微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗免疫原性的研究

目的探讨微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗(rBCG-CP15/60-23)的免疫原性。方法用rBCG-CP15/60-23免疫BALB/c小鼠,免疫前后取血,用ELISA法检测IgG抗体,末次免疫后2周取淋巴细胞作体外培养,测定培养上清IFN-γ、IL-2和IL-12的水平。设实验组、BCG组、载体组和PBS对照组。结果rBCG-CP15/60-23免疫后2周开始小鼠IgG抗体水平逐渐升高,与BCG组和载体组比较差异均有统计学意义(P均<0.01);免疫鼠脾淋巴细胞培养上清中IFN-γ和IL-2的含量与PBS对照组和BCG组比较差异有统计学意义(P均<0.05),IL-12水平组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论rBCG-CP15/60-23免疫小鼠后能刺激机体产生IgG抗体,IFN-γ和IL-2的分泌增加,具有较好的免疫原性。

微小隐孢子虫重组蛋白CP23与CP15/60-23免疫原性的研究

目的探讨微小隐孢子虫重组蛋白CP23与CP15/60-23的免疫原性。方法用重组蛋白CP23与CP15/60-23分别免疫BALB/c小鼠,免疫3次,2w后检测抗CP23与CP15/60-23的特异性抗体IgG滴度、小鼠脾脏CD4+、CD8+T细胞及其培养上清中的细胞因子IFN-γ、IL-12,实验同时设PBS对照组;之后用微小隐孢子虫卵囊攻击免疫小鼠,收集小鼠粪便,计算小鼠排出的卵囊量。结果自免疫第2周特异性IgG抗体滴度水平逐渐升高,重组蛋白CP15/60-23组升高更为明显,免疫小鼠脾脏T细胞CD4+、CD8+百分比及CD4+/CD8+比值都增高,细胞因子IFN-γ、IL-12的水平亦增加,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05);卵囊攻击后,各组小鼠粪便中的卵囊数量都很低,各组之间无明显差异。结论重组蛋白CP23和CP15/60-23皆可产生较好的细胞及体液免疫反应,具有较强的免疫原性。

微小隐孢子虫重组BCG疫苗免疫保护作用观察

目的研究微小隐孢子虫重组BCG疫苗的免疫保护作用。方法 100只BALB/c小鼠随机分为4组,BCG组免疫BCG,载体组免疫含PMV262质粒的BCG(BCG-PMV262),实验组免疫rBCG-CP15/60-23(各组均为每鼠尾静脉注射0.1mL,接种物浓度均为106细菌/mL),对照组每鼠尾静脉注射0.05mol/LpH7.2PBS0.1mL。免疫后,每组分别随机选6只小鼠检测其血清抗体和脾细胞培养液中的CD4+、CD8+以及细胞因子水平,各组剩余小鼠进行攻击实验。结果 rBCG-CP15/60-23能诱发小鼠产生细胞免疫和体液免疫反应,小鼠血清抗体水平于免疫后2周逐渐升高,与BCG组和载体组差异显著(P均<0.01);实验组CD4+T细胞增殖明显,CD4+/CD8+比值显著升高(P<0.05);脾细胞培养液中白细胞介素2(IL-2)、IL-12、γ干扰素(IFN-γ)均有不同程度的升高,实验组IFN-γ和IL-2含量与对照组和BCG组差异显著(P均<0.05),IL-12水平组间差异无统计学意义(P>0.05)。各组小鼠经隐孢子虫卵囊攻击感染后,实验组小鼠卵囊排泄数量减少40%～60%,初始排卵囊时间延长2d,卵囊持续排出时间缩短5d;组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论微小隐孢子虫重组BCG-CP15/60-23疫苗免疫小鼠后,能产生良好的免疫保护作用。