HPLC-QAMS法同时测定醒脑降压丸中6种成分的含量

目的建立高效液相色谱联合一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定醒脑降压丸中羟异栀子苷、栀子苷、木兰脂素、辛夷脂素、黄芩苷和汉黄芩苷的含量。方法以木兰脂素为内参物,建立其与羟异栀子苷、栀子苷、辛夷脂素、黄芩苷和汉黄芩苷的相对校正因子(RCFs),计算其待测成分含量,并与外标法实测值进行比对,验证一测多评法的准确性和可靠性。结果 6种成分的线性范围分别为3.59~71.80,10.77~215.40,2.06~41.20,0.69~13.80,28.83~576.60和4.96~99.20μg·mL^(-1),r值范围为0.999 5~0.999 9;平均回收率分别为98.88%,99.65%,97.74%,96.94%,100.19%和99.01%,RSD值分别为0.75%,0.92%,1.35%,1.11%,0.85%和1.06%(n=3);6种成分含量的计算值与实测值之间无明显差异。结论 HPLC-QAMS法可同时测定醒脑降压丸中6种成分的含量,该方法操作简便、结果准确,可用于醒脑降压丸的质量评价。

基于HPLC-QAMS法对清热通淋丸中7种成分的质量控制研究

目的建立高效液相一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定清热通淋丸中三叶豆紫檀苷、苦参醇I、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的含量。方法采用高效液相色谱法,以Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃。以苦参酮为内参物,建立其他6个成分的相对校正因子,计算含量。结果三叶豆紫檀苷、苦参醇Ⅰ、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的质量浓度分别在0.91~22.75μg/ml(r=0.999 5)、1.89~47.25μg/ml (r=0.999 3)、5.67~141.75μg/ml (r=0.999 7)、1.29~32.25μg/ml (r=0.999 5)、1.48~37.00μg/ml (r=0.999 6)、2.56~64.00μg/ml (r=0.999 4)、4.09~102.25μg/ml (r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为97.99%(1.42%)、98.44%(0.85%)、99.47%(0.92%)、96.98%(1.21%)、99.50%(0.74%)、100.00%(1.04%)和98.39%(1.32%),建立的高效液相一测多评法用于测定清热通淋丸中7种指标性成分的含量,一测多评法所得结果与外标法无明显差异。结论所建立的HPLC-QAMS法结果准确,可用于清热通淋丸的质量控制。

HPLC指纹图谱结合一测多评法(QAMS)评价傣药方剂黄氏蓝瘟康的质量

为了建立高效液相色谱(high-performance liquid chromatography,HPLC)指纹图谱结合一测多评法(quantitation analysis of multi-components by single marker,QAMS)评价傣药方剂“黄氏蓝瘟康”(Dai medicine prescription Huang’s Lanwenkang,DMPHL)的质量,试验采用HPLC对11批DMPHL复方的成分进行分析,将所得色谱信息导入“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”2012版进行分析,结合混合对照品色谱信息对共有峰进行指认,建立DMPHL的HPLC指纹图谱;以大黄酚为内参物,建立可同时测定绿原酸、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、大黄酸、对甲氧基肉桂酸乙酯、大黄素及大黄酚含量的一测多评法,同时用外标法(external standard method,ESM)验证一测多评法测定结果的准确性。结果表明:11批DMPHL的HPLC指纹图谱共有峰为24个,不同批次DMPHL指纹图谱的相似度均在0.900以上;以大黄酚为内参物计算出绿原酸、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、大黄酸、对甲氧基肉桂酸乙酯、大黄素的相对校正因子分别为2.0170,0.7885,0.8725,7.9264,2.7131,0.6992;一测多评法与外标法测定结果的RSD值均小于3.00%,两种方法的测定结果无明显差异。表明试验所建立的HPLC指纹图谱结合一测多评法适用于DMPHL的质量评价。

