RP-HPLC法同时测定九味羌活丸中升麻素苷等5种有效成分的含量

目的建立RP-HPLC法同时测定九味羌活丸中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷和汉黄芩苷5种有效成分的含量。方法采用Kromasil C_(18)(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,柱温为35℃,流动相为乙腈(A)-体积分数0.05%的磷酸水溶液(B),梯度洗脱,流速为1.0 m L·min^(-1),检测波长为254 nm。结果升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、黄芩苷和汉黄芩苷分别在质量浓度0.684~6.84、0.226~2.26、1.20~12.0、20.9~209和3.84~38.4 mg·L^(-1)内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.999 8,n=6),平均回收率分别为100.3%、100.2%、99.7%、101.0%和100.7%(RSD在1.0%~1.3%内,n=9)。结论该方法可用于九味羌活丸的质量控制。

DMF运载5-氟尿嘧啶在大鼠体内分布浓度的定量检测

用溴尿嘧啶作内标,制备生物样本、沉降蛋白、酯萃法提取待测组分,建立氟尿嘧啶浓度测定方法,检测"右旋糖酐-磁性层状复合氢氧化物-氟尿嘧啶"(Dextran-Magnetic LDH-Fluorouracil,DMF)给药干预大鼠体内组织中的氟尿嘧啶浓度。结果表明溴尿嘧啶内标HPLC法回收率高(>90%)、精密度好、结果重现性好(RSD<3%)、测试稳定性高;在外加磁场和多次给药干预条件下,测得不同实验组动物组织的药物浓度有统计学意义,满足验证DME磁靶向缓控释性能的分析要求。

生后大鼠颌下腺5-羟色胺及其受体含量的研究

为研究大鼠颌下腺５－羟色胺及其受体的相对含量与日龄的关系，用免疫组织化学法结合原位定量，测定了大鼠颌下腺５－羟色胺及其受体免疫反应产物的相对含量。结果发现，大鼠颌下腺５－羟色胺及其受体的相对含量在生后１～６０日龄内随日龄的增长而增多，在６０～９０日龄内基本保持恒定。

HPLC测定N-丙酰基-5-甲氧基色胺的含量及其有关物质检查

建立N-丙酰基-5-甲氧基色胺含量测定和有关物质检查的方法。采用DikmaDiamonsil C_(18)(5μ,4.6 mm×250 mm)色谱柱,流动相为乙腈-水(35:65),流速1.0mL/min,检测波长224nm。在所选定的液相色谱条件下,有关物质与N-丙酰基-5-甲氧基色胺完全分离,N-丙酰基-5-甲氧基色胺在100-400 μg/mL(r=0.9995)内线性关系良好,最低检测限为10ng,检测3批样品,主峰含量均在99.0%以上,有关物质在1%以下。此法简便、灵敏、准确,可用于N-丙酰基-5-甲氧基色胺的含量测定和有关物质检查。

利用HPLC-MS/MS联用技术定量测定人血浆中叶酸及5-甲基四氢叶酸浓度的方法学研究

为定量测定人血浆中叶酸及 5 -甲基四氢叶酸浓度 ,建立了利用 HPLC-MS/ MS联用技术的分析方法。血浆样品在弱光环境下 ,经 SPE萃取处理 ,以 5 m mol/ L甲醇与乙酸铵 ( p H6.0 ) ( V(甲醇 ) / V(乙酸铵 ) =2 5∶ 75 )为流动相 ,经 Waters XTerra MS C1 8色谱柱初步分离 ,利用串联质谱多反应离子监测 ( MRM)方式监测叶酸、5 -甲基四氢叶酸和内标的正离子 ,然后进行定量测定。结果表明 :叶酸和 5 -甲基四氢叶酸的最低定量浓度均为 0 .5 ng/ m L;线性范围为 0 .5～ 2 5 ng/ m L,标准曲线相关系数 r≥ 0 .99,精密度和准确度均在± 1 5 %之内。此法专属、灵敏、准确 ,可以用于测定人血浆叶酸和 5

HPLC测定N-[2-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-)乙基]己酰胺的含量及其有关物质

