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长链非编码RNA LINC00987通过细胞色素P450途径促进AML细胞凋亡的机制研究
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作者 杨彭月 刘暄 +3 位作者 王艳 徐玲 李扬秋 余锡宝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期265-273,共9页
目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987)... 目的:探讨长链非编码RNA LINC00987在抗肿瘤药物诱导的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞凋亡中的作用及分子机制。方法:通过RT-qPCR检测AML中的LINC00987表达水平。构建稳定敲减LINC00987基因的Molm13细胞(shLINC00987),通过Annexin V/PI检测LINC00987低表达对阿糖胞苷诱导AML细胞凋亡的影响。对LINC00987共表达基因进行信号通路富集,分析LINC00987的表达对细胞色素家族基因的影响。结果:与健康对照组相比,lncRNA LINC00987在AML细胞系和AML病人标本中均显著降低,而在抗AML治疗后缓解组中高表达;此外,低表达LINC00987与AML患者预后不良有关。抗肿瘤药物阿糖胞苷、阿霉素、三氧化二砷和维奈托克可显著诱导AML细胞系Molm13和MV411的LINC00987表达。下调LINC00987的表达可抑制阿糖胞苷诱导的Molm13细胞凋亡。进一步研究发现,LINC00987共表达基因可富集于细胞色素P450(cytochrome,P450,CYP450)介导的氧化应激通路/网络,且LINC00987的表达与CYP450家族基因CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的表达水平呈正相关。下调LINC00987的表达则可抑制阿糖胞苷诱导的CYP11B1、CYP2U1和CYP2C9的mRNA表达。结论:LINC00987可以作为AML的预后标志物,其可能通过CYP450介导的氧化应激途径促进阿糖胞苷诱导的AML细胞凋亡。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 LINC00987 细胞色素p450 阿糖胞苷 细胞凋亡
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细胞色素P450-RhFRED人工融合酶的研究进展与应用
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作者 张驰 苏昕 常尊学 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2024年第4期493-499,525,共8页
来自于红球菌Rhodococcus sp.NCIMB 9784的P450RhF是一个自给自足型的细胞色素P450酶,它的血红素结构域主要负责控制酶的底物特异性,P450还原酶伴侣蛋白RhFRED与细胞色素P450血红素结构域天然融合在一起,电子主要从蛋白分子内转移到P45... 来自于红球菌Rhodococcus sp.NCIMB 9784的P450RhF是一个自给自足型的细胞色素P450酶,它的血红素结构域主要负责控制酶的底物特异性,P450还原酶伴侣蛋白RhFRED与细胞色素P450血红素结构域天然融合在一起,电子主要从蛋白分子内转移到P450血红素结构域。依据融合型P450RhF自给自足的特性,有学者利用P450RhF的还原伴侣蛋白RhFRED,与其它P450构建人工融合酶P450-RhFRED,来实现多种细胞色素P450基因的功能表达。基于此建立的P450-Rh-FRED融合文库对未知功能P450的催化功能探索有很大意义,P450-RhFRED融合酶技术也可用于开发已知细胞色素P450酶的工业应用。 展开更多
关键词 细胞色素p450 还原伴侣蛋白 融合蛋白 RhFRED
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母体用药及母体细胞色素P450遗传多态性与新生儿罹患先天性心脏病的相关性分析
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作者 吴小妹 李慧 +1 位作者 王丽 胡春霞 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期588-594,共7页
目的研究母亲怀孕早期用药及细胞色素P450(CYP450)遗传多态性与后代先天性心脏病(CHD)的关联性。方法选取127名CHD胎儿产妇为观察组,132名非CHD胎儿产妇为对照组。调查双方特征及用药史,检测CYP450多态性。用Logistic回归分析产妇药物... 目的研究母亲怀孕早期用药及细胞色素P450(CYP450)遗传多态性与后代先天性心脏病(CHD)的关联性。方法选取127名CHD胎儿产妇为观察组,132名非CHD胎儿产妇为对照组。调查双方特征及用药史,检测CYP450多态性。用Logistic回归分析产妇药物使用与CYP450基因变异与后代CHD风险关联。结果观察组产妇使用促排卵药、降压药、抗生素、抗抑郁药、预防流产药、中药等后代CHD风险高于对照组(P<0.05)。rs1065852基因型中A/T和T/T及rs16947基因型中C/G和G/G相较各自基因型均增加后代CHD风险。母体CYP450基因rs1065852风险基因型(A/T或T/T)及怀孕早期用药可增加后代CHDs风险(P<0.05);CYP450基因rs16947风险基因型(C/G或G/G)同样会增加后代CHDs风险(P<0.05)。结论母体怀孕早期使用药物可能与后代患CHD有关,CYP450的rs1065852和rs16947位点与子代先天性心脏病风险显著相关。 展开更多
