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青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌耐药性调查与优势基因型分析 被引量:23
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作者 曲志娜 刘红玉 +5 位作者 王娟 赵思俊 李玉清 黄秀梅 盖文燕 王君玮 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2058-2066,共9页
【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBL... 【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13%(207/249)的鸡源大肠杆菌菌株产ESBLs;产ESBLs菌株对7种抗菌药的耐药率高于非产ESBLs菌株,其中对庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋等5种药物差异显著(P<0.05),而产ESBLs菌株对四环素和氟苯尼考2种抗菌药的耐药率显著低于非产ESBLs菌株;产ESBLs菌株多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌株,其多重耐药率分别为99.03%和92.86%(P=0.035);CTX-M型、TEM型和OXA型ESBLs菌株的检出率分别为100.00%、99.52%和47.83%,未检测出SHV型ESBLs菌株;产酶菌株分属于10个基因亚型,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型是优势基因亚型,并首次从健康家禽中检测到基因重组嵌合体CTX-M-123和CTX-M-64。【结论】产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株在青岛地区广泛流行和传播;产ESBLs菌株耐药相对非产ESBLs菌株严重;相比国内其它地区,CTX-M型和TEM型同样成为青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株的流行基因型,但基因亚型存在差异,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型分别是各基因型的优势基因亚型。 展开更多
关键词 鸡源大肠杆菌 耐药性 esbls 基因 基因亚型
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鸡源大肠杆菌分离鉴定及ESBLs与AmpC酶基因型检测及耐药性分析 被引量:16
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作者 马馨 刘一飞 +4 位作者 王志宇 任彬琳 陈泽 杜彬 张菁 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第9期2715-2725,共11页
为了解山西省范围内鸡源产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)大肠杆菌分离株的基因型及其耐药现状,本试验从呈现典型鸡大肠杆菌病临床症状的病料中分离、鉴定出68株符合鸡源大肠杆菌生物特性的流行菌株,采用K-B法与双纸片确... 为了解山西省范围内鸡源产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和头孢菌素酶(AmpC)大肠杆菌分离株的基因型及其耐药现状,本试验从呈现典型鸡大肠杆菌病临床症状的病料中分离、鉴定出68株符合鸡源大肠杆菌生物特性的流行菌株,采用K-B法与双纸片确认法对分离的68株大肠杆菌分别进行药敏试验和ESBLs、AmpC酶耐药表型的筛选;采用PCR方法检测了分离株中质粒介导的ESBLs、AmpC酶的基因型。结果显示,分离到的68株菌对22种抗菌药物均产生不同程度的耐药性,其中耐药谱达7耐以上的有66,占总分离菌株数的97.06%;呈ESBLs、AmpC酶阳性和两者均阳性的菌株数分别为57(83.82%)、19(27.94%)和16(23.53%)株;检测出ESBLs阳性菌株携带的耐药基因型包括bla TEM、bla OXA和bla CTX-M-1/9,AmpC酶阳性菌株耐药基因型为bla FOX型。研究结果表明,分离的68株鸡源大肠杆菌已对绝大多数种类抗菌药物产生耐药性,且产ESBLs和AmpC酶菌株已普遍流行。山西省鸡源大肠杆菌中流行的ESBLs基因型与国内其他地区相关报道大体一致,而检测到的bla FOX型AmpC酶基因在国内报道相对较少。 展开更多
关键词 大肠杆菌 esbls AMPC 耐药性 基因
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贵州部分地区猪源大肠杆菌耐药性分析及ESBLs基因型检测 被引量:21
