合的有2例),其中急性髓细胞白血病(AML)6例、急性淋巴细胞白血病(ALL)8例、慢性粒细胞性白血病(CMLLP)10例、骨髓增生异常综合征(MDSRAEBT)2例、非霍奇金氏淋巴瘤(ⅣB)1例;并选用同期的35名ABO血型相合的移植患者作比较(对照组)。移植物抗宿主病(GVHD)的预防采用霉酚酸酯(MMF)、环孢菌素A(CSA)和短程甲氨喋呤(MTX)三联预防方案。结果62例全部造血重建。实验组:27名alloPBSCT患者均未出现急性溶血反应,主侧不合者红系造血明显延迟,供/受者血型为A/O的患者中有3例(3/7)发生纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA),27名患者于移植后25～153d血型成功转变为供者型;实验组GVHD发生率、VOD发生率、CMV感染、HC发生率及疾病复发率、死亡率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论ABO血型不合可以进行alloPBSCT,并且不影响干细胞移植的植活、GVHD及其它移植相关并发症的发生和预后。供/受者血型为A/O是主侧ABO血型不合患者alloPBSCT后PRCA发生的高危因素。

ABO血型不合异基因造血干细胞移植后并发纯红系再生障碍

为了研究ABO血型不合异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后并发纯红细胞再生障碍(pure red cell aplasia,PRCA)的发病情况及危险因素,对本医院以往血型不合异基因造血干细胞移植进行回顾性分析,探讨移植后患者PRCA的发病危险因素。研究结果表明,72例ABO血型不合allo-HSCT患者中,4例发生PRCA,其中A供O3例,A供B1例。PRCA的发生不影响急性移植物抗宿主病(GVHD)或巨细胞病毒(CMV)感染的发生。PRCA患者红系恢复的时间显著长于未PRCA发生患者。结论:PRCA是ABO血型不合移植的主要并发症。A供O可能是ABO血型不合allo-HSCT后并发PRCA的危险因素。

ABO血型不合的异基因造血干细胞采集及移植效果研究

本研究评价COBE Spectra血细胞分离机按干细胞采集程序采集HLA配型相合、ABO血型不合供者外周血造血干细胞的效能,观察未去除红细胞和(或)血浆进行异基因外周血干细胞移植的效果。应用COBE Spectra血细胞分离机的自动干细胞采集程序采集28例异基因供者外周血干细胞,并选用同期ABO血型相合15例作对照。检测采集物有核细胞(NC)数、单个核细胞(MNC)比例及CD34+细胞计数,观察造血功能重建情况和转变为供者血型所需要的时间。结果表明,ABO血型不合和相合组采集物中的NC、CD34+细胞数、MNC比例无统计学差异(p>0.05)。ABO血型不合组和相合组中性粒细胞和血小板恢复的时间无统计学差异(p>0.05)。14例ABO血型主要不合患者,红系造血明显延迟,ABO血型不合组28名患者于移植后35-193天血型成功转变为供者型,和ABO血型相合组相比均有统计学差异(p<0.01)。结论:ABO血型不合不是异基因造血干细胞移植的障碍,主要不合可能是红系造血明显延迟的主要原因。

减停免疫抑制剂诱发移植物抗宿主病治疗儿童ABO血型不合移植后纯红细胞再生障碍性贫血1例及文献复习

目的探讨ABO血型不合移植后合并纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的发生机制及治疗对策。方法报道1例重型地中海贫血患儿接受ABO血型不合的无关供者外周血造血干细胞移植(URD-PBSCT)后合并PRCA病例并进行文献复习。结果患儿接受ABO血型不合的URD-PBSCT获得成功后出现PRCA,依赖红细胞输注伴ABO血型抗体滴度显著升高,通过减停免疫抑制剂诱发移植物抗宿主病(GVHD)后,ABO血型抗体滴度显著下降,网织红细胞、血红蛋白和骨髓象随之恢复正常。结论免疫紊乱及ABO血型抗体是ABO血型不合移植后PRCA的最可能原因,减停免疫抑制剂诱发GVHD是治疗ABO血型不合移植后PRCA的一种优先考虑的选择,但需要注意GVHD的有效控制。

