产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌qnrB基因的检测

目的:了解临床分离的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌株qnrB基因的存在情况及与细菌耐药的关系。方法:收集福建省福州市三家"三甲"医院临床分离的菌株,菌株药敏试验检测采用K-B法,聚合酶链反应对42株产ESBLs肺炎克雷伯菌和44株产ESBLs大肠埃希菌进行qnrB基因筛查。结果:42株产ESBLs肺炎克雷伯菌有5株检出qnrB基因,检出率为11.90%,44株产ESBLs大肠埃希菌中有7株检出qnrB基因,检出率为15.91%。检出qnrB基因的5株肺炎克雷伯菌和7株大肠埃希菌对两种喹诺酮药物均耐药。结论:在福州地区产ESBLs的肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌中存在qnrB基因,携带qnrB基因的12株细菌对左氟沙星和环丙沙星均耐药。

广州地区大肠埃希菌qnrB耐药基因与细菌耐药的研究

目的了解广州地区大肠埃希菌株qnrB基因的存在情况及其与细菌耐药的关系。方法收集广州地区临床分离的300株大肠埃希菌，PCR法对300株菌进行qnrB基因检测，K—B法进行药敏试验检测，X^2检验进行统计学分析，P〈0．05被认为有差异。接合试验验证qnrB的转移性。结果300株大肠埃希菌有16株检出qnrB基因，拴出率为5．33％，阳性菌对两种喹诺酮药物均耐药且有14株同时为ESBLs阳性。结论大肠埃希菌中存在qnrB基因的流行，携带qnrB基因的16株细菌对左氧氟沙星和环丙沙星均耐药，且多数与ESBLs基因共存。

大肠埃希氏菌的qnrB基因检测与耐药机制研究

目的探索本地区医院大肠埃希氏菌喹诺酮耐药基因的分布及耐药机制。方法采用PCR扩增与测序、基因初步定位、质粒接合转移实验等方法确定喹诺酮耐药的大肠埃希氏菌qnr的基因类型,以分析研究有关的耐药特点与机制。结果各大肠埃希氏菌株中仅qnrB基因阳性,qnrA、qnrS、qnrC、qnrD、qepA、aac(6’)-Ib-cr基因均阴性;并且qnrB基因包括qnrB2、qnrB5、qnrB9、qnrB16、qnrB18、qnrB19和qnrB31等位基因;在这些qnrB等位基因中,qnrB31与qnrB16、qnrB2与qnrB9同源性较高;各qnrB等位基因分别位于约21.0 kb至28.0 kb长的质粒上。结论在本地区医院存在不同的qnrB等位基因流行;实验菌株的喹诺酮耐药与qnrB等位基因结构中LexA-蛋白结合位点共有序列缺失有关。

大肠埃希菌qnrB耐药基因与细菌耐药的关系探讨

目的了解大肠埃希菌qnrB基因的流行状况及其与细菌耐药的关系。方法收集250株大肠埃希菌作为检测对象,qnrB阳性对照菌由某医科大学提供。分别进行qnrB基因扩增及序列测定、药敏试验和质粒结合试验。结果共有14株(5.6%)检出存在qnrB基因。而ESBLs阳性菌的检出株数为117株(46.8%),且14株阳性株中有13株为ESBLs阳性。阳性质粒接合试验均接合成功,且可于选择平板或丙环沙星TSA琼脂上生长,表明qneB具有转移性。选取2例qnrB阳性扩增产物进行DNA测序,发现qnrB扩增片段为469bp,与GenBank数据库中qnrB基因的同源性为100%。结论 qnrB基因在本市存在流行情况,且原因推测为抗生素的滥用。因此,应制定临床用药规范,杜绝抗生素的滥用。

1株携带qnrB4及aac(6′)-Ⅰb-suzhou型基因同时产ESBLs、AmpC酶多药耐药大肠埃希菌的调查

目的了解1株产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌的耐药机制。方法采用纸片扩散法检测1株大肠埃希菌对19种抗菌药物的敏感性,采用聚合酶链反应(PCR)检测6种耐药基因:qnrA、qnrB、qnrC、qnrS、qepA、aac(6′)-Ⅰb,并对qnrB、aac(6′)-Ⅰb基因测序后进行BLAST比对分析。结果该菌株除对碳青霉烯类、酶抑制剂复合抗菌药物类敏感外,对其余药物均耐药;PCR发现该菌株同时携带qnrB和aac(6′)-Ⅰb,经测序并分别与已在美国国立信息中心登录的DQ303921(qnrB4)和EF375621[aac(6′)-Ⅰb-suzhou]型比对,同源性均>99.0%。结论该菌株多药耐药的机制与产ESBLs、AmpC酶及携带qnrB4和aac(6′)-Ⅰb基因有关;该研究是第一篇从1株产ESBLs、AmpC酶大肠埃希菌中检出同时携带qnrB4和aac(6′)-Ⅰb-suzhou型基因的报道。

大肠埃希菌染色体、质粒介导的喹诺酮类药物耐药机制研究

目的探讨我院ICU病区临床分离大肠埃希菌(Escherichia Coli. ECO)的耐喹诺酮类抗菌素耐药机制。方法收集2007年12月～2008年6月期间20株分离自我院ICU病区患者临床标本的ECO菌,采用纸片扩散法测定30种抗菌药物的敏感性,微量琼脂稀释法测定环丙沙星、左氧沙星的MIC值;采用PCR法联合检测细菌染色体介导DNA解旋酶gyrA和质粒介导的qnrA、qnrB、qnrS以及aac(6’)-Ⅰb-Cr变异体和与喹诺酮类外排有关的qepA等6种基因。结果20株ECO菌gyrA基因均存在突变,其中13、15号株gyrA基因经比对与美国NCBI中已登录的gyrA基因序列均不相同,为新亚型;检出aac(6’)-Ⅰb基因3株,经比对分别为aac(6’)-Ⅰb(2株)和aac(6’)-Ⅰb-Cr(1株);qnrA基因检出1株,经比对为qnrA1。结论本组ECO菌对环丙沙星等喹诺酮类耐药主要为gyrA基因突变所致,但也有aac(6’)-Ⅰb-Cr、qnrA1的因素。