嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病中文名称之商榷

给大鼠注射puromycin aminonucleoside(PAN)所建立的肾病模型应该称为嘌呤霉素氨基核苷肾病(PAN肾病),但在国内却多被误为“嘌呤霉素肾病”。本文就嘌呤霉素与嘌呤霉素氨基核苷的区别、嘌呤霉素氨基核苷肾病英文缩写的不同解读等予以辨析,并强调纠正这一流传多年的错误有助于开展国际学术交流。

Rac1及Cdc42在肾上腺髓质肽(AM)缓解嘌呤霉素氨基核苷(PAN)所诱导足细胞损伤中作用机制的初步探讨

目的观察肾上腺髓质肽(adrenomedullin,AM)对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)所诱导受损足细胞的作用以及Rac1/Cdc42表达变化,初步探讨其可能机制。方法将小鼠肾足细胞株分为对照组、PAN处理组(100μg/mL)、PAN联合AM处理组(10-7mol/L)及PAN联合AM和蛋白激酶A(PKA)抑制剂H89(10-6mol/L)处理组。经一次性腹腔注射PAN(150 mg/kg)建立大鼠足细胞损伤模型,每天经尾静脉注射AM蛋白(66μg/kg)进行干预。SDS-PAGE法检测尿蛋白水平,电镜观察足细胞足突宽度变化,双重免疫荧光染色及/或Western blot观察足细胞特异性骨架蛋白(synaptopodin、nephrin)、Rac1及Cdc42的蛋白表达水平,实时定量PCR(qRT-PCR)检测synaptopodin、nephrin的mRNA表达,谷胱甘肽巯基转移酶-拉下实验(GST-pull down assay)法检测Rac1及Cdc42活性变化。结果PAN在体内、外均显著降低synaptopodin、nephrin的蛋白或/及mRNA表达水平,且显著升高desmin表达;大鼠PAN肾病模型的尿蛋白水平显著升高,足突宽度显著增加;PAN显著降低Rac1、Cdc42总蛋白及活性水平。上述由PAN所介导的效应被AM显著抑制;H89显著阻断AM的体外作用。结论AM主要通过PKA通路促进受损足细胞的修复,该保护机制与AM调控Rac1/Cdc42表达密切相关。

嘌呤霉素氨基核苷肾病肾脏中RANK-RANKL的表达

目的探讨RANK-RANKL在嘌呤霉素氨基核苷肾病(PAN)大鼠动物模型肾脏中的表达。方法 36只SD大鼠被分配为PAN组及对照组,单次静脉注射嘌呤霉素氨基核苷(PA,100 mg/kg)制作PAN动物模型。大鼠于第3、7、14天检测蛋白尿及血肌酐。检测肾脏病理,并分析RANK和RANKL变化。结果(1)在PAN SD大鼠动物模型中,第3、7、14天时蛋白尿与对照组比较有显著差别,第7天达到高峰;(2)用Western blotting及RT-PCR定量检测发现RANK-RANKL蛋白及mRNA在PAN模型组高于对照组;(3)用激光共聚焦技术显示足细胞标记蛋白Synaptopodin与RANK完全重合,提示RANK主要在足细胞表达;(4)免疫电镜发现RANK在PAN模型组明显增多,且主要定位于足突的顶部胞膜和胞质内。结论在PAN SD大鼠动物模型足细胞异常表达RANK-RANKL,提示RANK及RANKL在足细胞损伤中可能发挥重要作用。