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作者 曹敏 谭艾娟 +4 位作者 吕世明 常鑫 丁昌庆 陈婷 王珍燕 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第4期1098-1104,共7页
为了解贵州地区规模养猪场大肠杆菌菌株耐药情况和ESBLs基因型的流行情况,试验采用CLSI推荐的方法对采自贵州省4个地区规模养猪场的164株大肠杆菌进行药物敏感性试验和产ESBLs菌的检测,并用PCR方法对TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1 4种常见ES... 为了解贵州地区规模养猪场大肠杆菌菌株耐药情况和ESBLs基因型的流行情况,试验采用CLSI推荐的方法对采自贵州省4个地区规模养猪场的164株大肠杆菌进行药物敏感性试验和产ESBLs菌的检测,并用PCR方法对TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1 4种常见ESBLs基因进行检测。结果显示,164株大肠杆菌对10种常用抗菌药物耐药率分别是头孢噻呋93.29%、氨苄西林87.19%、四环素86.59%、庆大霉素81.10%、链霉素53.66%、多黏菌素51.83%、环丙沙星53.05%、卡那霉素47.56%、金霉素34.76%和氟苯尼考21.95%,且大多为多重耐药,其中检测出ESBLs阳性菌株137株,阳性率为83.54%,各个地区的检出率不同;137株产ESBLs大肠杆菌中,TEM、SHV、OXA-1和CTX-M-1基因的检出率分别为90.51%、70.07%、51.82%和43.07%,且多为复合基因型耐药菌株,各地区的各种基因检出率不同。试验结果表明,贵州部分地区的猪源大肠杆菌耐药现象严重,ESBLs菌株的检出率很高,耐药基因的检出率也极高,且多为复合基因型耐药菌株,应加强当地产酶耐药菌的监测和研究,有效防制此类细菌引发的疾病。 展开更多
关键词 猪源大肠杆菌 耐药性 esbls 基因
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儿童临床产ESBLs菌基因型分布及其耐药特征的研究 被引量:8
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作者 刘岚 郑玉强 +4 位作者 赵昕 刘昌林 朱军 谢伟 景春梅 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第2期142-146,共5页
目的:对本地区2002~2004年儿童临床分离的产超广谱-β内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)细菌的流行特点和基因型别进行分析,了解产ESBLs细菌的耐药基因的型别分布和耐药特征变化情况。方法:用microscan walka-way-4.0... 目的:对本地区2002~2004年儿童临床分离的产超广谱-β内酰胺酶(Extended-Spectrum β-Lactamases,ESBLs)细菌的流行特点和基因型别进行分析,了解产ESBLs细菌的耐药基因的型别分布和耐药特征变化情况。方法:用microscan walka-way-4.0细菌鉴定仪对4022株革兰氏阴性菌鉴定到种并做药敏分析,K-B法确认产ESBLs菌株,并用PCR法扩增,筛选其中108株ESBLs阳性菌株进行初步基因分型。结果:产ESBLs菌1468株,大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌的分别为52.5%和65.8%;总产酶率为58.0%;2002~2004年产酶率分别为:68.2%、56.9%、50.8%。PCR初步分型结果表明:108株ESBLs菌检测到TEM、SHV及CTX三种基因型;大肠埃希氏菌59株,主要为TEM型(56/59);肺炎克雷伯菌29株,主要为SHV型(28/29);阴沟肠杆菌13株,以TEM型为主(12/13);铜绿假单孢菌7株,以TEM型为主(6/7)。2002年以TEM型为主(75%),2003年主要为TEM型(40%)和SHV型(57.1%),2004年主要为TEM型(90.9%),CTX为少见基因型(3.7%)。产ESBLs菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类抗生素耐药率为56.2%~100%,具有多重耐药特点。结论:产ESBLs菌发生率在逐年下降,产ESBLs菌主要携带TEM和SHV型β-内酰胺酶基因,其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶;但耐药情况不容乐观;提示临床应加强细菌耐药性与基因型变化的了解,合理用药,减少耐药菌的产生,更好的控制院内感染。 展开更多
关键词 esbls 基因分型 耐药性
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鸡、猪大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析 被引量:21