关键词 先天性心脏病 母体用药 细胞色素p450遗传多态性
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细胞色素P450氧化还原酶缺乏症试管助孕1例
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作者 李卓 李洋洋 +2 位作者 苏迪 朱越英 钱聪 《中国实验诊断学》 2023年第10期1230-1232,共3页
细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)中罕见的类型,为细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)基因纯... 细胞色素P450氧化还原酶缺乏症(cytochrome P450 oxidoreductase deficiency,PORD)是先天性肾上腺皮质增生症(congenital adrenal hyperplasia,CAH)中罕见的类型,为细胞色素P450氧化还原酶(cytochrome P450 oxidoreductase,POR)基因纯合或杂合变异引起的常染色体隐性遗传病。 展开更多
关键词 先天性肾上腺皮质增生症 细胞色素p450氧化还原酶 常染色体隐性遗传病 缺乏症 基因纯合 p450 CAH
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Cocktail探针药物法评价玄参对大鼠细胞色素P450酶的影响
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作者 魏艳丽 应晓倩 +4 位作者 谈文状 吴美玲 江悦娟 丁明星 杜洪建 《分析测试技术与仪器》 CAS 2023年第1期76-82,共7页
采用Cocktail探针药物法研究玄参对大鼠4种细胞色素P450(CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2)活性的影响.24只健康雄性SD大鼠(Sprague-Dawley rat)随机分为三组:A组为多剂量组,连续7 d给予150 mg/kg玄参.B组为单剂量组,第7 d给予150 mg/kg... 采用Cocktail探针药物法研究玄参对大鼠4种细胞色素P450(CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2)活性的影响.24只健康雄性SD大鼠(Sprague-Dawley rat)随机分为三组:A组为多剂量组,连续7 d给予150 mg/kg玄参.B组为单剂量组,第7 d给予150 mg/kg玄参.C组为对照组.第7 d,各组在给予玄参30 min后,再给予4种探针药物的混合溶液,其中咪达唑仑3 mg/kg、美托洛尔20 mg/kg、氯沙坦5 mg/kg、非那西汀5 mg/kg,分别用以评价CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9和CYP1A2的活性.根据设定的时间点收集大鼠血浆样品,处理后的样品采用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)法测定样品中4种探针药物的浓度.结果可见,玄参对大鼠体内氯沙坦和非那西汀的药代动力学参数无显著影响.单剂量的玄参导致咪达唑仑代谢减慢,多剂量给予的玄参显著诱导美托洛尔代谢.玄参对CYP2C9和CYP1A2的酶活性无明显影响,可以抑制CYP3A4或诱导CYP2D6的酶活性. 展开更多
关键词 玄参 鸡尾酒疗法 细胞色素p450 中药-西药相互作用 超高效液相色谱-串联质谱
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细胞色素P450家族成员21A2活性与非酒精性脂肪性肝病的关系
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作者 阿丽亚·热哈提 王黎 +1 位作者 谢松 何方平 《成都医学院学报》 CAS 2023年第4期439-443,共5页
目的比较不同人群细胞色素P450家族成员21A2(CYP21A2)表达水平和氧合活性差异,并进一步探索CYP21A2活性缺陷与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)以及NAFLD合并多囊卵巢综合征(PCOS)的相关性。方法选取2021年3月至2022年3月就诊于新疆医科大学... 目的比较不同人群细胞色素P450家族成员21A2(CYP21A2)表达水平和氧合活性差异,并进一步探索CYP21A2活性缺陷与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)以及NAFLD合并多囊卵巢综合征(PCOS)的相关性。方法选取2021年3月至2022年3月就诊于新疆医科大学第一附属医院消化内科的NAFLD患者400例,根据其是否合并PCOS,将其分为NAFLD组(n=200)和NAFLD+PCOS组(n=200);另选取同期健康女性志愿者为对照组(n=100)。