人参皂苷Rb_1增生性瘢痕影响的研究

本实验通过建立增生性瘢痕的动物模型探讨人参皂苷Rb1对增生性瘢痕的治疗效果。选取十分成熟的兔耳增生性瘢痕模型,每只兔子做5处增生性瘢痕,每个瘢痕做不同处理:空白对照组(a),生理盐水注射组(b),药物浓度分别为:0.2 mg/mL(c)、0.4 mg/mL(d)、1.0 mg/mL(e),共5组。通过HE、VG染色,计算HI和胶原纤维含量等发现人参皂苷Rb1可使得瘢痕增生情况有所抑制。免疫组织化学上相关胶原Ⅰ型蛋白和Caspase 3的表达以及原位杂交检测胶原Ⅰ型mRNA的表达从更深的角度表明了该药物有促进成纤维细胞凋亡的趋势和抑制胶原增生的现象。实验结果表明人参皂苷Rb1有抑制增生性瘢痕发展的作用。

他克莫司抑制兔耳瘢痕增生的作用及其机制研究

目的:他克莫司是临床广泛应用的一种药物,其对增生性瘢痕是否产生作用并无相关报道,为此提出并证实了他克莫司可以抑制兔耳瘢痕增生。方法:建立兔耳增生性瘢痕模型,选10只新西兰大耳白兔双耳腹侧用打孔器制作直径1cm圆形创面,伤后14天创面上皮化后给药,每只兔左耳为空白对照组涂等剂量凡士林软膏,右耳为他克莫司治疗组。分别在伤后14天、21天2、8天3、5天和49天采集标本,行HE染色,观察形态学差异;Real-t i me PCR检测纤维化相关因子TGF-β1、TGF-β2、Col l agen-α1等的表达。结果:HE染色可见他克莫司组成纤维细胞数量及胶原纤维较对照组明显减少,PCR结果可见TGF-β1、TGF-β2及Col l agen-α1表达较对照组在各时间点均减少。结论:实验组较对照组瘢痕明显减轻,证明他克莫司显著抑制兔耳瘢痕增生,可作为临床上治疗及预防瘢痕增生的全新疗法。

双丹脂质体凝胶抑制兔耳瘢痕增生的作用及机制研究

目的考察双丹脂质体凝胶抑制兔耳瘢痕增生的作用及可能机制。方法制备兔耳增生性瘢痕模型,21 d后给药,持续42 d。采集兔耳缘静脉血,分离血清进行IL-1β、TGF-β_1含量测定,采集瘢痕组织标本进行HE染色后光镜下观察病理组织学变化,同时测量瘢痕增生指数和成纤维细胞密度。结果与模型组相比,双丹脂质体凝胶组瘢痕内炎性细胞显著减少,成纤维细胞呈梭形,细长,呈疏松状有序排列;双丹脂质体凝胶剂组的成纤维细胞密度明显降低,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,兔血清IL-1β、TGF-β_1含量较治疗前均有显著变化,与模型组及治疗前比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论双丹脂质体凝胶有良好的抑瘢效果,可能通过调节IL-1β和TGF-β_1的表达来发挥抑制瘢痕增生的作用。

二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响研究

目的研究二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响。方法选取20只成年新西兰大耳白兔建立兔耳增生性瘢痕动物模型,待伤口上皮化后,将其随机分成两组,每组10只。对照组灌胃给予10 m L的生理盐水,实验组灌胃给予10 m L的二氢青蒿素,1次/天,连续给予1周。记录观察术后20 d和50 d 2组兔耳瘢痕的发生和兔耳瘢痕的大小。结果对照组兔耳瘢痕的发生率大于实验组兔耳瘢痕的发生率,差异有统计学意义(P<0.05),表明二氢青蒿素具有降低兔耳瘢痕发生的疗效;对照组兔耳瘢痕大于实验组兔耳瘢痕,差异有统计学意义(P<0.050),表明二氢青蒿素具有治疗兔耳瘢痕的作用。结论二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕具有显著的疗效,作为一种有效的药物,值得对其做进一步的研究。