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作者 曲志娜 张颖 +4 位作者 李玉清 李梁梁 王娟 黄秀梅 刘焕奇 《中国农学通报》 CSCD 2013年第8期50-54,共5页
为检测不同动物源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型,探究ESBLs对大肠杆菌耐药性的影响,指导兽医临床有效防治大肠杆菌病。采用NCCLS标准方法和双纸片协同法,对102株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定和和ESBLs检测,设计合... 为检测不同动物源大肠杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型,探究ESBLs对大肠杆菌耐药性的影响,指导兽医临床有效防治大肠杆菌病。采用NCCLS标准方法和双纸片协同法,对102株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定和和ESBLs检测,设计合成4对引物,用PCR方法进行了ESBLs耐药质粒的DNA扩增和基因型分析。结果表明:以产ESBLs细菌的耐药质粒为模板扩增出了与预期片段大小相符的TEM、CTX-M型ESBLs产物,但均未扩增出SHV、OVA型ESBLs产物。鸡源、猪源产ESBLs菌株检出率分别为81%、6%。CTX-M、TEM型为山东莱西地区动物源产ESBLs大肠杆菌菌株的流行基因型,且鸡源产ESBLs大肠杆菌菌株分布广泛,应加强当地产酶耐药菌的监测和研究,以有效防治此类细菌引发的疾病。 展开更多
关键词 大肠杆菌 esbls 耐药性 基因
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内蒙古地区奶牛源致病性沙门氏菌耐药性分析及ESBLs基因检测 被引量:9
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作者 赵俊利 石瑞丽 +3 位作者 李志芳 丁月霞 李培锋 关红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第8期2150-2159,共10页
为研究内蒙古地区奶牛源致病性沙门氏菌的耐药特性及ESBLs基因流行特征,试验采用微量肉汤稀释法测定了22种兽医临床常用抗菌药物对临床分离沙门氏菌的最低抑菌浓度(MICs),并对其多重耐药特性进行了分析;采用PCR法对具有β-内酰胺类药... 为研究内蒙古地区奶牛源致病性沙门氏菌的耐药特性及ESBLs基因流行特征,试验采用微量肉汤稀释法测定了22种兽医临床常用抗菌药物对临床分离沙门氏菌的最低抑菌浓度(MICs),并对其多重耐药特性进行了分析;采用PCR法对具有β-内酰胺类药物耐药表型的菌株进行了8种动物源沙门氏菌常见ESBLs基因的检测。结果显示,内蒙古地区奶牛源致病性沙门氏菌对甲氧苄啶(97.4%)及磺胺甲基异唑(94.7%)的耐药率最高,对多数β-内酰胺类、氨基糖甙类、氯霉素类及四环素类药物的耐药性也较为严重(耐药率为40%~80%),所有菌株对氟喹诺酮类药物均敏感;菌株的多重耐药率为94.7%,有29株菌(76.3%)同时对6类抗菌药物具有耐药性;35株对β-内酰胺类药物耐药的菌株中,有30株(85.7%)为ESBLs基因阳性,共检出6种ESBLs基因,其中CTX-M型基因检出率最高(40.0%),未检出SHV和PSE型基因;共发现15种ESBLs基因型,9种ESBLs基因型组合,有16株菌(45.7%)同时携带两种或两种以上ESBLs基因。结果表明,内蒙古地区奶牛源致病性沙门氏菌对兽医临床常用抗菌药物的耐药性较为严重,且ESBLs基因的流行模式较为复杂,提示兽医临床抗菌药物不合理使用可能是造成该地区奶牛源沙门氏菌耐药性产生的原因。 展开更多
关键词 奶牛 沙门氏菌 耐药性 esbls基因
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鸡源大肠杆菌ESBLs基因型检测及其耐药性分析 被引量:6
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作者 薛原 陈建飞 +2 位作者 张秀英 华育平 赵树臣 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2011年第4期30-32,共3页
采用K-B法检测30株鸡源大肠杆菌对16种抗菌药物的耐药性,根据耐药表型和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型流行情况,指导临床合理用药。结果表明,24株大肠杆菌为产ESBLs株。扩增出了与预期片段大小相符的TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型... 采用K-B法检测30株鸡源大肠杆菌对16种抗菌药物的耐药性,根据耐药表型和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型流行情况,指导临床合理用药。结果表明,24株大肠杆菌为产ESBLs株。扩增出了与预期片段大小相符的TEM型、SHV型、CTX-M型、OXA型基因。有5株同时检测出TEM和CTX-M基因。产酶大肠杆菌对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、环丙沙星的耐药率100%。其多重耐药性明显比非产酶大肠杆菌严重。 展开更多