纯钛表面激光熔覆处理的实验研究

目的采用激光熔覆技术构建钛片表面微米级多孔形貌并探讨钛表面多孔形貌对细胞黏附、增殖和分化的影响。方法本实验通过筛选预置式铺粉粘结剂,寻求激光熔覆最佳参数,在氩气保护环境中应用脉冲式掺钕钇铝石榴石晶体(Nd:YAG)激光熔覆45μm钛粉颗粒于钛片表面。采用场发射扫描电镜(SEM)观察钛片表面微观形貌,能量弥散X射线谱(EDS)检测钛片表面成分;采用小鼠骨髓基质干细胞(BMSCs)体外培养评价光滑钛片组(A组)、激光轰击组(B组)和激光熔覆组(C组)材料的生物相容性。SEM观察BMSCs在钛表面的黏附状况,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测法和碱性磷酸酶(AKP)活性检测评价钛片对BMSCs增殖和分化的影响。结果选择九水硅酸钠做为旋涂粘结剂,在电流110 A、峰值功率2.2 kW的条件下Nd:YAG激光熔覆钛粉于钛片表面形成了互相连通的多孔结构,表面成分主要为钛。与A、B组比较,C组钛表面有较多BMSCs黏附,细胞增殖和分化,OD值较高。结论激光熔覆处理钛片表面可促进细胞黏附、增殖及分化。

纯钛表面激光熔覆处理的进一步实验研究

目的探讨激光熔覆后钛表面多孔形貌对细胞黏附、增殖和分化的影响。方法在氩气保护环境中应用脉冲式掺钕钇铝石榴石晶体(Nd:YAG)对45μm钛粉颗粒在钛片表面进行激光熔覆,采用场发射扫描电镜(SEM)观察钛片表面微观形貌,能量弥散X射线谱(EDS)检测钛片表面成分;采用小鼠骨髓基质干细胞BMSCs体外培养评价喷砂酸蚀组(A组)和激光熔覆组(B组)的生物相容性。SEM观察BMSCs在钛表面的黏附状况,细胞计数试剂盒(CCK-8)检测法和碱性磷酸酶(AKP)活性检测评价钛片对BMSCs增殖和分化的影响。结果与A组比较,B组互相连通的多孔钛表面更有利于BMSCs的黏附,也有利于BMSCs细胞的增殖和分化。结论激光熔覆处理钛片表面可促进BMSCs黏附、增殖及分化,有望成为一种有效有前景的钛表面处理方法。

鄂东南喜树人工纯林树干解析研究

通过对湖北省崇阳县桂花林场喜树人工纯林的调查,选取30株标准木进行树干解析,分析其胸径、树高、材积的生长量和生长率,研究其生长规律。研究表明：喜树在前10年呈现快速生长的趋势,10~15年处于稳定增长状态,15年后生长趋势变缓。

间充质干细胞治疗顽固性纯红细胞再生障碍疗效观察

目的研究脂肪源间充质干细胞(adipose tissue-derived mesenchymal stem cells,AMSC)作为挽救方案治疗ABO血型不合异基因造血干细胞移植后并发的顽固性纯红细胞再生障碍(pureredcellaplasia,PRCA)的疗效。方法 2例顽固性PRCA患者均经中心静脉输入AMSC(剂量为1.5×106/kg)。结果 2例接受AMSC治疗的患者病情很快得以缓解,均无明显副作用。结论 AMSC有望用于治疗ABO血型不合异基因造血干细胞移植后并发的顽固性PRCA。

听神经病谱系障碍患者临床听力学特点分析

目的总结听神经病谱系障碍(auditory neuropathy spectrum disorder,ANSD)患者临床特点和听力学测试结果,分析其听力学特点。方法回顾性分析60例听神经病谱系障碍患者的发病年龄,确诊年龄以及纯音听阈、声导抗测试、听性脑干反应、畸变产物耳声发射的结果。结果患者中男34例(56.7%),女26例(43.3%);发病年龄6~32岁,平均年龄(16.6±4.7)岁,以青少年居多;ANSD平均确诊年龄(24.9±6.8)岁,2例患者伴有视神经萎缩。60例ANSD患者均为双侧发病,纯音听力图以峰型或碟形102耳(85.0%)为主,波峰多出现在2 kHz或4 kHz处;依据听力损失程度分级,好于轻度听力损失28耳(23.3%),轻度听力损失59耳(49.2%),中度听力损失28耳(23.3%),重度听力损失4耳(3.3%),极重度听力损失1耳(0.8%)。60例患者均引出畸变产物耳声发射,115耳鼓室图A型,3耳为As,2耳为Ad。92耳(76.7%)均未引出镫骨肌声反射,28耳(23.3%)可引出1 kHz镫骨肌声反射,但阈值均升高。结论 ANSD多单独发病,也可伴有其他神经系统疾病。部分ANSD患者平均听阈可能正常,但多存在低频听力损失。