二氢青蒿素抑制兔耳瘢痕增生的实验研究

目的:观察二氢青蒿素对兔耳增生性瘢痕增生的影响。方法:选取成年新西兰大耳白兔16只,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,待上皮化后,对实验组、对照组分别给予二氢青蒿素(180mg/kg)和生理盐水(乙醇终浓度为0.1%)各10ml灌胃,术后28天和56天时观察药物对瘢痕增生指数(HI)的影响及光镜下瘢痕变化情况。结果:二氢青蒿素组与生理盐水组之间HI差异均有显著性意义(P<0.O1);光镜下见二氢青蒿素组成纤维细胞凋亡增加及胶原纤维的含量降低。结论:二氢青蒿素可明显抑制兔耳增生性瘢痕的形成及瘢痕组织增生。

5-氟尿嘧啶对增生性瘢痕的作用研究

目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法建立兔耳外伤性皮肤早期瘢痕增生模型。将12只兔随机平均分为3组,设立生理盐水注射对照组(A组)、局部注射5-FU组(B组)和局部涂抹5-FU软膏组(C组),观察各组瘢痕改变情况。60d后空气栓塞法随机处死兔子,切取含创面的兔耳组织,分别进行苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察组织形态学变化及组织中细胞及胶原等的改变。Real-time PCR及ELISA法检测TGF-β、PDGF、bFGF和INF-γ的表达水平。结果 HE和Masson染色显示,与A组和C组比较,B组真皮层变薄,成纤维细胞和胶原纤维数量较少,胶原纤维排列规则,无胶原结节或者胶原结节不明显。B组和C组TGF-β、PDGF、bFGF、INF-γmRNA表达水平和蛋白水平均显著低于A组,且B组效果好于C组。结论 5-FU对增生性瘢痕有治疗作用,瘢痕组织局部注射5-FU比局部涂抹5-氟尿嘧啶软膏更为有效。

木犀草素对兔耳增生性瘢痕抑制作用机制的初步研究

目的:初步研究木犀草素对兔耳增生性瘢痕的抑制作用及可能机制。方法:9只新西兰兔随机分为空白组、生理盐水对照组和药物干预组,每组3只,生理盐水对照组和药物干预组建立兔耳增生性瘢痕模型,每只兔左右耳各3个直径约0.7cm瘢痕创面,相距约1cm。生理盐水对照组给予生理盐水,药物干预组给予木犀草素乳膏,瘢痕组织于给药前和给药后40d取材,Masson染色后显微镜下观察各组瘢痕组织的病理变化,ELISA法检测瘢痕组织中转化生长因子-β(TGF-β)、血小板衍化生长因子(PDGF-BB)、结缔组织生长因子(CTGF)的含量,qRT-PCR和Western Blot法检测TGF-β、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达水平。结果:Masson染色显示木犀草素干预后瘢痕组织中胶原沉积减少,胶原纤维致密且排列规则。与生理盐水对照组相比,药物干预组瘢痕组织中TGF-β、PDGF-BB、CTGF的表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,qRT-PCR和Western Blot结果显示,与生理盐水对照组相比,药物干预组MMP-2表达升高,而CollagenⅠ表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:木犀草素能够抑制兔耳增生性瘢痕的形成,其作用机制可能与抑制TGF-β、PDGF-BB、CTGF的分泌、上调MMP-2、减少CollagenⅠ的表达有关。