关键词 esbls 大肠杆菌 TEM基因 SHV基因 CTX-M基因 OXA基因
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临床产ESBLs细菌耐药特性及其基因分型的研究 被引量:34
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作者 管希周 刘又宁 王睿 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期468-472,共5页
目的 了解并研究产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL s)细菌流行及耐药特点 ,应用聚合酶链反应(PCR)对产 ESBL s细菌进行初步分型。方法 先后用 nitrocefin及纸片扩散初筛法、纸片扩散确认法从临床分离的肺炎克雷伯氏菌及大肠埃希氏菌中检测... 目的 了解并研究产超广谱 β-内酰胺酶 (ESBL s)细菌流行及耐药特点 ,应用聚合酶链反应(PCR)对产 ESBL s细菌进行初步分型。方法 先后用 nitrocefin及纸片扩散初筛法、纸片扩散确认法从临床分离的肺炎克雷伯氏菌及大肠埃希氏菌中检测产 ESBL s菌株 ,用微量稀释法测定不同类抗生素对产 ESBL s菌株的 MIC值 ,并用聚合酶链反应对 ESBL s基因进行初步分型。结果 我院临床分离肺炎克雷伯氏菌产ESBL s率为 16 .7%、大肠埃希氏菌产 ESBL s率为 12 .4%。产 ESBL s细菌对青霉素类及第三代头孢菌素类耐药率约为 70 %~ 10 0 % ,加用酶抑制剂后它们的耐药率降为 2 %~ 6 0 %。它们对磺胺甲口恶唑 /甲氧苄氨嘧啶、环丙沙星及头孢吡肟的耐药率分别为 6 9.2 3%、5 6 .41%和 2 0 .5 1% ,但它们对阿米卡星的耐药率为 12 .82 %。而非典型 β-内酰胺类抗生素头孢西丁、头孢美唑及拉氧头孢对产 ESBL s菌株的敏感率分别为 94.88%、92 .32 %和 97.44 %。碳青霉烯类的亚胺培南和美罗培南表现了最高的敏感率未发现耐药菌株。 ESBL s对单独头孢哌酮的水解率为 43.93% ,而当结合了舒巴坦、克拉维酸及三唑巴坦时对头孢哌酮的水解率分别下降为2 0 .91%、18.13%及 15 .2 7%。产 ESBL s肺炎克雷伯氏菌中产 SHV型、TEM型、SHV和 展开更多
关键词 超广谱Β-内酰胺酶 esbls 耐药性 基因分型
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产ESBLs鲍曼不动杆菌的耐药特性、质粒谱及耐药基因型 被引量:25
9
作者 李蓉 李文林 +5 位作者 石小玉 梁朝 赵林 廖晚珍 徐小文 崔伟光 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期202-205,共4页
目的了解并研究产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌的流行、耐药特点及质粒图谱,对产ESBLs菌株进行基因分型。方法先后用nitrocefin纸棒、最低抑菌浓度(M IC)初筛法和纸片扩散确认法从临床分离的鲍曼不动杆菌中检测产ESBLs菌株,用... 目的了解并研究产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌的流行、耐药特点及质粒图谱,对产ESBLs菌株进行基因分型。方法先后用nitrocefin纸棒、最低抑菌浓度(M IC)初筛法和纸片扩散确认法从临床分离的鲍曼不动杆菌中检测产ESBLs菌株,用凝胶电泳分析其质粒图谱,并用聚合酶链反应(PCR)对产ESBLs基因进行分型。结果93株鲍曼不动杆菌中,对β-内酰胺酶类抗菌药物耐药47株(79.66%),中度敏感12株(20.34%);产ESBLs菌株有16株,占17.20%。产ESBLs鲍曼不动杆菌对头孢曲松、头孢他啶、头孢唑肟、头孢吡肟、氨曲南、庆大霉素、妥布霉素、磺胺甲唑、环丙沙星和阿米卡星的耐药率均显著高于非产ESBLs菌株(P<0.05)。保留的15株产ESBLs菌具有4种质粒谱,主要为Ⅰ型和Ⅲ型;它们均携带1~2种TEM型或SH V型或PER型β-内酰胺酶基因,且80%携带OXA-23型碳青霉烯酶基因。结论产ESBLs鲍曼不动杆菌常为多重耐药菌,耐药率与产ESBLs密切相关;同一克隆株在同一病房有流行趋势;本院流行株均携带2~3种耐药基因型,主要为TEM型、PER型β-内酰胺酶基因和OXA-23型碳青霉烯酶基因。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 超广谱β-内酰胺酶(esbls) 耐药性 质粒图谱 基因分型
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临床产ESBLs细菌的耐药特征和基因分型的研究 被引量:42