目的 建立了N-[2-（5-甲氧基-1H-吲哚-3-）乙基]己酰胺（MLT-5）含量测定和有关物质检查的方法。方法 采用Zorbax 300SB C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，流动相为甲醇-水（55：45），流速1．0mL·min^-1，检测波长277nm。结果 在所选定的液相色谱条件下，有关物质与主药完全分离，MLT-5在0．05～40mg·L^-1（r=0．9997）内线性关系良好，最低检测限为0．4ng。检测了3批样品，主峰含量均在99．0％以上，有关物质在1％以内。结论 此法简便、灵敏、准确，可用于MLT-5的含量测定和有关物质检查。

Microscopic and ultramicroscopic localizations and quantitative analysis of 5-HT receptors in human placentas

The localizations of 5-hydroxytryptamine receptor (5-HTR) at light and electron microscopic levels and its quantitative analysis in human placentas were studied by using immunohistochemistry and in situ hybridization. Both syncytiotrophoblast and cytotrophoblast in placental villi and fetal white blood cells in villose capillary cavity showed 5-HT receptor immunoreactivity, with 5-HT 1A receptor mRNA hybridized signal detected in cytoplasm. But the stromal cells and capillary endothelium in placental villi showed 5-HT receptor immunoreactivity in cytoplasm, without 5_HT\-1A receptor mRNA hybridized signal detected. This suggested that two layers of trophoblast cells may produce 5-HT 1 and 5-HT 2 receptors, that the stromal cells and capillary endothelium in placental villi may only produce 5-HT 2 receptor. By immunohistochemistry at electron microscopic level, the small flattened vesicles and large dense cored vesicle within trophoblast cells showed 5-HT receptor immunoreactivity. This suggested that it may be the result of 5-HT receptors internalization and transportion. Using a quantitative immunohistochemical method, the contents of 5-HT receptor in placenta were higher during the 6th week of gestation, and decreased in 7th and 8th, reoccurred the second peak in the 9th, reduced gradually during the 10th, 20th and 40th of the gestation period. These changes paralleled the contents of 5-HT in the authors’ studies, reflecting that 5-HT may be one of the most important bioactive substances in placental self-regulation.

定量核磁共振法测定4种磷酸二酯酶-5抑制剂的含量

目的:建立定量核磁共振法(qNMR)测定那莫西地那非、豪莫西地那非、硫代艾地那非和伪伐地那非4种磷酸二酯酶-5(PDE-5)抑制剂的含量。方法:采用Bruker Ascend 500 MHz核磁共振仪采集一维定量氢谱,90°脉冲,延迟时间为20 s,采样次数为64次,测定温度25℃,以对苯二甲酸二甲酯为内标,氘代氯仿(CDCl3)为溶剂,对4种PDE-5抑制剂进行定量研究。结果:样品与内标物定量峰分离良好,4种成分在各自线性范围内线性关系良好(R2>0.999 2),进样精密度和重复性好。那莫西地那非、豪莫西地那非、硫代艾地那非和伪伐地那非的含量(n=6)分别99.2%(RSD=0.27%)、99.4%(RSD=0.28%)、99.1%(RSD=0.18%)和99.3%(RSD=0.24%),与质量平衡法测定结果比较,两者基本一致。结论:本文建立的q NMR法测定4种PDE-5抑制剂的含量准确可靠,简便快速,为该类成分的含量测定和对照品的标定提供了新的测定方法。

HPLC法测定小儿止痒胶囊中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的含量

目的建立HPLC法测定小儿止痒胶囊中防风所含升麻素苷和5-O－甲基维斯阿米醇苷含量的方法。方法采用Diamonsil（TM）钻石C18（250mm×4．6mm，5μm），甲醇-水（40：60）为流动相；流速为1．0mL／min，检测波长为254nm。结果升麻素苷在0．3888—0.9072μg范围内线性良好（r=0．9999），5-O-甲基维斯阿米醇苷在0．1272—0．7632μg范围内线性良好（r=0．9996）。升麻素苷平均回收率为102．3％，RSD为2．59％（n=5）；5-O-甲基维斯阿米醇苷平均回收率为98．1％，RSD为1．53％（n=5）。结论本方法简便，结果准确。

