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purmorphamine促进人牙周膜干细胞应力成骨 被引量:5
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作者 常慧君 申涛 +3 位作者 董世武 杨彦春 张洁 周继祥 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期839-842,共4页
目的研究purmorphamine在动态张应力促人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,PDLSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养鉴定PDLSCs,在矿化诱导环境中加入purmorphamine,采用Flexcell FX-4000T应力加载系统对... 目的研究purmorphamine在动态张应力促人牙周膜干细胞(human periodontal ligament stem cells,PDLSCs)向成骨细胞分化过程中的作用。方法分离培养鉴定PDLSCs,在矿化诱导环境中加入purmorphamine,采用Flexcell FX-4000T应力加载系统对细胞加力24 h,以Real-time PCR检测成骨相关指标Runx2、alkaline phosphatase(ALP)以及Hedgehog(Hh)通路的标志物GLI1、Pathed1(PTCH1)、Smoothend(SMO)。结果动态张应力作用24 h后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GLI1、PTCH1、SMO的表达水平明显升高(P<0.05);加入purmorphamine后,成骨相关指标Runx2、ALP,Hh通路的标志物GLI1、PTCH1、SMO的表达水平较加力组均有增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 purmor-phamine可能通过激活Hh通路,进而增强人PDLSCs应力条件下向成骨细胞分化。 展开更多
关键词 purmorphamine 人牙周膜干细胞 HEDGEHOG 动态张应力 成骨分化
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Purmorphamine对帕金森病炎症细胞模型的影响及其作用机制 被引量:3
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作者 洪乐鹏 汪光亮 +2 位作者 王迪 王智明 邵帅 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期91-96,共6页
为探讨Shh信号通路激活剂,2,6,9-三取代嘌呤化合物(Purmorphamine,PM)对帕金森病炎症细胞模型中炎症因子TNF-α,IL-1β和Peli1等的表达,以及对PC12细胞的影响及其作用机制,本研究应用MTT法和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR... 为探讨Shh信号通路激活剂,2,6,9-三取代嘌呤化合物(Purmorphamine,PM)对帕金森病炎症细胞模型中炎症因子TNF-α,IL-1β和Peli1等的表达,以及对PC12细胞的影响及其作用机制,本研究应用MTT法和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,Q-PCR)技术分别检测了细胞活性和相关基因的表达。结果显示:(1)MTT法检测结果显示:与对照组细胞相比,脂多糖(LPS)组、PM组和二甲基亚砜(DMSO)组BV2细胞的存活率无明显差异(P>0.05);而与LPS组相比,PM+LPS组PC12细胞的存活率显著升高(P<0.01)。2)Q-PCR实验结果显示:与对照组相比,LPS-24 h组TNF-α、IL-1β、Peli1的表达显著升高,LPS-4 h组Smo和Gli1的表达显著升高,而LPS-24 h组TRAF3表达显著下降(P<0.01);与对照组相比,PM-24 h组的Smo、Gli1表达显著升高(P<0.01);与LPS组相比,PM+LPS组BV2细胞TRAF3的表达显著升高,而炎症因子TNF-α,IL-1β,Peli1的表达显著下降(P<0.01)。由此我们推测:PM可提高炎症因子作用下PC12细胞的存活率,其作用机制可能与增加TRAF3的表达有关。 展开更多
关键词 purmorphamine 帕金森病 BV2细胞 PC12细胞 炎性因子
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维甲酸联合Purmorphamine诱导人脐带间充质干细胞向运动神经元分化的研究 被引量:2
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作者 刘学元 李德华 +1 位作者 单伟 姜东 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期647-652,共6页