采集3组研究对象的外周血样,采用反转录实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹技术检测其全血CYP21A2 mRNA和蛋白表达水平;分离血清,测定脂代谢标志物甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)含量,氧合活性标志物过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化脂质(LPO)、丙二醛(MDA)、血红素加氧酶-1(HO-1)和髓过氧化物酶(MPO)含量;同时提取外周血DNA,用竞争性等位基因特异性PCR实验分析CYP21A2-rs772588285位点突变情况。结果相较于对照组,NAFLD组与NAFLD+PCOS组患者的CYP21A2 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),但NAFLD组与NAFLD+PCOS组间差异无统计学意义(P>0.05);相较于对照组,NAFLD组和NAFLD+PCOS组TG、TC、LDL、LPO、MDA和MPO含量均增多(P<0.05),HDL、CAT含量降低(P<0.05),但NAFLD组与NAFLD+PCOS组间差异无统计学意义(P>0.05);此外,对照组和NAFLD组的CYP21A2基因rs772588285位点G/A基因型分布频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论CYP21A2表达水平及氧合活性可能与NAFLD发病存在相关性,与NAFLD是否合并PCOS可能关系不大。 展开更多
关键词 非酒精性脂肪性肝病 多囊卵巢综合征 细胞色素p450家族成员21A2 氧化应激 位点突变
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4种中药调节细胞色素P4503A4转录表达的研究 被引量:12
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作者 董海燕 邵敬伟 +3 位作者 陈剑峰 王涛 林凤屏 郭养浩 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1014-1017,1089,共5页
目的:从中药中筛选通过激活人孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)转录表达的中药;研究其诱导能力与药物浓度和作用时间之间的关系。方法:在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因试验筛选对CYP3A4转录表达有诱导作用的中药,研究... 目的:从中药中筛选通过激活人孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P450 3A4(CYP3A4)转录表达的中药;研究其诱导能力与药物浓度和作用时间之间的关系。方法:在HepG2细胞中,采用瞬时共转染报告基因试验筛选对CYP3A4转录表达有诱导作用的中药,研究其在不同浓度和不同作用时间下对PXR介导的CYP3A4的转录调节作用。结果:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达,且具有浓度-效应关系和时间-效应关系。在浓度-效应关系中,500 mg.L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间24 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO处理细胞的(6.82±0.09),(6.76±0.20),(5.49±0.13),(4.97±0.07)倍。在时间-效应关系研究中,500 mg.L-1的莪术、苍术、白术和茯苓,在作用时间为48 h时,其诱导倍数分别为0.1%DMSO作用细胞的(7.74±0.54),(7.34±0.10),(5.54±0.11),(5.32±0.18)倍。结论:中药莪术、苍术、白术和茯苓均能够通过激活PXR诱导CYP3A4的转录表达。 展开更多
关键词 莪术 苍术 白术 茯苓 细胞色素p450 3A4 人孕烷X受体
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中药对核受体介导的CYP450酶转录调节机制的研究进展
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作者 刘文凤 夏玉凤 《药物资讯》 2024年第2期73-81,共9页
近年来中药在临床上的应用日益广泛,但其成分复杂,易导致药物相互作用和不良反应的发生。细胞色素P450酶(Cytochrome P450, CYP450)家族作为最重要的I期代谢酶,负责众多内源性及外源性物质的氧化代谢。核受体(Nuclear Receptors, NRs)是... 近年来中药在临床上的应用日益广泛,但其成分复杂,易导致药物相互作用和不良反应的发生。细胞色素P450酶(Cytochrome P450, CYP450)家族作为最重要的I期代谢酶,负责众多内源性及外源性物质的氧化代谢。核受体(Nuclear Receptors, NRs)是CYP450酶的关键转录调节因子。本文将阐述常见中药及其相关成分通过NRs介导CYP450酶转录调节机制的研究进展。 展开更多
关键词 细胞色素p450 核受体 中药