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作者 张晓兵 府伟灵 +2 位作者 廖扬 陈斌 龚雅利 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期386-389,共4页
目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的流行和耐药特点,初步对产ESBLs细菌进行基因分型,确立耐药基因的位点和种类.方法收集分离鉴定菌株,通过K-B法药敏实验初筛以确认产ESBLs菌株,并对ESBLs基因进行初步分型.结果分离到产ESBLs细... 目的了解产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)细菌的流行和耐药特点,初步对产ESBLs细菌进行基因分型,确立耐药基因的位点和种类.方法收集分离鉴定菌株,通过K-B法药敏实验初筛以确认产ESBLs菌株,并对ESBLs基因进行初步分型.结果分离到产ESBLs细菌88株,检出率为38.9%,其中肺炎克雷伯菌阳性率为43.1%、大肠埃希菌阳性率为33.3%;产ESBLs细菌对青霉素类、氨曲南及头孢菌素类耐药率约为90%~100%,加用酶抑制剂克拉维酸或他唑巴坦后耐药率降为18.7%~46.8%;PCR初步分型结果表明:大多数产ESBLs细菌携带TEM型和SHV型β-内酰胺酶基因,其中单独携带TEM型基因的占42%,单独携带SHV型基因的占12.5%,携带两种基因的占31.8%.结论产ESBLs细菌具有多重耐药的特点;产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌大都携带TEM和(或)SHV型β-内酰胺酶基因,其中绝大部分产TEM型β-内酰胺酶. 展开更多
关键词 超广谱β-内酰胺酶(esbls) 基因分型 肺炎克雷伯菌 大肠埃希菌
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1株鹑鸡肠球菌产ESBLs和AmpC酶的基因型鉴定 被引量:5
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作者 苑丽 付秀玲 +4 位作者 刘建华 胡功政 莫娟 潘玉善 康宇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期858-863,共6页
为检测1株临床分离的七彩鸟鹑鸡肠球菌的ESBLs和AmpC酶的基因型,探讨其耐药基因的进化机制;采用两倍稀释法测定此菌株对18种常用药物的敏感性,并用9对特异性引物进行PCR扩增、基因克隆及测序分析,确定鹑鸡肠球菌ESBLs和AmpC酶的基因型... 为检测1株临床分离的七彩鸟鹑鸡肠球菌的ESBLs和AmpC酶的基因型,探讨其耐药基因的进化机制;采用两倍稀释法测定此菌株对18种常用药物的敏感性,并用9对特异性引物进行PCR扩增、基因克隆及测序分析,确定鹑鸡肠球菌ESBLs和AmpC酶的基因型及基因亚型。结果表明,鹑鸡肠球菌为产ESBLs和AmpC酶菌,除对3代、4代头孢,碳青霉烯类和磷霉素体外敏感外,对其他常用药物均呈现耐药,具有多重耐药特性;该菌所产ES-BLs的TEM序列与AJ847364(TEM-116)序列相比发生了2处碱基突变,即512T→A和695A→C,引起了相应氨基酸的突变171Ile→Lys、232Lys→Thr,是一种新的TEM亚型,GenBank注册号DQ849329;AmpC酶与序列EF078894(ACT-like型)有97%的同源性,GenBank登录号是DQ849330。这表明该株鹑鸡肠球菌ESBLs为一种新TEM亚型,来源于同时分离的鹑鸡克雷伯菌TEM型的ESBLs;ACT型AmpC酶的存在可能与七彩鸟鹑鸡接触过β-内酰胺类药物有关。 展开更多
关键词 鹑鸡肠球菌 esbls AMPC酶 基因
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合肥市产超广谱β-内酰胺酶菌株中OXA型ESBLs基因分布 被引量:13
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作者 丁震 孙耕耘 李家斌 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期124-126,共3页
目的了解合肥市部分医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中OXA型ESBLs基因分布情况. 方法标本为安徽省细菌耐药性监控中心所留取1999年9月~2000年9月,合肥市4所医院临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠... 目的了解合肥市部分医院临床分离产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中OXA型ESBLs基因分布情况. 方法标本为安徽省细菌耐药性监控中心所留取1999年9月~2000年9月,合肥市4所医院临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌98株;采用聚合酶链反应(PCR)扩增产OXA型ESBLs菌株基因;按Sanger双脱氧末端终止法,用自动测序仪对其进行测序以鉴定基因型. 结果98株产ESBLs菌株中19株携带OXA型ESBLs基因,对其中3株的进行测序,结果分别与OXA-1、OXA-2和OXA-10基因相符. 结论合肥市部分医院产OXA型ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率较高. 展开更多