目的:探讨单独和联合应用维甲酸(retinoic acid,RA)与purmorphamine(2,6,9-三取代嘌呤化合物,PM)对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)向运动神经元分化的影响,为其进一步临床应用提供实验依据... 目的:探讨单独和联合应用维甲酸(retinoic acid,RA)与purmorphamine(2,6,9-三取代嘌呤化合物,PM)对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)向运动神经元分化的影响,为其进一步临床应用提供实验依据。方法:用双酶消化法提取纯化hUCMSCs,取传至第3代的hUCMSCs,流式细胞仪检测表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44的表达情况。根据加入不同诱导剂分4组:空白对照组;RA组(加入0.5μg/ml RA);PM组(加入1μg/ml PM);RA+PM组(加入0.5μg/ml RA和1μg/ml PM)。细胞诱导后第20d,观察细胞形态的变化;采用免疫细胞化学方法检测Nestin、β-tubulin-III、Hb9、ChAT的表达情况,比较各组细胞阳性表达的比例。RA+PM组细胞诱导5、10、15、20、25 d后收集细胞,检测细胞内Ach的含量。结果:流式细胞仪检测结果显示,CD29、CD44高表达,CD31阴性,CD34不表达。空白对照组和PM组细胞诱导后形态变化不明显,Nestin和β-tubulin-III阳性表达率均很低,两者之间无差别。RA组和RA+PM组的诱导后细胞具有典型的神经元样形态;且Nestin和β-tubulin-III阳性表达率比其他两组高,有显著性差异(P<0.01)。4组中只有RA+PM组细胞诱导后出现Hb9表达阳性,其他各组均无Hb9表达。RA+PM组ChAT高表达,RA组仅少量表达。从第15 d起,RA+PM组细胞可检测到Ach,其含量随着诱导时间的延长逐渐增加。结论:RA能促进hUCMSCs向神经元分化,单独使用PM并没有明显效果,而RA联合PM能显著促进hUCMSCs向运动神经元分化。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 运动神经元 维甲酸 purmorphamine 诱导
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Purmorphamine对BV2细胞帕金森病相关基因Nurr1表达的影响 被引量:2
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作者 洪乐鹏 邵帅 汪光亮 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2016年第3期195-198,共4页
目的探讨Purmorphamine(PM)激活小胶质细胞瘤BV2细胞中Sonic hedgehog(SHH)信号通路对帕金森病(PD)相关基因Nurr1表达的影响。方法体外培养BV2小胶质细胞并分为对照组、脂多糖(LPS)处理组、PM+LPS处理组以及PM处理组,运用荧光定量PCR(Q-... 目的探讨Purmorphamine(PM)激活小胶质细胞瘤BV2细胞中Sonic hedgehog(SHH)信号通路对帕金森病(PD)相关基因Nurr1表达的影响。方法体外培养BV2小胶质细胞并分为对照组、脂多糖(LPS)处理组、PM+LPS处理组以及PM处理组,运用荧光定量PCR(Q-PCR)检测经LPS处理后BV2细胞中SHH信号通路Smoothened(Smo)、Gli1及Nurr1基因mRNA表达情况;PM激活SHH信号通路后,Q-PCR检测Nurr1mRNA含量以及炎性反应因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA表达情况。结果(1)与对照组相比,LPS处理后4h和24h时Smo和Gli1mRNA表达均升高(P<0.01,P<0.05);(2)与对照组相比,PM处理组细胞Smo和Gli1mRNA表达升高(P<0.01),LPS组Nurr1、IL-1β、TNF-αmRNA表达亦均升高(均P<0.01);而PM+LPS组Nurr1、IL-1β、TNF-αmRNA表达均较LPS处理组下降(均P<0.01)。结论PM激活SHH信号通路能够抑制BV2细胞中Nurr1的表达,并能发挥抑制炎性反应作用。 展开更多
关键词 purmorphamine BV2细胞 帕金森病 NURR1 炎症
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Purmorphamine对神经干细胞分化的影响及其机制 被引量:3
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作者 黄志 张良明 +7 位作者 陈瑞强 杨阳 杨补 刘畅 陈振翔 刘灿 戎利民 刘斌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第29期4675-4680,共6页
