期刊文献+
共找到65篇文章
< 1 2 4 >
每页显示 20 50 100
东北虎微卫星DNA遗传标记的筛选及在亲子鉴定中的应用 被引量:74
1
作者 张于光 李迪强 +2 位作者 饶力群 肖启明 刘丹 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第1期118-123,共6页
利用 18个家猫微卫星基因座 ,在东北虎 (Pantheratigrissibilia)DNA中扩增结果有 4个基因座没有产物 ,8个基因座为单态 ,6个基因座为多态性。同时利用苏门答腊虎的微卫星序列设计了 8对引物 ,在东北虎DNA中有 4对具有多态性。微卫星基... 利用 18个家猫微卫星基因座 ,在东北虎 (Pantheratigrissibilia)DNA中扩增结果有 4个基因座没有产物 ,8个基因座为单态 ,6个基因座为多态性。同时利用苏门答腊虎的微卫星序列设计了 8对引物 ,在东北虎DNA中有 4对具有多态性。微卫星基因座的多态性百分率为 38 5 %。在供试的 2 7只东北虎中 ,发现等位基因间的变异均为偶数碱基长度变化 ,对有准确谱系记录的个体研究表明 ,这 10个微卫星DNA遗传标记符合孟德尔遗传规律 ,所以这些微卫星DNA可以有效的应用于东北虎的亲子鉴定。利用这 10对多态性引物 ,我们成功地鉴定了 7个父子关系不清的后代。收集的样品包括 2 3只毛发样品和 4只血液样品 ,实验结果表明 ,毛发和血液样品均可以得到清晰的微卫星条带 [动物学报 49(1) :118~ 12 3,2 0 0 3]。 展开更多
关键词 东北虎 微卫星DNA 遗传标记 筛选 亲子鉴定
下载PDF
黄曲霉中pyrG筛选标记循环利用的方法 被引量:1
2
作者 聂鑫怡 薛杨 +2 位作者 王银春 丁霞飞 汪世华 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2021年第2期270-275,共6页
为解决黄曲霉遗传转化操作过程中遗传筛选标记受限及传统URA3/pyrG环出系统存在重复序列残留的问题,以具有尿嘧啶营养缺陷的黄曲霉CA14PTs(Δku70ΔpyrG)菌株为出发菌,利用pyrG筛选标记构建表达HA-SumO的重组菌株GHS(pyrG+),再通过重叠... 为解决黄曲霉遗传转化操作过程中遗传筛选标记受限及传统URA3/pyrG环出系统存在重复序列残留的问题,以具有尿嘧啶营养缺陷的黄曲霉CA14PTs(Δku70ΔpyrG)菌株为出发菌,利用pyrG筛选标记构建表达HA-SumO的重组菌株GHS(pyrG+),再通过重叠PCR法构建包含GHS(pyrG+)基因组中pyrG整合位点上、下游片段的融合片段,导入GHS(pyrG+)菌株原生质体,利用DNA同源重组和5-氟乳清酸(5-FOA)的负筛选剔除pyrG筛选标记,重新获得具有尿嘧啶营养缺陷的重组菌株GHS(pyrG-).通过测序分析,确认GHS(pyrG-)重组菌株基因组中的pyrG筛选标记已被剔除且无其他序列残留.免疫杂交分析结果表明,剔除pyrG筛选标记不影响重组菌株的蛋白表达模式. 展开更多
关键词 pyrg遗传筛选标记 循环利用 不依赖同向重复序列 黄曲霉
下载PDF
中国龙虾微卫星标记的筛选及遗传多样性分析 被引量:8
3
作者 刘楚吾 黎锦明 +1 位作者 刘丽 郭昱嵩 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期737-743,共7页
