重组人白细胞介素-2的分离纯化

报道了重组人白细胞介素-2(rHuIL-2)高表达菌株的最佳培养和表达条件、表达产物的分离纯化、复性条件对rHuIl-2活力的影响及高纯度rHuIL-2的性质鉴定。利用制备性SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行rHuIL-2的纯化,回收率可达80%以上,纯度达95%以上,其比活为1～2×10~6 U/mg,能在体外维持CTLL和CTC细胞的增殖,其分子量、等电点、氨基酸组成、N-末端分析结果与德国Boehringer公司的同类产品基本一致。

重组人IL-2联合STAg鼻内免疫BALB/c小鼠诱导的免疫应答

目的观察重组人白细胞介素-2(rhuIL-2)联合弓形虫可溶性速殖子抗原(STAg)滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答,探讨rhuIL-2的佐剂效应及适宜剂量。方法5～6周龄BALB/c小鼠60只,随机分为6组,每组10只。实验组以STAg20μg或分别加rhuIL-2250、500、1000、2000 IU滴鼻免疫,抗原与佐剂溶于20μlPBS中,对照组以PBS滴鼻,免疫2次,间隔2周。末次免疫后30d,颈椎脱臼处死全部小鼠,ELISA法检测血清IgG和粪便sIgA水平;分离脾淋巴细胞、肠上皮内淋巴细胞(iIEL),并计数。结果与PBS组相比,各佐剂组血清IgG水平都有增高,其中STAg+500 IU IL-2组IgG水平增高最显著(P<0.01);STAg+500 IU IL-2组和STAg+1000 IU IL-2组粪便sIgA抗体水平显著高于PBS组和STAg组(P<0.05)。联合IL-2佐剂免疫小鼠脾淋巴细胞和产生了增殖性应答,其中STAg+500 IU IL-2组和STAg+1000 IU IL-2组脾淋巴细胞数显著高于PBS组和STAg组(P<0.05);TAg+500 IU IL-2组iIEL高于PBS组(P<0.05)。结论rhuIL-2作为佐剂联合STAg鼻内免疫小鼠可有效诱导粘膜免疫、系统的细胞免疫和体液免疫应答;500 IU IL-2为鼻内免疫小鼠的适宜剂量。

rIL-2、rTNF-α和PHA协同促进胎儿的脾细胞和胸腺细胞增殖的研究

本文观察了胎儿脾细胞和胸腺细胞对ｒＨｕＩＬ-２、ｒＨｕＴＮＦ-α和ＰＨＡ的体外应答能力。胎儿脾细胞对三者单独都能产生增殖反应，ＩＬ-２与ＰＨＡ与ＴＮＦ-α、ＰＨＡ与ＩＬ-２以及ＰＨＡ与ＴＮＦ-α两两联合对胎儿脾细胞都能产生明显的协同刺激作用，三者同时与胎儿脾细胞共育协同作用最强。胎儿胸腺细胞对ＰＨＡ、ｒＨｕＩＬ-２或ｒＨｕＴＮＦ-α单独均不产生应答，只有当ＰＨＡ与ｒＩＬ-２联合刺激时才能产生增殖反应。可见胎儿脾细胞对ＩＬ-２、ＴＮＦ-α和ＰＨＡ已有很好的应答能力，而胎儿胸腺细胞对其应答能力较差。