背景:神经干细胞的增殖及分化一直是研究的难点和热点,有效提高神经干细胞向神经细胞的分化效率具有重要的意义。据最近文献报道,小分子化合物purmorphamine在各类细胞增殖及分化实验中的应用越来越广泛。目的:探讨小分子化合物purmorph... 背景:神经干细胞的增殖及分化一直是研究的难点和热点,有效提高神经干细胞向神经细胞的分化效率具有重要的意义。据最近文献报道,小分子化合物purmorphamine在各类细胞增殖及分化实验中的应用越来越广泛。目的:探讨小分子化合物purmorphamine通过上调Shh信号通路对神经干细胞分化为各类神经细胞的促进作用。方法:从小鼠胚胎海马区分离培养得到原代神经干细胞,取第2-4代生长良好的细胞分为对照组及实验组。对照组用不添加purmorphamine的分化培养基培养,实验组用添加1μmol/L purmorphamine的分化培养基培养。培养7,14 d后,通过免疫细胞化学、RT-qPCR方法检测神经细胞标志物的表达量。结果与结论:(1)体外培养的神经干细胞生长良好,神经球中的大部分细胞表达特异性标志物nestin;(2)对照组及实验组均可见到TUJ1、GFAP、MAP2、MBP染色阳性;(3)RT-qPCR显示第7天实验组的TUJ1、GFAP、MAP2、MBP表达量均比对照组显著增高(P<0.05);第14天实验组的Smo、Ptc1、Gli-1表达量比对照组显著增高(P<0.05);GFAP、MAP2、MBP的表达量也比对照组显著增高(P<0.05);(4)以上数据表明purmorphmine能通过上调Shh信号通路来促进神经干细胞的分化。 展开更多
关键词 神经干细胞 purmorphamine 分化 SHH信号通路 干细胞 国家自然科学基金 神经干细胞 细胞分化 组织工程
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Purmorphamine在人多能干细胞向抑制性中间神经元分化中的作用
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作者 霍海芹 韩东妮 +3 位作者 瞿庄茵 徐敏 黄明敏 刘妍 《中国科技论文》 北大核心 2017年第24期2839-2844,共6页
为探究Pur诱导hPSCs向基底前脑抑制性中间神经元分化的最佳浓度。以前期建立的基底前脑γ-氨基丁酸(gammaaminobutyric acid,GABA)能中间神经元分化方法为基础,在分化过程中加入不同浓度的Pur,应用免疫荧光、PCR等技术探究不同浓度的Pur... 为探究Pur诱导hPSCs向基底前脑抑制性中间神经元分化的最佳浓度。以前期建立的基底前脑γ-氨基丁酸(gammaaminobutyric acid,GABA)能中间神经元分化方法为基础,在分化过程中加入不同浓度的Pur,应用免疫荧光、PCR等技术探究不同浓度的Pur对GABA能中间神经元的分化作用。2.0μmol/L的Pur分化可获得纯度较高的GABA能中间神经元,而1.5μmol/L的Pur分化可获得数量较多的GABA能中间神经元。高浓度的Pur能够有效诱导hPSCs向基底前脑分化,并高效地分化为前脑GABA能中间神经元。 展开更多
关键词 药理学 GABA能中间神经元 人多能干细胞 purmorphamine
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特异性激活SHH通路对急性脑缺血大鼠血管再生影响 被引量:3
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作者 朱美霖 白宏英 +1 位作者 曾志磊 张沛琳 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1098-1101,共4页
目的探讨应用purmorphamine特异性激活SHH信号通路对大鼠脑缺血区血管再生的影响。方法采用线栓法制备大鼠急性大脑中动脉脑缺血模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,其中给药组给予purmorphamine腹腔注射。于术后6h、12h、24h... 目的探讨应用purmorphamine特异性激活SHH信号通路对大鼠脑缺血区血管再生的影响。方法采用线栓法制备大鼠急性大脑中动脉脑缺血模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、给药组,其中给药组给予purmorphamine腹腔注射。于术后6h、12h、24h、48h通过免疫组化测定脑缺血后不同时相各组CD105和VEGF表达,PCR测定不同时相各组PTCH-1表达。结果模型组VEGF、CD105、PTCH-1表达明显高于假手术组(P<0.05);给药组与模型组相比较各时间点VEGF、CD105和PTCH-1表达明显增多,差异有统计学意义(P<0.01)。结论激活SHH通路可增加脑缺血组织的VEGF和CD105表达,促进急性脑缺血大鼠的血管再生。 展开更多