HPLC-QAMS法同时测定紫花烧伤软膏中10种有效成分的含量

目的建立同时测定紫花烧伤软膏中毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B_(1)、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素含量的高效液相色谱-一测多评法(high performance liquid chromatography-quantitative analysis of multi-components by single-marker,HPLC-QAMS)。方法用Acclaim 120 C_(18)色谱柱;流动相为乙腈-1 mL·L^(-1)磷酸,梯度洗脱;检测波长分别为330 nm(检测毛蕊花糖苷和焦地黄苯乙醇苷B_(1))、275 nm(检测羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素);以乙酰紫草素为内参物,建立其与其他9种成分的相对校正因子(relative correction factor,RCF),计算各成分的含量,与外标法(external standard method,ESM)进行比较,验证所建立的HPLC-QAMS法的准确性和可行性。结果毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B_(1)、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素质量浓度分别在3.57~178.50、1.49~74.50、2.88~144.00、1.26~63.00、0.68~34.00、4.91~245.50、2.55~127.50、2.39~119.50、3.17~158.50、7.65~382.50 mg·L^(-1)范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9991);所得相对校正因子耐用性良好,HPLC-QAMS法和外标法含量测定结果的差异无统计学意义(P>0.05)。结论所建立以乙酰紫草素为内参物的HPLC-QAMS法结果准确、方法可行,可用于紫花烧伤软膏中多指标成分的定量控制和综合质量评价。

Application of Fingerprint Combined with QAMS in Quality Evaluation of Zhenrongdan Mixture

[Objectives] The research aimed to evaluate the quality of Zhenrongdan mixture by fingerprint combining QAMS. [Methods] The quality evaluation method was established and validated with echinacoside as internal reference to determine the contents of other components(ferulic acid, salvianolic acid B, and icariin) according to the relative correction factor. The accuracy and feasibility of QAMS were evaluated by comparison on the results between the measured value and calculation value by external standard method and QAMS. [Results] A common pattern of characteristic fingerprint of Zhenrongdan mixture by HPLC was established. Thirteen common peaks were identified, and they account for 91% of the total peak area, and four components were verified in five batches of Zhenrongdan mixture. Good similarities with correlation coefficients higher than 0.99 were found in the fingerprints. There was no significant difference between the quantitative results of the four ingredients in the five batches by external standard method and QAMS. [Conclusions] The method of fingerprint combined with QAMS could be used for the quality control of multiple components determination and fingerprint chromatography for Zhenrongdan mixture.

一测多评法同时测定润肠丸(胶囊)中的9种成分

目的 建立同时测定润肠丸(胶囊)中苦杏仁苷、阿魏酸、芦荟大黄素、大黄酸、羌活醇、大黄素、异欧前胡素、大黄酚、大黄素甲醚含量的一测多评法(quantitative analysis of multi-components with single-marker,QAMS)。方法 该药物甲醇提取液的分析采用Agilent Venusil C_(18) Plus色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈(A)-体积分数0.1%磷酸(B)-水(C);梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长为218 nm(苦杏仁苷)、254 nm(阿魏酸、芦荟大黄素、大黄酸、羌活醇、大黄素、异欧前胡素、大黄酚、大黄素甲醚);以芦荟大黄素为内标物,建立与其他8种成分的相对校正因子,检测各成分的含量。结果 苦杏仁苷、阿魏酸、芦荟大黄素、大黄酸、羌活醇、大黄素、异欧前胡素、大黄酚、大黄素甲醚的质量浓度分别在11.48~229.56、2.79~55.92、2.34~46.96、3.44~68.82、3.01~60.33、2.07~41.49、4.34~86.82、4.69~93.76、3.78~75.72μg·mL^(-1)范围内有良好的线性关系(r≥0.996 9);加样回收率为97.42%~99.28%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为1.09%~2.27%;QAMS结果与外标法实测值无明显差异。结论 建立的方法准确、可靠,稳定性、耐用性好,可用于润肠丸(胶囊)中苦杏仁苷、阿魏酸、芦荟大黄素、大黄酸、羌活醇、大黄素、异欧前胡素、大黄酚、大黄素甲醚含量的测定。

