黄鳍棘鲷重组IL-1β的表达及生物学活性检测

将扩增得到的黄鳍棘鲷Acanthopagrus latus白细胞介素1β(Interleukin 1β,IL-1β)基因克隆到表达载体pQE30,并转化到大肠杆菌M15中进行表达。采用Ni2+-Chelating Sepharose FF层析对重组蛋白进行纯化,并用梯度透析对纯化蛋白进行复性。经SDS-PAGE和Western Blot分析,获得了分子量为21kD的重组白细胞介素1β(Recombinant Interleukin 1β,rIL-1β)。采用Percoll不连续密度梯度离心分离黄鳍棘鲷头肾白细胞,在分离液密度1.080g/ml的界面上可以有效富集白细胞。用不同终浓度的rIL-1β和5μg/ml脂多糖(LPS)刺激培养的黄鳍棘鲷头肾白细胞,23℃培养4h后提取细胞的总RNA,经RT-PCR半定量检测,当培养基中rIL-1β的浓度达到20ng/ml时可以提高IL-1β基因的转录水平,与5μg/mlLPS的刺激效果相当,表达的重组蛋白表现出很好的生物学活性。

白芍总苷对IL-1α诱导胶原性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞功能的影响

目的研究白芍总苷(TGP)对rIL-1α诱导胶原性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞(FLS)的影响,并探讨其部分机制。方法鸡Ⅱ型胶原(CCⅡ)诱导大鼠胶原性关节炎(CIA);MTT法检测FLS的增殖反应;放射免疫法(RIA)测定FLS产生PGE2和cAMP的水平。结果在rIL-1α(0.01、0.1、1、10μg.L-1)和1μg.L-1rIL-1α(3、6、12、24h)体外刺激下,CIA大鼠FLS产生的PGE2和cAMP水平均升高;TGP(2.5、12.5、62.5、125、250mg.L-1)体外给药可不同程度地抑制FLS的增殖反应和PGE2产生,而进一步升高cAMP水平。结论在不同浓度同一时间和同一浓度不同时间的rIL-1α体外刺激下,FLS产生PGE2和cAMP水平均升高;TGP体外作用FLS可抑制其增殖和产生PGE2,进一步升高cAMP的水平。

IL-1α对佐剂性关节炎大鼠滑膜细胞功能的影响及木瓜苷的作用

目的探讨rIL-1α对佐剂性关节炎（AA）大鼠滑膜细胞功能的影响及木瓜苷（GCS）的作用。方法采用弗氏完全佐剂（FCA）诱导大鼠AA模型，分离培养大鼠成纤维样滑膜细胞（FLS），用MTT法检测FLS的增殖能力，放射免疫法（RIA）测定FLS产生PGE2和cAMP的水平。结果在10μg·L-1的rIL-1α（1、2、4、8、24h）体外刺激下，AA大鼠FLS产生的PGE，水平升高，cAMP水平在1～8h升高，24h反而下降。GCS（100、50、25、12．5mg·L-1）体外给药可不同程度的抑制FLS的增殖反应和PGE2的产生，升高cAMP水平。结论rIL-1α可以促进AA大鼠FLS的增殖，降低cAMP，升高PGE2，GCS能明显逆转rIL-1α对FLS的影响。

重组白介素 1受体拮抗剂对实验性肝损伤保护作用的初步研究

白介素１（ＩＬ１） 是重要的炎症因子之一， 在肝损伤中起着重要的作用。为研究重组ＩＬ１ 受体拮抗剂ｒＩＬ１ｒａ） 对四氯化碳（ＣＣＩ４） 诱导的肝损伤的保护作用，将２４ 只Ｗｉｓｔａｒ 大鼠随机分为５ 组：即正常对照组（ｎ ＝ ５） ，造模组（ｎ ＝ ５） ，ｒＩＬ１ｒａ 高剂量（０ ．５ ｍ ｇ／１００ ｇ） 组（ｎ ＝ ５） ，中剂量（０ ．２ ｍｇ／１００ ｇ） 组（ｎ ＝ ５） 和低剂量（ｏ ．１ｍ ｇ／１００ ｇ） 组（ｎ ＝ ４） 。检测处理６ 周末血清肝酶学（ＡＬＴ，ＡＳＴ） 和肝纤维化指标：Ⅲ型前胶原（Ｐｃ Ⅲ） 、透明质酸（ ＨＡ） 和层粘蛋白（ＬＮ） 。结果：与造模组相比较，ｒＩＬ１ｒａ 各剂量组血清ＡＬＴ 和ＡＳＴ 的水平下降（ Ｐ ＜ ０ ．００１ 和Ｐ ＜ ０ ．０１） ，但组间无差异；而对于肝纤维化指标，虽然数值有下降趋势，但只有高剂量才具有统计学意义（ Ｐ ＜ ０ ．０５） 。表明ｒＩＬ１ｒａ（０ ．５ｍ ｇ／１００ ｇ） 可阻断肝细胞的急、慢性损伤，抑制肝纤维化的形成，从而可间接地反映ＩＬ１ 参与了ＣＣｌ４ 导致肝损伤的发病过程。