钛表面锶改性后骨髓基质干细胞黏附、迁移、增殖及成骨相关基因的表达

背景:锶是一种既刺激骨形成、又抑制骨吸收的元素,纯钛种植体表面锶改性促进骨质疏松状态下种植体骨结合是当前研究的热点,具有非常重要的意义。目的:探讨改良锶改性纯钛表面对大鼠骨髓基质干细胞黏附、铺展、迁移、增殖及成骨相关基因表达的影响。方法:将TA2纯钛片打磨清洗后,依次放于5mol/L NaOH溶液、100mmol/L醋酸锶溶液内处理,并以600℃或者700℃进行热处理1h,去离子水80℃水化处理(W)24 h,以纯钛为对照,共分为5组,分别为Ti、Sr600、Sr600W、Sr700、Sr700W组。采用全骨髓培养法获取大鼠骨髓基质干细胞,将改性钛片置于24孔培养板中与细胞悬液培养,CCK-8法检测骨髓基质干细胞的黏附和增殖情况。骨髓基质干细胞与钛片共培养24 h后对细胞肌动蛋白进行染色,观察细胞黏附伸展形态;通过细胞划痕实验和荧光染色,观察骨髓基质干细胞在各组钛片表面迁移的能力;qRT-PCR法检测各组细胞Ⅰ型胶原、Runx2、骨保护蛋白、RANKL、骨桥蛋白的mRNA表达。结果与结论:锶改性纯钛片可以促进骨髓基质干细胞的铺展、迁移。在5d和7d时,锶改性钛片表面细胞增殖较纯钛组均明显升高(P<0.001)。在5d时,Sr700组的细胞增殖数目较Sr600组高(P<0.01)。在14 d时,锶改性纯钛片可以促进骨髓基质干细胞Ⅰ型胶原、Runx2、骨桥蛋白的表达。结果表明,改良锶改性纯钛可以促进大鼠骨髓基质干细胞的黏附、铺展、迁移、增殖及成骨相关基因的表达,水化处理对大鼠骨髓基质干细胞成骨向分化具有促进作用。

主要ABO血型不合异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍(英文)

20例主要ABO血型不合异基因造血干细胞移植 (allo HSCT)患者中 ,6例发生纯红细胞再生障碍(PRCA)。PRCA对中性粒细胞和血小板植入以及Ⅱ -Ⅳ度aGVHD并无影响。 6例PRCA患者血型均为O型 ,而供者血型 5例为A型 ,1例B型 ,提示供 /受者血型A/O是主要ABO血型不合allo HSCT后PRCA发生的高危因素。 4例除给予RBC输注无其它特殊治疗 ,随着凝集素滴度降至 <8,红系造血自然恢复 ,而另 2例尽管给予重组人红细胞生成素 (rhEPO)治疗红系再障仍持续 >30 0天 ,经供者型血浆置换而红系恢复造血。在本组病例 ,环孢菌素在PRCA发生中并无作用 。

异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血发生的影响因素分析

目的分析异基因造血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)发生的危险因素。方法收集完成全部观察的225名与供者HLA匹配的异基因造血干细胞移植患者,其中21例(9.33%)发生移植后PRCA。用SPSS统计分析软件对移植红细胞生长延缓期时间(d)、免疫溶血病发生、ABO血型相容性、aGVHD分级、原发病、血浆sHLA-G1和G5含量以及年龄、性别等作单因素Logistic回归分析,然后对有明显差异的观察指标作多因素Logistic回归分析。结果单因素Logistic回归分析显示:ABO血型相容性、aGVHD分级、原发病、sHLA-G5含量、患者年龄及性别等因素OR值分别为0.596、0.553、1.079、1.007、1.023和2.961(P值分别为0.129、0.720、0.173、0.227、0.334和0.110),移植后红细胞生长延缓期时间、sHLA-G1含量以及溶血病发生对累积Logistic模型的OR值分别0.983、0.033、12.799(P值分别为0.001、0.033、0.003),多因素Logistic回归分析结果显示移植后红细胞生长延缓期时间、sHLA-G1含量以及溶血病发生对Logistic模型有统计学意义(OR值为1.017、0.964、0.110,P值分别为0.001、0.045、0.006)。结论移植红细胞生长延缓期时间、血浆sHLA-G1含量以及溶血病发生是移植后PRCA发生的主要影响因素。

