白细胞介素2（rIL—2）的碘标记研究

采用Ｉｏｄｏｇｅｎ碘标记法制备了１２５Ｉ标记的白细胞介素２（１２５Ｉ－ｒＩＬ－２）．经高效液相色谱（ＨＰＬＣ）纯化，放射性纯度大于９５％，游离１２５Ｉ小于５％；放射性比活度为２．２×１０１６－２．８×１０１６Ｂｑ／ｍｏｌ。该标记物用于放射免疫测定，与抗体有较高的结合活性和灵敏度。

rIL—2对红细胞免疫促进作用的实验研究

本文观察了 rIL-2在体外实验中对红细胞免疫粘附功能的影响,发现 rIL-2对 RBC—C_3bR 花环及肿瘤红细胞(EC-RBC)花环形成有明显的促进作用,且与 rIL-2浓度在一定范围呈正相关;而对 RBC-IC 花环形成无促进作用,且略有抑制,但无统计学意义。结果表明,rIL-2 能显著提高肿瘤患者和健康人红细胞免疫粘附功能,提示红细胞免疫同样受到 IL-2的调控,其作用机理可能是通过红细胞膜上 C_3b 受体所介导。

rIL—2和rIFN—γ在抗体生成中的协同作用

本文研究了基因工程重组的IL-2和IFN-γ对人-人B细胞杂交瘤的作用。结果发现1000u/ml rIL-2短期作用于人-人杂交瘤细胞,即可以提高抗体分泌量2倍,如果和rIFN-γ合并使用即可以提高3倍。当杂交瘤细胞培养于低血清培养基时,500u/ml的rIL-2可以提高抗体分泌量4倍,应用间接免疫荧光抗体技术表明,约7％～8％的B细胞杂交瘤表面呈现抗Tac抗体染色阳性。

LNT-rIL-2免疫原性研究

以家兔为实验动物，经同剂量ＬＮＴ－ｒＩＬ－２和ｒＩＬ－２多次免疫，ＥＬＩＳＡ法分析两者免疫血清中抗体（ＩｇＧ）滴度，结果显示：ＬＮＴ－ｒＩＬ－２免疫血清中特异抗体滴度与ｒＩＬ－２对照组无显著性差异（Ｐ＜０．１），但总体水平有一定程度下降；ＬＮＴ呈现弱免疫原性。提示ＬＮＴ－ｒＩＬ－２的免疫原性并未由于修饰作用而增强，而是有下降趋势，可能与ＬＮＴ对ｒＩＬ－２的空间位阻等因素有关。

rIL-2诱导一氧化氮产生对培养心肌细胞线粒体活性的影响

目的研究人类重组白介素2（rIL-2）对培养大鼠心肌细胞产生一氧化氮（NO）及线粒体活性的影响。方法在培养心肌细胞时分别或同时加入rIL-2、单甲基L-精氨酸（L-NMMA）以及L-精氨酸（L-Arg），并测定培养液中NO浓度，心肌细胞内的线粒体活性值。结果心肌细胞加rIL-2培养48h与对照组相比NO产生显著增加[（85±6.1）比（10±2.5）nmol·（106细胞）-1，P＜0.01]。rIL-2刺激NO产生呈时间（6～48h）和剂量（5×104～1×106IU·L-1）相关性。L-NMMA可抑制rIL-2诱导NO的产生而添加L-Arg可逆转这一作用。rIL-2组与对照组相比线粒体活性值明显受抑（0.397±0.03比0.599±0.02，P＜0.01），而添加L-NMMA可逆转（0.536±0.03，P＜0.01）。NO产生量与线粒体活性值呈负相关（P＜0.01）。结论rIL-2刺激培养大鼠心肌细胞产生NO可抑制线粒体活性。

rIL－2对长期训练小鼠免疫功能的影响

本文就注射ｒＩＬ－２对大强度游泳训练时小鼠免疫功能的影响进行了研究。结果发现：训练可使小鼠脾淋巴细胞对ＣｏｎＡ．ＬＰＳ分裂原的增殖应答，及ＰＦＣ反应明显减弱（Ｐ＜０．０５）；训练配合腹腔注射ｒＩＬ－２则可消除这种减弱，而使其应答反应明显强于安静对照组（Ｐ＜０．０５）；训练配合腹腔注射ｒＩＬ－２还可使Ｔ＿４／Ｔ＿８之比值明显高于单纯训练小鼠的（Ｐ＜０．０５）。这说明用ｒＩＬ－２纠正大强度训练对小鼠免疫系统功能的副作用有一定意义。