文章以M13通用引物和重复序列(CT)15、(AT)15引物,利用PCR法对中国龙虾(Panulirus stimpsoni Hoehuis)部分基因组DNA文库进行筛选。共获得78个微卫星序列,分别分布于55个阳性重组克隆中,其中完美型(perfect)共50个,占64%... 文章以M13通用引物和重复序列(CT)15、(AT)15引物,利用PCR法对中国龙虾(Panulirus stimpsoni Hoehuis)部分基因组DNA文库进行筛选。共获得78个微卫星序列,分别分布于55个阳性重组克隆中,其中完美型(perfect)共50个,占64%;非完美型(imperfect)3个,占3.8%;混合完美型(compound perfect)6个,占7.7%;混合非完美型(compound imperfect)19个,占24.5%。根据微卫星序列,设计并筛选出15对微卫星多态性引物,对中国龙虾的群体进行了遗传多样性分析。获得3~12个等位基因,等位基因大小在78~425bp之间,基本符合引物设计的理论长度。期望杂合度范围为0.48~0.87,平均值为0.71,表明中国龙虾基因组微卫星具有较高的杂合度与遗传多样性。15个微卫星位点的P1C值从0.44到0.84,平均值为0.60,说明这些微卫星位点在中国龙虾基因组中包含丰富的遗传信息,合适用于中国龙虾的各种分子标记及遗传学分析和应用。 展开更多
关键词 中国龙虾 基因组文库 微卫星标记 遗传多样性 引物筛选
下载PDF
以对潮霉素抗性为筛选标记的棉花遗传转化 被引量:14
4
作者 岳建雄 张慧军 张炼辉 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2002年第4期195-199,共5页
以 HPT基因作为筛选标记基因 ,潮霉素作为筛选剂 ,通过农杆菌介导法将 GFP基因导入棉花细胞并得到再生植株。经过 Southern杂交证实外源基因已经整合到棉花基因中 ,荧光显微镜可以观察到绿色荧光 ,说明 GFP基因得到表达。研究确定了潮... 以 HPT基因作为筛选标记基因 ,潮霉素作为筛选剂 ,通过农杆菌介导法将 GFP基因导入棉花细胞并得到再生植株。经过 Southern杂交证实外源基因已经整合到棉花基因中 ,荧光显微镜可以观察到绿色荧光 ,说明 GFP基因得到表达。研究确定了潮霉素作为棉花转化的筛选剂在农杆菌介导的转化中适用的浓度范围及筛选方法 ,即棉花转化中潮霉素的筛选浓度范围为 2 .5~ 1 0 mg· L- 1,在有 GFP等一些易于观察和检测的标记基因存在时 ,起始浓度可用较低 ( 2 .5 mg· L- 1)的筛选浓度 ;而在没有标记基因或检测方法较复杂时 ,起始浓度用较高 ( 1 0 mg· L- 1) 展开更多
关键词 潮霉素 抗性 筛选标记 棉花 遗传转化
下载PDF
以潮霉素为筛选标记猕猴桃遗传转化体系的初步建立 被引量:3
5
作者 陈晓玲 秦华明 +3 位作者 周玲艳 潘少英 罗翠欢 梁红 《北方园艺》 CAS 北大核心 2008年第1期189-191,共3页
以带潮霉素筛选标记基因的质粒载体通过农杆菌介导法分别转化猕猴桃的叶片、叶柄和茎段,并获得转化再生植株。结果表明:筛选时潮霉素浓度以2mg/L合适;叶片预培养以光照为适合,而叶柄和茎段差别不大;就转化率而言,茎段明显高于叶柄和叶片... 以带潮霉素筛选标记基因的质粒载体通过农杆菌介导法分别转化猕猴桃的叶片、叶柄和茎段,并获得转化再生植株。结果表明:筛选时潮霉素浓度以2mg/L合适;叶片预培养以光照为适合,而叶柄和茎段差别不大;就转化率而言,茎段明显高于叶柄和叶片;经PCR检测初步证实转化植株为阳性植株。 展开更多
关键词 潮霉素 筛选标记 猕猴桃 遗传转化
下载PDF
大约克夏猪群遗传结构分析及其经济性状生化遗传标记筛选 Ⅱ.不同来源大约克夏猪群遗传结构分析 被引量:3
6
作者 黄生强 柳小春 +2 位作者 施启顺 谢新民 贺长青 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期128-131,共4页
