丁酸梭菌与酪丁酸梭菌发酵特性比较

从人粪便、窖泥和动物肠道内容物分离筛选出3株丁酸梭状芽孢杆菌,分别命名为Clostridium butyricum NK、Clostridium butyricum SY、Clostridium butyricum RX。比较丁酸梭菌NK、丁酸梭菌SY、丁酸梭菌RX和酪丁酸梭菌ATCC25755在合成培养基的发酵特性。结果表明:丁酸梭菌NK和丁酸梭菌SY生长能力较强。酪丁酸梭菌产丁酸能力较强,而产乳酸能力低于丁酸梭菌。3株丁酸梭菌相比较,丁酸梭菌NK产丁酸能力较强,达2.08g/L。

滇西热泉中9个16S rDNA克隆的分析

用免培养法 (Culture independentapproach)从腾冲大滚锅和龙陵大沸泉两个高温热泉中获得的 1 6SrDNA ,经克隆筛选 ,测定了其中 9个克隆的 1 6SrDNA插入片段的近全序列 ,构建系统发育树进行分析。结果表明 ,9个克隆中有 4个是Thermus属、 2个是Bacillus属、1个是Hydrogenobacter属、 1个是Pseudomonas属 ,还有 1个在Thermodesulfobacteriaceae科 ,介于Geothermbacterium属和Thermodesulfobacteria属之间。

应用rDNA ITS2区段基因序列分析对浙江省传疟媒介的鉴定

目的对浙江省传疟媒介种类进行鉴定,以指导疟疾防治工作。方法针对媒介按蚊核糖体核酸内转录间隔2(rDNAITS2)区段基因特征,应用PCR基因鉴别技术,对浙江省现场捕捉的按蚊与嗜人按蚊、八代按蚊、中华按蚊、雷氏按蚊实验室标本进行基因鉴别和比较。结果浙江省现场捕捉的按蚊DNA样本的PCR扩增产物均为250bp,与实验室中华按蚊标本一致。结论中华按蚊目前仍是浙江省的主要传疟媒介,现场调查未发现嗜人按蚊。

桃红颈天牛肠道纤维素降解菌的筛选及其对肉仔鸡生产性能的影响

文章旨在从桃红颈天牛Aromia bungii Faldermann幼虫肠道中筛选的一株高纤维素酶活菌株,经16S rDNA测序,确定为枯草芽孢杆菌,命名为BSAB1306,进行饲料制粒,探讨其饲料制粒的耐受性和其对肉鸡肠道中微生物区系、生产性能的影响。选择体重相近的20只30日龄白羽肉鸡,先预饲无BSAB1306菌株饲料72 h,空腹2 h,然后饲喂其菌株饲料,1.5 h后屠宰。结果表明:其羧甲基纤维素酶活为68.27 U/ml,对其进行发酵培养后,酶活提高到163.86 U/ml;其饲料制粒后在50℃下保存50 d存活率为94.58%;菌株在十二指肠的萌发率为94.6%;且肉鸡的肠道食糜中大肠杆菌数量明显下降(P<0.05),第二和三周龄的微生物菌体蛋白含量显著增多(P<0.05)。结果提示BSAB1306菌株具有极高的饲料潜能,且可改善肉仔鸡的肠道微生物区系。

番茄采后寄生菌的分离鉴定及(E)-2-己烯醛抑菌活性研究

番茄采后储藏、运输中遭受的病害有很多,严重影响了番茄的品质。生物防治因低毒、高效,已作为控制采后病害的新途径,成为研究热点。本文主要对采后成熟番茄表面寄生菌进行分离纯化,通过形态特征、生理生化特性、rD NA-ITS序列分析以及系统发育分析对该菌株进行鉴定,并通过不同浓度(E)-2-己烯醛对该菌种进行抑菌分析。采用真菌通用引物扩增18S rD NA基因,得到PCR产物(约500 bp)。测序后,NCBI数据库比对可知,确定其为圆弧青霉菌(Penicillium cyclopium)。根据圆弧青霉的生长曲线可知,生长60-72 h,其生物量达到最大,其最适温度为25-30℃,最适p H为5.0。抑菌结果显示,(E)-2-己烯醛对圆弧青霉的菌丝生长有较好的抑制作用,对菌丝生长的最低抑菌浓度(MIC)为160μL/L。