血竭中5-羟基-7-甲氧基黄烷的含量测定

目的：建立血竭药材中有效成分5-羟基-7-甲氧基黄烷的HPLC含量测定方法。方法：Dikma Diamonsil C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5μm）,流动相为乙腈-水（60∶40）,检测波长210 nm,柱温30℃,流速1 mL.min-1。结果：5-羟基-7-甲氧基黄烷在0.01~0.10μg呈良好线性关系,r=0.999 9。平均回收率100.1%（n=6）。结论：该方法简便快速、结果准确,可用于检测血竭药材中有效成分5-羟基-7-甲氧基黄烷的含量。

基于药效学跟踪试验提取分离龙须藤总黄酮及其含量测定

目的：考察龙须藤的最佳乙醇提取浓度,并以硅胶柱色谱法分离得到龙须藤总黄酮,对分离得到的龙须藤总黄酮进行含量测定。方法：采用药效学跟踪试验,参考龙须藤不同浓度乙醇提取物对膝关节炎症模型大鼠的抗炎作用,选取龙须藤的最佳乙醇提取浓度,采用硅胶柱色谱方法从龙须藤乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到龙须藤总黄酮,HPLC对分离得到的龙须藤总黄酮进行含量测定。结果：龙须藤的70%乙醇提取物抗炎作用最好,采用溶剂系统为二氯甲烷-乙酸乙酯（8∶1~4∶1）梯度洗脱分离得到的龙须藤总黄酮中3＇,4＇-亚甲二氧基-5＇,5,6,7-四甲氧基黄酮、3＇,4＇,5＇,5,7-五甲氧基黄酮含量分别为21.3%,46.7%。结论：龙须藤的最佳乙醇提取浓度为70%,溶剂系统为二氯甲烷/乙酸乙酯（8/1~4/1）梯度洗脱分离龙须藤总黄酮的方法可行。

基于降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱的多指标成分定量方法研究

目的建立以降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱参照峰为基准,计算多指标成分含量的定量方法。方法建立降脂宁调脂抗氧化有效部位HPLC指纹图谱,以2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为对照品,以其色谱峰为基准,计算主要色谱峰相对含量。结果确定10个色谱峰为多成分定量指标,计算3批降脂宁调脂抗氧化有效部位中10个成分的总量,以2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷计分别为12.40%、12.44%和11.85%。结论建立的多指标成分定量方法简便、可行,可作为降脂宁调脂抗氧化有效部位质量控制和评价方法之一。

复方芪麻胶囊UPLC指纹图谱建立和同时测定8种成分研究

目的 建立复方芪麻胶囊（CQC）的UPLC指纹图谱，并同时测定指标成分天麻素、5-羟甲基糠醛（5-HF）、毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷（CG）、野漆树苷、柚皮苷、芒柄花素-7-O-β-D-葡萄糖苷（FG）、毛蕊异黄酮、芒柄花素的量，为评价CQC质量提供依据。方法 分析采用Agilent Eclipse C18柱（100 mm×4.6 mm，3.5 μm），以乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱，体积流量0.3 mL/min，柱温25℃，检测波长为265 nm。结果 得到分离度和重现性良好的CQC UPLC指纹图谱，相似度在0.98以上，标示出22个共有峰；8种成分中天麻素在5.976~29.880 μg/mL、5-HF在10.596~52.980 μg/mL、CG在2.697~13.485 μg/mL、野漆树苷在2.262~11.309 μg/mL、柚皮苷在40.768~203.840 μg/mL、FG在5.825~29.126 μg/mL、毛蕊异黄酮在0.372~1.858 μg/mL、芒柄花素在1.888~9.440 μg/mL线性关系良好，r均〉0.999 9，加样回收率分别为1.04%、1.30%、1.81%、1.41%、1.29%、1.01%、1.48%、1.29%。10批样品中天麻素量在2.883~3.491 mg/g，5-HF量在1.710~3.791 mg/g，CG量在0.107~0.286 mg/g，野漆树苷量在0.157~0.346 mg/g，柚皮苷量在8.853~10.726 mg/g，FG量在0.282~0.692 mg/g，毛蕊异黄酮量在0.097~0.135 mg/g，芒柄花素量在0.041~0.063 mg/g。结论 同时对CQC UPLC指纹图谱和8个指标成分进行分析，方法快速、简便、准确，可以作为有效评价该制剂质量的方法。