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几种植物化学物对人孕烷X受体介导的细胞色素P450 3A4转录调节作用 被引量:16
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作者 刘冬英 杨敏 +2 位作者 祝慧娟 郑一凡 朱心强 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第1期8-13,共6页
目的:观察几种植物化学物是否能通过活化孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P 4503A 4(CYP 3A 4)的转录表达。方法:在人肝肿瘤细胞株H epG2细胞中,用瞬时共转染报告基因实验进行异鼠李素、大豆异黄酮、木犀草素、姜黄素和芦丁素共5种植物化学... 目的:观察几种植物化学物是否能通过活化孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P 4503A 4(CYP 3A 4)的转录表达。方法:在人肝肿瘤细胞株H epG2细胞中,用瞬时共转染报告基因实验进行异鼠李素、大豆异黄酮、木犀草素、姜黄素和芦丁素共5种植物化学物在不同浓度和不同处理时间下对PXR介导的CYP 3A 4的转录调节作用研究。结果:5种植物化学物分别作用于H epG2细胞24 h后,大豆异黄酮、木犀草素、姜黄素均能诱导PXR介导的CYP 3A 4基因的转录表达,诱导能力随浓度增强,而异鼠李素和芦丁素无类似作用。大豆异黄酮、木犀草素、姜黄素均能在1~50μm o l/L浓度之间诱导CYP 3A 4的转录表达,这3种植物化学物在50μm o l/L浓度时,诱导倍数分别为0.1%DM SO处理细胞的5.46倍、2.87倍和2.07倍。在不同处理时间的研究中,10μm o l/L和50μm o l/L大豆异黄酮、木犀草素和姜黄素均能在12 h^48 h内增强CYP 3A 4的转录表达,诱导能力随时间延长呈增强趋势。50μm o l/L大豆异黄酮、木犀草素和姜黄素作用H epG2细胞48 h后,诱导倍数分别为0.1%DM SO处理细胞的6.72倍、3.24倍和2.13倍。结论:植物化学物大豆异黄酮、木犀草素和姜黄素能通过活化PXR诱导CYP 3A 4的转录表达,异鼠李素和芦丁素则没有类似作用。 展开更多
关键词 细胞色素p450 山奈酚 肝肿瘤 肿瘤细胞 培养的 基因 受体 孕烷 木犀草素 姜黄素 异黄酮类
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山奈酚调节细胞色素P450 3A4转录表达的研究 被引量:12
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作者 刘冬英 祝慧娟 +1 位作者 郑一凡 朱心强 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第1期14-17,共4页
目的:观察山奈酚能否通过活化孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P 450 3A 4(CYP 3A 4)的转录表达。方法:在人肝肿瘤细胞株H epG2细胞中,用瞬时共转染报告基因试验检测山奈酚对PXR介导的CYP 3A 4的转录调节作用。结果:山奈酚能通过活化PXR诱导C... 目的:观察山奈酚能否通过活化孕烷X受体(PXR)诱导细胞色素P 450 3A 4(CYP 3A 4)的转录表达。方法:在人肝肿瘤细胞株H epG2细胞中,用瞬时共转染报告基因试验检测山奈酚对PXR介导的CYP 3A 4的转录调节作用。结果:山奈酚能通过活化PXR诱导CYP 3A 4的转录表达,其诱导能力随山奈酚的浓度增大和处理时间延长而呈增强趋势。山奈酚在浓度为0.001、0.01、0.1、1.0和10.0μm o l/L下,其诱导倍数分别为0.1%二甲基亚砜(DM SO)处理组的(1.31±0.27)倍、(1.45±0.36)倍、(1.96±0.50)倍、(2.90±1.07)倍和(7.93±0.75)倍(P均<0.05)。1.0和10.0μm o l/L的山奈酚在48 h内其诱导作用随诱导时间的增加而增强,处理48 h后其诱导能力分别为0.1%DM SO处理组的(3.73±1.21)倍和(8.42±1.47)倍。结论:山奈酚能通过活化PXR诱导CYP 3A 4的转录表达。 展开更多
关键词 细胞色素p450 山奈酚 肝肿瘤 肿瘤细胞 培养的 转染 基因 受体 孕烷
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大鼠肝微粒体细胞色素P450在体温调节中作用的探讨 被引量:3
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作者 狄军艳 冯甲棣 +2 位作者 张玉霞 王常慧 曹滢滢 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期201-202,207,共3页