一测多评法同时测定玉屏风制剂中8种成分

建立一测多评法同时测定玉屏风制剂中升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇、亥茅酚苷、芒柄花素、白术内酯Ⅲ、苍术酮8种成分的含量。以乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,柱温为30℃,流量为1.1 mL/min,进样体积为10μL,检测波长为220 nm。8种成分的色谱峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,相关系数均大于0.999。样品加标平均回收率为91.7%~102.1%,测定结果的相对标准偏差为0.57%~1.62%(n=6)。以5-O-甲基维斯阿米醇苷为内参照物,计算升麻素苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、升麻素、亥茅酚苷、芒柄花素、白术内酯Ⅲ、苍术酮的相对校正因子分别为1.009,1.925,2.147,0.822,0.708,1.066,1.425。分别采用外标法与一测多评法测定18批样品,8种成分的测定结果无显著性差异(p>0.05)。该方法准确、可靠、便捷,可用于玉屏风制剂中8种成分的同时测定,也可为玉屏风制剂的质量控制及标准提高提供依据。

一测多评法同时测定不同配伍比例枳实-厚朴药对中11种成分的含量

目的建立一测多评法同时测定不同配伍比例枳实-厚朴药对中辛弗林、紫丁香苷、木兰花碱、芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、柠檬苦素、柚皮素、和厚朴酚、厚朴酚的含量。方法枳实、厚朴分别按1∶1、1∶2、2∶1比例配伍。分析采用Agilent 5TC-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长280 nm。以橙皮苷峰为内标,计算其他10种成分相对校正因子,测定其含量。结果11种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9990),平均加样回收率97.04%~99.45%,RSD 1.22%~2.48%,一测多评法所得结果与外标法接近,配伍比例为1∶1各成分含量最高。结论该方法简便准确,重复性好,可用于枳实-厚朴药对质量控制。2种药材配伍比例为1∶1时,更有利于各成分提取。

解郁安神颗粒一测多评多组分定量检测法建立及综合质量评价模型构建

目的建立一测多评(QAMS)法同时测定解郁安神颗粒中13种成分含量,并构建其综合质量评价模型。方法以乙腈-0.1%磷酸为流动相,同时测定解郁安神颗粒中王百合苷C、王百合苷E、王百合苷B、羟异栀子苷、栀子苷、斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、柴胡皂苷a、柴胡皂苷d、双去甲氧基姜黄素、去甲氧基姜黄素和姜黄素的含量,采用正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)和熵权逼近理想解排序(EW-TOPSIS)法对其整体质量进行综合评价。结果高效液相色谱(HPLC)方法学验证均符合《中华人民共和国药典》要求。OPLS-DA显示栀子苷、柴胡皂苷d、王百合苷B、姜黄素、斯皮诺素和柴胡皂苷a为解郁安神颗粒质量差异的主要因子。EW-TOPSIS显示14批解郁安神颗粒最优解欧氏贴近度0.2849~0.6407。结论所建立的方法可用于解郁安神颗粒的质量控制和整体评价。

一测多评法同时测定参芪二皮冬茶颗粒中6种成分的含量

目的 建立一测多评法同时测定参芪二皮冬茶颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、迷迭香酸、橙皮苷、橘皮素、川陈皮素的含量。方法 分析采用Agilent Eclipse Plus-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长260、330 nm。以橙皮苷为内标,计算其他5种成分的相对校正因子,测定其含量。结果 6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率99.82%~101.18%,RSD 1.26%~2.25%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论 该方法简便可靠,重复性好,可用于参芪二皮冬茶颗粒的质量控制。

