金铁锁三萜类成分对衣霉素诱导RA-FLS细胞内质网应激的影响

目的基于内质网通路探索金铁锁三萜类成分皂皮酸、丝石竹皂苷元对衣霉素诱导类风湿性关节炎成纤维细胞(RA-FLS)的作用机制。方法以衣霉素诱导RA-FLS细胞为研究对象,给予皂皮酸、丝石竹皂苷元进行干预,检测细胞增殖活性,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移能力,Western blot法检测细胞中转录激活因子6(ATF-6)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(caspase-12)、抗凋亡Bcl-2蛋白表达,RT-qPCR法检测细胞中ATF-6、GRP78、CHOP mRNA表达。结果与模型组比较,皂皮酸、丝石竹皂苷元各剂量组RA-FLS细胞TNF-α水平均降低(P<0.01),细胞增殖、迁移能力均减弱(P<0.01),凋亡率均升高(P<0.01),细胞ATF-6、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),CHOP、caspase-12蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);皂皮酸、丝石竹皂苷元低、中剂量组GRP78蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01);皂皮酸、丝石竹皂苷元中剂量组ATF-6、GRP 78 mRNA表达降低(P<0.01),CHOP mRNA表达升高(P<0.01)。结论皂皮酸、丝石竹皂苷元可能通过调节内质网信号通路,降低相关炎症因子分泌,抑制RA-FLS细胞增殖及迁移,诱导细胞凋亡,起到对类风湿性关节炎的保护作用。

HPLC同时测定丝石竹药材中丝石竹皂苷元和皂皮酸的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定丝石竹药材中丝石竹皂苷元和皂皮酸两个齐墩果烷型苷元含量的方法。方法丝石竹药材经酸水解后,采用HPLC测定丝石竹皂苷元和皂皮酸含量。采用Agilent Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇-乙腈-0.1%磷酸水溶液(51:9:40)为流动相,流速1.2 m L/min,检测波长210 nm,柱温25℃,进样量10μL。结果丝石竹皂苷元和皂皮酸进样量分别在2.920~17.52μg(r=0.9997)和8.040~48.24μg(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系。两者平均回收率分别为99.3%(RSD=0.82%)和98.5%(RSD=1.2%)。结论该方法简便、准确、重复性强,可作为同时测定丝石竹药材中丝石竹皂苷元和皂皮酸含量的方法。

2D—NMR对皂皮酸—3—氧—葡萄糖醛酸^(13)C,~1H的完全指定——介绍HMBC和HOHAHA

HMBC是一种测定远程偶合~1H—^(13)C相关的十分灵敏的方法,特别适用于检测和甲基质子远程偶合(~2J,~3J)的碳.HOHAHA谱显示出多次Relay信息,选择适当参数可通过一次实验得到独立自旋体系中所有质子相关信息.本文用HMBC和HOHAHA实验结合同核(~1H)COSY和导核(^(13)C-~1H)COSY确认了Qwhaic acid—3—O—glucuronic acid分子中所有^(13)C和~1H的归属.

苗药金铁锁质量标准完善研究

目的：控制金铁锁药材质量,完善2010年版中国药典中金铁锁药材质量标准,优化浸出物测定项,建立显微横切面鉴别和含量测定标准。方法：采用横切面及粉末显微法、正相分配薄层色谱法进行鉴别;采用中国药典附录方法,对水分、总灰分、浸出物进行测定;采用HPLC法测定酸水解后金铁锁皂皮酸苷元的含量,色谱柱为Zorbax Eclipse Plus C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温25℃,检测波长210 nm。结果：金铁锁横切面和粉末的显微特征与文献描述基本一致;薄层色谱斑点清晰,分离好;含量测定皂皮酸进样量在1.049～20.98μg范围内线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率为98.4%（RSD为3.0%,n=6）,皂皮酸含量不低于0.10%。结论：本文优化后的浸出物测定方法以及建立的显微横切面鉴别和含量测定方法可为进一步完善金铁锁药材质量标准提供依据。