关键词 OXA型esbls 肠杆菌科 PCR 基因
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鸡源大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析研究 被引量:7
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作者 栾鹏 冷丽 +1 位作者 徐国锋 李辉 《中国家禽》 北大核心 2014年第15期19-22,共4页
为调查哈尔滨市周边地区鸡源大肠杆菌中超光谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行情况,探索携带ESBLs对鸡源大肠杆菌耐药性的影响,从哈尔滨市周边地区多个养殖场分离了137株鸡源大肠杆菌,用微量肉汤稀释法测定137株菌对18种抗菌药物的最小... 为调查哈尔滨市周边地区鸡源大肠杆菌中超光谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型的流行情况,探索携带ESBLs对鸡源大肠杆菌耐药性的影响,从哈尔滨市周边地区多个养殖场分离了137株鸡源大肠杆菌,用微量肉汤稀释法测定137株菌对18种抗菌药物的最小抑菌浓度,采用CLSI推荐的表型筛选和确证试验检测大肠杆菌携带ESBLs情况,用PCR方法检测ESBLs基因(blaTEM、blaSHV、blaCTX-M、blaOXA)的流行分布情况。结果显示:109株大肠杆菌为产ESBLs菌株,占79.6%;137株鸡源大肠杆菌对临床常用18种抗菌药物产生不同程度耐药,且产ESBLs大肠杆菌的耐药性比非产ESBLs大肠杆菌的耐药性严重;blaTEM、blaCTX-M基因阳性率分别为40.9%、71.5%,所有菌株均未扩增出blaSHV和blaOXA基因。提示,blaTEM和blaCTX-M基因为哈尔滨地区鸡源产ESBLs大肠杆菌的流行基因型,且鸡源产ESBLs大肠杆菌菌株分布广泛,应加强当地用药监管。 展开更多
关键词 大肠杆菌 esbls 耐药性 基因
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猪、鸡大肠杆菌ESBLs的基因型检测 被引量:4
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作者 张春辉 张晓风 +2 位作者 张晓根 赵传壁 王建华 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第1期8-11,共4页
【目的】检测致病性大肠埃希氏菌中超广谱β-内酰胺酶(Extendβ-lactamase,ESBLs)的基因型,指导兽医临床合理用药。【方法】对产生ESBL的5株致病性大肠埃希氏菌,设计并合成TEM-1和SHV-1两对引物,用PCR方法进行了ESBLs耐药质粒的DNA扩增... 【目的】检测致病性大肠埃希氏菌中超广谱β-内酰胺酶(Extendβ-lactamase,ESBLs)的基因型,指导兽医临床合理用药。【方法】对产生ESBL的5株致病性大肠埃希氏菌,设计并合成TEM-1和SHV-1两对引物,用PCR方法进行了ESBLs耐药质粒的DNA扩增、测序和基因型分析【结果】以产生ESBLs细菌的ESBLs耐药质粒为模板均扩增出了与预期片段大小相符的TEM型ESBL产物,但都没有扩出SHV型ESBL产物。【结论】结果提示国内畜禽产生ESBLs的致病性大肠埃希氏菌未通过质粒进行细菌间耐药基因的交换;ESBLs的产生与动物种属没有关系;为克服细菌的该类耐药性问题,应该进行头孢噻呋复方制剂的研究。 展开更多
关键词 esbls 大肠杆菌 耐药性 基因
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鲍曼不动杆菌产PER-1型ESBLs基因的克隆、测序及分析 被引量:8
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作者 李蓉 李文林 +3 位作者 石小玉 梁朝 徐小文 赵林 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第13期1797-1800,共4页