一测多评法同时测定天麻头风灵胶囊中10种成分的含量

目的建立一测多评法同时测定天麻头风灵胶囊中天麻素、巴利森苷E、紫丁香苷、巴利森苷B、巴利森苷C、阿魏酸、巴利森苷A、蒙花苷、哈巴俄苷、肉桂酸的含量。方法分析采用GL Science Inertsil^(TM)ODS-3色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长220、280 nm。以紫丁香苷为内标,计算其他9种成分的相对校正因子,测定其含量。结果10种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9997),平均加样回收率98.53%~102.22%,RSD 1.26%~2.68%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法准确、专属性强,可用于天麻头风灵胶囊的质量控制。

一测多评法同时测定清开灵片剂和颗粒剂中6个成分

目的 建立测定清开灵制剂中6个成分含量的一测多评(quantitative analysis of multi-components with a single-marker, QAMS)方法。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,以黄芩苷为内参物,建立与其他5个成分(R,S)-告依春、绿原酸、栀子苷、胆酸和猪去氧胆酸的相对校正因子(fk/s),并对fk/s进行耐用性考察。分别采用外标法和QAMS法测定6批清开灵片剂和4批清开灵颗粒剂中6个成分含量,比较两者的差异。结果 各个成分fk/s的重复性良好(RSD<5%);两种方法测定的含量结果差异无统计学意义;6个成分在片剂中的含量高于颗粒剂,同一厂家不同批号的片剂间成分含量存在差异。结论 所建立的一测多评法结果准确可靠,可用于清开灵制剂的多成分含量检测,为清开灵制剂的质量控制提供方法参考。

基于薄层色谱与一测多评法的沙棘颗粒质量评价方法研究

目的:优化中成药沙棘颗粒的薄层鉴别方法,建立多成分高效液相色谱一测多评方法。方法:采用薄层色谱法对槲皮素、异鼠李素和山柰素进行定性鉴别;采用高效液相色谱法,C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(–1),柱温为35℃,检测波长为365 nm,以槲皮素为内参物计算异鼠李素和山柰素含量。结果:薄层色谱鉴别方法斑点清晰、专属性好;与外标法对比,一测多评法准确度高、耐用性好。结论:优化的薄层色谱法与建立的一测多评法可靠、准确、重复性好,可为沙棘颗粒的质量标准提升提供参考。

一测多评法同时测定心脑康胶囊中9种成分

目的 建立一测多评法同时测定心脑康胶囊中丹参素钠、丹酚酸B、芍药苷、阿魏酸、羟基红花黄色素A、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、斯皮诺素、甘草苷、葛根素的含量。方法 分析采用SVEA C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相乙腈-0.2%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;检测波长280、403 nm。以葛根素为内标,计算其他8种成分的相对校正因子,计算其含量。结果 9种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 4),平均加样回收率99.83%~101.18%,RSD 1.04%~1.91%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于心脑康胶囊的质量控制。

黄葵胶囊质量标准提升

目的提升黄葵胶囊质量标准。方法TLC定性鉴别芦丁、棉皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷,建立UPLC特征图谱,一测多评法同时测定金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡糖醛酸苷、槲皮素-3′-O-葡萄糖苷的含量。结果TLC斑点清晰,分离度良好。16批样品特征图谱中有7个特征峰,分别为芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3′-O-葡萄糖苷、槲皮素。4种黄酮在各自范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率98.7%~100.5%,RSD 1.44%~1.79%。结论该方法准确稳定,专属性强,可用于黄葵胶囊的质量控制。

一测多评法同时测定感冒退烧片中4种异黄酮成分

目的:建立一测多评法同时测定感冒退烧片中葛根素、3'-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的含量。方法:采用高效液相色谱法,以Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,柱温30℃;流动相乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;检测波长为250 nm。以葛根素为内标,计算其他3种异黄酮成分的相对校正因子,计算其含量。结果:4种异黄酮成分在各自范围内线性关系良好,各相对校正因子重复性良好,一测多评法所得结果与外标法接近,相对平均偏差<5.0%。结论:QAMS法方法新颖,简捷准确,节约成本,可用于感冒退烧片的质量控制。