嘌呤霉素肾病鼠尿蛋白量与足突形态改变的关系

目的 :研究嘌呤霉素肾病大鼠尿蛋白排出量与肾小球上皮细胞足突的形态变化之间的相互关系 ,初步探讨蛋白尿的发生机制。 方法 :30只SD大鼠随机分为实验组和对照组 ,在 2天、5天、10天、15天、2 0天 5个不同时间点应用双缩脲法测定大鼠 2 4h尿蛋白排出量 ,并用透射电镜摄片 ,图像分析及形态计量学的方法 ,研究大鼠在不同时间点的足突形态变化 ,进而分析尿蛋白排出量与足突形态改变之间的相互关系。 结果 :① 2 4h尿蛋白定量结果示 ,注药 5天后尿蛋白排出量逐渐增多 ,10天时尿蛋白排出量与对照组差异非常显著 (P <0 0 1) ,15天时尿蛋白排出量恢复 ,与 10天比差异亦非常显著 (P <0 0 1) ,且与对照组相比差异仍显著 (P <0 0 5 ) ,至 2 0天尿蛋白排出量与对照组无差别 (P >0 15 )。②注射嘌呤霉素后 ,足突形态呈现逐渐肿胀到融合以后又逐渐呈恢复的变化 ,其中 2～ 2 0天实验组足突宽度 ,体积密度 ,比表面与对照组相比差异有高度显著性 (P <0 0 1) ,表面积密度在2～ 15天与对照组差异显著 (P <0 0 5 ) ,各参数均于 10天达极值。③尿蛋白排出量与足突宽度正相关 (r =0 92 94,P =0 0 2 ) ,与体积密度成正相关 (r =0 95 5 9,P =0 0 11) ,而与比表面呈负相关 (r=- 0 9388,P =0 0 18)。 结论

柴黄益肾方对嘌呤霉素氨基核苷诱导大鼠慢性肾病的治疗作用

目的:研究柴黄益肾方对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)诱导大鼠慢性肾病的治疗作用。方法:60只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、福辛普利钠阳性对照组(0．833 mg·kg-1)、柴黄益肾方小、中、大剂量组(0．55,1．1和2．2 g·kg-1),每组10只,除假手术组外其余各组动物均经颈静脉插管一次性注射PAN 50 mg·kg-1,制作大鼠肾病综合征伴局灶节段性肾小球硬化模型,假手术组给予生理氯化钠溶液。各给药组于手术次日起连续灌胃给药23周。观察药物对大鼠24 h尿蛋白定量及血清总蛋白、白蛋白、血清胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等生化学指标的影响,对肾组织进行病理学观察并对损害程度进行评分,采用免疫组化的方法,观察柴黄益肾方对α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)和转化生长因子(transforming growth factor-β1,TGF-β1)蛋白在肾脏组织表达的影响。结果:柴黄益肾方能明显抑制大量尿蛋白排泄,提高血清总蛋白和白蛋白含量,改善脂代谢紊乱,降低血清尿素氮,改善肾脏病理损伤,降低α-SMA和TGF-β1蛋白在肾脏组织表达。结论:柴黄益肾方能减轻由PAN诱导的肾组织损伤,改善肾功能障碍和脂蛋白代谢紊乱,降低α-SMA和TGF-β1蛋白在肾脏组织表达。

肾炎康复片改善大鼠慢性肾损害的作用观察

目的:观察肾炎康复片对氨基核苷嘌呤霉素(PAN)诱导的大鼠慢性肾病的治疗作用。方法:实验大鼠随机分为假手术组、模型组、蒙诺对照组、肾炎康复片组,利用PAN诱导大鼠肾病综合征伴局灶节段性肾小球硬化模型,观察药物对大鼠24h尿蛋白定量,血清总蛋白、白蛋白、血清胆固醇、三酰甘油、血清尿素氮、血清肌酐等生化学指标的影响,对肾组织进行病理学观察并对损害程度进行评分,探讨肾炎康复片对肾病综合征、蛋白尿、肾小球硬化及肾间质纤维化的治疗作用。结果:肾炎康复片能明显抑制大鼠大量尿蛋白排泄,提升血清总蛋白和白蛋白含量,改善脂代谢紊乱,降低血清尿素氮,改善肾脏病理损伤。结论:肾炎康复片能减轻由PAN诱导的肾组织损伤,减少尿蛋白的排泄,改善肾功能障碍和脂蛋白代谢紊乱。

过氧化物酶体增殖物活化受体γ激动剂对肾病大鼠肾组织nephrin表达的调控

目的探讨过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)对nephrin表达的调控作用。方法建立大鼠氨基核苷嘌呤霉素(PAN)肾病模型,应用实时定量PCR和免疫印迹法检测肾病大鼠不同时间点肾组织中PPARγ和nephrin mRNA和蛋白表达,并观察PPAR-γ激动剂罗格列酮大鼠肾组织中nephrin表达的影响。体外培养HEK293细胞,转染含荧光素酶报告基因的nephrin启动子区,观察罗格列酮对nephrin基因转录活性的影响。结果PAN肾病模型d1 PPARγ、nephrin mRNA和蛋白即出现下降,d3出现明显下降,d7下降到最低点,PPARγ与nephrin表达呈显著正相关,而PPARγ和nephrin蛋白表达与24 h尿蛋白排泄呈负相关;罗格列酮治疗后大鼠尿蛋白排泄明显下降,肾组织中nephrin表达回升;罗格列酮呈时间依赖性诱导nephrin基因的转录活性,3 h达高峰,其后荧光素酶活性有所下降,但刺激24 h仍显著高于对照组。结论nephrin表达受PPARγ调控,PPARγ激动剂通过诱导nephrin表达而减轻蛋白尿。

