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健康鸡源肺炎克雷伯菌检测到质粒介导喹诺酮耐药qnrA基因 被引量:3
1
作者 岳磊 陈雪影 +5 位作者 庄娜 廖晓萍 何家欣 时伟 李树娟 刘雅红 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期259-263,共5页
通过PCR技术检测195株健康动物肠杆菌中qnrA基因的流行情况;琼脂稀释法对qnrA阳性菌株进行8种抗菌药物的药物敏感性试验;质粒接合转移试验研究qnrA的可转移性;Southern杂交对qnrA基因进行定位;PCR检测qnrA阳性菌中Ⅰ类整合酶intI基因的... 通过PCR技术检测195株健康动物肠杆菌中qnrA基因的流行情况;琼脂稀释法对qnrA阳性菌株进行8种抗菌药物的药物敏感性试验;质粒接合转移试验研究qnrA的可转移性;Southern杂交对qnrA基因进行定位;PCR检测qnrA阳性菌中Ⅰ类整合酶intI基因的携带情况.结果表明,195株肠杆菌中检出1株qnrA阳性的肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae GDKA1,经Blast鉴定为qnrA1.药物敏感性试验表明GDKA1对磺胺甲恶唑、氨苄西林、大观霉素、氯霉素、四环素耐药,对环丙沙星(MIC=0.019 mg·L-1),头孢噻肟(MIC=0.047 mg·L-1)表现敏感,对萘啶酸(MIC=12 mg·L-1)表现为部分敏感.接合试验表明qnrA1位于可转移的质粒上,且可以通过接合试验水平传播.接合子TGDKA1对喹诺酮类药物的敏感性比大肠埃希菌Escherichia coli J53 AzR稍高,但远低于GDKA1·South-ern杂交进一步证实了qnrA1基因位于质粒上.TGDKA1的质粒扩增出intI1,表明qnrA1阳性菌株携带I类整合子.可见,qnrA1基因已在健康鸡源肺炎克雷伯菌中出现且同时携带I类整合子位于质粒上,整合子灵活多样的存在方式和传播方式为qnrA基因的传播提供了便利条件,整合子可能携带qnrA基因通过食物链传播给人,因此健康动物共生菌携带qnrA1基因值得注意. 展开更多
关键词 健康动物 肺炎克雷伯菌 qnra1基因 整合子
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大肠埃希菌qnrA基因的检测 被引量:4
2
作者 张朋 聂大平 《大连医科大学学报》 CAS 2008年第3期268-270,共3页
[目的]了解大连地区耐环丙沙星的大肠埃希菌中qnrA基因的流行情况并研究其耐药机制。[方法]收集临床分离的耐环丙沙星的大肠埃希菌213株,通过PCR法扩增qnrA基因,对qnrA基因阳性株,KB纸片法检测抗菌药的体外抗菌活性,琼脂稀释法测MIC,并... [目的]了解大连地区耐环丙沙星的大肠埃希菌中qnrA基因的流行情况并研究其耐药机制。[方法]收集临床分离的耐环丙沙星的大肠埃希菌213株,通过PCR法扩增qnrA基因,对qnrA基因阳性株,KB纸片法检测抗菌药的体外抗菌活性,琼脂稀释法测MIC,并进行质粒结合试验。[结果]213株菌中查到2株qnrA阳性菌株,测序结果与Genbank中qnrA基因比对吻合率达100%。其中一株对多种抗菌药耐药,另一株则比较敏感。[结论]大连地区检测到了qnrA基因阳性的菌株,耐药机制复杂,应引起临床重视。 展开更多
关键词 qnra基因 环丙沙星 大肠埃希菌
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猪场环境大肠杆菌qnrA和aac(6’)-Ib基因检测 被引量:1
3
作者 李基棕 彭全海 +5 位作者 高颖 马喆 张人俊 王开功 周碧君 文明 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第7期100-102,共3页