LAK细胞及rIL-2腹腔灌注对胃癌术后预防腹膜转移的研究

作者选用3组Ⅲ期胃癌病例，即根治术后用LAK细胞／rIL－2腹腔灌注的LAK组，用5－Fu腹腔灌注的5-Fu组，未用药的对照组。经随访观察发现LAK组出现腹膜种植转移者2年只有7％（2／27），明显少于另外两组。因此文章指出：①LAK细胞／rIL－2腹腔灌注能有效的预防胃癌根治术后的腹腔种植转移，临床推广使用俾有助于生存率的提高；②鉴于LAK细胞的杀伤特性，阐明其真正价值是用于预防癌根治后的转移；③只有LAK细胞数量超过癌细胞数时才能有效的发挥其作用。

rIL-2激活的骨髓细胞抗瘤活性——白血病自体骨髓移植净化

用rIL-2激活未分离的骨髓外胞(bone marrow cell,BMC)观察其抗瘤活性和造血功能。经rIL-2激活24h后的未分离BMC即表现对NK细胞敏感的K562和NK细胞不敏感的Raji细胞均有杀伤活性;在一定时间内,随激活时间延长抗瘤活性增强,在第4天达高峰。rIL-2激活的未分离BMC与分离BMC二者抗瘤活性无差异。5例急性非淋巴细胞白血病病人骨髓经rIL-2激活后,白血病祖细胞CFU-L生成能力下降;经rIL-2激活的骨髓细胞生成CFU-GM能力无下降。根据我们的研究结果提出,rIL-2激活未分离BMC可用于白血病ABMT中残留白血病细胞净化,其方法简便、实用。

新型基因重组人白细胞介素-2(125ser-rIL-2)的Ⅱ期临床研究

目的 :新型基因重组人白细胞介素 2 (12 5ser rIL 2 )的临床应用范围 ,确定 12 5ser rIL 2对某些实体瘤 ,恶性胸腹水的疗效及人体的毒副作用 ,研究最适合的给药途径和治疗剂量。方法 :分别应用 12 5ser rIL 2经胸、腹腔注射 ,静脉滴注治疗5 4例中晚期恶性肿瘤患者。结果 :CR 2例 ,PR 12例 ,总缓解率为 2 5 9%。主要有效病种为恶性胸腹水 ,恶性黑色素瘤 ,肠癌和胃癌 ,其中胸腹腔注射的有效率为 4 0 7% ,静脉注射的有效率为 11 1%。免疫指标CD3、CD4治疗后升高 ,CD8治疗后下降 ,但无统计学差异 ,NK细胞治疗后升高 ,由 4 89上升到 6 2 8(P <0 0 5 )。治疗中主要不良反应为寒颤、发热、肌肉酸痛 ,未出现严重不良反应。结论 :12 5ser rIL 2具有一定的抗肿瘤作用 。

^（147）pm对小鼠中枢和外周免疫细胞的损伤及rIL－1、rIL－2的防护作用

本文研究了重核裂变产物１４７￣ｐｍ对小鼠中枢和外周免疫细胞的辐射损伤，以及外源性白细胞介素－１（ｒＩＬ－１）和外源性白细胞介素－２（ｒＩＬ－２）对机体的防护作用。结果表明，内污染１４７￣Ｐｍ后，可明显抑制中枢免疫器官骨髓细胞和胸腺细胞及外周免疫器官脾脏Ｂ淋巴细胞的ＤＮＡ合成，细胞增殖受到抑制；ｒＩＬ－１和ｒＩＬ－２对１４７￣Ｐｍ抑制上述细胞中ＤＮＡ合成具有完全或部分的保护作用。