兔耳增生性瘢痕动物模型的建立与应用

目的:观察外科感染常见致病细菌对兔耳腹侧创面愈合后增生组织块形成的影响。方法:在兔耳腹侧制作72个直径为1 cm的圆形全层皮肤缺损创面,待其愈合后形成增生性瘢痕组织块作为兔耳增生性瘢痕动物模型,进行形态学和组织学观察。另选同等大小兔耳腹侧240个创面,将其随机分成对照组和实验组,实验组又分为金黄色葡萄球菌污染组、大肠杆菌污染组、绿脓杆菌污染组,观察各组创面愈合情况与增生块发生等情况。结果:人为造成兔耳腹侧创面后可出现类似人增生性瘢痕的增生组织块,出现率为66.7%;4组平均愈合时间分别为(13.367±1.025)d、(19.283±1.091)d、(13.967±0.948)d、(16.233±0.981)d,实验组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);4组增生块出现率分别为64%、90%、75%及80%。金黄色葡萄球菌污染组增生块出现率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);各组创面愈合时间与增生块出现率呈正相关(r=0.169,P<0.01)。结论:增生性瘢痕兔耳动物模型制作简单,模型稳定,重复性强,可作为人增生性瘢痕形成机制与防治研究的动物模型;外科感染常见致病细菌可延长兔耳创面愈合时间,增加兔耳创面愈合后增生块的出现率是促进增生性瘢痕形成的重要因素。

人参皂苷Rb1对增生性瘢痕的作用

目的：研究人参提取物对兔耳增生性瘢痕的作用,探讨其作用的相关分子的表达.方法：建立15只大耳白兔的增生性瘢痕模型,每只兔耳腹侧中段随机做2～3处伤口,并分为空白对照组a,生理盐水注射组b,人参皂苷Rb1 c组（0.2 mg/ml）,d组（0.4 mg/ml）,e组（1 mg/ml）,5组.术后任其愈合,观察创面愈合和瘢痕增生情况.上皮化后26 d按组别进行相应处理,每3d给药1次,共3次,用药后分别于第2,4,6周取材,每次取5只兔子,进行HE染色,Masson染色,测量并计算HI,计算胶原纤维密度,免疫组织化学测Caspase 3的表达.结果：a,b组间差异无统计学意义（P＞0.05）,a,b组分别与c,d,e组间的差异有统计学意义.随药物浓度增加HI、胶原密度下降,但c,d组间差异无统计学意义（P＞0.05）,e组与c组和d组间差异有统计学意义（P＜0.05）.同样见于Caspase 3的组织化学结果,高浓度干预组Caspase-3表达增加.结论：人参提取物Rb1成分能减少瘢痕组织中胶原的合成,诱发细胞凋亡的基因表达,从而有效抑制增生性瘢痕的发展.

卡托普利对兔耳增生性瘢痕影响的实验研究

目的研究在创伤后不同时期使用卡托普利对兔耳增生性瘢痕的影响。方法16只新西兰兔按照随机数字表法分为4组（每组4只），每只兔耳腹侧制作6个直径1cm的圆形创面。早期治疗组在创面形成后立即给予卡托普利口服治疗；晚期治疗组在术后第21天开始予卡托普利口服治疗；阳性对照组在术后第21、28天分别给予皮损内曲安奈德溶液注射治疗；阴性对照组不给予任何干预。观察并记录创面完全上皮化时间。在术后第42天，根据温哥华瘢痕量表（VSS）对瘢痕进行评分。计算瘢痕增生指数（SEI）。所有标本行苏木精-伊红染色和苦味酸天狼星红染色后，观察成纤维细胞数量、I型胶原面密度和Ⅲ型胶原面密度。结果①创面完全上皮化时间：多组间比较差异无统计学意义（F=0．75，P=0．97）。②vss分值和SEI多组间比较差异均有统计学意义（F=83．44，P〈0．05；F=106．91，P〈0．05）；阳性对照组[（3．1±1．5）分，1．33±0．13]〈早期治疗组[（4．0±1．2）分，1．56±0．15]〈晚期治疗组[（6．0±1．4）分，1．73±0．16）]〈阴性对照组[（6．8±1．0）分，2．02±0．29]。③成纤维细胞数量多组间比较差异有统计学意义（F=211．76，P〈0．05）；阳性对照组（233±62）个〈早期治疗组（380±53）个、晚期治疗组（389±64）个〈阴性对照组（612±107）个。④I型胶原面密度多组间比较差异有统计学意义（F=480．53，P〈0．05）；早期治疗组（36．1±1．6）％、阳性对照组（36．4±2．4）％〈晚期治疗组（47．7±2．0）％〈阴性对照组（49．5±2．8）％。⑤HI型胶原面密度多组间比较差异有统计学意义（F=39．23，P〈0．05）；早期治疗组（26．0±1．8）％〈晚期治疗组（28．2±1．4）％、阳性对照组（27．9±2．3）％〈阴性对照组（29．8±1．4）％。结论卡托普利可通过抑制成纤维细胞增殖及细胞间基质沉积而抑制兔耳瘢痕增生，创伤后立刻使用治疗效果可能更佳。

