16S rDNA序列分析法对香蕉根部内生细菌种群多样性初析

采用16S rDNA序列分析法对香蕉根部内生细菌种群多样性进行初步研究,随机选择12个阳性克隆测序。结果表明,该序列与未培养及可培养的芽孢杆菌、雷尔氏菌、伯克氏菌、戴尔福特菌、肠杆菌等细菌的序列同源性在97%～100%之间,说明香蕉根部存在大量未培养及可培养的内生细菌。

16S rDNA序列分析法在注射剂微生物污染鉴定及溯源分析中的应用

目的对一次注射剂无菌检查阳性结果进行溯源。方法采用16S rDNA序列分析法对污染菌A1和污染调查中采集的16株葡萄球菌进行鉴定和同源性分析,并将分析结果用脉冲场凝胶电泳进行验证。结果A1的鉴定结果为科氏葡萄球菌;科氏葡萄球菌科氏亚种菌株的核糖体16S亚基序列完全相同;结合PFGE分析显示A1来自无菌检查使用的隔离器污染。结论制药企业可以使用16S rDNA序列分析法进行生产和检验中污染菌的鉴定和溯源,但对于与如科氏葡萄球菌科氏亚种一样核糖体16S亚基序列完全相同的菌株,需要结合其他同源性分析方法进行最终的判定。

rDNA-ITS 序列测定等三种方法鉴定假丝酵母菌结果比较

目的通过三种假丝酵母菌鉴定方法的比较,为临床选择假丝酵母菌的鉴定方法提供参考。方法用科玛嘉显色培养基、API 20C AUX生化系统和rRNA-ITS序列测定分析鉴定住院患者口腔培养出的198株假丝酵母菌,比较3种鉴定方法的结果。结果 API 20C AUX生化系统与rDNA-ITS序列测定分析鉴定结果一致,科玛嘉显色培养基与API 20C AUX生化系统和rDNA-ITS序列测定分析鉴定的符合率白假丝酵母菌为97.84%,热带假丝酵母菌的符合率为93.33%,光滑假丝酵母菌和克柔假丝酵母菌的符合率分别为90.91%、88.89%,其他假丝酵母菌科玛嘉不能鉴定。结论 API 20C AUX生化系统与rDNA-ITS序列测定分析鉴定假丝酵母菌的结果有较好的一致性,rDNA-ITS序列测定分析鉴定假丝酵母菌有望成为假丝酵母菌鉴定较好的方法。科玛嘉显色培养基方法可以简便有效的鉴定最常见的4种假丝酵母菌。

微生物絮凝剂产生菌的筛选、鉴定及培养条件优化

以活性污泥作为菌种来源,通过加入刚果红的寡培养基稀释涂布法和富培养基平板划线分离法,筛选出24株微生物絮凝剂产生菌,其中菌株LL6的絮凝活性最高,经鉴定,该菌为约氏不动杆菌(Acinetobacter sp.)。通过正交试验确定菌株LL6的最佳培养基成分配比为:葡萄糖,15g/L;蔗糖,10 g/L;酵母膏,0.7 g/L;尿素,0.1 g/L;硫酸铵,0.5 g/L;KH2PO4,1 g/L;K2HPO4,2.5 g/L;Mg SO4,0.3 g/L;Na Cl,0.2 g/L。通过单因子试验得出菌株LL6的最佳培养条件如下:初始p H值为6,培养温度为20℃,培养时间为24 h,摇床转速为150 r/min。