HPLC同时测定不同产地石吊兰中的4种黄酮类成分

采用反相HPLC法同时测定石吊兰药材中吊石苷C、去甲氧基苏打基亭、5-羟基-6,8,4'-三甲氧基-7-O-β-D-葡萄糖黄酮苷和石吊兰素等4种黄酮类成分的含量。采用Cosmosil 5 C18-AR-II色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸水(B)溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,进样量20μL,波长329 nm。4种黄酮类成分均能达到基线分离,在线性范围内的线性关系良好(r^(2)>0.9991),精密度、重复性、稳定性均满足分析方法的要求;加样回收率为98.82%~101.08%,RSD为1.36%~1.79%。14批不同产地石吊兰样品中4种黄酮类成分的含量存在显著差异。所用方法精度高、简便,可作为石吊兰的质量控制方法。

HPLC测定防风通圣丸中2个色原酮苷类成分含量

目的:建立防风通圣丸中2个色原酮苷类成分的含量测定方法。方法:采用HPLC法,对防风通圣丸中的升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷进行定量分析。kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-乙腈-0.1%磷酸(24∶12∶64);检测波长254 nm。结果:升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷分别在0.012 5～0.250,0.010 8～0.216μg(r>0.999 9)线性关系良好,平均回收率>96.75%,RSD<1.65%。结论:该研究同时进行升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷的定量分析,可作为防风通圣丸的质量控制标准。

柱前衍生化HPLC法测定1种酰氯类化合物

目的:建立高效液相色谱法测定1种酰氯类化合物5-氯噻吩-2-甲酰氯。方法:采用Ameritech Accurasil C8(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以0.01 mol·L^-1磷酸水溶液为流动相A,乙腈为流动相B进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温35℃,检测波长274 nm;以无水甲醇为衍生化试剂,三乙胺为缚酸剂,经衍生后进样测定。结果:5-氯噻吩-2-甲酰氯含量检测方法的专属性好;在1.012~2.040 mg·mL^-1浓度范围内线性良好r=0.9982,n=5;精密度、溶液稳定性好,RSD分别为0.040%(n=6)和1.2%(n=7);平均回收率(n=9)为99.0%,RSD为0.80%;色谱条件发生微小变化时,方法耐用性好;5-氯噻吩-2-甲酸的定量下限和检测下限分别为1.871μg·mL^-1和0.6237μg·mL^-1,5-氯噻吩-2-甲酰氯的定量下限和检测下限分别为1.562μg·mL^-1和0.4686μg·mL^-1;3批供试品中特定杂质和最大单一未知杂质含量均小于1.0%,主成分含量分别为98.5%、98.4%、98.4%。结论:本方法适用于5-氯噻吩-2-甲酰氯的测定,对于其他酰氯类化合物的测定也有重要的参考价值。

一测多评法测定防风中6个有效成分的含量

目的:建立测定防风中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、补骨脂素、欧前胡素6个成分含量的一测多评方法,并验证该方法的准确性和可行性。方法:采用液相色谱法,应用Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.02%的磷酸水溶液(B)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),柱温30℃,检测波长210 nm。以升麻素苷为内参物,分别建立升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、补骨脂素、欧前胡素的相对校准因子,利用该相对校准因子计算其他5个成分含量,同时利用外标法测定各成分含量,比较2种测定方法的差异,验证一测多评法的可行性和适用性。结果:12批不同产地和批号的防风中6个有效成分采用一测多评法与外标法的实测值之间无显著性差异。12批防风中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、补骨脂素、欧前胡素在测定范围内线性良好,含量范围分别为0.21%~0.49%、0.060%~0.16%、0.20%~0.41%、0.11%~0.26%、0.029%~0.093%、0.066%~0.14%。结论:一测多评法测定防风中升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、亥茅酚苷、补骨脂素、欧前胡素6个成分准确可行,可用于防风的质量控制。