基于Q-Orbitrap MS/MS的山银花标准汤剂多指标成分定量及指纹图谱研究

目的:建立山银花标准汤剂质量评价方法。方法:建立15批山银花标准汤剂指纹图谱及对照指纹图谱,标定共有峰,并对指纹图谱进行化学计量学分析;采用Q-Orbitrap MS/MS与Xcalibur数据处理平台、Thermo m/z Vault数据库和文献报道对共有指纹峰进行鉴定,对其中采用对照品确认的成分进行定量测定。结果:15批山银花标准汤剂具有21个共有指纹峰,各批次与对照指纹图谱相似度大于0.90,指纹图谱方法重复性良好,化学计量分析筛选出10个质量标志物;对21个共有指纹峰对应的化合物进行鉴别,共鉴定出18种成分,对8种已采用对照品确认的成分进行含量测定,15批山银花标准汤剂中新绿原酸含量为8.048~25.824 mg/g,绿原酸含量为72.751~108.664 mg/g,隐绿原酸含量为3.156~30.257 mg/g,异绿原酸B含量为3.104~34.945 mg/g,异绿原酸A含量为22.348~62.190 mg/g,异绿原酸C含量为11.403~49.295 mg/g,灰毡毛忍冬皂苷乙含量为128.243~194.196 mg/g,川续断皂苷乙含量为11.603~22.726 mg/g。结论:本研究建立的方法可用于山银花标准汤剂质量评价。

基于UPLC-Q-Orbitrap HRMS的痂状炭角菌子实体化学成分分析

痂状炭角菌(Xylaria sp.L1)是一种高价值药用真菌,属于炭角菌科,它生长在野外废弃的白蚁巢穴周围。文章应用超高效液相色谱(ultra-high performance liquid chromatography,UPLC)-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(quadrupole-orbitrap high-resolution mass spectrometry,Q-Orbitrap HRMS)技术对痂状炭角菌子实体80%甲醇提取物的化学成分进行定性分析。采用Welch RP-C18柱色谱(150 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水溶液和0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱;高分辨质谱分析采用电喷雾离子源(electrospray ionization source,ESI),在正、负离子模式下扫描采集数据;从痂状炭角菌子实体中共检测到41种化合物,包含6种萜类化合物、4种苯丙素类化合物、14种生物碱类化合物、10种长链不饱和脂肪酸类化合物、7种甾体类化合物,其中有18种化合物为痂状炭角菌子实体中首次发现。该研究对痂状炭角菌子实体化学成分进行较全面地分析,为该真菌的深入研究奠定基础。

四极杆-轨道阱液质联用法同时检测玉米中四种真菌毒素

该文采用四级杆-轨道阱液质联用仪(ultra high performance liquid chromatography quadrupole-orbitrap,UHPLC Q-Orbitrap)建立了同时检测玉米中4种主要真菌毒素黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))、伏马菌素B_(1)(fumonisin B_(1),FB_(1))、玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)和赭曲霉毒素A(ochratoxins A,OTA)的方法。首先对提取方式、提取时间和提取溶剂进行优化,同时研究玉米基质对4种真菌毒素的基质干扰效应以及低温高速离心的净化效果,然后进行方法验证,并将该方法与QuEChERS前处理方法进行比较。结果表明,低温高速离心能有效去除玉米基质对AFB 1的信号抑制,对4种真菌毒素均能达到较好的定量效果;添加低浓度和高浓度时的加标回收率为90%~105%,相对标准偏差为0.7%~2.2%。该方法具有良好的准确度和精密度,4种真菌毒素线性相关系数r^(2)>0.99,定量限为0.42~314μg/kg。此方法能达到与QuEChERS一致的检测效果,并且对含有FB 1样品的真菌毒素同时检测具有明显优势,是一种经济、高效的谷物中多种毒素分析方法。

头孢噻呋及去呋喃甲酰基头孢噻呋的四极杆轨道阱串联质谱分析及其在肉鸡体内的残留规律研究

建立了头孢噻呋及其主要代谢物去呋喃甲酰基头孢噻呋残留的超高效液相色谱-四极杆轨道阱串联质谱(UHPLC-Q-Orbitrap MS)分析方法。选用Kinetex F5 100A色谱柱(50mm×3.0mm×2.6μm)分离,在Q-Exactive高分辨质谱Full MS/dd-MS2扫描模式下采集数据进行定性定量分析。两种目标物在3种基质中相应浓度范围内的线性关系良好,相关系数r2均大于0.990,回收率为83.2%~129.7%,RSD均小于15%。通过对鸡体内头孢噻呋及其代谢物残留规律的分析表明,给药后,鸡胸肉中头孢噻呋和去呋喃甲酰基头孢噻呋均可检出,且消除时间均为12~24h;鸡肝、鸡肾中头孢噻呋可在0.5h内迅速代谢为去呋喃甲酰基头孢噻呋,鸡肝和鸡肾中去呋喃甲酰基头孢噻呋的消除时间分别为48~72h和72~120h。本研究可为保障动物源性食品安全以及鸡体内头孢噻呋最大残留限量标准和休药期的制订提供理论和实践依据。