为探讨不同来源大约克夏猪群的遗传结构差异 ,以湖南望城种猪场不同来源大约克夏猪群为研究对象 ,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳检测了 4个组合大约克夏猪群 (加系×加系 ,加系×法系 ,英系×加系 ,英系×法系 )10种血... 为探讨不同来源大约克夏猪群的遗传结构差异 ,以湖南望城种猪场不同来源大约克夏猪群为研究对象 ,采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳检测了 4个组合大约克夏猪群 (加系×加系 ,加系×法系 ,英系×加系 ,英系×法系 )10种血浆蛋白质 (酶 )多态性 ,共检测到 33种基因型或表型 ,2 6个等位基因 ,分析了猪群间各蛋白质 (酶 )位点基因型频率及基因频率的特点 ;用 RAPD标记分析了 4个组合猪群的平均带纹相似系数 ,结果表明 ,4个组合猪群蛋白质(酶 )位点基因平均杂合度及平均带纹相似系数均无显著差异 。 展开更多
关键词 经济性状 生化遗传标记 筛选 大约克夏猪群 蛋白质多态性 遗传结构 RAPD 蛋白质酶多态性
下载PDF
两种筛选标记基因在水稻(Oryza sativa L.)遗传转化中的比较 被引量:4
7
作者 钱海丰 薛庆中 《生物技术》 CAS CSCD 2004年第6期12-14,共3页
筛选标记的有效选择 (筛选周期及筛选效率 )是影响作物基因转化成败的重要因素之一。该文在农杆菌介导水稻转化过程中 ,比较研究了两个标记基因 (hpt和bar基因 )对抗性愈伤组织产生时间及出愈率的影响。结果表明 :以hpt为筛选标记 ,抗... 筛选标记的有效选择 (筛选周期及筛选效率 )是影响作物基因转化成败的重要因素之一。该文在农杆菌介导水稻转化过程中 ,比较研究了两个标记基因 (hpt和bar基因 )对抗性愈伤组织产生时间及出愈率的影响。结果表明 :以hpt为筛选标记 ,抗性愈伤组织出现周期短 ,出愈率高达 2 0 %左右 ;而bar基因作为筛选标记时 ,抗性愈伤组织块出现较慢 ,出愈率仅 10 %左右。因此 ,在水稻的农杆菌转化中 ,仅作为筛选标记 。 展开更多
关键词 水稻 遗传转化 筛选标记 磷酸转移酶基因 BAR
下载PDF
漠斑牙鲆微卫星标记筛选及美国群体遗传结构分析 被引量:1
8
作者 刘智超 廖梅杰 +4 位作者 徐永江 柳学周 王印庚 张正 刘洋 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2012年第1期40-46,共7页
采用磁珠富集法筛选适合漠斑牙鲆遗传多样性分析的微卫星分子标记。筛选共获得43条序列,其中完美型26个,占60.5%;非完美型14个,占32.6%;复合型3个,占6.9%。选取其中14对特异性好且扩增效率高的微卫星引物,对采自美国北卡罗来纳州沿海的... 采用磁珠富集法筛选适合漠斑牙鲆遗传多样性分析的微卫星分子标记。筛选共获得43条序列,其中完美型26个,占60.5%;非完美型14个,占32.6%;复合型3个,占6.9%。选取其中14对特异性好且扩增效率高的微卫星引物,对采自美国北卡罗来纳州沿海的漠斑牙鲆野生群体和养殖群体进行遗传多样性及遗传结构比较分析。研究结果表明,12对引物的扩增产物具有多态性,其中7个位点为高度多态(PIC>0.5)。两个群体中共检测到90个等位基因。12个多态性微卫星位点在两个群体中的平均观察杂合度(Ho)和期望杂合度(He)分别为0.36和0.57。9个位点在整个群体中呈现出不同程度的偏离遗传平衡(P<0.05),且偏离平衡的位点均表现为杂合子缺失(Fis>0)。野生群体和养殖群体间的遗传距离为0.1115,群体间的遗传分化微弱(Fst=0.0438)。 展开更多
关键词 漠斑牙鲆 微卫星标记 筛选 野生和养殖群体 遗传结构
下载PDF
两种遗传标记筛选物对马铃薯再生试管苗的影响 被引量:2
9
作者 金红 陈峥 +2 位作者 罗志敏 武志强 张保岩 《天津农业科学》 CAS 2002年第3期1-3,共3页
以马铃薯试管苗的单芽茎段为组织培养材料,研究含不同浓度除草剂Basta和不同浓度抗生素Hygromycin培养基对马铃薯试管苗生长状况的影响。结果表明,除草剂Basta对马铃薯试管苗的筛选浓度为0.6~0.8mg/L;潮霉素Hygromycin对马铃薯试管苗... 以马铃薯试管苗的单芽茎段为组织培养材料,研究含不同浓度除草剂Basta和不同浓度抗生素Hygromycin培养基对马铃薯试管苗生长状况的影响。结果表明,除草剂Basta对马铃薯试管苗的筛选浓度为0.6~0.8mg/L;潮霉素Hygromycin对马铃薯试管苗的筛选浓度为7~10mg/L。除草剂Basta和潮霉素Hygromycin联合使用对试管苗具有极强致死作用,不宜联合使用。 展开更多
