基因工程猪生长激素复性技术的研究

对基因工程猪生长激素 (r pGH)体外复性条件进行研究 ,提取包涵体用 6mol L盐酸胍溶解 ,空气氧化 80h后转入复性缓冲液中开始重组蛋白复性 ,结果表明 ,采用透析复性法———复性缓冲液Ⅲ ( 0 2 5 %Na2 CO3 ,0 2 %乳糖 ,0 2 %甘露醇 ) ,pH8 5 ,透析 5～ 6次 ,可较好恢复r pGH生物活性。β 巯基乙醇、谷光苷肽等添加剂对r pGH的体外复性影响不显著。复性后蛋白浓缩液进行去垂体大鼠试验 ,大鼠增重明显 ,表明得到了正确折叠的较高生物活性的r pGH。

影响基因工程猪生长激素复性效率的因素

对影响基因工程猪生长激素 (r pGH)体外复性效率的因素进行了研究 ,结果表明 :复性液组成、变性剂种类、复性方法的选择、变复性pH对r pGH体外复性效率有较大影响 ,β 巯基乙醇、谷光苷肽等添加剂对r pGH的体外复性影响不显著。提取包含体用 6mol L盐酸胍溶解 ,空气氧化 80h后转入复性缓冲液中开始重组蛋白复性 ,采用透析复性法———复性缓冲液Ⅲ (0 .2 5 %NaHCO3,0 .2 %α 乳糖 ,0 .2 %甘露醇 ) ,pH9.0 ,透析 5～ 6次 ,可较好地恢复r pGH生物活性。复性后蛋白浓缩液进行去垂体大鼠试验 ,大鼠增重明显 ,表明得到了正确折叠的较高生物活性的r pGH。