为了解质粒介导的喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、aac(6’)-Ib-cr在猪场环境大肠杆菌的流行分布及变异情况,从贵州省规模养猪场空气、污水、粪便和土壤样本中分离、鉴定大肠杆菌57株,PCR检测qnrA和aac(6’)-Ib基因,测序分析aac(6’)-Ib-c... 为了解质粒介导的喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、aac(6’)-Ib-cr在猪场环境大肠杆菌的流行分布及变异情况,从贵州省规模养猪场空气、污水、粪便和土壤样本中分离、鉴定大肠杆菌57株,PCR检测qnrA和aac(6’)-Ib基因,测序分析aac(6’)-Ib-cr基因变异体,并用药敏纸片琼脂扩散法测其对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药性。结果表明:57株大肠杆菌均未携带qnrA基因;8株检出aac(6’)-Ib基因,分别来自污水、粪便和土壤样本,且介导对喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素的广泛耐药性。E.coli3和E.coli4在第75(A)、76(G)或488位(A)碱基缺失;E.coli5在第222位(A→T)变异,E.coli1、E.coli2、E.coli3、E.coli4、E.coli5、E.coli7和E.coli8在223位(T→C)和454位(G→T)变异;E.coli3、E.coli4在第492位有A、C碱基增添。说明贵州省规模养猪场肠杆菌科细菌qnrA基因携带率较低,但存在aac(6’)-Ib-cr基因。 展开更多
关键词 猪场 大肠杆菌 耐药 qnra基因 aac(6’)-Ib基因
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环丙沙星浓度对大肠埃希菌qnrA基因的影响
4
作者 张朋 聂大平 《大连医科大学学报》 CAS 2009年第6期704-706,共3页
[目的]研究携带qnrA基因的大肠埃希菌在环丙沙星压力下gyrA基因的突变情况及防耐药变异浓度(MPC)。[方法]采用质粒结合实验构建出携带qnrA基因且gyrA基因未发生突变的结合子。在不同浓度环丙沙星药物平皿上观察gyrA基因突变情况及对防... [目的]研究携带qnrA基因的大肠埃希菌在环丙沙星压力下gyrA基因的突变情况及防耐药变异浓度(MPC)。[方法]采用质粒结合实验构建出携带qnrA基因且gyrA基因未发生突变的结合子。在不同浓度环丙沙星药物平皿上观察gyrA基因突变情况及对防耐药变异浓度的影响。[结果]结合子(菌株4E、5E)的突变选择指数(MPC/M IC)分别为24.0和35.0,平均突变率分别为0.6852和0.5500;阴性对照大肠埃希菌ATCC25922的突变选择指数为6.25,平均突变率为0.2078,与结合子比较差异有显著性意义(P<0.05)。[结论]携带qnrA基因的菌株在环丙沙星压力下,更容易发生gyrA基因突变,导致产生对环丙沙星的高水平耐药和高MPC。 展开更多
关键词 qnra基因 环丙沙星 大肠埃希菌 GYRA基因
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广东省中医院阴沟肠杆菌qnrA基因的检测及耐药机制的研究 被引量:1
5
作者 张鸣菲 《中国当代医药》 2015年第33期137-139,共3页
目的了解广东省中医院临床分离的阴沟肠杆菌qnrA基因的分布及其耐药机制。方法应用VITEK32全自动细菌鉴定仪鉴定400株阴沟肠杆菌,采用纸片K-B法检测耐药情况,PCR法检测qnrA基因阳性菌,质粒接合试验验证qnrA基因可发生水平传播。结果 qnr... 目的了解广东省中医院临床分离的阴沟肠杆菌qnrA基因的分布及其耐药机制。方法应用VITEK32全自动细菌鉴定仪鉴定400株阴沟肠杆菌,采用纸片K-B法检测耐药情况,PCR法检测qnrA基因阳性菌,质粒接合试验验证qnrA基因可发生水平传播。结果 qnrA基因阳性的阴沟肠杆菌共检出65株,检出率为16.3%,阳性菌对两种喹诺酮药物均产生耐药且多数还伴产ESBLs,呈多重耐药性。结论广东省中医院分离的阴沟肠杆菌中存在qnrA耐药基因的流行,多数与ESBLs基因共同存在,且可发生水平传播。 展开更多
关键词 阴沟肠杆菌 qnra基因 耐药 水平传播
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Molecular Detection and Association of <i>QnrA</i>, <i>QnrB</i>, <i>QnrS</i>and <i>BlaCMY</i>Resistance Genes among Clinical Isolates of <i>Salmonella</i>spp. in Iran
6