关键词 遗传标记筛选 马铃薯 再生试管苗 除草剂 潮霉素 浓度
下载PDF
反馈抑制不敏感邻氨基苯甲酸合成酶基因作为筛选标记基因用于大豆遗传转化研究(英文) 被引量:5
10
作者 陈士云 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期646-651,共6页
目前广泛采用的抗菌素或抗除草剂基因作为植物转化筛选标记基因可能带来转基因逃逸 ,因此寻找能够用于植物转化的来源于植物本身的筛选基因是解决这一问题的方法之一。通过从烟草中克隆的邻氨基苯甲酸合成酶基因 (ASA2 )作为筛选标记基... 目前广泛采用的抗菌素或抗除草剂基因作为植物转化筛选标记基因可能带来转基因逃逸 ,因此寻找能够用于植物转化的来源于植物本身的筛选基因是解决这一问题的方法之一。通过从烟草中克隆的邻氨基苯甲酸合成酶基因 (ASA2 )作为筛选标记基因 ,并采用氨基酸的类似物 5 甲基色氨酸为筛选剂 ,进行了农杆菌介导的大豆成熟胚尖转化研究。Southern杂交结果表明ASA2基因成功整合到大豆基因组 ,Northern杂交也显示该基因在转化大豆叶片中表达。HPLC检测转化大豆叶片游离色氨酸的含量比野生型要高 5 9%~ 12 3%。PCR检测转化子 1代结果显示转化基因通过孟德尔规律稳定遗传。这些结果表明反馈抑制不敏感ASA2基因可以作为筛选标记基因用于大豆遗传转化。同时也证实来源于一种植物 (烟草 )编码的邻氨基苯甲酸α 亚基能够与另一种植物 (大豆 )编码该酶的 β 亚基结合形成具有完整活性的邻氨基苯甲酸合成酶。 展开更多
关键词 邻氨基苯甲酸合成酶 反馈抑制不敏感 筛选标记 基因 5-甲基色氨酸 大豆 遗传转化
下载PDF
平菇遗传标记筛选初探
11
作者 于智勇 朱建燕 《生物学杂志》 CAS CSCD 1991年第2期16-17,共2页
本实验以0.5%的溴化镉溶液自然选择法和8-MOP-紫外光(30W)复合处理法,分别对平菇孢子进行处理,初步获得抗性菌株。
关键词 平菇 遗传标记筛选 孢子 食用菌
下载PDF
亚磷酸脱氢酶作为筛选标记基因在水稻遗传转化中的应用 被引量:2
12
作者 刘同同 刘诗琦 +1 位作者 袁丽丽 王创 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期98-104,共7页
为筛选标记基因用于植物遗传转化,采用组织培养、营养液筛选和叶面喷施等手段,综合评价了具有高催化活性的亚磷酸脱氢酶基因ptxDQ作为筛选标记基因用于水稻遗传转化的潜力。结果显示,ptxDQ基因作为筛选标记基因时,抗性愈伤的筛选效率为4... 为筛选标记基因用于植物遗传转化,采用组织培养、营养液筛选和叶面喷施等手段,综合评价了具有高催化活性的亚磷酸脱氢酶基因ptxDQ作为筛选标记基因用于水稻遗传转化的潜力。结果显示,ptxDQ基因作为筛选标记基因时,抗性愈伤的筛选效率为44.37%~47.28%,显著高于潮霉素和草胺磷等抗性基因的筛选效率。获得的转基因阳性幼苗,可利用以亚磷酸盐为唯一磷源的培养液,通过简单培养即可筛选出阳性转基因幼苗。此外,还建立了通过叶面喷施亚磷酸盐筛选转基因幼苗的方法。相比目前的抗生素和除草剂类筛选系统,亚磷酸盐更廉价且不会造成环境污染。同时,作为一种正向筛选系统具有较高的筛选效率,在农作物转基因研究和农业可持续发展中具有潜在价值。 展开更多
关键词 遗传转化 筛选标记 亚磷酸脱氢酶 亚磷酸 水稻
下载PDF
菜豆品系BAT332角斑病抗性遗传及其连锁RAPD标记的筛选
13
作者 向平 《作物育种信息》 2005年第7期10-10,共1页