柴黄益肾方对嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠尿蛋白及纤溶功能的影响

目的探讨柴黄益肾方提取物(CYE)对嘌呤霉素氨基核苷(PAN)肾病大鼠尿蛋白及纤溶功能的影响。方法大鼠经颈静脉一次性注射PAN5mg/100g体重制备大鼠肾病模型,于造模后第二天开始灌胃给药,连续给药21周后检测24小时尿蛋白含量,腹主动脉取血测定TPA、PAI、AT-Ⅲ纤溶功能。结果21周给药蒙诺与CYE均能显著降低尿蛋白,升高组织型纤溶酶原激活物活性(TPA),降低纤溶酶原活化物抑制因子(PAI),增强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)活性。结论柴黄益肾方提取物能抑制嘌呤霉素氨基核苷诱导的大鼠肾病模型的尿蛋白排泄,并能改善纤溶功能。

不规则趋化蛋白在嘌呤霉素氨基核苷肾病模型中的表达

目的 :检测CX3C族趋化因子不规则趋化蛋白 (fractalkine,Fkn)在嘌呤霉素氨基核苷 (puromycinaminonucleoside,PAN)肾病中的表达 ,进一步阐明肾病的发病机制 ,为肾病的治疗提供新的靶点。 方法 :从Wistar大鼠的颈静脉给予PAN ,对照组给予等量生理盐水 ,在不同的时间点观察PAN引起的尿蛋白改变和肾脏炎性细胞浸润情况 ,并于第 1、3、5、7、1 0天处死动物 ,制作肾组织匀浆和冰冻切片 ,分别用于RT PCR和免疫组化研究 ,观察在PAN注射的不同时间点肾组织中FknmRNA和蛋白质的表达情况 ;同时在体外用白介素 1 β(IL 1 β)刺激培养的肾小管上皮细胞观察Fkn的表达。 结果 :PAN注射后第 5天尿蛋白开始升高 ,持续增加直至第 1 0天 ,同时伴有肾间质中CD4+ T细胞 ,CD8+ T细胞和单核 /巨噬细胞的增加。RT PCR和免疫组化均显示Fkn在第 7、第 1 0天表达升高 ,第 3天主要分布在肾小球 ,以后主要在肾小管上皮细胞表达。用IL 1 β刺激后 1h体外培养的肾小管上皮细胞即开始表达FknmRNA ,在 4～ 6h达到高峰。 结论 :本文首次观察到Fkn在PAN肾病模型中表达增高 ,其特征为先出现于肾小球 ,后移行至肾小管 ,并早于肾组织中白细胞浸润及蛋白尿的发生。提示Fkn可能是肾病发病和进展过程中的另一重要的相关分子。

单次尾静脉注射嘌呤霉素氨基核苷制作大鼠肾病模型的研究和评价

目的研究单次尾静脉注射嘌呤霉素氨基核苷(PAN)制作大鼠肾病模型的方法,临床病理过程及效果评价。方法成年雄性SD大鼠,体重200-250g。PAN 15mg/100g浓度溶解在0.9%氯化钠溶液中,从大鼠尾静脉注射(PAN组);对照组为等量生理盐水注射,测定不同时间点的血压、尿蛋白排泄量、观察尿蛋白、血清胆固醇和甘油三酯及血肌酐的变化及肾组织的病理改变。结果尿蛋白定量在PAN注射第8d达峰值,同时血浆蛋白明显降低,血胆固醇和甘油三酯明显增高;尿蛋白在第4周降至正常,然后又逐渐增高在14和20周时尿蛋白在PAN组显著高于对照组;肾小球硬化指数(GSI)在PAN组4、14和20周分别是6.21%、25.35%、30.49%,明显高于对照组。同时伴有收缩压在PAN组明显高于对照组,在注射后20周,PAN组血肌酐明显高于对照组。结论单次尾静脉注射PAN可成功地诱导肾病综合征(急性期)和慢性肾炎FSGS(慢性期)的肾病模型,成功率高,方法较简单,用药量少,克服传统方法用药剂量过小,造模失败或需重复注射使剂量过大而致动物死亡等缺点,是研究人类相关肾脏疾病的良好动物模型。