目的 :观察发热、降温和解热时大鼠肝微粒体细胞色素P4 5 0 (CYP4 5 0 )含量的变化 ,探讨CYP4 5 0在体温调节中的作用。方法 :数字温度计连续监测大鼠体温 ,并用改进的木村和佐藤方法测量第 1次注射不同试剂后2 4hCYP4 5 0含量。以腹腔... 目的 :观察发热、降温和解热时大鼠肝微粒体细胞色素P4 5 0 (CYP4 5 0 )含量的变化 ,探讨CYP4 5 0在体温调节中的作用。方法 :数字温度计连续监测大鼠体温 ,并用改进的木村和佐藤方法测量第 1次注射不同试剂后2 4hCYP4 5 0含量。以腹腔注射生理盐水后大鼠作为对照。结果 :腹腔注射脂多糖后大鼠体温升高 (P<0 .0 5 ) ,注射后 2 4hCYP4 5 0含量下降 (P <0 .0 5 ) ;注射丁香酚后体温下降 (P <0 .0 5 ) ,注射后 2 4hCYP4 5 0含量增加(P <0 .0 5 ) ;腹腔注射脂多糖后 3h再腹腔注射丁香酚体温先升高然后恢复 ,注射后 2 4hCYP4 5 0含量与对照组差异不显著。结论 :CYP4 5 0含量变化与体温变化方向相反 ,CYP4 5 0可能有解热的作用。 展开更多
关键词 细胞色素p450 体温调节 解热
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稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系的建立
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作者 刘欢 刘亭 +6 位作者 陆定艳 孙莉 何俊奇 李勇军 王永林 孙佳 席晓岚 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期103-108,共6页
目的建立稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系,为进一步建立稳定双表达人POR与人细胞色素P450(CYP)的细胞系奠定基础。方法构建POR重组慢病毒并感染Flp-In^(TM) CHO细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,挑... 目的建立稳定表达人细胞色素P450氧化还原酶(POR)的Flp-In^(TM) CHO细胞系,为进一步建立稳定双表达人POR与人细胞色素P450(CYP)的细胞系奠定基础。方法构建POR重组慢病毒并感染Flp-In^(TM) CHO细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,挑选转染细胞进行嘌呤霉素筛选和单克隆培养,以获得稳定转染细胞株。利用丝裂霉素C(MMC)细胞毒实验、实时荧光定量PCR和Western blot法检测细胞POR的表达,获得稳定表达POR的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞株。构建稳定双表达POR和CYP2C19的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞(Flp-In^(TM) CHO-POR-2C19)和单表达CYP2C19的Flp-In^(TM) CHO细胞(Flp-In^(TM) CHO-2C19),并用环磷酰胺(CPA)测定CYP2C19酶活性。结果与感染阴性对照病毒的Flp-In^(TM) CHO细胞相比,感染POR重组慢病毒的Flp-In^(TM) CHO细胞MMC代谢活性升高,POR mRNA和蛋白的表达水平增加,说明获得了可稳定表达POR的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞。与Flp-In^(TM) CHO细胞相比,Flp-In^(TM) CHO-2C19的CPA代谢活性无显著差异,而Flp-In^(TM) CHO-POR-2C19的CPA代谢活性增加且明显高于Flp-In^(TM) CHO-2C19细胞。结论成功建立了稳定表达POR且可进一步用于CYP转基因细胞构建的Flp-In^(TM) CHO-POR细胞系。 展开更多
关键词 细胞色素p450氧化还原酶(pOR) 慢病毒 Flp-In^(TM)CHO-pOR细胞
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何首乌饮对大鼠睾丸间质细胞类固醇激素合成急性调节蛋白和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶蛋白表达的影响 被引量:8
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作者 王建明 孙静 +5 位作者 齐峰 宋庆亮 牛嗣云 回陈红 徐天戎 贺飞 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期30-36,共7页
目的探究何首乌饮影响大鼠睾丸间质(Leydig)细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)蛋白表达的变化。方法选用10~20 d的幼年雄性Wistar大鼠,分离、培养Leydig细胞,然后收集。采用氧化损伤的方... 目的探究何首乌饮影响大鼠睾丸间质(Leydig)细胞类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)和细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)蛋白表达的变化。方法选用10~20 d的幼年雄性Wistar大鼠,分离、培养Leydig细胞,然后收集。采用氧化损伤的方法建立Leydig细胞衰老模型。实验分组:间质细胞衰老模型组,何首乌饮处理组,首乌丸处理组,正常组和何首乌饮对照组。结果衰老模型组Leydig细胞St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显低于正常组和何首乌饮对照组(P<0.01)。另一方面,何首乌饮和何首乌丸干预组St AR和P450scc的免疫组织化学染色强度明显高于衰老模型组(P<0.05),何首乌饮组好于何首乌丸组。结论何首乌饮可提高睾丸Leydig细胞St AR和P450scc蛋白的表达,提高睾酮的合成能力,从而延缓Leydig细胞衰老。 展开更多