作者 Raheleh Saboohi Bahareh Rajaei +10 位作者 Nahid Sepehri Rad Mohamad Reza Razavi Mohammad Reza Aghasadeghi Arfa Moshiri Ahmad Reza Bahremand Keivan Kave Peiman Kave Mehrangiz Zangeneh Mohammad Rahbar Sara Khorami Sarvestani Seyed Davar Siadat 《Advances in Microbiology》 2014年第1期63-68,共6页
Prevalence of three plasmid-mediated quinolone resistance determinant qnrA, qnrB, qnrS and extended spectrum Cephalosporins determinant blaCMY, among eighty-five isolates of Salmonella spp. collected in the community ... Prevalence of three plasmid-mediated quinolone resistance determinant qnrA, qnrB, qnrS and extended spectrum Cephalosporins determinant blaCMY, among eighty-five isolates of Salmonella spp. collected in the community between 2008 and 2010 was determined by PCR. Not only qnr genes but also bla genes were positive in twenty-four different isolates. PCR assay detected that 22 of 85 (25.8%) Salmonella spp. carried the qnrA, 1 (1.17%) of 85 isolates harbored the qnrB, 1 (1.17%) of them contained the qnrS, 1 (1.17%) isolate carried all the three qnrA, qnrB, qnrS genes, 24 of 85 (28.2%) Salmonella carried blaCMY and 5 (5.88%) isolates carried qnrA and blaCMY. Antimicrobial susceptibility patterns of isolates were as follows: 49 (57.6%) exhibited resistance to Nalidixic acid and none of them to Ciprofloxacin. 33 (38.82%) isolates exhibited resistance to Cephalosporins and 2 (2.35%) of them exhibited ESBL phenotype and 12 (14.1%) isolates resistance to Ampicilin. These results were confirmed by MIC determination test as well. Having detected qnr and bla genes suggested that these genes spread antibiotic resistance among pathogenic bacteria. 展开更多
关键词 qnra QnrB QnrS ESBL (Extended-Spectrum Beta-Lactamase) BlaCMY
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海藻希瓦菌中发现一种新的qnrA7基因亚型 被引量:3
7
作者 周明明 屠鸿翔 +4 位作者 周铁丽 费静娴 李超 赵玉杰 包其郁 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期593-596,共4页