通脉颗粒对嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠FDP、DD、Plg及MDA的影响

目的:观察通脉颗粒对嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠纤维蛋白降解产物(FDP)、D-二聚体(DD)、纤溶酶原(P lg)及丙二醛(MDA)的影响。方法:颈静脉插管缓慢注入嘌呤霉素氨基核苷(PAN,50mg/kg)并于此后13、16、19天尾静脉追加注射PAN5mg/kg制备大鼠肾病模型。于造模后第二天开始灌胃给药,连续30天,收集造模后第5、10、15、20、25和30天24小时尿测定尿蛋白排泄。于第31天处死全部大鼠,取血和肾组织进行相关的检查,同时监测FDP、DD、P lg以及MDA等指标。结果:通脉颗粒在减少蛋白尿,改善肾组织病理损害的同时,能够调节FDP、DD、P lg的纤溶活性及清除MDA。结论:通脉颗粒对嘌呤霉素氨基核苷大鼠肾病模型的治疗作用,可能与改善纤溶功能和促进过氧化脂质的清除有关。

巢蛋白在足突广泛融合的肾小球中表达下调及与蛋白尿程度的相关性

目的观察中间丝蛋白类的巢蛋白（nestin）在足突广泛融合的肾小球中的表达及其与足突病变动态过程和蛋白尿产生的关系。方法免疫组化法检测nestin在人正常肾组织及微小病变肾组织中的表达。构建氨基核苷嘌呤霉素肾病大鼠模型，应用免疫组化、荧光实时定量PCR、Western印迹法检测注射嘌呤霉素后第1、4、10、20天大鼠肾小球中nestin的分布与表达；电镜观察肾脏足细胞改变，测定尿蛋白量（24h）。分析nestin的变化与蛋白尿的相关性。结果免疫组化显示nestin在人类微小病变肾小球中的表达较正常组织显著下调（0．93±0．08比1．65±0．12，P〈0．05）。在嘌呤霉素损伤足细胞早期，肾小球nestin的表达曾有一过性增加（mRNA和蛋白水平分别为对照组的1．23倍和1．48倍，P〈0．05），随后持续下降。nestin的mRNA水平在嘌呤霉素注射后第4天时降至对照组的35．8％；第10天时为对照组的12．1％（均P〈0．01）；病变好转后开始上升，恢复为对照组的65．8％（P〈0．05）。Western印迹检测nestin蛋白改变也有类似的趋势，嘌呤霉素注射后第4天，nestin蛋白水平有所下降，为对照组的77．0％（P〈0．05）；至大量蛋白尿的第10天，nestin蛋白水平仅为对照组的58．0％（P〈0．05）；而随着病变的恢复，嘌呤霉素注射后第20天时nestin蛋白量恢复为对照的83．4％。Pearson相关分析结果显示，注射嘌呤霉素后nestinmRNA（r=-0．667，P〈0．05）及蛋白（r=-0．621，P〈0．05）表达与尿蛋白量（24h）均呈负相关。结论在以足突广泛融合为特征的肾脏病变中，肾小球中间丝蛋白nestin表达显著减少，并与蛋白尿程度呈负相关，提示nestin可能参与了足细胞形态和功能的维持。