菜豆品种资源中角斑病抗性遗传变异为我们选育抗角斑病的菜豆新品系提供了基础条件。BAT332品系是菜豆角斑病的一个重要抗性资源。本文旨在研究BAT332中角斑病抗性的遗传模式及其连锁RAPD标记。本试验得到了BAT332×Rudd组合的F1、F... 菜豆品种资源中角斑病抗性遗传变异为我们选育抗角斑病的菜豆新品系提供了基础条件。BAT332品系是菜豆角斑病的一个重要抗性资源。本文旨在研究BAT332中角斑病抗性的遗传模式及其连锁RAPD标记。本试验得到了BAT332×Rudd组合的F1、F2、BC5和BCr群体。Ruder是一个商业化品种,它不抗角班病。试验进一步确认了BAT332品系抗61.41病原小种。植株的分离分析法表明: 展开更多
关键词 RAPD标记 抗性遗传 角斑病 新品系 菜豆 连锁 筛选 品种资源 基础条件
下载PDF
鉴定水稻品种的微卫星标记筛选 被引量:82
14
作者 施勇烽 应杰政 +2 位作者 王磊 朱智伟 庄杰云 《中国水稻科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期195-201,共7页
选用58个水稻微卫星标记,对目前应用较广的28份杂交水稻亲本材料进行多态性分析,并比较了其中14个标记应用3.0%琼脂糖凝胶电泳和6.0%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测结果。研究表明,所应用的标记可将所有供试水稻材料区分开,不同标记的... 选用58个水稻微卫星标记,对目前应用较广的28份杂交水稻亲本材料进行多态性分析,并比较了其中14个标记应用3.0%琼脂糖凝胶电泳和6.0%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测结果。研究表明,所应用的标记可将所有供试水稻材料区分开,不同标记的多态性检测能力差异较大;两种检测方法所得结果高度一致,但非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨率较高、带型清晰,能更准确反映水稻材料间的差异。对于一般水稻材料而言,选用12个标记可将不同材料区别开的几率大于99.9%,但要区分遗传相似性较高的材料,则可能需挑选高多态性标记和(或)增加检测的标记数。 展开更多
关键词 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 标记筛选 水稻品种 鉴定 微卫星标记 多态性分析 琼脂糖凝胶 多态性标记 遗传相似性 亲本材料 杂交水稻 检测结果 检测能力 检测方法 应用 分辨率 选用 挑选
下载PDF
小麦多酚氧化酶(PPO)活性的SSR标记筛选与验证 被引量:15
15
作者 孙道杰 张立平 +4 位作者 夏先春 何中虎 葛秀秀 徐兆华 王辉 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期1295-1299,共5页
小麦多酚氧化酶(PPO)活性是引起面条和面团储存期间颜色褐变的主要因素。发掘可应用于籽粒PPO活性辅助选择的分子标记,将有助于小麦面粉颜色性状的遗传改良。本研究选用来自全国不同麦区的203份冬小麦品种,验证SSR(simplesequencerepeat... 小麦多酚氧化酶(PPO)活性是引起面条和面团储存期间颜色褐变的主要因素。发掘可应用于籽粒PPO活性辅助选择的分子标记,将有助于小麦面粉颜色性状的遗传改良。本研究选用来自全国不同麦区的203份冬小麦品种,验证SSR(simplesequencerepeat)引物Xgwm312的PCR扩增片段大小与籽粒PPO活性的关系。结果表明,198bp扩增片段的有无同籽粒PPO活性大小密切相关,该片段的出现通常意味着籽粒PPO活性较高。Xgwm312可应用于籽粒PPO活性的分子标记辅助育种。 展开更多
关键词 多酚氧化酶 标记筛选 验证 SSR PPO活性 分子标记辅助育种 扩增片段 冬小麦品种 辅助选择 遗传改良 颜色性状 小麦面粉 籽粒 储存期 PCR 应用 麦区
下载PDF
水稻遗传转化甘露糖安全筛选体系的建立 被引量:7
16
