同时检测牛奶中喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法研究

【目的】喹诺酮类药物和庆大霉素均为高效、广谱抗菌药物,对大多数革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都具有显著的抗菌效果,是中国畜牧业和水产业中常用的两类兽药。由于这两类药物在动物源性食品中的残留可能导致对人类健康的危害,因此,为了保护消费者的健康,研究和制定动物源性食品中同时检测这两类药物的残留检测方法对完善中国的食品安全监测体系具有重要意义。【方法】建立了同时检测牛奶中13种喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,并对喹诺酮类和庆大霉素单克隆抗体按比例进行混合标记。同时,采用方阵法系统研究了胶体金标记这两类抗体时的pH值和抗体用量对灵敏度的影响,并对这两类药物抗原的包被条件进行选择确定。在此基础上研发出可同时检测牛奶中13种喹诺酮类药物和庆大霉素的胶体金快速检测试纸条,试纸条采用直接竞争法原理。【结果】该方法可同时检测恩诺沙星、环丙沙星、诺氟沙星、氟甲喹、培氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、噁喹酸、麻保沙星、氟罗沙星、奥比沙星、达氟沙星和洛美沙星这13种喹诺酮类药物和庆大霉素,对其他喹诺酮类药物如:沙拉沙星、二氟沙星、司帕沙星、帕珠沙星等无交叉反应,同时对其他氨基糖苷类药物如:链霉素、新霉素、卡那霉素等也无交叉反应。该试纸条对牛奶中这13种喹诺酮类药物和庆大霉素的检测限均为20 ng·mL-1,完全满足国家对这两类药物的残留限量要求。牛奶样本直接检测,无需处理,整个检测过程5 min内完成。【结论】采用该方法和HPLC-MS/MS对60份牛奶盲样进行比对试验,阳性样品全部检出,同时筛选方法未出现假阳性和假阴性现象,二者的测定结果基本相符,表明该方法准确可靠,适用于现场大批量样本的快速检测和筛选。实际操作过程中,可以采用胶体金免疫层析对样品进行现场快速初筛;筛选的疑似阳性样品,可以采用HPLC-MS/MS方法对样品中QNS和GEN的含量进一步确认。

纳米标记免疫层析法在农药残留检测中的应用研究进展

农药残留超标已成为影响农产品质量安全的重要问题,迫切需要探寻开发灵敏、准确、可靠、便捷且适用性强的农药残留快速检测方法。免疫层析法是将抗原抗体特异性免疫反应和色谱层析分离技术相结合的一种快速检测方法,其中,基于胶体金标记的免疫层析技术以其便捷、成本低、可视化等优点而受到普遍欢迎。近年来随着量子点、时间分辨荧光微球、上转换发光纳米粒子等新型纳米标记材料的出现,免疫层析技术得到了广泛发展。文章从标记类型(非共价作用标记及共价作用标记)及标记材料(胶体金、纳米碳、量子点、上转换发光纳米粒子、磁性纳米颗粒、时间分辨荧光微球及荧光乳胶颗粒)等方面,综述了不同纳米材料标记的免疫层析技术及其在农药残留检测领域的研究及应用进展,可为深入开展农药残留免疫层析技术研究提供参考。

ELISA和GICA快速检测水产品中氯霉素残留的比较

比较了水产品中氯霉素残留的ELISA和GICA检测方法。经测定,GICA检测限为1.000μg/kg。GICA对ELISA的阴性符合率为94.7%,阳性符合率为92.3%,总符合率为92.5%。结果表明:GICA方法操作简单、快速、特异性强、重复性好,适合水产品中氯霉素残留的现场筛选。

胶体金免疫层析法对组织样品中磺胺甲噁唑残留的快速检测

研究了用于快速检测组织样品中磺胺甲嗯唑残留的胶体金免疫层析检测试剂。采用免疫竞争法，将抗磺胺甲嗯唑多克隆抗体-胶体金复合物包被在胶体金结合垫上，同时将人工合成的磺胺甲嗯唑抗原包被在硝酸纤维素薄膜表面作为检测线（T线），将抗磺胺甲嗯唑多克隆抗体的羊抗兔二抗包被在硝酸纤维素薄膜表面作为质控线（C线）。T线的人工抗原与待测样品中的磺胺甲嗯唑竞争结合胶体金标记的磺胺甲嗯唑多克隆抗体，通过T线与C线的显色对比读出结果。采用该检测试剂检测组织试样时，定量下限可达20μg／L，整个检测过程只需3—5min，且与磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、盐酸克伦特罗、四环素、青霉素、链霉素无交叉反应。检测试剂具有较高的灵敏度及特异性，操作便捷，稳定可靠，可作为组织中磺胺甲嗯唑残留现场监控的有效筛检手段。

