HPLC-QAMS法同时测定醒脑降压丸中6种成分的含量

目的建立高效液相色谱联合一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定醒脑降压丸中羟异栀子苷、栀子苷、木兰脂素、辛夷脂素、黄芩苷和汉黄芩苷的含量。方法以木兰脂素为内参物,建立其与羟异栀子苷、栀子苷、辛夷脂素、黄芩苷和汉黄芩苷的相对校正因子(RCFs),计算其待测成分含量,并与外标法实测值进行比对,验证一测多评法的准确性和可靠性。结果 6种成分的线性范围分别为3.59~71.80,10.77~215.40,2.06~41.20,0.69~13.80,28.83~576.60和4.96~99.20μg·mL^(-1),r值范围为0.999 5~0.999 9;平均回收率分别为98.88%,99.65%,97.74%,96.94%,100.19%和99.01%,RSD值分别为0.75%,0.92%,1.35%,1.11%,0.85%和1.06%(n=3);6种成分含量的计算值与实测值之间无明显差异。结论 HPLC-QAMS法可同时测定醒脑降压丸中6种成分的含量,该方法操作简便、结果准确,可用于醒脑降压丸的质量评价。

基于HPLC-QAMS法对清热通淋丸中7种成分的质量控制研究

目的建立高效液相一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定清热通淋丸中三叶豆紫檀苷、苦参醇I、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的含量。方法采用高效液相色谱法,以Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃。以苦参酮为内参物,建立其他6个成分的相对校正因子,计算含量。结果三叶豆紫檀苷、苦参醇Ⅰ、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的质量浓度分别在0.91~22.75μg/ml(r=0.999 5)、1.89~47.25μg/ml (r=0.999 3)、5.67~141.75μg/ml (r=0.999 7)、1.29~32.25μg/ml (r=0.999 5)、1.48~37.00μg/ml (r=0.999 6)、2.56~64.00μg/ml (r=0.999 4)、4.09~102.25μg/ml (r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为97.99%(1.42%)、98.44%(0.85%)、99.47%(0.92%)、96.98%(1.21%)、99.50%(0.74%)、100.00%(1.04%)和98.39%(1.32%),建立的高效液相一测多评法用于测定清热通淋丸中7种指标性成分的含量,一测多评法所得结果与外标法无明显差异。结论所建立的HPLC-QAMS法结果准确,可用于清热通淋丸的质量控制。

HPLC-QAMS法同时测定紫花烧伤软膏中10种有效成分的含量

目的建立同时测定紫花烧伤软膏中毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B_(1)、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素含量的高效液相色谱-一测多评法(high performance liquid chromatography-quantitative analysis of multi-components by single-marker,HPLC-QAMS)。方法用Acclaim 120 C_(18)色谱柱;流动相为乙腈-1 mL·L^(-1)磷酸,梯度洗脱;检测波长分别为330 nm(检测毛蕊花糖苷和焦地黄苯乙醇苷B_(1))、275 nm(检测羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素);以乙酰紫草素为内参物,建立其与其他9种成分的相对校正因子(relative correction factor,RCF),计算各成分的含量,与外标法(external standard method,ESM)进行比较,验证所建立的HPLC-QAMS法的准确性和可行性。结果毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷B_(1)、羟基-α-山椒素、羟基-β-山椒素、羟基-γ-山椒素、乙酰紫草素、β-乙酰氧基异戊酰阿卡宁、异丁酰紫草素、β,β′-二甲基丙烯酰阿卡宁和异戊酰紫草素质量浓度分别在3.57~178.50、1.49~74.50、2.88~144.00、1.26~63.00、0.68~34.00、4.91~245.50、2.55~127.50、2.39~119.50、3.17~158.50、7.65~382.50 mg·L^(-1)范围内与其峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9991);所得相对校正因子耐用性良好,HPLC-QAMS法和外标法含量测定结果的差异无统计学意义(P>0.05)。结论所建立以乙酰紫草素为内参物的HPLC-QAMS法结果准确、方法可行,可用于紫花烧伤软膏中多指标成分的定量控制和综合质量评价。

Application of Fingerprint Combined with QAMS in Quality Evaluation of Zhenrongdan Mixture