铬污染土壤修复过程中土壤细菌群落多样性的RFLP分析

【目的】对污染土壤修复过程中土壤细菌群落多样性的变化进行研究。【方法】以淹水培养后的模拟铬污染土壤为供试材料,通过直接提取土壤中总细菌DNA,利用细菌专一引物克隆细菌16S rDNA片段,分别建立克隆文库。利用PCR-RFLP技术,分析比较了土壤淹水10 d(对照,S1)、添加Cr(Ⅵ)淹水10 d(S2)、添加Cr(Ⅵ)和Fe(OH)3淹水10 d(S3)及20 d(S4)4个处理中土壤细菌群落的变化。【结果】用专一引物克隆细菌16S rDNA片段,分别建立了克隆文库;用限制性内切酶RsaⅠ进行细菌16S rDNA PCR-RFLP分析,分别得到123,120,97和69个酶切类型,库容值分别为54.92%,55.43%,65.33%和76.60%;Shannon-Wiener指数、Gini指数、物种丰富度指数(dMa)和物种均匀度指数(Jgi)均表现为S1>S2>S3>S4,以上4个指数的变异系数分别为11.51%,1.84%,23.64%和1.55%;基于细菌多样性参数的聚类分析结果,将对照S1和添加Cr(Ⅵ)处理的S2归于一类,而2个添加Fe处理的土壤S3和S4聚为一类。【结论】经过10 d淹水处理,土壤中添加的Cr(Ⅵ)有98%以上可发生转化,土壤残留的Cr(Ⅵ)含量基本达到稳定。添加铬矿渣处理(S2)的土壤细菌群落多样性和对照(S1)基本一致,添加氧化铁的2个处理(S3和S4)的细菌群落多样性基本接近,但低于S1和S2;添加氧化铁的处理(S3和S4)中,均出现了明显的优势细菌群落,其分别属于荧光假单胞菌属和不动杆菌属。

苯酚降解菌PN6-15的分离及其苯酚降解特性

从长期受苯酚污染的土壤中筛选得到一株苯酚降解菌PM6-15.该菌为革兰阳性菌,能以苯酚为惟一碳源和能源生长.该菌降解苯酚的最适温度和pH值分别为30℃和7.0,该菌在36 h内可以将500 mg/L浓度的苯酚完全降解.重金属离子Cu2+,Hg2+和Ag+对该菌降解苯酚的速率有不同程度的抑制作用,而Zn2+对该菌降解苯酚无明显影响.代谢机制研究表明,苯酚可诱导该菌合成邻苯二酚-2,3-双加氧酶并分泌到胞外降解苯酚.16S rDNA基因序列同源性比较结果表明该菌为梭菌属的一种(clostridiumsp.).

内蒙古地区牛支原体的分离鉴定及遗传进化分析

为了调查内蒙古地区牛支原体的遗传变异情况,试验对从呼和浩特市10个牧场收集的40份疑似支原体病例的鼻拭子、肺脏、乳样等病料组织进行分离培养、分子生物学鉴定、致病性试验、药敏试验、系统进化树构建和同源性分析。结果表明:病料经纯化培养后在PPLO固体培养基上出现针尖大小透明菌落,有中心脐,边缘整齐,吉姆萨染色后可见明显的蓝紫色菌体,共分离得到了10株牛支原体。通过双重PCR扩增得到大小为238 bp、140 bp的10条特异性条带。5株强毒株140036-1、Z5-4、Z5-3、Z5-2、dong5-3对大多数牛有致病性,5株弱毒株0051-1、he6-3、0047-1、0047-2、0047-3对牛几乎无影响。10株牛支原体对恩诺沙星、氟苯尼考、大观霉素、四环素、多西环素敏感,对链霉素、氨苄西林、甲硝唑、头孢曲松耐药。10株牛支原体与国内外参考株形成2个大支,其中强毒株140036-1株与亲本株PG45遗传距离最近,同源性为99.6%;140036-1、Z5-3、Z5-2、Z5-4株与国内经典流行代表株Hubei-1及HB0801株亲缘关系较近,同源性为99.4%~99.7%,这4株强毒株间的同源性为99.4%~99.6%,同源性较高;强毒株dong5-3与亲本株PG45遗传距离最远,同源性为98.9%。5株弱毒株0051-1、he6-3、0047-2、0047-1、0047-3与亲本株PG45遗传距离相对较远,同源性为91.7%~99.2%。说明内蒙古地区牛支原体总体遗传变异速度较慢,周期性较长,较稳定,其中强毒株与国内经典流行代表株及亲本株更为接近。

片形吸虫“中间型”核糖体大小亚基序列多态位点的解析

为了分析片形吸虫"中间型"核糖体rDNA大小亚基中是否存在多态位点,试验通过经典分子生物学方法对采自青海省、广西壮族自治区和黑龙江省的片形吸虫进行准确鉴定,扩增3个地区片形吸虫rDNA的18S和28S序列,通过比对序列分析可能存在的多态位点,最后对可能存在的多态位点片段进行克隆验证。结果表明:采自青海省、广西壮族自治区和黑龙江省的片形吸虫分别是肝片吸虫、大片吸虫和片形吸虫"中间型",片形吸虫"中间型"18S的第653位和28S的第371,575,1422,2981位为多态位点。说明片形吸虫"中间型"rDNA 18S和28S序列存在5个新的多态位点,丰富了片形吸虫分子分类的标记基因。