目的 研究海藻希瓦菌中质粒介导的喹诺酮类耐药基因的分布和特性.方法 PCR检测qnr、qepA、aac(6')Ib-cr基因,阳性产物进行DNA测序以确定其基因型,接合转移试验探讨质粒介导的喹诺酮类耐药基因的体外转移性,E-test法测定菌株MIC,提取... 目的 研究海藻希瓦菌中质粒介导的喹诺酮类耐药基因的分布和特性.方法 PCR检测qnr、qepA、aac(6')Ib-cr基因,阳性产物进行DNA测序以确定其基因型,接合转移试验探讨质粒介导的喹诺酮类耐药基因的体外转移性,E-test法测定菌株MIC,提取质粒对qnrA基因进行初步定位.结果 海藻希瓦菌中检出qnrA基因,为新发现的亚型,命名为qnrA7,GenBank登录号为GQ463707,未检出qnrB、qnrS、qnrC、qnrD、qepA、aac(6')-Ib-cr基因;qnrA7位于约33 kb的质粒上,但体外接合转移试验未成功;该菌对喹诺酮类药物敏感.结论 海藻希瓦菌质粒上检出新的qnrA基因亚型,其作为qnr基因的环境宿主值得关注. 展开更多
关键词 海藻希瓦菌 喹诺酮类 质粒 qnra7
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含qnrA基因质粒介导不同水平环丙沙星耐药性的机制研究 被引量:1
8
作者 徐晓刚 吴湜 +3 位作者 叶信予 石万良 张婴元 王明贵 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期203-207,共5页
目的研究4个含qnrA基因质粒在大肠埃希菌接合子中介导环丙沙星耐药水平不同的发生机制。方法以大肠埃希菌J53作为受体菌,通过接合试验从4株qnrA阳性的临床菌株中获得4株接合子。采用Etest方法测定环丙沙星最低抑菌浓度(MIC);以PCR... 目的研究4个含qnrA基因质粒在大肠埃希菌接合子中介导环丙沙星耐药水平不同的发生机制。方法以大肠埃希菌J53作为受体菌,通过接合试验从4株qnrA阳性的临床菌株中获得4株接合子。采用Etest方法测定环丙沙星最低抑菌浓度(MIC);以PCR法检测aac(6’)-Ib-cr基因,采用实时RT-PCR法测定qnrA的mRNA表达水平,通过启动子探针载体pKK232-8测定qnrA启动子强度,测定、比较启动子周边序列。结果环丙沙星对仅含qnrA质粒pHS4及pHS5的接合子的MIC为0.094μg/ml及0.125mCml,同时携带qnrA及aac(6’)-Ib-cr质粒pHS3及pUS6的接合子的环丙沙星MIC为0.25μg/ml及1.00μg/ml。含pHS6接合子qnrA相对表达水平较其他接合子高13~32.5倍,pHS6的qnrA上游序列启动子活性最强,比另3个质粒高12倍,序列分析发现与pHS3比较,pHS6中qnrA转录启始位点与启始密码之间有7bp(GTrAGCA)的缺失。结论1个质粒同时携带qnrA和aac(6’)-Ib-cr2个耐药基因及qnrA高表达是导致接合子对环丙沙星的耐药性不同的原因。 展开更多
关键词 环丙沙星 质粒介导 耐药 qnra
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中国部分地区产超广谱-β内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌qnrA基因的检测 被引量:1
9
作者 钱英 裘云庆 +2 位作者 周志慧 俞云松 李兰娟 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期601-606,共6页
目的明确我国部分地区产超广谱-β内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qnrA基因的存在状况。方法PCR扩增产ESBL菌株,包括263株大肠埃希菌和99株肺炎克雷伯菌的qnrA基因;测序分析其基因序列。琼脂稀释法测定10种抗菌药物对qnrA基... 目的明确我国部分地区产超广谱-β内酰胺酶(ESBL)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中qnrA基因的存在状况。方法PCR扩增产ESBL菌株,包括263株大肠埃希菌和99株肺炎克雷伯菌的qnrA基因;测序分析其基因序列。琼脂稀释法测定10种抗菌药物对qnrA基因阳性菌株的最低抑菌浓度(MIC)。接合实验和Southern杂交进行基因定位。脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析qnrA基因阳性株的同源性。结果263株大肠埃希菌中有5株检出qnrA基因,占1.9%;99株肺炎克雷伯菌中有8株检出qnrA基因,占8.1%。13株qnrA阳性株中qnrA基因均位于可接合性质粒上。13株菌株同时携带CTX-M基因(1株CTX-M-9、5株CTX-M-14和7株CTX-M-24)。qnrA基因阳性的接合菌与受体菌J53相比,环丙沙星对前者的MIC较后者提高了4~133倍。11株环丙沙星耐药株(MIC≥4 mg/L)均存在GyrA亚基的83位氨基酸和(或)87位氨基酸改变,其中8株对环丙沙星高水平耐药株(MIC≥16 mg/L)同时存在ParC亚基的80位氨基酸改变。2株MIC分别为4 mg/L和2 mg/L的菌株GyrA和ParC两亚基均未发生改变。结论肺炎克雷伯菌中qnrA基因的携带率高于大肠埃希菌。qnrA基因单独作用仅导致低水平喹诺酮类耐药,合并gyrA和(或)parC突变导致喹诺酮类高水平耐药。 展开更多