健脾五味丸HPLC指纹图谱的建立及多指标成分的含量测定研究

目的 建立蒙药健脾五味丸指纹图谱和多指标含量测定方法,为其质量控制提供依据。方法 采用Sepax HP-C_(18)(4.6 mm × 250 mm,5 μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL/min,检测波长为254 nm,柱温为28 ℃,进样量为10 μL;建立10 批健脾五味丸的指纹图谱,并采用一测多评法测定其中7种成分的含量。结果 健脾五味丸HPLC指纹图谱确定了11个共有峰,指认出原儿茶酸、没食子酸、胡黄连苷Ⅰ、胡黄连苷Ⅱ、鞣花酸、土木香内酯和异土木香内酯7个成分,通过一测多评法计算得到7个成分的含量值,与外标法比较10 批样品含量测定结果一致。经方法学验证,线性关系良好(r ≥ 0.999),加样回收率为96.68% ~ 104.44%。结论 所建立的指纹图谱和多指标含量测定方法准确、高效、特征性强,可为健脾五味丸的质量评价和临床应用提供参考。

基于多指标成分定量结合化学计量学评价加味玉屏风颗粒质量研究

目的:采用一测多评法测定加味玉屏风颗粒中多种成分的含量,并联合化学计量学对加味玉屏风颗粒的质量进行综合评价。方法:采用超高液相色谱法,测定12批加味玉屏风颗粒中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、橙皮苷、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸6种成分的含量。采用聚类分析、主成分分析对12批样品进行质量差异分析。结果:6种成分在各成分相应的浓度范围内线性关系良好,方法的精密度、重复性、稳定性均较好,且准确性高。一测多评法测定结果与外标法测定结果间无显著的差异。化学计量学聚类分析结果显示,12批样品聚为2类,主成分分析显示12批样品综合得分以YP03批较高。结论:建立的一测多评方法可用于加味玉屏风颗粒质量的综合评价,为加味玉屏风颗粒的质量控制提供参考。

一测多评法同时测定车前草中4种活性成分的含量

目的:建立一测多评法(Quantitative Analysis of Multi-Components by Single Marker,QAMS)同时测定车前草中原儿茶酸、儿茶素、槲皮素和木犀草素的含量,并验证此方法的可行性及适应性。方法:以槲皮素为内标物,建立其与其他3种成分间的相对校正因子,并计算4种成分含量,实现一测多评。结果:槲皮素与其他3种成分的相对校正因子分别为1.199 2、0.861 3、1.606 9;采用一测多评法测定的10批次车前草中4种活性成分的含量与外标法测定结果无显著差异。结论:该方法准确稳定,可用于车前草多指标质量控制。

HPLC-一测多评法测定参葛补肾胶囊中总黄酮醇苷的含量

目的:建立参葛补肾胶囊中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C含量的HPLC测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C 18(2.1×100 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液体系,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),检测波长为320 nm,柱温为30℃,进样量为2μL。以淫羊藿苷为内参物,采用斜率校正法计算其他3个成分的相对校正因子,比较外标法和一测多评法(QAMS)测定结果,验证一测多评法的可行性及准确性。结果:淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C分别在7.130~713.38μg·mL^(-1)、1.284~128.4μg·mL^(-1)、5.108~510.8μg·mL^(-1)、4.360~435.67μg·mL^(-1)质量浓度范围内存在良好的线性关系,线性系数R 2均大于0.99,平均加样回收率分别为104.5%、99.69%、100%、98.59%,RSD分别为1.4%、2.7%、1.2%、2.8%。朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的相对校正因子为1.31、1.19、1.17。一测多评法和外标法测定结果比较,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法准确、简便、重复性好,可作为参葛补肾胶囊中淫羊藿总黄酮醇苷的质量控制研究。