关键词 SHH信号通路 血管再生 purmorphamine
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SHH信号通路的激活对帕金森病模型小鼠的保护及其机制 被引量:2
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作者 洪乐鹏 汪光亮 +2 位作者 王迪 王智明 邵帅 《神经解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2017年第5期586-592,共7页
目的:为探讨Sonic Hedgehog(Shh)信号通路激活剂,2,6,9-三取代嘌呤化合物(purmorphamine,PM)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型动物中小鼠身体的协调能力、多巴胺能神经元及小胶质细胞细胞活性的影响及可能机制。方法:将47只C57B... 目的:为探讨Sonic Hedgehog(Shh)信号通路激活剂,2,6,9-三取代嘌呤化合物(purmorphamine,PM)对帕金森病(Parkinson’s disease,PD)模型动物中小鼠身体的协调能力、多巴胺能神经元及小胶质细胞细胞活性的影响及可能机制。方法:将47只C57BL/6J雄性8周小鼠随机分为control组、PM组、MPTP组、PM+MPTP组,使用腹腔注射1-methyl-4-phenyl 1,2,3,6-tet-rahydropyridine(MPTP)制作小鼠的帕金森病模型。应用悬杆实验、免疫组织化学和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,Q-PCR)技术分别检测小鼠的运动协调能力,酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)阳性的多巴胺(DA)能神经元的形态、数目,Ionized calcium binding adapter molecule 1(Iba1)阳性的小胶质细胞的形态以及炎症因子TNF-α的表达情况。结果:(1)悬杆实验显示:在预处理PM 24 h后MPTP诱导的PD模型小鼠中,与MPTP组相比,PM+MPTP组小鼠后爪抓到横杆的时间明显缩短(P<0.01);而与control组相比,MPTP组中小鼠后爪抓到横杆的时间显著延长(P<0.01)。(2)TH免疫组织化学结果显示:control组TH+DA能神经元染色很深,胞体密集,突起明显;与control组相比,MPTP组TH+DA能神经元的数量明显减少,细胞质着色变浅,突起变短或者消失(P<0.01);与MPTP组相比,PM+MPTP组TH+DA能神经元不仅使损失细胞的数目明显减少,而且细胞质染色变深,突起有所增多(P<0.01)。(3)Iba1免疫组织化学染色显示:与control相比,MPTP组小胶质细胞变大、形态不规则、突起变粗;与MPTP组相比,PM+MPTP组小胶质细的胞体形态较小,突起呈现细长较多。(4)Q-PCR检测结果显示:与control组相比,MPTP组TNF-α和Iba1mRNA表达明显增加(P<0.01);与MPTP组对比,PM+MPTP组表达的TNF-α和Iba1 mRNA水平明显降低(P<0.01)。结论:PM可改善PD模型小鼠的运动协调能力,保护多巴胺能神经元,其机制可能与降低小胶质细胞的炎症水平有关。 展开更多
关键词 purmorphamine 帕金森病 炎症 小胶质细胞 小鼠
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SHH的激活对永久性脑缺血大鼠细胞骨架蛋白α-tubulin、MAP-2表达的影响 被引量:1
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作者 陈苗苗 白宏英 曾志磊 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期693-696,共4页
目的探讨应用purmorphamine激活SHH信号通路后对大鼠脑缺血区细胞骨架蛋白α-tubulin、MAP-2的影响。方法采用线栓法制备大鼠急性大脑中动脉脑缺血模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组和给药组,其中给药组给予purmorphamine腹腔注射。... 目的探讨应用purmorphamine激活SHH信号通路后对大鼠脑缺血区细胞骨架蛋白α-tubulin、MAP-2的影响。方法采用线栓法制备大鼠急性大脑中动脉脑缺血模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组和给药组,其中给药组给予purmorphamine腹腔注射。于术后1d、3d、7d、14d用免疫组化法测定脑缺血后不同时相α-tubulin、MAP-2的表达,用RT-PCR测定Gli-1的表达。结果假手术组各时间点α-tubulin、MAP-2、Gli-1的表达差异无统计学意义;与之相比,模型组α-tubulin、MAP-2各时间点含量明显低于假手术组(P<0.05);给药组与模型组比较在1d、3d、7d各时间点α-tubulin、MAP-2的表达明显增多,差异有统计学意义(P<0.05),第14天时趋于稳定;而给药组Gli-1各时间点的表达明显高于假手术组和模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论激活SHH信号通路可促进缺血区α-tubulin、MAP-2表达增加,这可能是其减轻脑缺血后神经损伤的机制之一。 展开更多