作者 王彩芬 付永彩 +3 位作者 朱作峰 徐杰 葛占宇 孙传清 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期41-45,共5页
根据genebank中公布的pmi基因序列设计引物,通过PCR扩增从大肠杆菌中分离出6-磷酸甘露糖异构酶基因。将该基因替换植物表达载体pCAMBIA1300中的潮霉素抗性基因hpt,构建了以pmi为选择标记基因的植物表达载体pPMI。对水稻进行了基因枪转... 根据genebank中公布的pmi基因序列设计引物,通过PCR扩增从大肠杆菌中分离出6-磷酸甘露糖异构酶基因。将该基因替换植物表达载体pCAMBIA1300中的潮霉素抗性基因hpt,构建了以pmi为选择标记基因的植物表达载体pPMI。对水稻进行了基因枪转化和农杆菌转化,研究了筛选培养基中甘露糖浓度对抗性愈伤组织频率的影响。部分抗性愈伤组织已获得再生植株,PCR检测初步证明外源基因已转入植物细胞。 展开更多
关键词 6-磷酸甘露糖异构酶基因(pmi) 甘露糖 安全筛选标记 水稻 遗传转化
下载PDF
苹果RAPD标记的引物筛选与RAPD校正 被引量:4
17
作者 朱元娣 李光晨 +1 位作者 张文 王涛 《中国农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期7-10,共4页
为筛选适宜苹果的RAPD引物 ,以苹果富士与舞姿的杂交后代为试材 ,依据RAPD校正方法、利用引物OPA13构建了苹果的RAPD校正图谱 ;在 5 2 0个RAPD引物中找出了扩增稳定、条带清晰的 2 4 6个引物 ,其中扩增条带数在 8个以上的有 91个引物 ,... 为筛选适宜苹果的RAPD引物 ,以苹果富士与舞姿的杂交后代为试材 ,依据RAPD校正方法、利用引物OPA13构建了苹果的RAPD校正图谱 ;在 5 2 0个RAPD引物中找出了扩增稳定、条带清晰的 2 4 6个引物 ,其中扩增条带数在 8个以上的有 91个引物 ,可用于苹果的遗传分析。探讨了RAPD -PCR反应条件与RAPD校正的关系 ,RAPD校正能够提高RAPD 展开更多
关键词 苹果 RAPD标记 引物筛选 RAPD校正 杂交后代 校正图谱 遗传分析 扩增能力
下载PDF
大蒜种质资源遗传多样性的分子标记研究 被引量:11
18
作者 陈昕 周涵韬 +2 位作者 杨志伟 潘文 林鹏 《厦门大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第B06期144-149,共6页
本研究利用RAPD和ISSR两种分子标记技术,对中国10个不同地区的大蒜品种进行了种质资源遗传多样性研究.从30个RAPD引物当中,筛选出11个具有多态性的引物,共扩增出多态性带224条,多态性条带比率为41.18%,从12个ISSR引物中筛选出5个具多态... 本研究利用RAPD和ISSR两种分子标记技术,对中国10个不同地区的大蒜品种进行了种质资源遗传多样性研究.从30个RAPD引物当中,筛选出11个具有多态性的引物,共扩增出多态性带224条,多态性条带比率为41.18%,从12个ISSR引物中筛选出5个具多态性的ISSR引物,共扩增出多态性带121条,多态性条带比率为50.21%.对RAPD和ISSR两种标记分别运用Nei指数法,计算出10个大蒜品种的平均遗传距离为0.28和0.32.根据这两种标记的结果,采用UPGMA进行聚类分析,得到与生物学分类地位基本一致的结果.结果表明,在实验稳定性上,ISSR优于RAPD,且ISSR比RAPD能检测到更多的遗传变异,RAPD和ISSR两种标记可用于大蒜种质遗传多样性的研究. 展开更多
关键词 遗传多样性 种质资源 RAPD ISSR SSR引物 平均遗传距离 分子标记技术 大蒜品种 多态性 UPGMA 多样性研究 聚类分析 研究利用 分类地位 遗传变异 指数法 生物学 稳定性 比率 条带 筛选
下载PDF
省沽油ISSR引物筛选及居群遗传多样性初探 被引量:3
19