稳定病理性瘢痕模型的建立

目的:通过比较两种病理性瘢痕动物模型——裸鼠瘢痕模型和兔耳瘢痕模型的稳定性并对制作方法进行改进,为病理性瘢痕研究中选择有效的动物模型提供依据。方法:分别采用改良保留表皮(带表皮人瘢痕组织移植1周后剪除移植组织上方的裸鼠皮肤)、去除表皮(去除瘢痕组织表皮后移植)的方法分别在皮下移植人增生性瘢痕和瘢痕疙瘩制作裸鼠瘢痕模型。分别采用去除软骨膜及软骨、保留软骨膜及软骨、去除软骨膜保留软骨3种术式制作兔耳瘢痕模型,观察各瘢痕模型的效果、模型稳定时间和病理学改变来评价模型质量。结果:裸鼠组可快速并稳定地复制增生性瘢痕及瘢痕疙瘩的病理生理特点,且改良保留表皮增生性瘢痕或瘢痕疙瘩移植组的稳定时间(15周和20周)及增生程度明显优于去除表皮的增生性瘢痕及瘢痕疙瘩移植组(模型稳定时间为8周和10周);兔耳组可观察到去除软骨膜保留软骨组瘢痕稳定时间(15周)及增生程度明显优于另外两组(模型稳定时间分别为9周和10周)。结论:裸鼠瘢痕模型的制作以改良保留表皮移植术式为最佳,兔耳瘢痕模型的制作则以去除软骨膜保留软骨术式为最佳。

缬沙坦对兔耳增生性瘢痕的影响

目的研究缬沙坦对兔耳增生性瘢痕形成的影响。方法 16只新西兰兔随机分为4组,每只兔耳腹侧制作6个创面。高剂量治疗组:术后第21天开始给予缬沙坦8mg/(kg·d)口服治疗。低剂量治疗组:在术后第21天开始予缬沙坦4mg/(kg·d)口服治疗。阳性对照组:分别在术后第21天和28天时给予皮损内曲安奈德注射治疗。阴性对照组:不给于任何干预。在术后第42天时处死所有兔子,收集所有标本行苏木素-伊红染色和苦味酸天狼星红染色。结果高剂量治疗组的瘢痕增生指数(1.71±0.11)、成纤维细胞数量(438.15±50.01)、Ⅰ型胶原百分比(41.94±2.29)、Ⅲ型胶原百分比(28.83±1.48)均低于阴性对照组(2.02±0.29),(612.08±106.59),(49.51±2.81),(29.80±1.39);低剂量治疗组的Ⅰ型及Ⅲ型胶原百分比(48.24±2.02),(29.05±1.10)均低于阴性对照组;阳性对照组的瘢痕增生指数(1.33±0.13)、成纤维细胞数量(233.08±62.32)、Ⅰ型及Ⅲ型胶原百分比(36.42±2.41),(27.94±2.26)均低于高剂量治疗组。结论缬沙坦可以在一定程度上抑制兔耳瘢痕增生,高剂量治疗效果更佳。

苦参碱对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增生活性抑制作用

目的研究苦参碱(matrine,Mat)对兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增殖活性的影响。方法利用兔耳腹侧面增生性瘢痕模型,采取免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原的表达(proliferationcellnuclearantigen,PCNA)及嗜银核仁组织区染色法(AgNORs)统计NORs颗粒数,对比研究苦参碱在治疗兔耳增生性瘢痕过程中对成纤维细胞增殖活性的影响。结果局部注射苦参碱后,兔耳腹侧面增生性瘢痕中的成纤维细胞增生活性受到明显抑制,PCNA表达明显减弱,AgNORs记数明显减少。用药12周后对照组/苦参碱组PCNA标记指数和AgNORs分别为0.87/0.35,2.31/1.07(P<0.05)。结论苦参碱明显抑制兔耳增生性瘢痕成纤维细胞增生活性,对兔耳腹侧面增生性瘢痕有明显的治疗作用。