基于纳米材料的免疫层析试纸在兽药残留检测中的应用

兽药残留是食品安全的重要影响因素,开发兽药残留检测方法是保证食品安全的重要手段。免疫层析试纸是一种操作简单、生产成本低且具有良好灵敏度的检测方法,适用于现场检测、大规模食品筛选,在兽药残留检测中具有巨大的应用价值。纳米材料可提供特殊的检测信号,是影响免疫层析试纸检测灵敏度和定量分析的关键因素。文章主要对胶体金、磁性纳米材料、量子点以及时间分辨荧光微球这几种纳米标记材料进行介绍,指出各自的优缺点及应用情况,并对该技术在兽药残留检测中的应用趋势进行展望。

基于胶体金免疫层析法快速筛查水产品中的药物残留

[目的]应用现代检测技术,对水产品中药物残留实施监控,推动水产品市场准入制度和基地准出制度的实施。[方法]运用胶体金免疫层析法对采集的水产样品中可能残留的违禁药物进行快速筛查。[结果]试验显示,此方法检测限能达到:氯霉素≤0.5μg/kg、孔雀石绿≤1.0μg/kg、硝基呋喃代谢物≤1.0μg/kg、氟喹诺酮≤10μg/kg,在一定程度上满足了基层对水产品质量安全监管需要,大大减少了基层对水产品安全检测的盲区。[结论]胶体金免疫层析法(GICA)是一种新型快速免疫检测技术,具有特异性强、操作简便快捷、检测成本低等优点,研究可为水产品中的违禁药物残留监控提供技术支持。

生物膜干涉技术快速定性检测牛乳中喹诺酮类药物残留

[目的]基于生物膜干涉技术建立一种快速检测牛乳中喹诺酮类抗生素残留的方法。[方法]通过疏水作用力在APS光线生物传感器探头末端固定环丙沙星-BSA偶联物,结合纳米金-喹诺酮类抗生素单克隆抗体偶联物,建立了检测牛乳中喹诺酮类抗生素的方法。[结果]所建立的检测方法具有良好的灵敏度,比免疫层析法至少高出1倍。该检测方法还具有良好的特异性,与浓度1 000ng/ml的黄曲霉毒素M1、青霉素G、头孢噻呋、庆大霉素、卡那霉素、链霉素、泰乐菌素、氯霉素、三聚氰胺无交叉反应。该方法还具有良好的重复性,不同基质牛乳检测对检测结果无显著影响。分别采用免疫层析试纸条和建立的金标记BLI检测方法检测43份牛乳(原奶)样品中的喹诺酮类抗生素残留,二者检测结果一致。[结论]生物膜干涉技术检测牛乳中的喹诺酮类抗生素为一种简便、快捷的检测方法,可以用于牛乳中喹诺酮类抗生素残留的快速定性检测。

胶体金免疫层析法同时检测肉类食品中八种兽药残留物

目的研制八联盘检测肉类食品中多种兽药残留物。方法将应用胶体金免疫层析法制备好的8种试纸条组装成多联检测盘,评价该盘检测兽药残留物的灵敏度、准确度、特异性和稳定性。结果通过在空白样本中加标,确定了不同样本(猪肉、牛肉和羊肉)中14种兽药的检测限;60份样本的八联盘检测结果与仪器确证结果一致,检出禁用药和限用药各6份,符合率达100%;检测盘中的试纸条与类似药物之间无交叉反应,特异性好;八联盘在室温条件下可保存至少12个月,稳定性较好。结论该八联盘操作简便、快速、检测结果准确、稳定,为兽药残留现场监控提供了有力工具。

基于胶体金免疫层析法快速筛查博罗县水产品中的药物残留

应用胶体金免疫层析技术,对采集的水产样品中可能残留的违禁药物进行快速筛查。结果表明,博罗县水产品中仍出现违禁药物残留检出情况,氯霉素和孔雀石绿检出率高达3.36%和2.98%。对博罗县水产品中药物残留实施监控提供了技术支持,也进一步推动了水产品质量安全检测体系的建立。

兽药残留八联检测盘在调查肉类兽药残留中的应用

目的比对国标方法,评估自主研制兽药残留八联检测盘结果的可靠性,为新产品的应用提供依据。方法随机采取北京市大兴区市场上销售的猪、牛、羊的肌肉样品,应用兽药残留八联检测盘测定是否含有兽药残留,对检测出的阳性样品再用其相应的国标方法进行复检。结果共检测了176份样品,有21份样品中含有兽药残留,检出率为11.9%。其中11份样品含禁用药物克伦特罗、沙丁胺醇、氯霉素、培氟沙星和诺氟沙星,剩余10份样品中的恩诺沙星和磺胺类药物在残留限量范围内。结论市场上的肉类中仍有部分兽药残留。