关键词 喹诺酮类 Β内酰胺酶 qnra基因 抗药性 细菌 克雷伯菌 肺炎 大肠埃希菌
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宋内志贺菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药性研究 被引量:5
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作者 汪雅萍 应春妹 +3 位作者 吴唯一 叶杨芹 张灏旻 于嘉屏 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2009年第1期27-31,共5页
目的检测宋内志贺菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药情况,探讨染色体介导DNA旋转酶A亚单位(gyrA)和拓扑异构酶ⅣC亚单位(parC)基因突变或(和)质粒介导qnrA基因存在与宋内志贺菌耐喹诺酮类药物的相关性。方法用K-B纸片扩散法对58株宋内志贺菌... 目的检测宋内志贺菌对喹诺酮类抗菌药物的耐药情况,探讨染色体介导DNA旋转酶A亚单位(gyrA)和拓扑异构酶ⅣC亚单位(parC)基因突变或(和)质粒介导qnrA基因存在与宋内志贺菌耐喹诺酮类药物的相关性。方法用K-B纸片扩散法对58株宋内志贺菌进行耐药性检测;PCR法检测宋内志贺菌喹诺酮耐药决定区(QRDR)相关gyrA、parC基因,并根据药敏结果挑选5株菌扩增片段进行DNA测序;PCR法扩增qnrA基因片段。分析宋内志贺菌gyrA、parC基因突变或(和)qnrA基因存在与喹诺酮类药物耐药性的关系。结果宋内志贺菌对萘啶酸的耐药率高达94.8%。58株宋内志贺菌中,8株检出qnrA基因,5株测序gyrA、parC基因的菌株中,4株萘啶酸耐药菌株均在gyrA83位发生有义突变TCG(Ser)→TTG(Leu),但未发生parC基因突变,gyrA基因突变菌株对萘啶酸全耐药。qnrA基因阳性菌株对5种喹诺酮类药物抑菌圈中位数比较都缩小;对NAL、氧氟沙星的耐药率高于qnrA基因阴性菌株(P<0.05),差异有统计学意义。结论gyrASer83→Leu突变是导致宋内志贺菌临床分离株对喹诺酮类药物耐药的关键突变,宋内志贺菌若携带质粒介导qnrA基因则会导致对喹诺酮类药物的敏感性下降,若两者同存也可引起喹诺酮类药物耐药增强,除萘啶酸耐药外对其他喹诺酮类药物也可呈中介。 展开更多
关键词 喹诺酮类药物 耐药性 DNA旋转酶 DNA拓扑异构酶Ⅳ qnra基因
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革兰阴性杆菌临床分离株质粒介导喹诺酮类耐药研究 被引量:2
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作者 徐晓刚 吴湜 +3 位作者 王明贵 叶信予 刘杨 朱德妹 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2007年第5期330-334,共5页
目的了解质粒介导耐药机制在革兰阴性杆菌临床株对喹诺酮类抗菌药耐药性形成中的作用。方法以PCR方法筛选541株连续分离的所有环丙沙星耐药或中介革兰阴性杆菌中的耐药基因qnrA;以接合试验了解喹诺酮耐药的可转移性;对qnrA阳性株测定氨... 目的了解质粒介导耐药机制在革兰阴性杆菌临床株对喹诺酮类抗菌药耐药性形成中的作用。方法以PCR方法筛选541株连续分离的所有环丙沙星耐药或中介革兰阴性杆菌中的耐药基因qnrA;以接合试验了解喹诺酮耐药的可转移性;对qnrA阳性株测定氨基糖苷乙酰化酶aac(6′)-Ib-cr基因,分析了gyrA和parC基因的喹诺酮耐药决定区的变异。结果541株革兰阴性杆菌中,7株肠杆菌科细菌qnrA检测阳性,其中4株为阴沟肠杆菌,在不发酵糖菌中未检出qnrA基因。在7株qnrA阳性菌中,4株喹诺酮耐药性可通过质粒转移,接合子对环丙沙星的MIC较受体菌上升12~125倍。4个接合子中环丙沙星MIC较高的2个结合子携带aac(6′)-Ib-cr,7株qnrA阳性临床分离菌中5株耐药决定区gyrA、parC有变异。结论qnrA在肠杆菌属临床分离株中的检出率较高,aac(6′)-Ib-cr基因及靶位改变与qnrA同时存在可能使细菌对喹诺酮类的耐药性进一步上升。 展开更多