关键词 SHH信号通路 purmorphamine Α-TUBULIN MAP-2
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激活SHH通路对急性脑缺血大鼠SYN、GAP-43的影响 被引量:1
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作者 刘花艳 娄季宇 +2 位作者 曾志磊 陈苗苗 牛广义 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期1546-1548,共3页
目的探讨应用purmorphamine激活SHH信号通路对脑梗死大鼠神经突触再生的影响。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉模型(MCAO),将大鼠随机分为假手术组、模型组、药物组(腹腔注射purmorphamine溶液)。于术后6、24、72 h、7 d通过免疫组化... 目的探讨应用purmorphamine激活SHH信号通路对脑梗死大鼠神经突触再生的影响。方法采用线栓法制备大鼠大脑中动脉模型(MCAO),将大鼠随机分为假手术组、模型组、药物组(腹腔注射purmorphamine溶液)。于术后6、24、72 h、7 d通过免疫组化测定大鼠脑缺血半暗带SYN和GAP-43表达,PCR法测定不同时间点GLi1的表达。结果脑缺血后缺血半暗带SYN于24 h表达减少,3 d达最低值,7 d开始增高但不及正常表达数值;GAP-43于24 h开始升高,3 d达高峰,7 d开始下降,药物组缺血半暗带SYN、GAP-43表达在各个时间点高于模型组(P<0.05);GLi1的表达于6 h开始升高,24 h达高峰,之后开始下降,药物组GLi1 mRNA的表达高于模型组(P<0.05)。结论激活SHH通路可促进脑缺血组织的SNY和GAP-43表达,促进缺血后突触再生。 展开更多
关键词 purmorphamine 急性脑梗死 GLI1 突触素 生长相关蛋白
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特异激活SHH信号通路对急性脑缺血大鼠NGF、BDNF表达的影响 被引量:1
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作者 牛广义 白宏英 +2 位作者 曾志磊 陈苗苗 刘花艳 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期895-897,共3页
目的研究特异激活SHH信号通路对急性脑缺后大鼠NGF、BDNF表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组(只分离血管不插线栓)、模型组、药物组,药物组于术后给予purmorphamine腹腔注射。术后6h、24h、48h、72h、7d,通过免疫组化法检测大鼠脑... 目的研究特异激活SHH信号通路对急性脑缺后大鼠NGF、BDNF表达的影响。方法将大鼠随机分为假手术组(只分离血管不插线栓)、模型组、药物组,药物组于术后给予purmorphamine腹腔注射。术后6h、24h、48h、72h、7d,通过免疫组化法检测大鼠脑组织NGF、BDNF和通过Real-time PCR检测大鼠脑组织GLI-1 mRNA的表达。结果模型组NGF、BDNF、GLI-1 mRNA表达明显高于假手术组(P<0.05),药物组与模型组在各个时间点NGF、BDNF、GLI-1 mRNA表达明显增多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论激活SHH信号通路后可增加NGF、BDNF的表达,促进急性脑缺血后神经元修复。 展开更多
关键词 神经生长因子 脑源性营养因子 SHH信号通路 purmorphamine
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自制毛囊再生乳膏对小鼠皮肤创面毛囊再生的影响 被引量:2
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作者 孙浩 汤茂 +5 位作者 孙梦黎 秦华 马奎 梅谨瑜 赵安东 付小兵 《解放军医学院学报》 CAS 北大核心 2021年第3期319-326,共8页