[Objectives] The research aimed to evaluate the quality of Zhenrongdan mixture by fingerprint combining QAMS. [Methods] The quality evaluation method was established and validated with echinacoside as internal reference to determine the contents of other components(ferulic acid, salvianolic acid B, and icariin) according to the relative correction factor. The accuracy and feasibility of QAMS were evaluated by comparison on the results between the measured value and calculation value by external standard method and QAMS. [Results] A common pattern of characteristic fingerprint of Zhenrongdan mixture by HPLC was established. Thirteen common peaks were identified, and they account for 91% of the total peak area, and four components were verified in five batches of Zhenrongdan mixture. Good similarities with correlation coefficients higher than 0.99 were found in the fingerprints. There was no significant difference between the quantitative results of the four ingredients in the five batches by external standard method and QAMS. [Conclusions] The method of fingerprint combined with QAMS could be used for the quality control of multiple components determination and fingerprint chromatography for Zhenrongdan mixture.

一测多评法同时测定参芪二皮冬茶颗粒中6种成分的含量

目的 建立一测多评法同时测定参芪二皮冬茶颗粒中毛蕊异黄酮葡萄糖苷、阿魏酸、迷迭香酸、橙皮苷、橘皮素、川陈皮素的含量。方法 分析采用Agilent Eclipse Plus-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温25℃;检测波长260、330 nm。以橙皮苷为内标,计算其他5种成分的相对校正因子,测定其含量。结果 6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率99.82%~101.18%,RSD 1.26%~2.25%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论 该方法简便可靠,重复性好,可用于参芪二皮冬茶颗粒的质量控制。

基于薄层色谱与一测多评法的沙棘颗粒质量评价方法研究

目的:优化中成药沙棘颗粒的薄层鉴别方法,建立多成分高效液相色谱一测多评方法。方法:采用薄层色谱法对槲皮素、异鼠李素和山柰素进行定性鉴别;采用高效液相色谱法,C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(–1),柱温为35℃,检测波长为365 nm,以槲皮素为内参物计算异鼠李素和山柰素含量。结果:薄层色谱鉴别方法斑点清晰、专属性好;与外标法对比,一测多评法准确度高、耐用性好。结论:优化的薄层色谱法与建立的一测多评法可靠、准确、重复性好,可为沙棘颗粒的质量标准提升提供参考。

一测多评法同时测定天麻头风灵胶囊中10种成分的含量

目的建立一测多评法同时测定天麻头风灵胶囊中天麻素、巴利森苷E、紫丁香苷、巴利森苷B、巴利森苷C、阿魏酸、巴利森苷A、蒙花苷、哈巴俄苷、肉桂酸的含量。方法分析采用GL Science Inertsil^(TM)ODS-3色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长220、280 nm。以紫丁香苷为内标,计算其他9种成分的相对校正因子,测定其含量。结果10种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9997),平均加样回收率98.53%~102.22%,RSD 1.26%~2.68%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论该方法准确、专属性强,可用于天麻头风灵胶囊的质量控制。

一测多评法同时测定心脑康胶囊中9种成分

目的 建立一测多评法同时测定心脑康胶囊中丹参素钠、丹酚酸B、芍药苷、阿魏酸、羟基红花黄色素A、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷、斯皮诺素、甘草苷、葛根素的含量。方法 分析采用SVEA C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相乙腈-0.2%甲酸,梯度洗脱;体积流量0.5 mL/min;柱温30℃;检测波长280、403 nm。以葛根素为内标,计算其他8种成分的相对校正因子,计算其含量。结果 9种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 4),平均加样回收率99.83%~101.18%,RSD 1.04%~1.91%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论 该方法准确稳定,重复性好,可用于心脑康胶囊的质量控制。

一测多评法同时测定清开灵片剂和颗粒剂中6个成分

目的 建立测定清开灵制剂中6个成分含量的一测多评(quantitative analysis of multi-components with a single-marker, QAMS)方法。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,以黄芩苷为内参物,建立与其他5个成分(R,S)-告依春、绿原酸、栀子苷、胆酸和猪去氧胆酸的相对校正因子(fk/s),并对fk/s进行耐用性考察。分别采用外标法和QAMS法测定6批清开灵片剂和4批清开灵颗粒剂中6个成分含量,比较两者的差异。结果 各个成分fk/s的重复性良好(RSD<5%);两种方法测定的含量结果差异无统计学意义;6个成分在片剂中的含量高于颗粒剂,同一厂家不同批号的片剂间成分含量存在差异。结论 所建立的一测多评法结果准确可靠,可用于清开灵制剂的多成分含量检测,为清开灵制剂的质量控制提供方法参考。