嘌呤霉素肾病模型肾组织微小RNA的差异性表达及雷至胶囊的干预作用

目的:观察嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病模型鼠肾组织微小RNA(microRNAs,miR-NAs)差异性表达的特征及其与足细胞裂隙膜(slid diaphragm,SD)关键结构分子nephrin,podocin和骨架蛋白synaptopodin表达的关系;阐明雷至胶囊(Leizhi capsule,LZC)在体内通过调控模型鼠肾组织miRNAs差异性表达而改善足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达,减少蛋白尿的机制。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组(A)、模型组(B)、雷至胶囊组(C,5 mL.kg-1.d-1)、雷公藤多苷组(D,10 mL.kg-1.d-1)和缬沙坦(E,7.5 mL.kg-1.d-1)组。除A组外,其余各组大鼠一次性经颈静脉注射PAN(100 mg.kg-1)而建立PAN肾病模型。造模后第2天灌胃给药,A,B组大鼠用生理盐水干预,共10 d。造模前及造模后第3,9天称量各组大鼠体重,并检测24 h尿蛋白排泄量(urinary protein ration,Upro)。造模后第11天,处死全部大鼠,采集血液和肾组织,观察血清生化指标血清白蛋白(albumin,Alb),血清肌酐(serum creatinine,Scr),血清尿素氮(bloodurea nitrogen,BUN),肾小球超微结构(足细胞足突形态)以及肾组织dicer酶,nephrin,podocin,synaptopodin表达;同时,借助生物芯片(biochip)技术,分析肾皮质miRNAs差异性表达的特征,并且,借助荧光实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)验证rno-miR-23a,rno-miR-300-3p,rno-miR-24,rno-miR-30c等的差异性表达量。结果:在PAN诱导下,模型鼠出现蛋白尿、肾功能减退、低白蛋白血症、足细胞足突融合;在模型鼠肾组织中,dicer酶影响足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达;上调rno-miR-23a,rno-miR-300-3p表达,下调rno-miR-24,rno-miR-30c表达;差异性表达的miRNAs包括rno-miR-24,rno-miR-30c,rno-miR-23a,rno-miR-300-3p等。雷至胶囊能改善PAN肾病模型鼠的一般情况、蛋白尿、血清BUN、足细胞足突融合;还能减少模型鼠肾组织dicer酶表达,增加足细胞nephrin,podocin和synaptopodin表达;减弱在模型鼠肾组织中上调的rno-miR-23a,rno-miR-300-3p,增强在模型鼠肾组织中下调的rno-miR-24,rno-miR-30c等。结论:PAN在体内通过dicer酶/miRNAs差异性表达途径而影响模型鼠肾组织miRNAs表达,干预足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达,破坏足细胞结构和功能,产生蛋白尿;雷至胶囊可以减少PAN肾病模型鼠蛋白尿,其机制可能是干预dicer酶/miRNAs差异性表达途径,调控足细胞nephrin,podocin,synaptopodin表达,改善足细胞的结构与功能。

Podocalyxin在大鼠嘌呤霉素肾病模型中的表达及其意义

目的:研究大鼠嘌呤霉素肾病(PAN)模型中podocalyxin的表达,探讨其在蛋白尿发生中的意义。方法:建立PAN模型,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,免疫荧光法检测podocalyxin在肾脏的表达与分布。结果:①PAN 4d组大鼠24h尿蛋白量较对照组升高(P<0.01),PAN 7d组达高峰(P<0.001),于28d逐渐下降至正常。②透射电镜显示PAN 4d组大鼠足突部分融合,PAN 7d组大鼠足突广泛融合,PAN 28d组大鼠足突形态有所恢复。③免疫荧光显示podocalyxin在肾小球表达,PAN 4d组podocalyxin的表达较对照组降低(P<0.05)。PAN 7d组表达明显低于对照组(P<0.01)。PAN 28d组podocalyxin的表达明显高于PAN 7d组(P<0.01),与蛋白尿产生明显相关。结论:大鼠PAN模型中,podocalyxin的表达减少可引起足突融合,并与蛋白尿产生密切相关。