关键词 何首乌饮 睾丸Leydig细胞 免疫组织化学 免疫印迹法 类固醇激素合成急性调节蛋白 p450胆固醇侧链裂解酶 大鼠
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复方曲肽注射液对细胞色素P450酶活性的体内外影响
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作者 刘凡琪 王婧媛 +3 位作者 李楠 李自强 黄宇虹 王保和 《中国药房》 CAS 北大核心 2023年第16期1972-1978,共7页
目的考察复方曲肽注射液对细胞色素P450(CYP450)酶活性的体内外影响。方法将人肝微粒体与复方曲肽注射液(体积分数0.05%~10%)和CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4的特异性探针底物共孵育30 min,采用超高效液相色... 目的考察复方曲肽注射液对细胞色素P450(CYP450)酶活性的体内外影响。方法将人肝微粒体与复方曲肽注射液(体积分数0.05%~10%)和CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4的特异性探针底物共孵育30 min,采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术检测相应代谢产物的生成量,并计算半数抑制浓度(IC_(50));将人原代肝细胞与复方曲肽注射液(体积分数0.05%~10%)或CYP1A2、CYP2B6、CYP3A4阳性诱导剂共孵育48 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应法测定上述酶mRNA的相对表达量(即诱导倍数)。将雄性SD大鼠随机分为对照组(生理盐水+CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4探针底物8、2、1、1、10、10、8 mg/kg)和实验组(复方曲肽注射液0.9 mL/kg+CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4探针底物8、2、1、1、10、10、8 mg/kg),每组6只,采用Cocktail探针药物法,以UPLC-MS/MS技术为手段,检测各探针底物的药动学参数。结果经0.05%~10%复方曲肽注射液处理后,人肝微粒体中CYP2B6、CYP2C8、CYP2C19的活性无明显变化,未能拟合出IC50;CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6、CYP3A4的IC50分别为419.90%、97.78%、176.00%、19.42%;经0.05%~10%复方曲肽注射液处理后,人原代肝细胞(批号MHK)中CYP3A4mRNA的平均诱导倍数为4.88(且有2个浓度点的平均诱导倍数>2);经复方曲肽注射液干预后,CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19底物的AUC0-t、AUC0-∞均显著升高,CYP2C8、CYP2C19底物的CL均显著降低,CYP2C9酶底物的t1/2显著延长(P<0.05)。结论复方曲肽注射液对人肝微粒中CYP1A2、CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP3A4活性无明显的体外抑制作用,对人原代肝细胞中CYP3A4mRNA的表达有体外诱导作用,对大鼠CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19活性有体内抑制作用。 展开更多
关键词 复方曲肽注射液 细胞色素p450 酶抑制 酶诱导 药物相互作用
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中华蜜蜂细胞色素P450基因及其全长转录本的鉴定及分析 被引量:5
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作者 蔡宗兵 王紫馨 +9 位作者 吴鹰 王思懿 钱加珺 胡颖 张凯遥 顾小雨 徐细建 骆群 陈大福 郭睿 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第1期11-18,共8页
【目的】利用纳米孔(nanopore)测序技术鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫肠道中细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)基因及其全长转录本,为后续功能研究提供参考信息和基础。【方法】通过Nanopore PromethION平台对中华蜜蜂工... 【目的】利用纳米孔(nanopore)测序技术鉴定中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫肠道中细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)基因及其全长转录本,为后续功能研究提供参考信息和基础。