黄葵胶囊质量标准提升

目的提升黄葵胶囊质量标准。方法TLC定性鉴别芦丁、棉皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷,建立UPLC特征图谱,一测多评法同时测定金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-葡糖醛酸苷、槲皮素-3′-O-葡萄糖苷的含量。结果TLC斑点清晰,分离度良好。16批样品特征图谱中有7个特征峰,分别为芦丁、金丝桃苷、异槲皮苷、棉皮素-8-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、杨梅素、槲皮素-3′-O-葡萄糖苷、槲皮素。4种黄酮在各自范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率98.7%~100.5%,RSD 1.44%~1.79%。结论该方法准确稳定,专属性强,可用于黄葵胶囊的质量控制。

基于一测多评与化学计量分析的滇重楼及其近缘种质量评价方法

目的 建立一测多评法(quantitative analysis of multi-components by a single marker, QAMS)与HPLC指纹图谱及化学计量分析相结合的方法对滇重楼及其近缘种的质量进行评价。方法 建立滇重楼及其近缘种的指纹图谱并进行相似度分析、聚类分析(cluster analysis, CA)以及主成分分析(principal component analysis, PCA)。以重楼皂苷VII为内标,建立重楼皂苷II、重楼皂苷III、重楼皂苷VI、重楼皂苷I、重楼皂苷H、重楼皂苷D、伪原薯蓣皂苷的相对校正因子,并考察QAMS的可行性。色谱条件:采用Agilent ZORBAX SB C18色谱柱(4.6 mm×250.0 mm, 5μm);乙腈(A)和水(B)为流动相进行梯度洗脱;流速0.8 mL/min;柱温30℃;检测波长203 nm;进样量5μL。结果 建立了不同种重楼样品的指纹图谱,相似度分析显示不同种重楼样品的相似度介于0.646~0.913,表明不同种重楼间的化学成分及含量差异性较大;以重楼皂苷VII为内标,所建立的滇重楼QAMS含量测定方法,与外标法(external standard method, ESM)得到的结果进行比较无显著差异,确定了QAMS在含量测定中的可行性,将QAMS应用于滇重楼近缘种的含量测定,只有长柱重楼的全部样品(CZCL01~04)和TCCL03符合《中华人民共和国药典》的质控标准;进一步以重楼样品中的8个皂苷类成分的峰面积作为变量进行聚类分析和主成分分析,聚类分析结果显示滇重楼及其近缘种样品可以聚为4类,长柱重楼、大理重楼和腾冲重楼均可自成一类,其余种重楼无法进行区分。主成分分析中46批重楼样品大体可以分为5类,大理重楼、长柱重楼、腾冲重楼各为一类,大部分滇重楼为一类,毛重楼、矮重楼、独龙重楼样品在主成分分析中无分类趋势。结论 QAMS与指纹图谱及化学计量分析相结合的方法可以完成对滇重楼及其近缘种中8种皂苷类成分的同时快速定量。并对其质量进行评价。实验建立的分析方法准确可行,可以在保护中药资源、节省时间的前提下对滇重楼及其近缘种样品的质量进行综合评价。

基于多指标成分定量结合化学计量学评价加味玉屏风颗粒质量研究

目的:采用一测多评法测定加味玉屏风颗粒中多种成分的含量,并联合化学计量学对加味玉屏风颗粒的质量进行综合评价。方法:采用超高液相色谱法,测定12批加味玉屏风颗粒中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、橙皮苷、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸6种成分的含量。采用聚类分析、主成分分析对12批样品进行质量差异分析。结果:6种成分在各成分相应的浓度范围内线性关系良好,方法的精密度、重复性、稳定性均较好,且准确性高。一测多评法测定结果与外标法测定结果间无显著的差异。化学计量学聚类分析结果显示,12批样品聚为2类,主成分分析显示12批样品综合得分以YP03批较高。结论:建立的一测多评方法可用于加味玉屏风颗粒质量的综合评价,为加味玉屏风颗粒的质量控制提供参考。