ABO血型不合异基因造血干细胞移植患者ABO血型抗体的监测

目的:监测ABO血型不合造血干细胞移植患者IgM型和IgG型ABO血型抗体的变化,研究这些变化在移植患者血型转变中的作用。方法:用凝聚胺法和微柱凝胶法监测32例移植患者ABO血型,IgM型和IgG型ABO血型抗体的变化。结果:32例ABO血型不合患者血型全部转变为供者型,造血重建时间结果分析表明血型不合对于粒系和血小板的恢复无影响;患者血型转为供者血型后,其血清中缺乏相对应的抗体;32例ABO血型不合患者中有6例供受者移植模式为A→O,其中有3例发生PRCA,且均检出IgG型抗A抗体,其余29例未检测到IgG血型抗体;3例PRCA患者红系造血恢复时间明显延长。结论:IgG型ABO血型抗体可能会抑制ABO血型不合骨髓移植患者的红系分化成熟,在PRCA的发生中可能起重要作用。监测ABO血型不合移植患者体内的ABO血型抗体变化可指导输血治疗,避免溶血性输血反应。

听性脑干诱发电位结合单刺激听觉稳态诱发反应对正常青年人听阈正常值评估的探讨

目的分析正常青年人多频刺激听觉稳态诱发电位(multiple stimuli auditory steady-state response,m-ASSR)、单频刺激听觉稳态诱发电位(single stimulusauditory steady-state response,s-ASSR)、听性脑干诱发电位(click-evoked auditory brain stem response,C-ABR)、纯音听力测试(pure tone auditory,PTA)阈值,探讨C-ABR结合0.5、1 kHz s-ASSR在正常青年人中反应阈的正常值。方法对听力正常青年人(43人,共86耳)分别行PTA、m-ASSR、0.5、1.0 kHz s-ASSR、C-ABR检查。将PTA、m-ASSR、听力测试组合(C-ABR结合0.5、1 kHzs-ASSR反应阈)结果行t检验、线性回归分析等统计学分析。结果①0.5、1、2、4 kHz处,听力测试组合反应阈高于PTA;除1 kHz外其他频率均较m-ASSR反应阈接近PTA;②0.5、1、2、4 kHz处,听力测试组合反应阈预测PTA的回归方程分别为:y=0.75x-4.53,y=0.56x-4.46,y=0.62x-7.70和y=0.92x-12.66。结论正常青年人中ASSR反应阈与PTA、C-ABR V波反应阈有一定的差值;听力测试组合较m-ASSR更接近PTA;听力测试组合可以更准确、更可靠评估正常成年人听阈水平。

ABO血型不合同胞间异基因外周血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血3例报告

目的：探讨ABO血型不合异基因外周血干细胞移植后纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的治疗。方法：报道3例病例并进行文献复习。结果：3例HLA配型完全相合、ABO血型主要不合的患者进行同胞间异基因外周血干细胞移植获得成功,但移植后均出现PRCA。1例经大剂量糖皮质激素联合大剂量免疫球蛋白治疗,2例经大剂量糖皮质激素联合血浆置换治疗后血型均转为供者血型,血红蛋白逐渐恢复正常。结论：大剂量糖皮质激素联合血浆置换或大剂量免疫球蛋白是治疗ABO血型不合异基因外周血干细胞移植后PRCA的有效方法。