关键词 革兰阴性杆菌 质粒介导耐药 喹诺酮类 喹诺酮耐药决定区 qnra
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阴沟肠杆菌质粒介导耐喹诺酮类药物的机制研究
12
作者 吴创鸿 陆坚 +3 位作者 邓启文 张扣兴 张国良 潘伟光 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期569-571,共3页
目的 了解深圳地区阴沟肠杆菌中qnrA基因的流行情况、基因定位及其介导喹诺酮耐药性产生的机制。方法 收集临床分离的阴沟肠杆菌45株,采用PCR法结合测序的技术筛查qnrA基因,大质粒提取技术、Southern杂交和接合传递试验进行质粒定位... 目的 了解深圳地区阴沟肠杆菌中qnrA基因的流行情况、基因定位及其介导喹诺酮耐药性产生的机制。方法 收集临床分离的阴沟肠杆菌45株,采用PCR法结合测序的技术筛查qnrA基因,大质粒提取技术、Southern杂交和接合传递试验进行质粒定位,琼脂对倍稀释法进行药物敏感性检测。结果45株阴沟肠杆菌中,7株PCR法及测序证实为qnrA基因。7株菌中6株菌所携质粒被成功提取并进行Southern杂交,qnrA基因定位于80~200kb大小的低拷贝数天然质粒上。4株菌成功进行接合传递试验,使接合子对环丙沙星的MIC值提高了32-64倍。结论 质粒介导的喹诺酮耐药基因qnrA在深圳地区阴沟肠杆菌中具有较高的流行率,可能是导致阴沟肠杆菌对喹诺酮类抗菌药获得性耐药的重要原因。 展开更多
关键词 qnra基因 阴沟肠杆菌 喹诺酮 耐药 质粒
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大肠埃希菌染色体、质粒介导的喹诺酮类药物耐药机制研究 被引量:1
13
作者 汪一萍 陈国忠 +4 位作者 应建飞 俞燕红 贺明阳 安敏飞 周成杰 《浙江检验医学》 2009年第4期7-12,共6页
目的探讨我院ICU病区临床分离大肠埃希菌(Escherichia Coli. ECO)的耐喹诺酮类抗菌素耐药机制。方法收集2007年12月~2008年6月期间20株分离自我院ICU病区患者临床标本的ECO菌,采用纸片扩散法测定30种抗菌药物的敏感性,微量琼脂稀释法... 目的探讨我院ICU病区临床分离大肠埃希菌(Escherichia Coli. ECO)的耐喹诺酮类抗菌素耐药机制。方法收集2007年12月~2008年6月期间20株分离自我院ICU病区患者临床标本的ECO菌,采用纸片扩散法测定30种抗菌药物的敏感性,微量琼脂稀释法测定环丙沙星、左氧沙星的MIC值;采用PCR法联合检测细菌染色体介导DNA解旋酶gyrA和质粒介导的qnrA、qnrB、qnrS以及aac(6’)-Ⅰb-Cr变异体和与喹诺酮类外排有关的qepA等6种基因。结果20株ECO菌gyrA基因均存在突变,其中13、15号株gyrA基因经比对与美国NCBI中已登录的gyrA基因序列均不相同,为新亚型;检出aac(6’)-Ⅰb基因3株,经比对分别为aac(6’)-Ⅰb(2株)和aac(6’)-Ⅰb-Cr(1株);qnrA基因检出1株,经比对为qnrA1。结论本组ECO菌对环丙沙星等喹诺酮类耐药主要为gyrA基因突变所致,但也有aac(6’)-Ⅰb-Cr、qnrA1的因素。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 喹诺酮类抗菌素耐药机制 基因突变 GYRA基因 qnra基因qnrB基因 qnrS基因、
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2种耐药表型4种非发酵菌质粒介导的5种喹诺酮类耐药相关基因的检测 被引量:1
14
作者 明德松 陈清清 陈晓婷 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2016年第5期464-467,共4页