HPLC-一测多评法测定参葛补肾胶囊中总黄酮醇苷的含量

目的:建立参葛补肾胶囊中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C含量的HPLC测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C 18(2.1×100 mm,1.8μm),流动相为乙腈-0.05%磷酸水溶液体系,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),检测波长为320 nm,柱温为30℃,进样量为2μL。以淫羊藿苷为内参物,采用斜率校正法计算其他3个成分的相对校正因子,比较外标法和一测多评法(QAMS)测定结果,验证一测多评法的可行性及准确性。结果:淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C分别在7.130~713.38μg·mL^(-1)、1.284~128.4μg·mL^(-1)、5.108~510.8μg·mL^(-1)、4.360~435.67μg·mL^(-1)质量浓度范围内存在良好的线性关系,线性系数R 2均大于0.99,平均加样回收率分别为104.5%、99.69%、100%、98.59%,RSD分别为1.4%、2.7%、1.2%、2.8%。朝藿定A、朝藿定B、朝藿定C的相对校正因子为1.31、1.19、1.17。一测多评法和外标法测定结果比较,其差异无统计学意义(P>0.05)。结论:该方法准确、简便、重复性好,可作为参葛补肾胶囊中淫羊藿总黄酮醇苷的质量控制研究。

一测多评法在含生物碱类成分中药质量控制中的应用研究

生物碱(alkaloid)是广泛分布于中药中的一类含氮有机化合物,其显著的药理活性和疗效已被大量研究文献和临床应用证实。在全球抗微生物药物耐药性背景下,生物碱类中药凭借其良好的抗菌、抗病毒活性广受关注。一测多评(quantitative analysis of multi-components by single maker,QAMS)法是一种适用于中药多成分质量控制的检测方法,可在缺少对照品条件下实现对多个待测成分的同步分析检测,在中药质量控制和评价领域得到较好验证和发展。本文梳理近15年QAMS法在生物碱类中药质量控制中的应用情况,系统分析常见问题并提出解决方法,以期为QAMS法的正确应用提供一些参考。

一测多评法同时测定红曲茯苓片中洛伐他汀和洛伐他汀酸含量

目的:建立适于红曲茯苓片质量控制的洛伐他汀和洛伐他汀酸的一测多评含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,以洛伐他汀为对照,建立与其开环产物洛伐他汀酸的校正因子关系,同时对产品中洛伐他汀和洛伐他汀酸两种成分同时进行定量检测的一测多评方法。结果:阴性样品无干扰,样品检测方法的专属性良好,洛伐他汀和洛伐他汀酸在相应的线性范围内线性关系良好,R^(2)>0.9999,精密度和重复性RSD值均小于3%,加标回收率为在98.43%~103.18%之间。洛伐他汀对洛伐他汀酸的相对校正因子为0.9000;一测多评法测定三批红曲茯苓片中洛伐他汀酸的平均含量为0.3563 mg/g,外标法测定洛伐他汀酸的平均含量为0.3668 mg/g;洛伐他汀的平均含量为1.1113 mg/g,表明所构建的一测多评法可用于红曲茯苓片的多成分质量评价研究。结论:本研究建立的产品中洛伐他汀定量方法稳定准确,专属性强,为以红曲为原料的红曲茯苓片的质量控制和深度开发提供了科学依据。

一测多评法测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量

目的建立一种一测多评法(QAMS)同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法,以黄芩苷为内参物,建立黄芩苷与芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子(f),再通过f计算出止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。同时采用外标法(ESM)测定6种黄酮类成分的含量,并比较二者的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果芦丁、甘草苷、黄芩苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素在一定范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r>0.997);精密度、稳定性、重复性均符合方法学要求;平均加样回收率范围为95.72%~100.43%,RSD范围为1.97%~3.22%。芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子分别为6.426、3.939、3.215、41.140、0.555,且重现性良好。一测多评法的计算结果与外标法测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论以黄芩苷为内参物建立的一测多评法,同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量,方法操作简便,准确可靠,可用于止血化痔合剂的质量评价。