人rIL-2对鼠脾细胞杀瘤功能的影响

目的探讨ｒＩＬ－２抗肿瘤机制。方法用“ＬＤＨ释放法”检测经不同处理的脾细胞对其敏感的靶细胞ＹＡＣ－１，不敏感的ｌｅｗｉｓ肺癌（ＬＬＣ）及耐受的ＬＬＣ肺转移细胞（ＬＬＣＦ１）体外杀伤功能。结果正常脾细胞对３种靶细胞的杀伤能力有明显差异（Ｐ＜０．０１）；经人ｒＩＬ－２体外激活后（ＬＡＫ细胞），杀瘤能力明显增强，并对ＬＬＣ、ＬＬＣＦ１细胞的杀伤作用已无明显差异；对ＬＬＣ血道转移也有明显抑制作用；激活时间对脾细胞杀瘤能力也有影响。结论人ｒＩＬ－２能激活小鼠脾细胞，使其杀瘤尤其是对具有抗ＮＫ细胞的肿瘤杀伤能力明显增强，对肿瘤转移也有疗效。

rIL-2体外对烧伤脓毒症的细胞免疫功能的影响

目的：为探讨烧伤脓毒症的防治措施，采用烫伤后盲肠结扎穿刺术建立烧伤脓毒症小鼠模型。方法：体外观察ｒＩＬ－２（重组白细胞介素２）对鼠模型和临床烧伤患者的细胞免疫功能的作用。结果：①烧伤脓毒症小鼠脾细胞对ＣｏｎＡ刺激的应答和ＮＫ细胞毒活性均显著降低；②烧伤患者的Ｔ细胞和ＮＫ细胞免疫功能也明显降低，并随烧伤严重程度而加重；③ｒＩＬ－２在体外对烧伤后受损的细胞免疫功能有一定的改善作用，但对脓毒症感染患者无明显作用。结论：ｒＩＬ－２对烧伤后免疫功能的降低有一定的恢复作用。

骨肉瘤患者外周血经体外诱导的rIL-2-CL和杀伤细胞的抗瘤活性

目的 研究骨肉瘤患者外周血淋巴细胞体外刺激后经rIL2诱导形成的细胞毒淋巴细胞和杀伤细胞的体外抗瘤活性。 方法 外周血淋巴细胞(PBL)在体外用患者肿瘤组织学相关传代骨肉瘤细胞刺激5d再经rIL2诱导12d;单独rIL2激活培养PBL3～5d;分别获取rIL2诱导体外刺激细胞毒淋巴细胞和LAK细胞。 结果 rIL2对两种效应细胞诱导作用基本平行;rIL2CL第12d达到峰值,二周后仍保持相当强度;rIL2CL对人骨肉瘤细胞(OS细胞系)杀伤活性明显强于LAK细胞。 结论 rIL2CL主要是一种特异性较高、杀伤活性强烈CTL细胞群。

脂质体rIL-2和肿瘤浸润淋巴细胞治疗鼠H22肝癌的体内实验研究

目的 :比较脂质体rIL - 2和游离rIL - 2分别联合肿瘤浸润淋巴细胞治疗鼠H2 2肝癌的效果及副作用。方法 :采用薄膜分散法和超声波粉碎处理法制备脂质体rIL - 2 ;选昆明鼠 40只 ,随机分组进行体内治疗 ,游离rIL - 2用量为脂质体rIL - 2的 3倍 ,观察瘤出现时间、瘤体积、瘤湿重及鼠体温的变化。结果 :TIL +rIL - 2组的瘤出现时间、瘤体积、瘤湿重分别为 :15± 2 .5d、2 .44± 2 .97cm3 、4.7± 2 .0 g ;TIL +脂质体rIL - 2组分别为 :15± 3.2d、2 .2 7± 2 .5 8cm3 、4.5± 2 .1g ;二者与对照组比较均显出了肯定的治疗效果 (P <0 .0 5 ) ,但二者之间比较无统计学差别 (P >0 .0 5 )。TIL +rIL - 2组有明显发热反应 ,TIL +脂质体rIL - 2组体温正常。结论 :脂质体rIL - 2较游离rIL - 2抗肿瘤作用提高 ,副作用降低。