多频听觉稳态反应与切迹噪声掩蔽短纯音诱发的听性脑干反应对纯音听阈的预测

目的在感音神经性听力损失(sensorineural hearing loss,SNHL)成年患者中通过回归方程,应用多频听觉稳态反应(auditory steady-state response,ASSR)和同侧切迹噪声(notched noise,NN)掩蔽短纯音诱发的听性脑干反应(NN-ABR)预测纯音听阈。方法 测试22例(30耳)SNHL成年患者的多频ASSR和NN-ABR反应阈,将其代入各自对纯音听阈的回归方程,将所得的预测听阈与实际纯音听阈进行比较。结果本组SNHL成年患者0.5、1、2、4 kHz的多频ASSR预测听阈与实际纯音听阈之差为(-1.37±10.6)、(-0.47±9.8)、(1.98±6.6)、(-3.8±11.4)dB;相应频率NN-ABR预测听阈与实际纯音听阈之差为(-0.32±9.6)、(1.4±7.9)、(0.18±5.7)、(-0.8±6.0)dB。协方差分析显示测试方法对预测结果无显著影响(F=0.669,P=0.415)。结论使用多频ASSR和NN-ABR反应阈通过回归方程预测纯音听阈均有较高的准确性。

伊布替尼治疗造血干细胞移植后自身免疫性血细胞减少2例报告并文献复习

目的初步探究伊布替尼治疗造血干细胞移植后自身免疫性血细胞减少(autoimmune cytopenia,AIC)的疗效。方法收集2016、2018年在本院行造血干细胞移植的白血病患者2例,移植后分别诊断为Evans综合征和纯红细胞再生障碍性贫血(pure red cell aplastic anemia,PRCA),经糖皮质激素、人免疫球蛋白、免疫抑制剂、血浆置换、输血支持等治疗后效果不佳,给予伊布替尼治疗,观察疗效及免疫指标的变化。结果移植后出现PRCA的患者使用伊布替尼治疗后红细胞输注次数较前减少,抗供者血型抗体较前下降,血红蛋白逐步上升,治疗3个月后逐步脱离输血,随后获得完全缓解。移植后出现Evans综合征的患者使用伊布替尼治疗后约2周后脱离血小板输注,血红蛋白及血小板逐渐升高,直接抗球蛋白试验(DAT)逐步转为弱阳性,自身抗体逐渐转阴,获得完全缓解。2例患者均未出现明显药物副反应或原发病复发。结论伊布替尼治疗造血干细胞移植术后PRCA或Evans综合征有一定疗效。

噪声性听损伤者听性脑干诱发电位的变化特点

目的:观察噪声性听损伤者听性脑干诱发电位(auditory brainstem response,ABR)的变化特点。方法:对接触噪声作业的47例工人进行纯音测听(pure tone audiometry,PTA)和ABR测试;依PTA正常者和4、3、2kHz处的听力受损者分为4组;对各组的ABR结果进行比较分析。结果:(1)随听力损失频率和程度的增加,逐渐出现低声强Ⅴ波潜伏期延长、高声强Ⅰ波的异常,继之伴Ⅲ波、Ⅴ波的异常,同时伴Ⅴ波反应阈的逐渐上升。(2)仅有4kHz受累的轻度噪声性听力损失者,主要表现为低声强的Ⅴ波潜伏期延长和半数耳高声强的Ⅰ波异常。结论:(1)噪声性听损伤的ABR变化反映了声损伤始于外毛细胞,逐渐累及内毛细胞、听神经和脑干听觉通路的病变过程。(2)低声强的Ⅴ波潜伏期延长和高声强的Ⅰ波异常系轻度噪声性听损伤ABR的主要异常表现;对于可疑噪声性听损伤者在ABRⅤ波阈值正常时,还应观察其阈值处潜伏期,并结合其他听力学检查结果才能作出合理判断。

儿童异基因造血干细胞移植后纯红再障1例并文献复习

目的探讨ABO血型不合的异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生纯红细胞再生障碍性贫血(PRCA)的发病机制和治疗对策。方法报道1例极重型再生障碍性贫血患儿行同胞HSCT后发生PRCA的病例及成功治疗经过,并复习相关文献。结果13岁女性患儿,接受ABO血型主要不合的同胞HSCT后不能脱离红细胞输注,并发PRCA,经调整免疫抑制剂、DLI、应用利妥昔单抗、血浆置换等治疗后,PRCA得到纠正,血常规恢复正常。结论HSCT后PRCA的发生与ABO血型抗体、非清髓预处理带来的免疫紊乱有关。主要治疗方法有使用单克隆抗体、血浆置换等,对于难治性患者,达雷木单抗、硼替佐米和艾曲波帕可作为新的靶向治疗药物。