目的检测2种耐药表型(多耐和泛耐)的4种非发酵病原菌,,鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)、嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia,Sm)和脑膜炎金黄杆菌(Chryseobacterium m... 目的检测2种耐药表型(多耐和泛耐)的4种非发酵病原菌,,鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii,Ab)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,Pa)、嗜麦芽窄食单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia,Sm)和脑膜炎金黄杆菌(Chryseobacterium meningosepticum,Cm)质粒介导的5种喹诺酮类耐药相关基因,为临床合理使用喹诺酮类抗菌药物提供依据。方法应用Phoenix NMIC/ID-109鉴定/药敏板和API 20NE鉴定条/PSE5.0药敏条对19株临床分离菌(6株Ab(多耐药2株、泛耐药4株)、6株Pa(多耐药、泛耐药各3株)、4株Sm(多耐药、泛耐药各2株)和3株脑膜炎金黄杆菌(2株多耐药、1株泛耐药))进行鉴定和药敏试验,并用PCR法检测其喹诺酮类耐药质粒介导的5种喹诺酮类相关基因,即喹诺酮类药物耐药相关基因A(quinolone resistance A,qnrA)、氨基糖苷类乙酰转移酶基因acc(6')-Ib的环丙沙星耐药变异体基因(aminoglycoside acetyltransferase ciprofloxacin resistance variant,acc(6')-Ib-cr)及3种整合子基因(intI1、2、3),扩增产物经1%琼脂糖电泳分析并测序,利用生物信息学的方法进行比对分析。结果本组19株菌中携带acc(6')-Ib-cr 8株,6株为泛耐药(Ab 3株,Pa 2株,Sm 1株),泛耐菌携带率60.0%(6/10);2株多耐菌(Ab、Pa各1株),多耐菌携带率22.0%(2/9)。泛耐菌携带率与多耐菌携带率比较差异无统计学意义(P<0.05)。11株检出Ⅰ类整合子,其中6株泛耐药(Ab3株,Pa2株,Sm1株),携带率60.0%(6/10);5株多耐药菌(Pa3株,Ab、Cm各1株),携带率55.6%(5/9),泛耐菌携带率与多耐菌携带率比较差异无统计学意义(P>0.05)。6株同时检出acc(6')-Ib-cr和intI1,qnrA和intI2、intI3均阴性。结论本组临床分离菌喹诺酮类药物耐药与acc(6')-Ib-cr和intI1有关,与qnrA,intI 2and intI 3无关。acc(6')-Ib-cr携带率泛耐菌高于多耐菌,而intI1携带率无显著差异;2种基因在Ab和Pa的检出率较高且相近。 展开更多
关键词 喹诺酮类 鲍曼不动杆菌 铜绿假单胞菌 嗜麦芽窄食单胞菌 脑膜炎金黄杆菌 质粒 整合子 acc(6')-Ib-cr qnra
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产超广谱β-内酰胺酶菌株质粒介导喹诺酮类药物耐药机制的研究
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作者 钱英 蒋琰 +4 位作者 周志慧 俞云松 魏泽庆 沈萍 李兰娟 《中华临床感染病杂志》 CAS 2008年第1期-,共5页
目的 明确产超广谱β-内酰胺酶(esbls)菌株对喹诺酮类药物的耐药机制.方法 用pcr方法扩增产esbls的263株大肠埃希菌和99株肺炎克雷伯菌的qnra基因.对ctx-m和qnra基因都阳性的肺炎克雷伯菌zj96采用接合试验、southern杂交进行基因定位,... 目的 明确产超广谱β-内酰胺酶(esbls)菌株对喹诺酮类药物的耐药机制.方法 用pcr方法扩增产esbls的263株大肠埃希菌和99株肺炎克雷伯菌的qnra基因.对ctx-m和qnra基因都阳性的肺炎克雷伯菌zj96采用接合试验、southern杂交进行基因定位,用鸟枪法对分离自zj96菌株的同时含qnra和ctx-m基因的质粒(pkp96)进行全序列测定.结果 263株大肠埃希菌中有5株检出qnra基因,阳性率为1.9%;99株肺炎克雷伯菌中有8株检出qnra基因,阳性率为8.1%.zj96菌株含有ctx-m和qnra基因同时阳性的大小约60 kb的接合性质粒pkp96.菌株zj96的接合菌质粒pkp96含有qnra、ctx-m-24、aac(6')-ib-cr、teta和intⅠ 1等基因.