化疗药物与rIL-2的生物化学治疗对晚期肺癌、肝癌的临床效果

本文观察了化疗药物联合ｒＩＬ－２对２８例肺癌及肝癌患者的生物化学治疗效果并与１４例单纯化疗患者（对照组）进行了对比。结果显示：实验组有效率（ＣＲ＋ＰＲ）分别为肝癌３１％、肺癌４２％，合并有效率（ＣＲ＋ＰＲ）为３６％，均显著高于对照组（１３％、１７％、１４％，Ｐ＜０．０１）。主观症状改善及生存率方面实验组优于对照组Ｐ＜０．０５。本研究结果提示，化疗联合ｒＩＬ－２对晚期肝癌及肺癌有较明显疗效。

rIL-2对慢性HBV感染者淋巴细胞转化功能的影响

本文采用~3H-TdR渗入技术,观察到慢性HBV感染者休外淋巴细胞转化功能受到明显的损害。HBsAgrHBeAg和rHBeAg可明显抑制正常人淋巴细胞转化,且有剂量依赖性。上述情况在加入外源性重组白细胞介素Ⅱ(rIL-2)后仍不能得到纠正。实验提示,慢性HBV感染者淋巴细胞转化功能低下的原因除了IL-2生成减少外,还有HBV或其产物对它的直接抑制或通过某种机制间接干扰。

rIL－2／LAK细胞治疗晚期恶性肿瘤

胎儿来源的ＬＡＫ细胞／ｒＩＬ－２对５例失去手术、化疗、放疗机会的晚期恶性肿瘤病人进行了过继免疫治疗。结果都取得了一定的疗效，黑色素瘤病人肺转移结节基本消失，局部瘤细胞全部坏死，组织细胞正常；淋巴瘤病人转移灶消退５９％；小肠平滑肌肉瘤病人在没进行此疗法之前２年半复发、手术三次。第三次手术后用此疗法治疗一个疗程，三年后第一次复发。为晚期恶性肿瘤病人延长了生命，提高了生存质量争得了再次治疗的机会。

rIL-2工程菌诱导阶段细胞再循环培养的研究

为了减少rIL-2工程菌高密度培养时乙酸的积累,在诱导阶段对该工程菌进行细胞再循环培养的研究,比较了细胞再循环补料液、pH、细胞循环培养时间段对工程菌的生长及rIL-2表达的影响。结果表明在菌密度D_(600)为50时,细胞再循环补料液中酵母抽提物与胰蛋白胨浓度为发酵培养基的5倍就能满足rIL-2表达的需求,同时选择诱导后4～6h之间的细胞再循环培养能有效地防止乙酸的过高积累并减少营养物质的损失,有利于rIL-2的表达。根据以上研究结果得到了rIL-2工程菌诱导阶段细胞再循环培养方法,使得在诱导前菌密度D_(600)为50左右时rIL-2的表达水平约为40％。

S180腹水瘤细胞提取物与rIL-2对S180实体瘤生长影响

利用小鼠S180腹水瘤细胞提取物与rIL－2分别单用和并用对S180实体瘤生长影响。经实验观察瘤细胞提取物组，rIL－2组，提取物与rIL－2并用组对S180实体瘤的抑制率分别为27．27％、29．75％、47．93％。采用提取物与rIL－2并用组做重复试验，结果表明此实验组对S180实体瘤生长有明显的抑瘤作用。

rIL_（－2）对慢性HBV感染者NK细胞功能调节及影响因素

本文采用４小时、１６小时微量释放细胞毒法监测慢性ＨＢＶ感染者ＮＫ细胞对Ｋ５６２细胞及ＰＬＣ／ＰＲＦ／５细胞杀伤活性及某些影响因素。实验提示慢性活动型肝炎（ＣＡＨ）、慢性无症状携带者（ＡＳＣ）ＮＫ细胞杀伤活性均高于健康人。ｒＩＬ－２可明显增加健康人ＮＫ细胞活性，但对ＨＢＶ感染者ＮＫ细胞增强作用不明显。ＨＢｓＡｇ、ｒＨＢｅＡｇ和ｒＨＢｃＡｇ均可明显抑制ＮＫ细胞活性，并有剂量依赖性，加入外源性ｒＩＬ－２仍不能纠正。提示ＨＢｓＡｇ、ｒＨＢｅＡｇ和ｒＨＢｃＡｇ可通过某种机制阻抑ｒＩＬ－２与ＮＫ细胞结合发挥作用。