【方法】通过Nanopore PromethION平台对中华蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道进行转录组测序。利用Guppy软件对原始读段(raw reads)进行质控以得到有效读段(clean reads)。通过识别两端引物鉴定全长转录本序列。使用BLAST工具将上述全长转录本的序列比对到Nr和GO数据库以鉴定CYP450基因及其全长转录本。采用Astalavista软件鉴定基因的可变剪接(alternative splicing,AS)事件。通过RT-PCR验证不同类型AS事件的可靠性。【结果】在中华蜜蜂工蜂4-6日龄幼虫肠道中分别测得7338627,7003419和7434233条原始读段,经质控得到的有效读段数分别为7289494,6959880和7387756条。鉴定到的非冗余全长转录本总数为48200条。共鉴定到47个CYP450基因和265条CYP450基因全长转录本。共鉴定到CYP450基因的90次AS事件,包括36次外显子跳跃事件、20次可变5′端剪接位点事件、17次内含子保留事件、9次可变3′端剪接位点事件及8次外显子互斥事件。RT-PCR结果证实随机选取的3种AS事件类型真实可靠。【结论】鉴定了中华蜜蜂的CYP450基因及其全长转录本,补充了东方蜜蜂参考基因组的相关注释,并揭示中华蜜蜂CYP450基因可通过多种AS类型产生丰富的剪接体。 展开更多
关键词 中华蜜蜂 幼虫 第三代测序技术 细胞色素p450 全长转录本 可变剪接
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中药益坤宁方调节围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶mRNA的实验研究 被引量:4
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作者 张广美 张旸旸 +1 位作者 齐群艳 廖希慧 《中医药信息》 2008年第4期76-78,共3页
目的:探讨细胞色素P450芳香化酶(aromatase cytochrome P450,P450arom)mRNA在围绝经期自然老化大鼠卵巢上的表达及意义。方法:选用11-13月龄雌性围绝经期Wistar大鼠32只。随机将其分为模型组、益坤宁组、西药对照组。另选青年大鼠10... 目的:探讨细胞色素P450芳香化酶(aromatase cytochrome P450,P450arom)mRNA在围绝经期自然老化大鼠卵巢上的表达及意义。方法:选用11-13月龄雌性围绝经期Wistar大鼠32只。随机将其分为模型组、益坤宁组、西药对照组。另选青年大鼠10只,月龄4个月,作为青年对照组,用原位杂交方法检测大鼠卵巢上的P450arom mRNA的表达。结果:P450arom mRNA在模型组卵巢上呈阴性或弱阳性表达,在青年组呈强阳性表达,两组比较差异有统计学意义(P〈0.01)。而在益坤宁组及西药对照组均呈阳性表达,与模型组比较差异均具有统计学意义(P〈0.01)。结论:中药益坤宁可促进大鼠卵巢P450arom mRNA的表达,有利于雌激素的合成。 展开更多
关键词 围绝经期 卵巢 细胞色素p450芳香化酶
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细胞色素P450基因家族参与植物硫代葡萄糖苷生物合成的研究进展
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作者 费丹丹 王军伟 +4 位作者 吴小媚 黄惠萍 毛舒香 吴秋云 黄科 《中国蔬菜》 北大核心 2023年第5期30-41,共12页
硫代葡萄糖苷是一种主要存在于十字花科植物中的重要次生代谢物,在植物病虫害防御、食品风味形成以及医学癌症治疗等方面均有重要作用。硫代葡萄糖苷的生物合成过程十分复杂,参与其合成调控的因素有很多,如遗传背景、调节基因以及植物... 硫代葡萄糖苷是一种主要存在于十字花科植物中的重要次生代谢物,在植物病虫害防御、食品风味形成以及医学癌症治疗等方面均有重要作用。硫代葡萄糖苷的生物合成过程十分复杂,参与其合成调控的因素有很多,如遗传背景、调节基因以及植物激素等。细胞色素P450酶(CYP450)是一类普遍存在于动植物、微生物以及病毒中的超基因家族编码的酶系,在硫代葡萄糖苷的生物合成中起关键作用。本文综述了CYP450的结构、分类和功能,阐述了CYP450参与硫代葡萄糖苷生物合成的作用,并介绍了CYP450响应外源刺激和环境条件的变化调控硫代葡萄糖苷合成的作用机理,以期为研究硫代葡萄糖苷合成机制提供参考。 展开更多
关键词 细胞色素p450 硫代葡萄糖苷 生物合成 外源刺激 环境条件
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益坤宁对围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶的调节作用和血清雌二醇水平的影响 被引量:1
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作者 张广美 刘国艺 +5 位作者 安牧尔 张献 刘媛媛 王吏 李桂华 张旸旸 《中医药学报》 CAS 2013年第6期37-40,共4页