结论 喹诺酮耐药基因qnra和ctx-m-24型esbls基因同时位于可接合性质粒中,耐药质粒的广泛传播是造成临床耐药菌株大量出现的主要原因. abstract: objective to characterize the prevalence of plasmid-mediated quinolone resistance determinants qnra in extended-spectrum β-lactamase(esbl)-producing escherichia coli and klebsiella pneumonia.methods pcr was used to amplify qnra gene in esbl-rpoducing isolates(including 263isolates of escherichia coli and 99 isolates of klebsiella pneumonia).conjugation experiments and southern blot hybridization were employed to definitude the location of the genes in zj96 isolate of klebsiella pneumonia which had positive qnra and ctx-m genes.shot gun sequencing was performed for analyzing the complete nucleotide sequence of pkp96,a plasmid containing qnra and ctx-m-24 genes in zj96 isolate.results qnra was detected in 5 out of 263(1.9%)escherichia coli isolates and 8 out of 99(8.1%)klebsiella pneumonia isolates.pkp96,a conjugative plasmid including qnra gene and ctx-m-24 gene presented in zj96 isolate.the sequence of the plasmid pkp96 displayed the qnra,ctx-m-24,aac(6')-ib-cr,teta and int Ⅰ 1 genes.conclusion the plasmid-mediated genes,such as qnra and ctx-m,may facilitate the prevalence of multi-drug resistant strains. 展开更多
关键词 喹诺酮类 超广谱Β-内酰胺酶 qnra 质粒
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肺炎克雷伯杆菌对氟喹诺酮耐药的机制研究 被引量:12
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作者 廖景光 李小燕 +5 位作者 李敏妍 张耀森 梁艳容 高炎超 崔志新 黎敏 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2012年第2期145-148,共4页
目的研究肺炎克雷伯杆菌对氟喹诺酮类药物(FQNs)的耐药机制。方法筛选临床分离的对环丙沙星耐药的肺炎克雷伯杆菌共10株,采用微量肉汤稀释法检测菌株对5种氟喹诺酮类药物的MIC值;采用PCR方法检测菌株染色体和质粒携带的喹诺酮耐药基因(g... 目的研究肺炎克雷伯杆菌对氟喹诺酮类药物(FQNs)的耐药机制。方法筛选临床分离的对环丙沙星耐药的肺炎克雷伯杆菌共10株,采用微量肉汤稀释法检测菌株对5种氟喹诺酮类药物的MIC值;采用PCR方法检测菌株染色体和质粒携带的喹诺酮耐药基因(gyrA基因、parC基因和qnr基因)并测序;质粒接合试验验证qnr基因的转移性。结果 10株肺炎克雷伯杆菌对5种氟喹诺酮类药物均产生耐药性。扩增产物经测序发现10株肺炎克雷伯杆菌染色体的gyrA基因和parC基因均有突变;有2株菌株(K79和K107)携带qnrA基因,这2株菌的接合菌对喹诺酮抗菌药的MIC值上升了5~30倍;未检测到qnrB阳性的菌株。结论 gyrA和parC基因突变是肺炎克雷菌对氟喹诺酮类产生耐药机制的主要原因,质粒上qnrA基因的存在,也是产生喹诺酮耐药的一个重要因素。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯杆菌 氟喹诺酮耐药 GYRA基因 PARC基因 QNR基因
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