虾血对兔耳瘢痕模型的防治作用

为探讨虾血对抑制兔耳瘢痕增生的影响,以成年新西兰大耳白兔建立兔耳增生性瘢痕模型,将增生性瘢痕块分为对照组(A组)、虾血治疗组1(B组)和虾血治疗组2(C组),以不同组瘢痕组织石蜡包埋HE染色,观察虾血治疗对瘢痕组织中成纤维细胞、胶原纤维的影响。结果表明:肉眼观察虾血治疗组的瘢痕较空白对照组有改善;光镜下见虾血治疗组成纤维细胞减少,胶原纤维含量降低且排列较规则有序,差异具有显著性(p<0.001);虾血治疗组2微血管均数较少,抑制疤痕增生效应最好(p<0.01);虾血可能具有抑制兔耳增生瘢痕的形成及瘢痕组织增生的作用。

人参皂苷Rb1注射对兔耳增生性瘢痕中PCNA表达的影响

目的:建立兔耳增生性瘢痕模型,通过局部注射人参皂苷Rb1,观察增殖细胞核抗原(Proliferating Cell Nuclear Antigen PCNA)的表达变化。方法:取8只新西兰白兔,每只兔耳6处创面,建立增生性瘢痕模型,设空白组,地塞米松组,生理盐水组,人参皂苷Rb1组。待伤口上皮化后,局部注射药物,每3d 1次,共三次,空白组不予处理。给药后第1、2、4、8周切除标本行MASSON染色观察瘢痕情况及瘢痕增生高度,免疫组化法检测PCNA表达。结果:注射后4、8周,与生理盐水组比较,地塞米松及人参皂苷Rb1组瘢痕均改善明显,瘢痕增生高度降低(P<0.05),PCNA表达降低(P<0.05)。结论:人参皂苷Rb1可有效抑制细胞增殖,改善兔耳增生性瘢痕增生。

兔耳模型上增生性瘢痕治疗研究进展

增生性瘢痕是创伤愈合的异常结局,其治疗一直是困扰皮肤科的难题之一。该文检索国内外兔耳模型上增生性瘢痕的治疗研究报道,探讨增生性瘢痕的最新治疗方法及其作用机制。

咪喹莫特调节Th1、Th2细胞相关趋化因子对兔耳增生性瘢痕创面愈合和瘢痕增生的影响

目的:探讨咪喹莫特调节Th1、Th2细胞相关趋化因子对兔耳增生性瘢痕创面愈合时间和瘢痕增生的影响。方法:选取健康清洁级新西兰大耳实验兔40只,随机分为空白组、模型组、凡士林组以及咪喹莫特组,每组10只。模型组、凡士林组以及咪喹莫特组建立兔耳瘢痕模型,14d创面完全上皮化后,凡士林组涂抹凡士林软膏0.1g,1次/d;咪喹莫特组外用咪喹莫特软膏0.1g,1次/d,连续42d。观察并比较各组实验兔的大体情况,瘢痕增生指数,Th1、Th2细胞相关趋化因子CXCL10、CXCL12、CCL2、CCL3、CCL5、CCL7、CCL13水平,完全上皮化时间及创面愈合时间。结果:模型组与凡士林组28d达到增生巅峰;与模型组相比,凡士林组及咪喹莫特组的瘢痕增生指数、创面愈合时间均较低,且咪喹莫特组低于凡士林组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,凡士林组及咪喹莫特组的CCL2、CCL3、CCL5、CCL7、CCL13水平较低,CXCL10、CXCL12水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与凡士林组相比,咪喹莫特组的CCL2、CCL3、CCL5、CCL7、CCL13水平降低,CXCL10、CXCL12水平较高(P<0.05)。三组实验兔完全上皮化时间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:咪喹莫特能够调节Th1、Th2细胞相关趋化因子,缩短兔耳增生性瘢痕创面的愈合时间。