目的:观察中药益坤宁方对围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶(Aromatase cytochrome P450,P450arom)的调节作用。方法:建立自然衰老的大鼠模型,将模型分为青年对照组、模型组、益坤宁组和西药对照组4组,益坤宁组和西药对照组分别给... 目的:观察中药益坤宁方对围绝经期大鼠卵巢细胞色素P450芳香化酶(Aromatase cytochrome P450,P450arom)的调节作用。方法:建立自然衰老的大鼠模型,将模型分为青年对照组、模型组、益坤宁组和西药对照组4组,益坤宁组和西药对照组分别给予中药益坤宁汤剂和西药利维爱混悬液治疗。4周后,采用免疫组织化学及Western Blot方法检测大鼠卵巢P450arom蛋白表达情况;采用放射免疫法测定大鼠空腹血清雌二醇(E2)水平。结果:P450arom蛋白在益坤宁组大鼠卵巢上均多呈阳性表达,与模型组比较均具有显著性差异(P<0.01);与西药对照组比较差异不具有统计学意义(P>0.05)。益坤宁组大鼠空腹血清雌二醇(E2)水平升高,与模型组比较差异显著(P<0.01),与西药对照组比较差异不具统计学意义(P>0.05),但其E2水平仍然低于青年对照组,差异具有显著性(P<0.05)。结论:中药益坤宁可促进围绝经期大鼠卵巢P450arom蛋白的表达。中药益坤宁可提高大鼠血清雌二醇(E2)的水平。中药益坤宁可通过促进卵巢P450arom的表达而利于雌激素的生成。 展开更多
关键词 益坤宁 围绝经期综合征 细胞色素p450芳香化酶 血清雌二醇
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细胞色素P450调节剂对DNA加合物形成的影响 被引量:1
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作者 王良君 余应年 陈星若 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期54-56,共3页
人羊膜上皮细胞FL系分别接触a-萘黄酮(0.6mmol·L ̄(-1))β-萘黄酮(20pmol·L ̄(-1))24h后,再用苯并(a)芘[B(a)P,10umol·L ̄(-1)]处理24h,用32P后标记... 人羊膜上皮细胞FL系分别接触a-萘黄酮(0.6mmol·L ̄(-1))β-萘黄酮(20pmol·L ̄(-1))24h后,再用苯并(a)芘[B(a)P,10umol·L ̄(-1)]处理24h,用32P后标记技术测定以B(a)-DNA加合物。结果发现,阳性对照组,a-萘黄酮预处理组及β-萘黄酮预处理组加合物的量分别为(加合物个数/10’个核苷酸):4.7±0.2(100%),1.8±0.9(38.3%),16.0±2.2(340.1%).该实验结果直接显示了纳胞色素P450调节剂对肿瘤发生影响的作用水平。亦为药物对致癌物代谢影响的研究提供了一种方法. 展开更多
关键词 DNA加合物 细胞色素p450 萘黄酮
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基于转录组数据的中华按蚊细胞色素P450超家族基因不同发育阶段、成蚊不同组织和吸血前后不同时期雌成蚊的表达模式分析
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作者 郭迎澳 陈斌 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期1443-1450,共8页
【目的】本研究以中华按蚊Anopheles sinensis细胞色素P450超家族基因为研究对象,分析其在中华按蚊不同发育阶段、成蚊不同组织和雌成蚊吸血前后不同时期的表达模式,为进一步研究其功能奠定基础。【方法】收集中华按蚊实验室溴氰菊酯敏... 【目的】本研究以中华按蚊Anopheles sinensis细胞色素P450超家族基因为研究对象,分析其在中华按蚊不同发育阶段、成蚊不同组织和雌成蚊吸血前后不同时期的表达模式,为进一步研究其功能奠定基础。【方法】收集中华按蚊实验室溴氰菊酯敏感品系(WX-LS)不同发育阶段(卵、1-4龄幼虫、雄蛹、雌蛹、雄成蚊和雌成蚊)、成蚊组织(触角、唾液腺、中肠、马氏管、精巢、卵巢、表皮和脂肪体)和雌成蚊吸血后1,3,6,12,24和48 h时的样本,采用Illumina HiSeqTM2000进行转录组测序。基于测得的转录组数据,分析细胞色素P450基因在中华按蚊不同发育阶段、成蚊不同组织及吸血前后雌成蚊中的表达量。【结果】中华按蚊细胞色素P450超家族基因的表达具有发育阶段特异性和组织特异性。在幼虫、蛹和成虫期,分别有40,26和35个基因表达量较高,其中CYP6AG1,CYP6AG2,CYP6AH1,CYP6Z3,CYP6Y2,CYP6P4,CYP9J3和CYP9J4在整个幼虫期高表达。中华按蚊CYP6AA1,CYP6AH1,CYP6M4,CYP9J3,CYP9J4和CYP12F3在成蚊中肠和马氏管中均高表达,CYP4G16,CYP6AA1,CYP6AH1,CYP6Y1,CYP6Z3,CYP9J3和CYP9J4在成蚊所有组织中均表现出高表达。CYP4G16,CYP6AA1,CYP6AG2,CYP6AH1,CYP6Y1,CYP6Y2,CYP9K1,CYP12F3和CYP304B1在中华按蚊雌成蚊吸血后1,3,6,12,24和48 h时均高表达。【结论】在幼虫期高表达的细胞色素P450超家族基因可能参与了对幼虫期食源性有毒化合物质的解毒,在雌成蚊中肠和马氏管中高表达的细胞色素P450基因可能在解毒过程中发挥了重要作用。研究结果为进一步探究细胞色素P450超家族基因在中华按蚊生长发育、表达调控和杀虫剂代谢机制等方面的功能奠定了前期基础。 展开更多
关键词 中华按蚊 细胞色素p450 表达模式 发育阶段特异性 组织特异性
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