嘌呤霉素损伤小鼠肾小球足细胞系中podocin表达与分布的影响及其意义

目的Podocin是构成肾小球足细胞裂孔隔膜(slit diaphragm,SD)完整性的重要分子,其表达异常与大量蛋白尿的形成有关。本研究采用体外培养肾小球足细胞系,探讨足细胞损伤过程中,podocin mRNA表达和分布变化与足细胞损伤的关系。方法将体外培养的足细胞采用随机数字表法设立为实验组与对照组。实验组采用嘌呤霉素(puromycin aminonucleoside,PAN)刺激(剂量为50μg/mL),分别于8 h,24 h和48 h观察细胞形态、提取总RNA和细胞免疫组化观察podocin的分布。对照组用含10%FBS的RPMI 1640培养液培养。细胞图像应用Image J图像处理软件,计算实验组与对照组在上述各时间点200倍镜下随机选择的30个细胞的相对面积,半定量RT-PCR和间接免疫荧光法检测podocin mRNA表达和分布变化。结果对照组呈星形伸出树枝状突起,相邻细胞间形成相互连接。实验组细胞体缩小,足突回缩、消失,细胞间失去相互连接。上述各时间点两组间podocin mRNA表达比较,差异无显著意义(P>0.05)。Podocin在对照组呈细丝状均匀分布于细胞核膜、细胞质及细胞膜;在实验组主要沿细胞核膜呈点线样分布,刺激后8 h和24 h细胞质有少许分布,刺激48 h后出现细胞膜、细胞质分布缺失。结论Podocin分布异常与足细胞损伤密切相关,损伤早期即有变化;podocin分布异常是足细胞损伤过程中的重要分子效应。

益气清热膏对氨基核苷嘌呤霉素肾病综合征大鼠模型肾组织Wnt/β-catenin信号通路表达的影响

目的:探讨益气清热膏对氨基嘌呤霉素肾病综合征模型Wnt/β-catenin信号通路相关分子表达的影响。方法:采用RT-PCR法及Western Blot法检测PAN模型造模后第3、10、15天大鼠肾组织中wnt4、wnt5a、β-catenin、GSK-3β、FEN的基因和蛋白表达情况。结果:造模后第15天,与模型组比较,益气清热膏可以抑制PAN大鼠模型wnt4、β-catenin、GSK-3β和FEN蛋白的表达(P<0.05,P<0.01),并且随着治疗时间延长,益气清热膏作用靶点逐渐增多。结论:益气清热膏可以降低PAN大鼠模型肾组织wnt4、β-catenin、GSK-3β、FEN的基因和蛋白表达,这可能是其降低蛋白尿、修复足细胞损伤的作用机制之一。

黄芪甲苷联合糖皮质激素治疗嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠的疗效及其机制

目的:观察黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)联合糖皮质激素干预治疗嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病大鼠的疗效,并探讨其相关机制。方法:40只150~180 g无特定病原体级健康雄性Wistar大鼠被随机分为对照组、模型组(PAN组)、黄芪甲苷干预组(PAN+AS-IV组)、甲泼尼龙(MP)干预组(PAN+MP组)和AS-IV+MP干预组(PAN+AS-IV+MP组)。采用单次尾静脉注射50 mg/kg PAN的方法建立PAN肾病模型。药物干预组于造模同时分别给予40 mg·kg^(-1)·d^(-1)AS-IV灌胃和15 mg·kg^(-1)·d^(-1)MP腹腔注射,连续治疗10 d,实验第11天收集各组大鼠血液、24 h尿液和肾组织标本。用全自动生化仪检测尿蛋白量、尿肌酐、血清白蛋白(Alb)水平;Western印迹法检测足细胞标志蛋白nephrin、Rho家族蛋白RhoA、Rac/Cdc42的相对表达量;免疫荧光法检测各组大鼠肾组织nephrin、synaptopodin蛋白的表达。结果:与对照组比较,PAN组大鼠尿蛋白/肌酐比值(uPCR)显著升高,Alb水平显著降低,足细胞标志蛋白nephrin相对表达量明显下调,RhoA、Rac/Cdc42蛋白相对表达量显著上调(均P<0.01)。与PAN组比较,PAN+AS-IV组和PAN+AS-IV+MP组血清Alb水平显著升高(均P<0.01),PAN+MP组(P<0.05)和PAN+AS-IV+MP组(P<0.01)uPCR显著降低。Western印迹结果显示,与PAN组比较,各药物干预组(PAN+AS-IV组、PAN+MP组和PAN+AS-IV+MP组)肾组织nephrin相对表达量显著升高,RhoA、Rac/Cdc42相对表达量显著降低(均P<0.01)。免疫荧光结果显示,PAN组足细胞标志蛋白nephrin、synaptopodin表达较对照组明显减少,各药物干预组肾组织nephrin、synaptopodin表达较PAN组均升高,其中PAN+AS-IV+MP组改善最显著。结论:AS-IV及糖皮质激素均可改善PAN诱导的肾足细胞损伤,且两者联合使用有协同增强的保护作用,可能与抑制Rho家族信号的激活有关。