重组白细胞介素－1β对小鼠胚胎着床的影响

本文报道了重组白细胞介素－１β（ｒＩＬ－１β）对小鼠胚胎着床的影响，并对其作用机理进行初步的探讨。研究证实，ｒＩＬ－１β能够有效地阻断妊娠第３、４天小鼠胚胎着床的发生，此外，ｒＩＬ－１β能致小鼠早期胚胎发育异常，运行滞缓，并改变小鼠胚泡植入阶段受卵巢激素调控的子宫内膜有丝分裂模式，还诱发着床前子宫腔白细胞浸润现象。上述结果表明，ｒＩＬ－１β对抗着床效应是多因素的协同作用。

rhIL—1ra减轻新生大鼠窒息后肾损伤的作用机制

目的 探讨重组的人白细胞介素１－受体拮抗剂（ｒｈＩＬ－１ｒａ）减轻新生大鼠窒息后肾损伤的作用及机制。方法 Ｗｉｔｓａｒ大鼠３０只，７～１０ｄ龄，随机均分为窒息组、窒息＋ｒｈＩＬ－１ｒａ处理组和对照组，在窒息３０ｍｉｎ复氧１２０ｍｉｎ时，测定左肾系数（ＬＲＣ）；用硫代巴比妥酸法测定肾组织过氧化脂质（ＬＰＯ）含量，用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）测定肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）和白细胞介素－８（ＩＬ－

重组人白介素1α引起小鼠骨髓基质细胞膜超极化

重组人白介素１α引起小鼠骨髓基质细胞膜超极化１吴曙光肖学军徐伟鲍永耀（第一军医大学药物研究所，广州５１０５１５）白介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１，ＩＬ－１）是具有广泛生物学活性的多肽，其生物活性通过受体介导［１］，但至今有关ＩＬ－１与受体结合后的...

重组人IL-1β、IL-6对小鼠体外早期胚胎发育的影响

研究了重组人白细胞介素(rIL-1β、rIL-6)对ICR小鼠体外早期胚胎发育的影响。结果表明:(1)培养液中rIL-1β浓度为4、10、100IU/ml时,对胚胎的发育无明显影响;(2)rIL-6在浓度4、10IU/ml时,对胚胎的发育无明显影响;当浓度为100IU/ml时,则对胚胎的发育有明显抑制作用及毒性作用。结果提示:IL-6在高浓度时对胚胎具有直接毒性作用。

荧光涂料激发能源^（147）pm对免疫细胞的损伤和防护的研究

本文探讨了细胞因子外源性ｒＩＬ－１和ｒＩＬ－２对机体内污染荧光涂料激发能源１４７ｐｍ时的辐射防护作用以及喹胺酸促排１４７ｐｍ的效果。研究发现，１４７ｐｍ可使中枢免疫器官骨髓和胸腺细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入反应，以及外周免疫器官脾Ｂ淋巴细胞ＬＰＳ转化反应受到抑制，ＤＮＡ合成显著减少，而外源性，ｒＩＬ－１与ｒＩＬ－２则可完全或部分逆转１４７ｐｍ损伤骨髓细胞、胸腺细胞和脾Ｂ淋巴细胞的增殖抑制能力，对１４７ｐｍ损伤机体呈现明显的辐射防护作用。而喹胺酸对１４７ｐｍ则有明显的加速排除效果。

结肠癌细胞起源的白细胞介素1α对血管内皮细胞增殖和迁移的影响

目的探讨结肠癌细胞起源的白细胞介素1仅（IL—1α）及其受体拮抗剂IL—1α对血管内皮细胞的影响。方法Westernblot法检测IL-1α和IL-1I型受体（IL-1R1）在结肠癌细胞中的表达，细胞增殖和迁移实验检测外源性的IL-1α和IL—1α对胎儿脐静脉内皮细胞（HUVEC）增殖和迁移的影响；采用双层培养系统检测肿瘤细胞起源的IL-1α对血管内皮细胞增殖和迁移的影响，以及IL-1α对血管内皮细胞的作用。结果Westernblot检测显示，IL-1α蛋白在高肝转移结肠癌HT-29和WiDr细胞中表达，而在低肝转移结肠癌CaCo-2和CoL0320细胞中不表达。细胞迁移实验显示，对照组、1ng／mrIL—1α组、10n异／mlrIL—1α组和100ng／mlrIL—1α组的穿膜细胞数分别为（17．9±3．6）个、（23．2±4．2）个、（31．7±4．5）个和（38．6±4．9）个，IL-1α能够显著提高HUVEC的迁移能力，并与IL-1α浓度有关（均P〈0．01）。细胞增殖实验显示，对照组、1ng／mlrIL—1α组、10ng／mlrIL—1α组和100ng／mlrIL—1α组的吸光度值分别为1．37±0．18、1．79±0．14、2．14±0．17和2．21±0．23，IL—1α能够显著提高HUVEC的增殖能力，并与IL-1α浓度有关（均P〈0．叭）。IL—1α能够抑制HUVEC的迁移和增殖（均P〈0．01）。在共同培养系统中，对照组、HUVECs＋10pg／mlrIL—1α组和HUVECs＋HT-29组中血管内皮生长因子（VEGF）水平分别为（1．697±0．072）ng／ml、（3．507±0．064）ng／ml和（4．139±0.039）ng／ml，HUVECs＋10pg／mlrIL-1α组和HUVECs＋HT-29组分别与HUVECs组比较，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论结肠癌细胞起源的IL-1α在结肠癌的转移过程中有重要作用，其通过结合IL-1RI提高结肠癌细胞VEGF的分泌水平，强化血管内皮细胞的增殖和迁移，进而促进肿瘤的新生血管；而IL-1α具有抑制IL-1α水平的作用，从而抑制结肠癌的新生血管。