背景创面愈合时无毛囊等皮肤附属器再生是创面修复领域的难题。小分子化合物能够调控细胞增殖与分化,促使成熟体细胞再分化为具有增殖能力的前体细胞或其他细胞系,还能够靶向调控信号通路与代谢进程,是一种促进皮肤及附属器原位再生的... 背景创面愈合时无毛囊等皮肤附属器再生是创面修复领域的难题。小分子化合物能够调控细胞增殖与分化,促使成熟体细胞再分化为具有增殖能力的前体细胞或其他细胞系,还能够靶向调控信号通路与代谢进程,是一种促进皮肤及附属器原位再生的安全有效的方法。目的本研究拟通过小分子化合物组合探索其促进创面毛囊再生的效果及机制。方法选取C57BL/6小鼠45只,雌性,体质量(20±5)g。以打孔器配合眼科剪制作小鼠背部双侧皮肤全层缺损创面动物模型,左侧创面为用药侧,右侧创面为对照侧。以负载CHIR-99021、Purmorphamine、Tofacitinib和SJ000291942四种小分子化合物的凡士林药膏(以下简称毛囊再生乳膏)连续涂抹小鼠背部皮肤全层缺损创面28 d,通过常规HE染色、Masson染色以及免疫组织化学染色分析创面愈合和毛囊再生情况。结果用药组与对照组小鼠背部创面愈合率无统计学差异,提示毛囊再生乳膏对创面愈合速度无显著影响。HE染色发现,毛囊再生乳膏处理创面14 d左右,用药组创面表皮形成毛囊上皮芽基细胞,真皮中出现毛乳头细胞。28 d可见用药组创面中大量毛囊样结构,免疫荧光染色证实其表达毛囊细胞特征性标志物CK5、CK15、CK17、Noggin,而对照组创面毛囊再生数量极少,用药组与对照组新生毛囊数量差异有统计学意义(17 vs 4,P<0.001)。Masson染色可见用药组与对照组创面胶原纤维密度及排列方式无明显区别,提示毛囊再生乳膏可诱导纤维瘢痕中毛囊再生。免疫组织化学染色显示用药侧创面新生的表皮细胞、毛囊上皮芽基细胞、新生毛乳头细胞中Wnt信号通路和Shh信号通路相关标志物β-catenin、Shh、Gli1显色明显,表明毛囊再生乳膏可能通过激活Wnt、Shh信号通路促进创面毛囊再生。结论本研究自制的毛囊再生乳膏能够通过调控毛囊生长发育过程中的Wnt信号通路和Shh信号通路促进创面愈合时毛囊再生,有望转化为创面治疗药物应用于临床。 展开更多
关键词 小鼠皮肤创面 小分子化合物CHIR-99021 小分子化合物purmorphamine 小分子化合物Tofacitinib 小分子化合物SJ000291942 毛囊再生
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调控Smo活性对成年大鼠神经干细胞增殖和迁移的影响 被引量:3
13
作者 仇欣霞 陈荷 +1 位作者 冯德龙 董为人 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1588-1592,共5页
目的探讨Shh信号通路中G蛋白偶联受体Smoothened(Smo)对成年大鼠神经干细胞(ANSCs)增殖、迁移的影响并阐明其作用机制。方法培养ANSCs,分别添加Smo的激动剂Purmorphamine及其抑制剂Cyclopamine,细胞增殖-毒性实验(CCK8)检测其对ANSCs增... 目的探讨Shh信号通路中G蛋白偶联受体Smoothened(Smo)对成年大鼠神经干细胞(ANSCs)增殖、迁移的影响并阐明其作用机制。方法培养ANSCs,分别添加Smo的激动剂Purmorphamine及其抑制剂Cyclopamine,细胞增殖-毒性实验(CCK8)检测其对ANSCs增殖的影响;细胞划痕实验检测其对ANSCs迁移能力的影响;实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测Sonic Hedgehog(Shh)信号通路的细胞表面Patched蛋白(Ptch1)、G蛋白偶联受体Smo、转录因子(Gli1)以及神经导向因子(Slit1)和脑源性神经营养因子(BDNF)表达量的变化。结果Smo激动剂PM对ANSCs的增殖有明显促进作用,48 h后PM组ANSCs的吸光度明显升高(P<0.01);PM可以促进ANSCs的迁移,48 h后的PM组ANSCs划痕面积显著减小(P<0.01);Smo抑制剂CPM对ANSCs的增殖和迁移均有显著的抑制作用;RT-PCR实验显示PM组细胞中的Ptch1、Smo、Gli1及Slit1、BDNF表达水平均明显增加(P<0.05)。结论调控Smo的活性可以促进或抑制成年神经干细胞的增殖和迁移,其作用机制可能与调节BDNF和Slit1的表达有关。 展开更多
关键词 purmorphamine CYCLOPAMINE G蛋白偶联受体Smoothened 成年神经干细胞
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Baihui(DU20)-penetrating-Qubin(GB7) acupuncture inhibits apoptosis in the perihemorrhagic penumbra 被引量:9
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作者 Beng Zhang Xiao-Hong Dai +8 位作者 Xue-Ping Yu Wei Zou Wei Teng Xiao-Wei Sun Wei-Wei Yu Hao Liu Hui Wang Meng-Juan Sun Meng Li 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2018年第9期1602-1608,共7页