紫蠊乳膏制备工艺优化及药理作用的研究

目的:对紫蠊乳膏的制备工艺进行优化,并通过药理实验研究其治疗增生性瘢痕的疗效。方法:以紫草、美洲大蠊的提取物为主药,采用单因素实验设计方法,以乳膏的整体外观和综合特点作为考察指标,优化乳膏的基质类型及配比,进一步基于兔耳瘢痕模型进行药理作用考察。结果:通过单因素实验设计方法得出紫蠊乳膏的最佳处方为:紫草提取物2.5 mL(10%),美洲大蠊提取物2.5 mL(10%),硬脂酸3.0 g(12%),三乙醇胺3.0 mL(12%),羊毛脂0.5 g(2%),液体石蜡3.0 mL(12%),蒸馏水9.0 mL(36%),吐温-801.0 mL(4%),尼泊金乙酯0.5 g(2%)。通过兔耳瘢痕实验及其HE切片证明紫蠊乳膏可抑制增生性瘢痕且有助于瘢痕的修复。结论:该乳膏剂具有一定的祛瘢痕功效,可为研制祛瘢痕药物提供参考。

CO2点阵激光联合糖皮质激素治疗兔耳增生性瘢痕的疗效评价

目的评价CO2点阵激光联合糖皮质激素治疗兔耳增生性瘢痕(HS)的疗效,为临床两者联合应用提供理论依据。方法选取15只成年雄性新西兰大白兔,采用随机数字表法分为对照组、激素组和激光激素组,每组5只共10只耳朵,每只耳朵制备6个瘢痕创面,每组共60个瘢痕创面。造模后第14天,对照组仅用0.9%氯化钠溶液涂抹创面;激素组于瘢痕内注射8 mg曲安奈德注射液;激光激素组先给予激光治疗(body模式,能量80 mJ,范围1 cm×1 cm,密度11.1%),继而在创面涂抹8 mg曲安奈德注射液。造模后第14、21、28、35天,行瘢痕大体观察,取瘢痕组织行病理检查并测定瘢痕增生指数(HI),造模后第35天时检测瘢痕组织中I型胶原蛋白(Collagen I)和平滑肌肌动蛋白(SMA)表达水平,比较3组间上述指标的差异。结果造模后第35天,对照组创面肉眼可见明显高于周围正常皮肤的、颜色更深、质地更硬的HS组织;激素组和激光激素组尽管均未见明显高于周围正常皮肤的HS组织,但激素组局部颜色更深、质地偏硬,而激光激素组的颜色和质地均与周围正常皮肤无明显差别。病理检查显示激光激素组HS组织成纤维细胞数目和微血管密度明显减少、炎性细胞浸润最轻。造模后第14天各组兔耳HS组织HI比较差异无统计学意义(P>0.05);造模后第21、28、35天,激光激素组和激素组HS组织HI均低于对照组(均P<0.05);造模后第28天,激光激素组HS组织HI低于激素组(P<0.05)。激光激素组和激素组HS组织中Collagen I和SMA表达水平均低于对照组(均P<0.05),激光激素组HS组织中SMA表达水平低于激素组(P<0.05)。结论CO2点阵激光联合糖皮质激素治疗可通过抑制HS组织中SMA和Collagen I表达从而有效防治HS的形成。

治疗兔耳增生性瘢痕的研究进展

人体皮肤组织在受到损伤后,如烧伤、手术、外伤等,必然会引起外观和组织学的改变,伤口损伤愈合后形成瘢痕。瘢痕给患者带来局部不适感,导致功能障碍,大大地影响正常生活。兔耳增生性瘢痕在组织学上已被证实与人类增生性瘢痕相似,其获取成本低,并可动态观察瘢痕发展演变的全过程。从而可以加以药物干预,运用生化等检测结果,评估多种治疗方法对瘢痕的作用。本文对国内外单独及联合应用在兔耳增生性瘢痕模型中所取得的最新研究成果进行了综述,希望能启发临床工作者实验思路。