一测多评法同时测定沙芪浓缩丸中5种黄酮

目的 建立一测多评法同时测定沙芪浓缩丸中毛蕊异黄酮苷、水仙苷、银锻苷、异鼠李素、芒柄花素的含量。方法 该药物90%甲醇(含1%甲酸)提取液的分析采用Welch LP-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm);流动相乙腈-0.4%磷酸,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长260 nm。以毛蕊异黄酮苷为内标,计算其他4种黄酮的相对校正因子,计算其含量。结果 5种黄酮在各自范围内线性关系良好(r≥0.999 9),平均加样回收率91.90%~99.82%,RSD 0.26%~0.64%。一测多评法所得结果与外标法接近(RAD<2%)。结论 该方法准确可行,可用于沙芪浓缩丸的质量控制。

高效液相色谱指纹图谱结合一测多评的山楂与野山楂有机酸比较研究

该研究采用高效液相色谱法,利用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),建立了山楂与野山楂中有机酸类成分HPLC指纹图谱,并以D-奎宁酸为内参物,建立了同时D-奎宁酸、L-苹果酸和枸橼酸的一测多评分析方法。对33批山楂样品和10批野山楂样品进行指纹图谱相似度分析、聚类分析、主成分分析和偏最小二乘法-判别分析。结果显示,山楂和野山楂所含有机酸类成分具有明显差别。山楂中3个有机酸类成分总量[(13.02±2.85)%]明显高于野山楂[(7.02±0.62)%];其中,山楂中以枸橼酸含量最高[(8.94±2.00)%],L-苹果酸次之;而野山楂中以D-奎宁酸含量最高[(6.32±1.00)%]。山楂和野山楂中有机酸类成分研究可为山楂的质量评价及品种优选提供参考。

UPLC一标多测法测定淫羊藿中4个黄酮醇苷的含量

目的:建立测定淫羊藿中淫羊藿苷、朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C等4个黄酮醇苷含量的超高效液相色谱一标多测分析方法。方法:采用超高效液相色谱,以淫羊藿苷为内参物,建立朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C与淫羊藿苷之间的校正因子,并考察校正因子在不同条件下的稳定性,同时比较一标多测法(QAMS)和外标法(ESM)测定结果的差异,验证QAMS的准确性。结果:4个化合物平均回收率分别为100.95%、99.33%、100.30%、98.03%,RSD分别为1.45%、1.14%、0.77%、1.45%。该方法在不同实验条件下耐用性良好;朝藿定A、朝藿定B和朝藿定C 3个化合物相对于淫羊藿苷的校正因子分别为1.21、1.17、1.31,两种分析方法所得结果基本无差异。结论:所建立的QAMS简便、快捷、准确度高,对控制淫羊藿的质量具有参考价值。

一测多评法同时测定白芍药材及制剂中9个成分含量

目的 白芍中药产品种类繁多,为提高白芍的质量控制水平,建立同时测定白芍药材及制剂中9个成分的一测多评(quantitative analysis of multi-components with a single-marker, QAMS)方法。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法,以芍药苷为参照物,计算其他8种成分没食子酸、羟基芍药苷、儿茶素、芍药内酯苷、没食子酰芍药苷、五没食子酰葡萄糖、苯甲酸和苯甲酰芍药苷的相对校正因子(fk/s),并对fk/s进行耐用性考察。收集18批不同产地来源的白芍药材及其炮制品以及不同批号的白芍总苷胶囊,分别采用外标法和QAMS法测定9个成分含量,比较两者的差异,验证QAMS法的可行性和准确性。结果 各个成分的fk/s重复性良好,对18批样品运用QAMS法和外标法检测得到的各成分含量无显著性差异(RSD<4%);不同产地来源及炮制品的白芍药材中9个成分含量均存在较大差异,说明应提高白芍中药的质量控制标准;不同批次间白芍总苷胶囊的主要成分含量差异不大,说明制剂工艺相对稳定。结论 研究所建立的QAMS法准确性高,可用于白芍药材及其相关制剂的多成分同时定量分析,为白芍中药的全面质量控制提供方法参考。