Baihui(DU20)-penetrating-Qubin(GB7) acupuncture can inhibit inflammatory reactions and activate signaling pathways related to proliferation after intracerebral hemorrhage.However,there is no research showing the r... Baihui(DU20)-penetrating-Qubin(GB7) acupuncture can inhibit inflammatory reactions and activate signaling pathways related to proliferation after intracerebral hemorrhage.However,there is no research showing the relationship between this treatment and cell apoptosis.Rat models of intracerebral hemorrhage were established by injecting 60 μL of autologous blood into the right side of the caudate-putamen.Six hours later,the needle traveled subcutaneously from the Baihui acupoint to Qubin acupoint.The needle was alternately rotated(180 ± 10 turns/min) manually along clockwise and counter-clockwise directions.Stimulation lasted for 7 days,and was performed three times each for 6 minutes with 6-minute intervals between stimulations.Rats intraperitoneally receiving Sonic hedgehog pathway activator,purmorphamine(1 mg/kg per day),served as positive controls.Motor and sensory function were assessed using the Ludmila Belayev test.Extent of pathological changes were measured in the perihemorrhagic penumbra using hematoxylin-eosin staining.Apoptosis was examined by terminal deoxynucleotidyl transferase(Td T)-mediated d UTP nick end labeling assay.Expression of smoothened(Smo) and glioma-associated homolog 1(Gli1) was determined by western blot assay.Our results showed that Baihui-penetrating-Qubin acupuncture promoted recovery of motor and sensory function,reduced the apoptotic cell percentage in the perihemorrhagic penumbra,and up-regulated Smo and Gli1 expression.We conclude that Baihui-penetrating-Qubin acupuncture can mitigate hemorrhage and promote functional recovery of the brain in a rat model of intracerebral hemorrhage,possibly by activating the Sonic hedgehog pathway. 展开更多
关键词 nerve regeneration acupuncture treatment intracerebral hemorrhage neurological function Ludmila Belayev test TUNEL assay purmorphamine SMO Ptchl Glil neural regeneration
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