目的分析产PER-1型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌的耐药性及其基因的核苷酸序列。方法先后用最低抑菌浓度(MIC)初筛法和纸片扩散确认法从临床分离的鲍曼不动杆菌中检测产ESBLs菌株,并用聚合酶链式反应(PCR)、克隆测序方法分析... 目的分析产PER-1型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)鲍曼不动杆菌的耐药性及其基因的核苷酸序列。方法先后用最低抑菌浓度(MIC)初筛法和纸片扩散确认法从临床分离的鲍曼不动杆菌中检测产ESBLs菌株,并用聚合酶链式反应(PCR)、克隆测序方法分析质粒上PER-1型ESBLs基因。结果93株鲍曼不动杆菌中,产ESBLs菌株有16株,占17.20%,均为多重耐药菌。其中PER-1型ESBLs阳性菌株有8株;TA克隆后测序表明与铜绿假单胞菌(AJ621265.1)blaPER-1基因序列100%同源。结论发现质粒上同时带产TEM-1、PER-1型ESBLs和OXA-23型碳青霉烯酶基因的鲍曼不动杆菌,blaPER-1基因可能来源于铜绿假单胞菌。 展开更多
关键词 鲍曼不动杆菌 超广谱β-内酰胺酶(esbls) 基因
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鸡志贺菌产ESBLs的基因型鉴定 被引量:2
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作者 胡功政 司红彬 +5 位作者 陈红英 邓立新 许兰菊 苑丽 魏战勇 邓强 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期764-768,共5页
目的检测鸡志贺菌所产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型和基因亚型,分析其产酶耐药的分子机制。方法采用双纸片协同增效法对临床分离的鸡志贺菌进行了ESBLs检测,用试管二倍稀释法测定了其对常用抗菌药物的敏感性,并通过PCR扩增、基因... 目的检测鸡志贺菌所产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的基因型和基因亚型,分析其产酶耐药的分子机制。方法采用双纸片协同增效法对临床分离的鸡志贺菌进行了ESBLs检测,用试管二倍稀释法测定了其对常用抗菌药物的敏感性,并通过PCR扩增、基因克隆及测序分析,确定该菌所产ESBLs的基因亚型。结果鸡志贺菌为ESBLs产生菌,对三代头孢类药物严重耐药,具有多重耐药特性。该菌所产ESBLs的基因序列与U48775对比,同源性为99.2%,属于TEM型ESBLs;与同源性最高的AY903309(TEM-116)相比,同源性为99.8%,两处碱基发生变化,409位碱基T突变为C,没有引起氨基酸变化,为沉默突变,157位碱基A突变为G,引起53位丝氨酸变为甘氨酸且该突变是新的突变位点。结论该菌产ESBLs基因型为新的基因亚型,暂命名为TEM-1V,上传至GenBank获序列号DQ211973。 展开更多
关键词 志贺氏菌 esbls 基因 MIC
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产ESBLs液化沙雷氏菌临床分离株的表型和基因型分析 被引量:7
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作者 凌保东 谢勇恩 +4 位作者 张翔 蔡春燕 余娴 李苌青 雷军 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期741-743,752,共4页
目的探索液化沙雷氏菌临床分离株CR04对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用琼脂二倍稀释法对临床分离的液化沙雷氏菌CR04株进行MIC检测,提取耐药菌β-内酰胺酶,并测定其酶活性。双纸片法筛选及确证实验鉴别耐药菌的ESBLs表型,进行... 目的探索液化沙雷氏菌临床分离株CR04对第三代头孢菌素耐药的分子机制。方法采用琼脂二倍稀释法对临床分离的液化沙雷氏菌CR04株进行MIC检测,提取耐药菌β-内酰胺酶,并测定其酶活性。双纸片法筛选及确证实验鉴别耐药菌的ESBLs表型,进行结合传递实验并提取耐药菌质粒,进一步根据常见的质粒介导的β-内酰胺酶基因序列设计两对寡核苷酸引物,以耐药质粒为模板进行PCR扩增,并对其扩增产物进行DNA序列测定和同源性分析。结果头孢他啶对液化沙雷氏菌CR04株的MIC为512μg/ml,其酶活性为837.9U,双纸片法筛选及确证实验证明为产ESBLs耐药菌,结合传递实验表明产酶基因能传递给受体菌,从耐药菌中提取出大小约为10kb的质粒,以质粒DNA为模板进行PCR扩增,对扩增产物DNA测序结果进行分析表明,其核苷酸序列与已知的β-内酰胺酶blaSHV-5、blaSHV-1、blaSHV-2、blaSHV-7、blaSHV-8、blaSHV-12、blaSHV-24、blaSHV-34基因高度同源,其所推导的氨基酸序列与已知的β-内酰胺酶blaSHV-5、blaSHV-1、blaSHV-2、blaSHV-7、blaSHV-8、blaSHV-12、blaSHV-24、blaSHV-34相比较至少有30个氨基酸残基的差异。结论对临床分离的第三代头孢菌素耐药性液化沙雷氏菌CR04株进行详细的表型和基因型分析。 展开更多
关键词 液化沙雷氏菌 质粒 超广谱Β-内酰胺酶 耐药机制 esbls 表型 基因
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肺炎克雷伯氏菌K99-1029中的ESBLs基因型分析 被引量:11