液相色谱-高分辨质谱快速测定奶粉中氯丙醇酯

通过优化提取和净化过程建立了奶粉中氯丙醇酯的分级提取净化体系,并通过高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱技术(HPLC-Q-Orbitrap-HRMS)对该体系效果进行评价。实验采用在提取出的脂肪中加入内标再进行前处理的做法,第一级采用甲醇振荡提取、C_(18)固相萃取柱净化,可完成对缩水甘油酯和部分氯丙醇单酯的提取和净化工作,第二级采用甲醇提取,二氯甲烷辅助提取,中性氧化铝粉净化,去除油脂干扰的同时,可完成对氯丙醇双酯的提取与净化,通过合并第一、二级提取液,即可实现对奶粉中氯丙醇酯的高通量筛查,方法检出限为0.02 mg·kg^(−1),定量限为0.05 mg·kg^(−1),回收率≥80.6%,标准偏差低于10%,该方法对高蛋白、高脂肪的奶粉基质具有较强的适用性。

实时直接分析-高分辨质谱法快速筛查食品中8种非法添加染料

本研究建立了一种实时直接分析(DART)-四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱(Q-Orbitrap HRMS)法快速筛查食品中非法添加的8种工业染料。使用20μL乙腈润湿的碳纤维束(1 cm,6000根)擦拭样品表面取样,DART-HRMS直接检测。根据不同目标物确定DART离子源温度,高分辨质谱采用正离子模式,首先在全扫描模式下筛查目标化合物的一级精确质量数,随后通过二级质谱进一步确认,每个目标化合物用母离子和2个子离子进行定性分析。对于碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、碱性黄2、碱性品红、孔雀石绿、罗丹明B和罗丹明6G这8种工业染料,测得母离子和子离子的质量数误差均小于3×10^(-6),最低检测限在0.01~0.5 mg/L之间,重现性误差(RSD)不大于22%。使用该方法在疑似添加工业染料的市售黄鱼样品中检出碱性橙2。实验表明,首选的拭子取样部位是鱼鳃部、腹鳍、腹部和尾鳍。该方法具有前处理简单、分析速度快、定性准确的优势,可为食品中非法添加染料的快速筛查提供方法参考。

Q-Orbitrap高分辨质谱快速筛查及定量分析改善睡眠类保健品中非法添加的18个药物成分

目的:建立高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱质谱法(UPLC-Q-Orbitrap)快速筛查及定量分析改善睡眠类保健品中常见非法添加的18个药物成分。方法:保健品样品以甲醇为提取溶剂进行超声提取,离心取上清后,采用Waters HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)进行分离,乙腈(含0.1%甲酸)和水(含2 mmol·L^(-1)乙酸铵,0.2%甲酸)为流动相,梯度洗脱(0～1 min,35%B;1～7 min,35%B→85%B;7～7.5 min,85%B→35%B;7.5～10 min,35%B);流速为0.3 mL·min^(-1);柱温:35℃。质谱采用正离子和负离子切换扫描,全扫描/数据依赖的二级扫描(Full MS/dd-MS2)模式,在1个分析周期(10 min)内完成对样品中分析物的分离和一级、二级质谱扫描。通过比较样品与对照品的色谱保留时间、一级质谱和二级质谱,确定样品中是否掺杂了化学药物,并对阳性样品进行定量分析。结果:建立的UPLC-Q-Orbitrap方法简便快捷,定性能力强,非常适合高通量非法添加筛查。18个化学药物在0.15～300 ng·mL^(-1)范围内具有良好的线性(线性相关系数均大于0.993),各类药物的检测下限为0.05～20 ng·mL^(-1),回收率为72.2%～118.7%,RSD为2.4%～9.2%。结论:该方法操作简单,分析时间短,灵敏度高,准确可靠,为打击日益猖獗的非法添加行为提供了新的手段。

Chemical profiling of Scutellaria barbata by ultra high performance liquid chromatography coupled with hybrid quadrupole-orbitrap mass spectrometry

An ultra high performance liquid chromatography coupled with hybrid quadrupole-orbitrap mass spectrometry （UHPLC-quadrupole-orbitrap MS） method was developed to systematically analyze chemical constituents of Scutellaria barbata D. Don. The 70% methanol extract was separated on an Agilent Eclipse Plus Cl8 column （1.8μm, 150 mm×2.1 mm）, and eluted with a gradient of methanol-acetonitrile-water containing 0.1% formic acid at a flow rate of 0.25 mL/min. Constituents were identified by HRMS in the negative ion mode using both full scan and two-stage threshold-triggered mass modes. A total of 56 compounds, including 20 free flavonoids, 20 flavonoid O-glycosides, 2 flavonoid C-glycosides, 4 phenylethanoid glycosides, and 10 phenolic compounds were identified by analyzing their high resolution mass spectral data. Among them, 8 flavonoids and 2 phenylethanoid glycosides were unambiguously identified by comparing with reference standards. This study demonstrates that hybrid quadrupole-orbitrap mass spectrometry is a powerful tool in structural identification of unknown compounds in comolicated herbal extracts.