作者 陈龙灿 王颖 +5 位作者 王业中 张远海 束庆龙 王勤 张良富 曹翠萍 《安徽农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期462-467,共6页
测试和筛选出14条多态性较高的省沽油ISSR有效引物,并对安徽省野生省沽油的遗传多样性进行初步调查分析。共扩增出143个多态性位点,居群水平平均有效等位基因数ne为1.271,期望杂合度He为0.165,Shannon多态性信息指数I为0.257,物种水平... 测试和筛选出14条多态性较高的省沽油ISSR有效引物,并对安徽省野生省沽油的遗传多样性进行初步调查分析。共扩增出143个多态性位点,居群水平平均有效等位基因数ne为1.271,期望杂合度He为0.165,Shannon多态性信息指数I为0.257,物种水平遗传多样性参数分别为ne=1.341,He=0.227,I=0.370;居群间遗传分化系数为Gst=0.271。初步揭示了野生省沽油的遗传多样性,同时表明ISSR标记对于研究省沽油遗传多样性的适用性和可靠性,研究结果将为进一步深入研究省沽油多居群的遗传多样性和资源保护提供帮助。 展开更多
关键词 省沽油 ISSR标记 引物筛选 居群遗传多样性
下载PDF
农杆菌介导大麦无筛选标记转基因植株的获得 被引量:2
20
作者 龚强 王轲 +2 位作者 叶兴国 杜丽璞 徐延浩 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第18期3638-3649,共12页
【目的】目前,国内外大麦遗传转化主要利用Golden Promise品种,基因依赖性严重,尤其是大麦的转化效率较低,并且获得安全型转基因大麦植株对其进一步产业化非常重要。建立高效、无筛选标记大麦遗传转化体系,拓展大麦遗传转化的受体基因型... 【目的】目前,国内外大麦遗传转化主要利用Golden Promise品种,基因依赖性严重,尤其是大麦的转化效率较低,并且获得安全型转基因大麦植株对其进一步产业化非常重要。建立高效、无筛选标记大麦遗传转化体系,拓展大麦遗传转化的受体基因型,为大麦基因功能解析和大麦转基因育种及商业化种植提供技术保障。【方法】以优良大麦品种Vlamingh为受体,取开花授粉后14 d左右的幼胚为转化材料,通过对培养基成分及培养步骤优化,建立农杆菌介导的高效遗传转化体系,并利用该体系将Bar和GUS在不同T-DNA区段的双T-DNA表达载体pWMB123转化大麦,获得候选转基因植株,然后利用PCR、Bar试纸条、组织化学染色和Southern blot等检测方法,在T1代转基因植株中成功获得无筛选标记大麦转基因植株。【结果】在愈伤组织分化阶段,发现培养基中添加1.0 mg·L^-1 KT、0.5 mg·L^-16-BA和0.05 mg·L^-1 NAA明显促进愈伤组织分化。在转基因植株生根阶段,发现采用添加1.0 mg·L^-1的IBA的SM1(无其他生长素)的生根效果最佳,培养基中添加2.5 mg·L^-1 CuSO4显著降低了大麦转基因植株白化现象。共转化了138个幼胚,最终获得14株大麦转基因植株,转化效率10.14%。PCR、Bar试纸条、GUS染色等检测证实,T0代转基因植株中均含有Bar,而仅有10株含有GUS,2个T-DNA的共转化效率为71.43%。选取4个同时含有Bar和GUS的转基因植株,对其自交后代进行检测,在BL8株系中筛选到2株只含GUS而不含Bar的转基因植株,无筛选标记效率为6.9%。在T1代转基因植株中对Bar和GUS进行了Southern blot鉴定,发现在多数转基因植株中Bar和GUS均为多拷贝整合,进一步证实BL8-15和BL8-19为无筛选标记的转基因植株。【结论】利用大麦品种Vlamingh为转化材料可以较高效率获得转基因植株,提高愈伤组织分化效率和转基因植株生根效率,降低转基因植株白化现象。利用农杆菌介导双T-DNA表达载体转化大麦,成功获得了无筛选标记转基因植株。 展开更多
关键词 大麦 遗传转化 筛选标记 农杆菌介导法
下载PDF
上一页 1 2 4 下一页 到第
使用帮助 返回顶部