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作者 熊自忠 朱德妹 +1 位作者 汪复 张婴元 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期96-100,共5页
目的 了解华山医院临床分离的肺炎克雷伯氏菌K99 10 2 9菌株产生的超广谱 β 内酰胺酶(ESBLs)的基因型。方法 编码框以外设计引物、PCR扩增K99 10 2 9转移接合子中的ESBLs全编码基因 ,克隆入pHSG398质粒、表达 ,并对PCR产物进行测序... 目的 了解华山医院临床分离的肺炎克雷伯氏菌K99 10 2 9菌株产生的超广谱 β 内酰胺酶(ESBLs)的基因型。方法 编码框以外设计引物、PCR扩增K99 10 2 9转移接合子中的ESBLs全编码基因 ,克隆入pHSG398质粒、表达 ,并对PCR产物进行测序分析其基因型。结果 K99 10 2 9转移接合子所产生的三种酶编码基因序列分别与GenBank中TEM 1、SHV 12、CTX M 3编码基因序列的同源性为 10 0 % ;产SHV 12或CTX M 3克隆菌株对多数 β 内酰胺类抗生素耐药 ,SHV 12和CTX M 3对多数 β 内酰胺类抗生素具有水解作用 ,CTX M 3对头孢噻肟的水解能力明显强于头孢他啶 ;产TEM 1克隆菌株仅对青霉素类耐药 ,TEM 1对青霉素类有明显的水解作用。结论 临床分离的肺炎克雷伯氏菌K 99 10 2 9菌株同时产生TEM 1、SHV 12、CTX M 3型酶 ,可导致对大多数的 β 内酰胺类抗生素产生耐药性。 展开更多
关键词 esbls 基因 肺炎克雷伯氏菌 医院 超广谱Β-内酰胺酶 抗生素
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河南省猪源大肠杆菌ESBLs基因型检测及耐药性分析 被引量:4
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作者 张青娴 徐引弟 +10 位作者 王治方 朱文豪 焦文强 李海利 方剑玉 郎利敏 张立宪 游一 许峰 郑万录 王克领 《山西农业科学》 2018年第12期2087-2093,共7页
对河南省农业科学院畜牧兽医研究所传染病研究室2018年1—4月所分离的70株河南省猪源大肠杆菌,用双纸片法初步确证30株疑似ESBLs菌株,阳性率达42.8%。对30株疑似ESBLs菌株扩增其耐药基因,其阳性率分别为CTX-M53.3%,TEM66.7%,SHV 3.3%,... 对河南省农业科学院畜牧兽医研究所传染病研究室2018年1—4月所分离的70株河南省猪源大肠杆菌,用双纸片法初步确证30株疑似ESBLs菌株,阳性率达42.8%。对30株疑似ESBLs菌株扩增其耐药基因,其阳性率分别为CTX-M53.3%,TEM66.7%,SHV 3.3%,未扩增出OXA,DHA基因。结果显示,河南省农业科学院畜牧兽医研究所传染病研究室所分离的河南省猪源ESBLs大肠杆菌耐药基因型以CTX-M和TEM型为主,且多为耐药菌株。 展开更多
关键词 大肠杆菌 esbls 基因 耐药
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1997-2010年上海市猪源大肠杆菌耐药性和产ESBLs菌的基因型检测 被引量:5
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作者 沈莉萍 徐锋 +1 位作者 张维谊 王建 《中国动物检疫》 CAS 2017年第9期26-30,45,共6页
[目的 ]了解1997—2010年上海市猪源大肠杆菌的耐药情况和产ESBLs大肠杆菌的基因型分布。[方法 ]采用K-B法对199株猪源大肠杆菌进行药敏试验,采用PCR方法对TEM、CTX-M、SHV和OXA等4种基因型进行检测。[结果 ]199株猪源大肠杆菌对20种抗... [目的 ]了解1997—2010年上海市猪源大肠杆菌的耐药情况和产ESBLs大肠杆菌的基因型分布。[方法 ]采用K-B法对199株猪源大肠杆菌进行药敏试验,采用PCR方法对TEM、CTX-M、SHV和OXA等4种基因型进行检测。[结果 ]199株猪源大肠杆菌对20种抗菌药物均表现出不同程度的耐药性。耐药率最低的为大观霉素(7.04%),其次为头孢曲松(10.55%)、头孢哌酮(12.56%),最高的为林可霉素(100%),对阿莫西林和复方新诺明的耐药率分别高于80%和93.33%。5~15耐的菌株占88.94%。15种抗菌药物之间均存在不同程度交叉耐药性。共检出15株产ESBLs菌株(7.54%),其中2株TEM型,5株CTX-M型,7株同时携带TEM、CTX-M型。[结论 ]上海市猪源大肠杆菌分离株耐药谱广、耐药率高;对抗菌药物的交叉耐药现象严重,交叉耐药率有的相似,有的差异大。猪源大肠杆菌ESBLs基因型主要以TEM型和CTX-M型为主,尚无SHV型和OXA型。 展开更多
关键词 大肠杆菌 耐药性 esbls 基因 上海
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